CC BY
1390
УДК 573.6.086.835:579.8
И. А. Гнеушева, аспирант
Н.Е. Павловская, доктор биологических наук И.В. Яковлева, аспирант ФГОУ ВПО Орел ГАУ
БИОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ ГРИБОВ РОДА ТМСНОБЕКМА И ИХ ПРОМЫШЛЕННОЕ ПРИМЕНЕНИЕ
Проведена оценка биологической активности гриба рода Trichoderma viride. Установлено, что при культивировании микромицета на жидкой питательной среде с добавлением твердого остатка соломы гречихи, культуральная жидкость исследуемого штамма проявляет выгсокую целлюлазную активность и не обладает фитотоксичностью. Данный экспериментальный субстрат рекомендован к использованию его для биоконверсии грибами рода Trichoderma viride при промыпшленном получении жидкого биопрепарата
«Триходермин».
Ключевые слова: Trichoderma viride, биологическая
активность, целлюлазная активность, биопрепарат.
Введение
В последние годы в связи с бурным развитием биотехнологии возрастает интерес к
микроскопическим грибам рода Trichoderma, которые привлекают внимание исследователей в связи с их практическим )начением для получения биологически активных веществ, средств защиты растений и как активного деструктора растительных полисахаридов [4]. Разработка на их основе экологически чистых технологий является важным направлением в экологической биотехнологии.
При исследовании биологии микромицета в первую очередь акцентируют внимание на его ингибирующую активность в отношении фитопатогенных грибов, таких как Fusarium
oxysporum, Phytophthora parasitica и др. Поэтому грибы рода Trichoderma исполь)уются в мировой практике для со)дания и ра)работки биологических препаратов, исходя и) высокого антагонистического потенциала, скорости роста и во)можности культивирования в прои)водственных условиях.
Известно также, что Trichoderma выделяет
ра)личные метаболиты: факторы роста (ауксины, цитокины и этилен), органические кислоты,
внутриклеточные аминокислоты, витамины и свыше 100 антибиотиков [1]. Фитогормоны Trichoderma (цитокинины), отвечающие )а стимуляцию фи)иологических процессов растений, поступают в растительный органи)м и приводят к более активному его развитию [5]. Из тканей гриба можно получить трихотецин - антибиотик и триходермин - средство )ащиты растений от грибных боле)ней.
Микромицет рода Trichoderma является активным продуцентом фермента целлюла)ы и способен к глубокой деструкции как клеточных стенок растений, так и отдельных трудно расщепляемых растительных полисахаридов: целлюло)ы, гемицеллюло)ы, пектина до мономерных форм [6]. В настоящее время активно исследуются фенолоксида)ы микромицета в свя)и со )начительной ролью этих ферментов в биодеградации лигнина [2].
The estimation of biological activity of a mushroom of sort Trichoderma viride Is lead. It is established, that at cultivation microscopic mushroom on a liquid nutrient medium with addition of the firm rest of straw fagopyrum, epy culture liquid investigated Kind shows high cellulose activity and does not possess fitoooxicity. The given experimental substratum is recommended to its use for bioconversion by mushrooms of sort Trichoderma viride at industrial reception of a liquid biological product «Trihodermin ».
Key words: Trichoderma viride, biological activity, cellulose activity, a biological product.
Trichoderma viride - биодеструктор лигноцеллюлазных материалов проявляет высокую целлюлазную активность на любых питательных средах [9].
Целью данной работы являлась оценка биологической активности гриба рода Trichoderma viride в отношении фитопатогена Fusarium oxysporum, вызывающего корневые гнили бобовых растений, и определение целлюла)ной активности микромицета при культивировании на трудногидроли)уемом целлюлозосодержащем субстрате (соломе гречихи).
Материалы и методика исследований
Исследование проводилось в лаборатории биотехнологии Орловского регионального биотехнологического центра сельскохо)яйственных растений Орел Г АУ на инновационном оборудовании.
