128
МАТЕРИАЛЫ V НАЦИОНАЛЬНОГО КОНГРЕССА ПО РЕГЕНЕРАТИВНОЙ МЕДИЦИНЕ
Ранее было показано, что клетки с генетическими нарушениями могут преодолевать контрольные точкими-тотического цикла, но вступают в митоз с задержкой [1, 2]. По нашим данным, временные и пространственные характеристики взаимосвязаны: задержка деления клеток на 3-6 часов значительно (на 30%) увеличивает вероятность выхода стволовых клеток из ниши, что ведет к их последующей дифференцировке и элиминации из ткани. Таким образом, задержка мутантных клеток в митотическом цикле — выпадение их из временного окна пролиферации, ведет к повышенной вероятности элиминации из ткани и постепенной замене на клетки без нарушений. Можно сделать вывод, что строго определенная пространственно-временная организация обновляющихся тканей, наличие временного окна пролиферации и ниши, позволяют поддерживать генетический гомеостаз, а их нарушение может являться причиной генетической нестабильности при культивировании клеток.
Литература:
1. Кузин С.М., Стукалов С.В. Гены и клетки. 2017. Т. 12. № 3. С.
139.
2. Kuzin S., Bogomolov D., Berechikidze I. et al. Pharmacia. 2022.
V. 69(2). P. 327.
БИОСОВМЕСТИМЫЕ ПОЛИМЕРНЫЕ НАНОЧАСТИЦЫ НА ОСНОВЕ ЛАКТИДА И ОКСИДА ЭТИЛЕНА ДЛЯ ТКАНЕВОЙ ИНЖЕНЕРИИ
Е.В. Кузнецова1, Ю.А. Пучкова1, Е.В. Ястремский1, А.В. Бакиров1 2, С.Н. Чвалун1 2
1 НИЦ Курчатовский институт, Москва, Россия
2 Институт синтетических полимерных материалов им. Н.С. Ениколопова РАН, Москва, Россия
e-mail: kuznetsova.kate992@@gmail.com
Ключевые слова: самоорганизация, полимерные наноча-стицы, полилактид, полиэтиленоксид, тканевая инженерия, агрегативная устойчивость, коллоиды.
Активное развитие нанотехнологий в XXI веке привело к существенному прогрессу в области тканевой инженерии и регенеративной медицины. Так, биосовместимые наноча-стицы (НЧ) с регулируемыми физико-химическими характеристиками являются перспективным наполнителями для клеточных матриц (скаффолдов). В зависимости от биомедицинских задач, например, придания антимикробных свойств скаффолду, обеспечения контраста для визуализации, повышения биоактивности и др., используют различные типы НЧ: золотые, серебряные, кремнийсодержащие, кальций фосфатные, магнитные, а также частицы на основе биосовместимых природных и синтетических полимеров и др. [1]. Полимерные НЧ, способные инкапсулировать различные биологически-активные вещества, представляют особый интерес ввиду возможности регулирования их свойств (размера, формы, поверхностного заряда, сорб-ционной емкости, скорости разложения, скорости высвобождения загруженного вещества и пр.) в широком диапазоне за счет изменения химического состава полимера и/ или условий получения частиц [2].
В представленной работе объектами исследования стали НЧ на основе биосовместимых и биодеградиру-емых амфифильных блок-сополимеров поли(лактид)-б-поли(этиленоксид) (ПЛА-б-ПЭО). Изучено влияние стереоспецифичности гидрофобного ПЛА блока на размер ПЛА-б-ПЭО частиц, их форму, величину
электрокинетического потенциала, сорбционную емкость и агрегативную устойчивость с целью получения высокостабильных НЧ. Частицы получали методом наноосаж-дения: навеску блок-сополимера растворяли в ацетоне, к полученному раствору добавляли воду, ацетон удаляли испарением при комнатной температуре в течение 4 ч. В результате получали опалесцирующие водные дисперсии частиц на основе нестереорегулярного аморфного n(D,L) ЛА60-б-ПЭО113 сополимера, а также стереорегулярного частично кристаллического П(ЦиЛА50-б-ПЭО113 сополимера и эквимолярной смеси стереорегулярных П(ЦиЛА50-б-ПЭ0113 и ПЮЛ)ЛА50-б-ПЭО113 сополимеров. Показано, что эквимолярное смешение П(цЦЛА50-б-ПЭ0113 и ПЮЛ) ЛА50-б-ПЭО113 сополимеров приводит к формированию сферических частиц с частично кристаллическим ядром, гидродинамическим диаметром ~ 30 нм, величина которого остается постоянной (в рамках экспериментальной погрешности) в течение месяца как при 25°C, так и при 37°C. Установлено, что полученные П(ЦиЛА50/ПЮЛ) ЛА50-б-ПЭО113 частицы стабильны в достаточно широком диапазоне ионной силы и pH, а также способны к ресу-спендированию до исходных размеров после лиофилиза-ции. Работа выполнена при финансовой поддержке проекта Российского научного фонда (проект № 21-73-00071).
Литература:
1. Fathi-Achachelouei M., Knopf-Marques H., Ribeiro da Silve C.E.
Front. Biotechnol. 2019. V. 7. Art. № 113.
2. Sedush N.G., Kadina Y.A., Razuvaeva E.V. et al. Nanobiotechnol-
ogy Reports. 2021. V. 16. P. 421-438.
ЭКСПРЕССИЯ ГЕНА POU5F1 В РАКОВЫХ
КЛЕТКАХ МЫШИ
А.А. Кузьмин1, В.В. Кудряшов2, А.Н. Томилин1
1 ФГБУН Институт цитологии РАНи, Санкт-Петербург, Россия
2 ФГБОУ ВО Санкт-Петербургский государственный университет, Санкт-Петербург, Россия
e-mail: a.kuzmin@incras.ru
Ключевые слова: Pou5f1, фактор плюрипотентности, раковые клетки, CRISPR.
Фактор плюрипотентности Oct4, кодируемый геном Pou5f1 представляет собой октамер-связывающий белок, который в роли транскрипционного фактора выступает в качестве одного из основных факторов поддержания плюрипотентного состояния эмбриональных стволовых клеток [1, 2]. В последнее время накапливается всё больше информации о том, что этот транскрипционный фактор, иего ген, в частности, могут быть активны не только в плюрипотентных и половых клетках, но и в клетках совершенно иной спецификации [3].
В настоящее время нами ведутся работы по поиску экспрессии Pou5f1 в клетках, прошедших стадию плюрипотентности. При помощи системы CRISPR/Cas9 и целенаправленного встраивания селективной конструкции в локус Pou5f1 мы обнаружили, что разные раковые клетки мыши способны поддерживать активный статус этого гена. Более того, взяв широкий спектр различных линий, мы получили первичные данные, говорящие о том, что экспрессия Pou5f1 может носить избирательный характер в отношении раковых клеток.
В настоящий момент мы работаем над характериза-цией продуктов экспрессии этого гена, а также над выяснением универсальных механизмов, обеспечивающих
Гены & Клетки XVII, №3, 2022