CC BY
31
V Евразийский гематологический форум
КЛИНИЧЕСКАЯ ОНКОГЕМАТОЛОГИЯ
гранулярности; для моноцитов — экспрессию CD33, CD64, CD56 и паттерны созревания. Данные оценивались по шкале Ogata/Wells (2013): оценка А соответствовала отсутствию цитометрических признаков МДС; B — выявлению некоторых признаков, часто встречающихся при МДС; C — результаты ПЦ соответствуют МДС.
Результаты. Из 28 пациентов с МДС (синдром 5q— у 3, рефрактерная цитопения с однолинейной дисплазией — у 4, РАКС — у 1, РЦМД — у 14, РАИБ-1 — у 4, РАИБ-2 — у 2) оценки В и С получило 22, т. е. диагностическая чувствительность метода составила 78,6 %. Ложноотрицательные результаты ПЦ среди пациентов с МДС были получены в том случае, если дисмиелопоэз затрагивал только эри-троидный и/или мегакариоцитарный ростки, анализ которых не проводился. При этом хромосомные аберрации были обнаружены в группе с оценкой А у 2 (33,3 %) из 6 пациентов, с В — у 2 (66,7 %) из 3, с С — у 9 (47,4 %) из 19. Среди 30 пациентов с другими заболеваниями (в-талассемия, железодефицитная анемия, апластическая анемия, аутоиммунная гемолитическая анемия, иммунная тромбо-цитопения, B-клеточная лимфома, анемия Фанкони, пароксизмаль-ная ночная гемоглобинурия, гепатит С и гипотиреоз) результат А, расцененный как отсутствие признаков МДС, получен у 28 (93,3 %) пациентов, что соответствует диагностической специфичности метода. Ложноположительные результаты были у 2 пациентов с апла-стической анемией, получивших оценку В.
Заключение. Метод ПЦ обладает высокой специфичностью (93,3 %) и чувствительностью (78,6 %). Возможно его использование в качестве дополнительного критерия в первичной диагностике МДС, особенно когда отсутствуют цитогенетические аномалии. Цитометрические признаки МДС выявляются чаще, чем хромосомные нарушения.
Конфликты интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликтов интересов. А.М. Ковригина, член редакционной коллегии журнала «Клиническая онкогематология. Фундаментальные исследования и клиническая практика», не участвовала в рецензировании рукописи.
Источники финансирования. Работа не имела спонсорской поддержки.
some of the signs that often occur with MDS; C meant that the results of the FC are consistent with MDS.
Results. Of the 28 patients with MDS (3 with 5q- syndrome, 4 with refractory cytopenia and single-line dysplasia, 1 with RARS, 14 with RCMD, 4 with RAEB-1 and 2 with RAEB-2), 22 patients were marked B and C, i.e. the diagnostic sensitivity of the method was 78.6 %. False negative results of FC among patients with MDS were obtained when dysmyeloepoiesis affected only erythroid and/or megakaryocyte sprouts, the analysis of which was not carried out. In this case, chromosomal aberrations were found in the group marked A in 2 (33.3 %) of 6 patients, in the group marked B in 2 (66.7 %) of 3 patients, in the group marked C in 9 (47.4 %) of 19 patients. Among the 30 patients with other diseases (^-thalassemia, iron-deficiency anemia, aplastic anemia, autoimmune hemolytic anemia, immune thrombocytopenia, B-cell lymphoma, Fanconi anemia, paroxysmal nocturnal hemoglobinuria, hepatitis C and hypothyroidism), the result A, indicating the absence of signs of MDS, was obtained in 28 (93.3 %) patients, which corresponds to the diagnostic specificity of the method. Two patients with aplastic anemia marked B received false positive results.
Conclusions. The FC method has high specificity (93.3 %) and sensitivity (78.6 %), and it is possible to use it as an additional criterion in the primary diagnosis of MDS, especially when no cytogenetic abnormalities are detected. Cytometric signs of MDS are detected more often than chromosomal abnormalities.
Conflicts of interest. The authors declare no conflicts of interest. AM Kovrigina, a member of the editorial board of "Clinical Oncohema-tology. Basic Research and Clinical Practice", did not participate in the peer-review process.
Funding. The study received no external funding.