Объекты1 исследования. В работе использовался микромицет Trichoderma viride, который был выделен из биогумуса. К 25 г биогумуса с влажностью 60% добавляли МКЦ (карбоксиметилцеллюлоза), из расчета 0,3 г на 1 кг и культивировали в термостате при температуре 27°С. Выделенную накопительную культуру идентифицировали по Гаузе [7]. Посевной материал выращивали на агаризованной среде Чапека при температуре 28оС, 5 суток в термостате. Для получения инокулята спорово-мицелиальную суспен)ию микромицета фильтровали и ра)бавляли до 1*106 спор/г.
Фитопатоген Fusarium oxysporum любезно предоставлен )аведующей лабораторией )ащиты иммунитета и агротехники ГНУ ВНИИ ЗБК к.с.х.н. Борзенковой Г.А.
Методы
Определение ингибирующей активности Trichoderma viride выявляли методом «аппликаций». На тест-культуру Fusarium oxysporum, равномерно распределенной по поверхности твердой питательной среды Чапека в чашке Петри, накладывали диск и) фильтровальной бумаги, смоченный исследуемым биоцидом - Trichoderma viride. После инкубации определяли зону задержки роста тест-культуры.
Потенциальная способность микромицета разрушать целлюлозосодержащий субстрат была подтверждена в результате проведения качественных реакций с использованием КМЦ (карбоксиметилцеллюлоза), о чем свидетельствовало образование зон просветления среды вокруг колонии гриба.
Для биоконверсии использовали
целлюлозосодержащий субстрат - солому гречихи, которая является ценным биотехнологическим сырьем с богатым комплексом распространенных биополимеров, биологически активных веществ, а также органических веществ не волокнистого характера (биофлавоноидов), которые способствуют устойчивости к поражению патогенными грибами. Для снижения селективности субстрата биофлавоноиды были частично извлечены из сырья путем водной экстракции.
Характеристика твердого остатка соломы гречихи представлена в таблице 1.
Клетчатка является веществом для биоконверсии растительного сырья микромицетами, а фенольные
соединения (биофлавоноиды) источником углерода. - дополнительным
Таблица 1 - Характеристика твердого остатка соломы гречихи
Показатели Характеристика
Влажность, % 65
РСВ, % 1,5
«Сырая» клетчатка, % 45,7
Сумма биофлавоноидов, г/л 1,4
Исследования проводили в трех биологических повторностях. Данные в таблице 2 приведены -среднее значение +/- стандартное отклонение. Статистическая обработка результатов и графическое представление данных проводили с использованием программы Microsoft Office Excell.
Результаты и их обсуждение Антагонистическое действие гриба рода Trichoderma viride в отношении Fusarium oxysporum, оцененное зонами подавления роста фитопатогена, представлено в таблице 2.
Таблица 2 - Ингибирующая активность Trichoderma viride
Время инкубации, час Диаметр зоны подавления роста гриба Fusarium oxysporum, мм
24 4
48 12
72 28
96 42
120 50
Предварительно термически обработанную экспериментальную среду (110 г твердого остатка соломы гречихи и 1 л питательной среды по Чапеку-Доксу) инокулировали споровой суспензией Trichoderma viride. Био деструкцию целлюлозы проводили методом глубинной ферментации в биореакторе BIOSTAT A plus при температуре 25-28°С, рН 5,0-5,5, 200 об./мин.
Зависимости между наличием биомолекул-стимуляторов, продуцируемых микромицетом Trichoderma viride, и улучшением физиологических и биохимических свойств микрорастений гороха проводили согласно методике (Молина, Алимова, 2009) [11]. Отфильтрованной культуральной
жидкостью обрабатывали 3-дневные прорости гороха. На 7-е сутки измеряли длину стеблей, корней, пероксида)ную активность. Подсчет фитотоксической активности проводили по формуле:
Аф=100-((Дх-Дн/Дк-Дн)*100), где
Аф - фитотоксическая активность в процентах ингибирования роста корней (стеблей);
Дх - средняя длина корней (стеблей) на 7-е сутки в опытном варианте, см;
Дк - средняя длина корней (стеблей) на 7-е сутки в контроле, см;
Дн - начальная длина корней (стеблей) на 3-е сутки, см.
