CC BY
38
УДК 636.32/.38.082.453.53
Биологическая полноценность глубокозамороженной спермы баранов в зависимости от сроков хранения
М.М. Айбазов, Д.В. Коваленко,
П.В. Аксенова (ГНУ СНИИЖК)
Теоретические достижения в области криобиологии и кропотливая работа нескольких поколений ученых позволили на базе лаборатории воспроизводства ГНУ СНИИЖК создать генофондный банк, в котором, начиная с 1973 г., сохраняется криоконсервированная сперма
высокоценных производителей. Теоретическую значимость создания банка генофонда и ее практическую ценность для развития селекционно-племенной работы трудно переоценить. Вместе с тем значительные достижения в технологии криоконсервации спермы барана побудили исследователей к изучению одной из теоретически обоснованных биологических задач при криоконсервации - вопроса о длительности сохранения замороженной спермой своей функциональной полноценности как биологического объекта.
Известно, что при сверхнизких температурах (-1960С) биологические объекты, в том числе и половые клетки, переходят в состояние обратимого анабиоза. Считается, что в этом состоянии в клетках практически прекращаются обменные процессы. Поэтому существует априорное мнение о том, что замороженная сперма может неограниченно долго сохранять свою полноценность. В то же время исключительное значение имеет экспериментальное выяснение возможности долгосрочного хранения замороженной спермы как биологического объекта. Так как указанная проблема имеет не только глубокое теоретическое, но и прикладное значение, мы сочли необходимым изучить в методически точном опыте оплодотворяющую способность спермы, сохраняемой в жидком азоте различное время. Следует подчеркнуть, что в РФ подобные исследования являются исключительными вследствие уникальности генофондного банка.
Первый опыт по выяснению оплодотворяющей способности замороженной спермы баранов, сохраняемой в жидком азоте разные сроки, проведен в Агрофирме «Чох» Гунибского района Республики Дагестан на овцах дагестанской горной породы (п = 165). Лабораторную оценку качества спермы, сохраняемой в жидком азоте различные сроки, производили по подвижности после оттаивания и по выживаемости при +380С. Оплодотворяющую способность спермы проверяли на клинически здоровых животных, подобранных по принципу аналогов. Условия кормления, ухода и содержания овец были одинаковыми и соответствовали зоотехническим нормам, в которых можно было выполнить все элементы методики.
Второй опыт был проведен в осенний период 2010 г. на овцах в типе северокавказской мясо-шерстной породы на опытной станции ГНУ СНИИЖК. Как и в первом опыте, оплодотворяющую способность спермы
проверяли на клинически здоровых животных, подобранных по принципу аналогов.
Выборку маток в охоте проводили при помощи баранов- пробников с подвязанными фартуками. Овец осеменяли двукратно, сразу после выборки и спустя 8-10 часов, интрацервикальным способом при помощи существующих и усовершенствованных для этих целей инструментов. Результаты осеменения учитывали предварительно по количеству повторно пришедших в охоту животных и окончательно по результатам ягнения.
Результаты осеменения овец замороженной спермой в зависимости от сроков хранения представлены в таблице 1 и 2.
Результаты двух научно-производственных опытов, проведенных на достаточно большом поголовье (п =272), показали, что оплодотворяющая способность спермы не зависела от сроков хранения и составила от 37,5 до 43,9%.
Таблица 1. - Результаты ягнения подопытных овцематок,
осемененных замороженной спермой разного срока хранения
(Агрофирма «Чох» Гуни бского р-на Республ пики Дагестан, 2009-2010 гг.)
№ группы Год заго- товки спермы Срок хране- ния, лет Подвижность спермы после оттаивания, балл Осем енено овец, гол. Объягнилось Получено ягнят
гол. % гол. %
1 1973 36 3,5 44 18 40,9 22 122,0
2 1990 19 4,0 65 28 43,1 34 121,0
3 1994 15 4,0 56 21 37,5 25 119,0
Итого 165 67 41,8 81 121,0
Это свидетельствует о том, что биологическая полноценность замороженной спермы в процессе длительного хранения не снижается. Некоторое различие в оплодотворяющей способности спермы и плодовитости маток мы склонны объяснить различиями в технологии криоконсервации (разные синтетические среды, режимы замораживания и т.д.). Таким образом, на основании собственных экспериментов мы можем утверждать, что длительное - до 37 лет - хранение спермы баранов в жидком азоте не снижает ее биологической полноценности, что является важным доказательством полного анабиоза половых гамет при -196 С.
Таблица 2. - Результаты ягнения подопытных овцематок,
осемененных замороженной спермой разного срока хранения (опытная
станция ГНУ С НИИЖК, 2010-2011 гг.)
№ груп- пы Год заго- товки спер- мы Срок хране- ния, лет Подвиж- ность после оттаива- ния Осе- мене- но овец, гол. Вы- было из опы- та Объягни- лось Получено ягнят
гол. % гол. %
1 1973 37 3,5 22 1 8 38,1 10 125,0
2 1990 20 4,0 22 - 9 40,9 11 122,0
3 1994 16 4,0 21 - 9 42,9 11 122,0
4 2000 10 4,5 21 1 8 40,0 10 125,0
5 2010 1 4,5 21 1 8 40,0 10 125,0
Итого 107 3 42 40,4 52 123,8
Таким образом, проведением производственных опытов (осеменение) определена оплодотворяющая способность спермы после хранения при -196оС в течение разного срока (от 1 до 37 лет) и на этой основе сделан вывод о биологической полноценности сохраняемой спермы и экономической эффективности этого метода сохранения генофонда. Практически значимым в этой проблеме является выяснение постулата проф. А.И.Лопырина о том, что криоконсервированная и сохраняемая при температуре сжиженных газов (-183...-196°С) сперма может практически бесконечно сохранять свою биологическую полноценность, в частности, оплодотворяющую способность.