CD200 КАК ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНО-ДИАГНОСТИЧЕСКИЙ МАРКЕР И ТЕРАПЕВТИЧЕСКАЯ МИШЕНЬ ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ ЛИМФОЛЕЙКОЗЕ
С. Дагбашян, А. Айваз, К. Меликсетян, А. Севоян
Гематологический центр им. проф. Р.О. Еоляна, Ереван, Армения
Введение. Хронический лимфолейкоз (ХЛЛ) — распространенное онкогематологическое заболевание среди армянской популяции. В течение последних 3 лет в Гематологический центр Армении поступило 103 пациента с подозрением на лимфопролиферативное заболевание. Диагностика включала морфологическое, цитогене-тическое и FISH-исследования, а также иммунофенотипирование. CD200 был добавлен к стандартной панели иммунофенотипирова-ния для дифференциальной диагностики ХЛЛ и лимфомы из клеток зоны мантии. CD200 — иммунорегуляторная молекула, которая имеет важное значение в иммунотерапии ХЛЛ. Экспрессия CD200 была обнаружена при различных опухолевых заболеваниях: раке почки, кишечника, яичников, меланоме, остром миелобластном лейкозе, множественной миеломе и ХЛЛ. В последнее время CD200 считается маркером опухолевой стволовой клетки. При В-клеточных лимфопролиферативных заболеваниях, включая ХЛЛ, опухолевые клетки являются слабо иммуногенными, несмотря на экспрессию большого количества антигенов.
CD200 AS A DIAGNOSTIC MARKER AND A THERAPEUTICAL TARGET IN CHRONIC LYMPHOCYTIC LEUKEMIA
S Dagbashyan, A Aivaz, K Meliksetyan, A Sevoyan
Yeolyan Hematology Center, Yerevan, Armenia
Background. Chronic lymphocytic leukemia (CLL) is a common on-cohematological disease among the Armenian population. During the last 3 years, 103 patients with suspected lymphoproliferative disorder were admitted to the Yeolyan Hematology Center (Yerevan, Armenia). The diagnostic work-up included morphological, cytogenetic and FISH tests, as well as immunophenotyping. CD200 was added to the standard immunophenotyping panel for the differential diagnosis of CLL and mantle cell lymphoma. CD200 is an immunoregulatory molecule that plays important role in the immunotherapy of CLL. CD200 expression was detected in various cancers: kidney cancer, intestinal cancer, ovarian cancer, melanoma, acute myeloid leukemia, multiple myeloma and CLL. Recently, CD200 is considered a marker of cancer stem cells. In B-cell lymphoproliferative disorders, including CLL, cancer cells are considered poorly immunogenic, despite the expression of a large number of antigens.
Aim. To evaluate the importance of CD200 in the differential diagnosis of CLL and mantle cell lymphoma.
http://bloodjournal.ru/ V Евразийский гематологический форум 537
Цель. Оценить значение CD200 в дифференциальной диагностике ХЛЛ и лимфомы из клеток зоны мантии.
Материалы и методы. Использована стандартная диагностическая панель для иммунофенотипирования клеток периферической крови 103 пациентов. Анализ был проведен на 4-цветовом проточном цитометре FACSCalibur (Becton Dickinson). Образцы были окрашены 4-цветовой комбинацией моноклональных антител (CD200PE clone MRCOX-104), CD19, CD23, CD20, CD22 от Becton Dickinson и CD10, CD5 от E-bioscience. На проточном цитометре было исследовано 20 000 В-клеток.
Результаты. У 87 больных ХЛЛ и 16 — лимфомой из клеток зоны мантии наблюдалась выраженная экспрессия CD5, CD19, CD23. Обнаружена выраженная экспрессия CD200 в 87 случаях ХЛЛ. При этом у 81 из 87 больных выявлен типичный ХЛЛ с выраженной экспрессией CD200, у остальных 6 — отмечалась умеренная экспрессия антигена. Во всех 16 случаях лимфомы из клеток зоны мантии экспрессия CD200 была слабо выражена или не обнаруживалась вовсе.
Выводы. Проточная цитометрия играет важную роль в диагностике В-клеточных лимфопролиферативных заболеваний. До включения CD200 в стандартную иммунофенотипическую панель были проблемы с дифференциальной диагностикой ХЛЛ и лимфомы из клеток мантийной зоны, т. к. они имеют сходный иммунофенотип. Принимая во внимание наши данные, мы можем в будущем участвовать в клиническом исследовании, цель которого — ингибирование экспрессии CD200 в опухолевых клетках. Это может иметь важное значение для развития как иммунотерапии, так и медицины в целом.
Конфликты интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликтов интересов.
Источники финансирования. Работа не имела спонсорской поддержки.
Materials & Methods. A standard diagnostic panel was used for immunophenotyping peripheral blood cells in 103 patients. The analysis was performed using 4-color flow cytometer FACSCalibur (Becton Dickinson). Samples were stained with a 4-color combination of monoclonal antibodies CD200PE clone MRCOX-104, CD19, CD23, CD20, CD22 (Becton Dickinson) and CD10, CD5 (E-bioscience). The total of 20,000 B-cells were analysied with the flow cytometer.