Пока)ателем фитотоксичности является угнетение роста корней (проростков) более чем на 30% по сравнению с контролем [8].
Определение целлюла)ной активности
Trichoderma viride на целлюлозосодержащем субстрате проводили по Konig (2002) [3]. Пробы отбирали каждые 24 часа. Клетки отделяли центрифугированием [10].
При совместном культивировании с Trichoderma viride плотность популяции фитопатогена сокращалась до минимума на 5 сутки. Микроскопированием мицелия, конидиеносцев Fusarium oxysporum не установлено внедрение в их клетки гиф гриба рода Trichoderma viride. Антагонистическая активность исследуемого микромицета обусловлена продуцированием фитогормонов, антибиотиков и способностью к быстрой колонизации субстрата.
При изучении влияния культуральной жидкости Trichoderma viride на рост гороха отмечено, что данный штамм увеличивает рост корней (проростков) 7-дневных микрорастений в 2,5 (2,3) раза по
отношению к контролю (рис. 3).
длина, см,
□ Вода
□ Trichoderma viride
корни
проростки
Рисунок 3 - Длина корней и проростков 7-дневных микрорастений гороха, обработанных и необработанных Trichoderma viride
При изучении пероксидазной активности было установлено, что выделение данного фермента у 7-дневных проростков гороха, обработанных Trichoderma viride, увеличилось по отношению к контролю в 2 раза (рис. 4).
В результате исследований показано, что изучаемый штамм Trichoderma viride не обладает фитотоксичностью, а стимулирует рост корней и проростков гороха. Ингибирующую способность по отношению к микрорастению гороха проявляет Fusarium oxysporum, т.е. обладает 100% фитотоксической активностью (рис. 5).
для выращивания гриба рода Trichoderma viride в качестве стимуляторов роста гороха штамм перспективен, так как стимулирует рост корней и проростков, увеличивает пероксидазную активность, то есть не проявляет фитотоксичности.
Полученные нами результаты показывают, что целлюлоза твердого остатка соломы гречихи подвержена деструкции под действием микромицета Trichoderma viride методом глубинной ферментации. Микромицет проявляет высокую целлюлазную активность. Содержание «сырой» клетчатки после 96 часов ферментации составило 32,4%, что на 30% меньше, чем в исходном субстрате.
Таким образом, благоприятный состав твердого остатка соломы гречихи позволяет использовать его в качестве экологически чистого сырья для биоконверсии грибами рода Trichoderma viride, проявляющие высокую биологическую активность в отношении Fusarium oxysporum, а высокий титр спор в полученной культуральной жидкости (1*108 спор/гр.) дают основание рекомендовать этот субстрат для промышленного получения жидкого биопрепарата «Триходермин».
Литература
1. Benitez, T. Biocontrol mechanisms of Trichoderma strains [Тех^/ T.Benitez, A.M.Rincon, M.C.Limon, A.C. Codon // International Microbiology, -2004. - 7 7. - р. 249 - 260.
2. Claus, H. Laccases: structure, reactions,
distribution [Тех^/ H. Claus // Micron. - 2004. - V. 35. -P. 93-95
3. Konig j. et al. Determination of xylanase, glucanase, and cellulose activity [Тех^// Anal Bional Chem. - 2002. - v. 374, 71. -p. 80-87.
4. Алимова, Ф. К. Trichoderma/Hypocrea (Fungi,
Ascomycetes, Hupocreales): таксономия и
распространение [Текст]/ Ф.К. Алимова. - Учебник. -Казань: Казанский государственный университет им.
В.И. Ульянова-Ленина, 2006. - 264 с.
5. Алимова, Ф. К. Биотехнология. Промышленное
применение грибов рода Trichoderma [Текст]: учебнометодическое пособие/ Ф.К.Алимова,
Д.И.Тазетдинова, Р.И.Тухбатова. - Казань:
УНИПРЕСС ДАС, 2007. - 234.
6. Бабицкая, В. Г. Грибы - эффективные
деструкторы лигноцеллюло)ных субстратов: их
морфологическая и физиолого-биохимическая характеристика [Текст]/ В.Г.Бабицкая// Микология и фитопатология. - 1993. - Т. 27. - 75. - с. 38-44.
7. Гаузе, Г. Ф. Определитель актиномицетов [Текст]/ Гаузе Г.Ф. и др. - М., 1983.
8. Захарова, Н.Г. Методические указания к
выполнению лабораторных работ по теме: Экология микроорганизмов [Текст]/ Н.Г.Захарова,
Ф.К.Алимова, С.Ю.Егоров. - Казань: КГУ, 1993. - с. 37-39.).
9. Лазарева, Е.С. Влияние компонентов среды культивирования на фенолоксидазную активность микромицетов Trichoderma viride и Trichoderma Lignorum [Текст]/ Е.С.Лазарева, В.Ф.Смирнов, И.В.Стручкова // Вестник Нижегородского
Активность
пероксидазы1,
%
100
50
0
□ Вода
□ Trichoderma viride
тип обработки
Рисунок 4 - Активность пероксидазы в 7-дневных проростах гороха, обработанных и необработанных Trichoderma viride
80
60
40
20
0
-20
-40
-60
-B0
-100
-120
□ корни ■ проростки
Trichoderma
Fusarium
Рисунок S - Влияние культуральной жидкости Trichoderma viride и Fusarium oxysporum на рост корней и проростков гороха
B процессе культивирования Trichoderma viride продуцирует фермент целлюла)у, )а счет чего происходит гидролиз полисахаридов до растворимых сухих веществ (PCB) [S]. Целлюлазная активность микромицета на экспериментальном субстрате представлена в таблице 6.
Таблица 6 - Целлюлазная активность Trichoderma viride на экспериментальном субстрате
Время культивирования, час Целлюлазная активность, ед/мл Содержание PCB, %
24 0,02S+/-0,002 3,3
48 0,042+/-0,00S 4,4
72 0,283+/-0,03 7,1
96 0,10+/-0,01 9,9
Полученные результаты показывают, что в ходе культивирования на трудногидроли)уемом целлюло)осодержащем субстрате Trichoderma viride проявляет высокую целлюлазную активность. Содержание «сырой» клетчатки после 96 часов ферментации составило 32,4%, что на 30% меньше, чем в исходном твердом остатке соломы гречихи.
Выводы
Микроскопический гриб Trichoderma viride в отношении Fusarium oxysporum проявляет ингибирующую активность. Плотность фитопатогена при совместном его культивировании с микромицетом сокращается до минимума на 5 сутки.
При использовании твердого остатка соломы гречихи после водной экстракции биофлавоноидов (с высоким содержанием «сырой» клетчатки - 45,7%)
университета им. Н.И. Лобачевского, 2008. - №1. -с.77-80.]
10. Методы экспериментальной микологии [Текст] /под ред. В.И. Билай. - Киев: Наукова Думка, 1982.
11. Молина, С. В. Экспресс-метод отбора
микроорганизмов-продуцентов биомолекул
фитостимуляторов [Текст]/ С.В.Молина,
Ф.К.Алимова// Электронный журнал «Структура и динамика молекулярных систем». - №6, А. - 2009.