Results. Marked expression of CD5, CD19, CD23 was observed in 87 patients with CLL and 16 patients with mantle cell lymphoma. Marked expression of CD200 in 87 CLL cases was found. In 81 out of 87 patients, typical CLL with marked CD200 expression was detected, the remaining 6 patients had moderate expression of the antigen. In all 16 cases of mantle cell lymphoma, CD200 expression was poorly expressed or not detected at all.
Conclusions. Flow cytometry plays an important role in the diagnosis of B-cell lymphoproliferative disorders. Before CD200 was included in the standard immunophenotypic panel, the differential diagnosis of CLL and mantle cell lymphoma was challenging, since they have a similar immunophenotype. The obtained data may be used in future clinical studies to research the inhibition of CD200 expression in cancer cells. This can be important for the development of both immunotherapy and fundamental medicine.
Conflicts of interest. The authors declare no conflicts of interest.
Funding. The study received no external funding.
«ПЕРЕЗАПУСК» ИММУННОЙ СИСТЕМЫ КАК СПОСОБ ТЕРАПИИ СТЕРОИД-ЗАВИСИМОЙ ХРОНИЧЕСКОЙ РЕАКЦИИ «ТРАНСПЛАНТАТ ПРОТИВ ХОЗЯИНА»
В.В. Дайлидите, Г. Л. Менткевич, И.С. Долгополов, Н.Н. Субботина, В.К. Бояршинов
ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва, Российская Федерация
Введение. Стероид-зависимая хроническая реакция «трансплантат против хозяина» (РТПХ) остается серьезной проблемой у пациентов после аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток (аллоТГСК). Отсутствие ответа на терапию кор-тикостероидами приводит к увеличению смертности. Мы предположили, что стратегия, используемая в терапии аутоиммунных заболеваний, могла бы быть успешной у таких пациентов.
Клиническое наблюдение. Больной З., 4 года, впервые заболел ювенильным миеломоноцитарным лейкозом (ЮММЛ) в июле 2011 г. На первом этапе он получал низкие дозы цитарабина и эпигенетическую терапию. В сентябре 2013 г. отмечено прогрессирование ЮММЛ в виде лейкоцитоза, тромбоцитопении, спленомегалии. В пунктате костного мозга 19,2 % моноцитов и 19,8 % бластных клеток. В ноябре 2013 г. выполнена спленэктомия в связи с развившейся реф-рактерностью к трансфузиям компонентов крови. В декабре 2014 г. проведена аллоТГСК от матери клеточностью 3,2 * 106/кг по CD34+ и 3,5 * 108/кг по CD3+. Миелоаблативный режим кондиционирования включал мелфалан 100 мг/м2 в день -5, треосульфан 14 г/м2 в дни -4, -3, -2, антитимоцитарный иммуноглобулин 10 мг/кг в дни -5, -3, -1, +1. Органной токсичности выше II степени не отмечалось. Профилак-
"RESETTING" THE IMMUNE SYSTEM TO TREAT STEROID-DEPENDENT CHRONIC GRAFT-VERSUS-HOST DISEASE
VV Dailidite, GL Mentkevich, IS Dolgopolov, NN Subbotina, VK Boyarshinov
NN Blokhin National Medical Cancer Research Center, Moscow, Russian Federation
Background. A steroid-dependent chronic graft-versus-host disease (GVHD) remains a serious problem for patients after allogeneic hematopoietic stem cells transplantation (allo-HSCT). The lack of response to corticosteroid therapy leads to an increase in mortality. We hypothesized that the strategy used for the therapy of autoimmune diseases could be successful in such patients.
Clinical case. Patient Z. was diagnosed with juvenile myelomono-cytic leukemia (JMML) in the age of 4 in July 2011. The patient received low doses of cytarabine and epigenetic therapy as initial therapy. In September 2013, the disease progressed manifesting with leukocytosis, thrombocytopenia, and splenomegaly. The bone marrow aspirate showed 19.2 % of monocytes and 19.8 % of blast cells. In November 2013, splenectomy was performed due to the developed refractoriness to blood transfusions. In December 2014, allo-HSCT with mother as donor was performed (cellularity of 3.2 * 106/kg for CD34+ and 3.5 * 108/kg for CD3+). Myeloablative conditioning regimen included 100 mg/m2 of melphalan on day -5; 14 g/m2 of treosulfan on days -4, -3, -2; and 10 mg/kg of antithymocyte immunoglobulin on days -5, -3, -1, +1. No organ toxicity above grade II was observed. To prevent acute GVHD, intravenous tacrolimus from day -1 and 25 mg/kg of my-