УДК 634.11:631.527:632.4
С.В. Резвякова, кандидат сельскохозяйственных наук ФГОУ ВПО Орел ГАУ
ОТБОР ЗИМОСТОЙКИХ ГИБРИДНЫХ СЕЯНЦЕВ ЯБЛОНИ В РАННЕМ ВОЗРАСТЕ
В статье дана оценка влияния генетического разнообразия исходных родительских форм на выход морозоустойчивых гибридных сеянцев яблони двухлетнего возраста после искусственного промораживания в лабораторных условиях при критических температурах, соответствующих второму и третьему компонентам зимостойкости в условиях ЦЧР. Выявлена тесная связь между подмерзанием почек и тканей в раннем и плодоносящем возрасте. Ключевые слова: яблоня, зимостойкость, повреждающие факторы зимнего периода, искусственное промо-
раживание.
При создании зимостойких сортов яблони актуальной остается )адача отбора гибридных сеянцев в раннем возрасте. Поскольку приходится иметь дело с ограниченным количеством испытуемого материала (1-3 ветки), то невозможно оценить вновь созданные генотипы по всем основным компонентам )имостойкости. Наиболее опасными в условиях Центрально-Черноземного региона являются максимальные морозы до - 40°С в середине зимы и резкие перепады температур в период оттепели. Эти повреждающие факторы соответствуют 2-му (устойчивость к критическим моро)ам в )акаленном состоянии в середине )имы) и 3-му (способность сохранять устойчивость к морозам в период оттепели в конце )имы) компонентам )имостойкости.
Метод искусственного промораживания в
контролируемых условиях по)воляет выявить
генотипы, которые выдерживают критические температуры, характерные для )оны во)делывания, с обратимыми повреждениями. Моделирование в лабораторных условиях основных стресс-факторов зимовки позволяет интенсифицировать селекционный процесс, проводить ускоренную оценку гибридных сеянцев яблони в раннем во)расте по степени подмер)ания почек и тканей и отбраковывать недостаточно )имостойкие генотипы, тем самым, освобождаться от селекционного брака до высадки сеянцев в селекционный сад. В ре)ультате
сокращаются площади и )атраты на со)дание новых сортов.
Во)можности ранней диагностики
моро)оустойчивости сеянцев яблони методом искусственного промораживания начали и)учать в 70-е годы прошлого столетия сотрудники Всероссийского селекционно-технологического
института садоводства и питомниководства (ВСТИСП) Н.В. Ефимова, М.М. Тюрина и Г.А. Гоголева. Было исследовано более 10 тысяч гибридных сеянцев яблони, полученных от
In article the estimation of influence of a genetic variety of initial parental forms on an exit cold-resistant hybrid seedlings apple-trees of two-year age after artificial freezing is given in laboratory at the critical temperatures corresponding to the second and third components of winter hardiness. The close connection between injury kidneys and fabrics at early and fructifying age is revealed. Practical results are submitted in this article.
Key words: apple-tree, winter hardiness, injurical factors of the winter period, artificial freezing.
скрещивания сортов с разным уровнем зимостоикости [1, 2, 3, 4, 5, 6].
Несмотря на определенные достижения в решении данного вопроса, селекционеры до сих пор высказывают сомнения в правомочности отбора в раннем возрасте. Поэтому целью настоящих исследований было определить влияние генетического разнообразия исходных форм на выход )имостойких гибридных сеянцев яблони и выявить свя)ь между подмер)анием яблони в раннем и плодоносящем во)расте.
Материал и методика исследований
Исследования выполнены во Всероссийском научно-исследовательском институте селекции плодовых культур в лаборатории )имостойкости плодовых и ягодных культур в 1995-2000 гг. и 2008 г.
Объектами исследований послужили 826 гибридных сеянцев яблони 2-х летнего и 66 плодоносящего во)раста ра)ного генетического происхождения, со)данных под руководством и непосредственном участии академика РАСХН Е.Н. Седова.
Во всех комбинациях скрещивания одним и) родителей является донор устойчивости к парше (ген vf или vm). Другая родительская форма является носителем комплекса хо)яйственно-ценных при)наков или одного и) них, таких как )имостойкость, компактность, самоплодность, скороплодность, витаминность, высокие
технологические качества и др.
Искусственное промораживание проводили по методике М.М. Тюриной и Г.А. Гоголевой [7]. Однолетние приросты гибридных сеянцев яблони двухлетнего и плодоносящего возраста промораживали при минус 40оС в январе после стандартной закалки (при минус 5 и минус 10оС в течение 7 дней на каждом режиме) и )атем при минус 25 оС после пятидневной оттепели при 2оС в конце февраля (2+3 компоненты зимостойкости). Во время опыта температуру снижали со скоростью 5оС в час, время промораживания составляло 10 часов. Оценку
Вестник Орел Г Ay
июнь
№3(24)
2010
Теоретический и научно-практический журнал. Основан в 2005 году
Учредитель и издатель: Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Орловский государственный аграрный Университет»_____________________________________________
Редакционный совет: Парахин Н.В. (председатель) Амелин А.В. (зам. председателя) Астахов С.М.
Белкин Б.Л.
Блажнов А.А.
Брыкля О.А.
Буяров В.С.
Гуляева Т.И.
Гурин А.Г.
Гущина Т.В.
Дегтярев М.Г.
Зотиков В.И.
Иващук О.А.
Козлов А.С.
Кузнецов Ю.А.
Лобков В.Т.
Лысенко Н.Н.
Ляшук Р.Н.
Мамаев А.В.
Масалов В.Н.
Новикова Н.Е.
Павловская Н.Е.
Попова О.В.
Прока Н.И.
Савкин В.И.
Степанова Л.П.
Хромов В.Н.
Шендаков А.И. (ответств. секретарь) Ермакова Н.Л. (редактор)
Адрес редакции: 302019, г. Орел, ул. Генерала Родина, 69. Телефон: (4862)454037 Факс: (4862)454064 E-mail: nichо[email protected] E-mail: [email protected]
Свидетельство о регистрации ПИ 7ФС77-21514 от 11.07. 2005 г.
Технический редактор Мосина А.И. Сдано в набор 21.06.2010 Подписано в печат. 28.06.2010 Формат 60x84/8. Бумага офсетная. Гарнитура Таймс.
Объём 12,5 усл. печ. л. Тираж 300 экз. Издательство Орел ГАУ, 302028, г. Орел, бульвар Победы, 19. Лицензия ЛР№021325 от 23.02.1999 г.
Журнал рекомендован ВАК Минобрнауки России для публикаций научных работ, отражающих основное научное содержание кандидатских и докторских диссертаций
Содержание номера научное обеспечение развития растениеводства
Чекалин Е.И., Амелин A.B., Кондыков И.В. Содержание пигментов в листьях и прилистниках у разных по степени окультуренности сортообразцов гороха
полевого......................................................................... 2
Пикунова A.B., Корниенко H.H., Павловская Н.Е., Князев С.Д. SDS-ПААГ
электрофорез запасных белков семян смородины чёрной..............................5
Лысенко H.H., Зернова Н.В. Влияние глубины заделки семян и граминицидов на
развитие растений Avena fatua....................................................8
Лякина O.A., Самсонова Н.Е., Новикова Н.Е. Влияние фосфатов пониженной растворимости и кремния на продуктивност. и химический состав
сельскохозяйственных культур..................................................... 12
Мотылева С.М., Резвякова С.В. Влияние цеолита Хотынецкого месторождения на
некоторые физиологические показатели и урожайность крыжовника....................17
Панарина В.И., Амелин A.B. О влиянии погодных условий, ценотического взаимодействия и морфотипа растений на потенциал.ное и реал.ное плодо- и
семяобразование современных сортов гороха........................................ 21
Павленкова Г.А., Догадина М.А. Влияние стимуляторов роста на выход стандартных
саженцев сирени при вегетативном размножении, их дальнейший рост и развитие......25
Кирсанова Е.В., Тиняков Л.А., Злотников А.К. Новые элементы технологии
возделывания многорядного ячменя сорта Вакула в условиях Орловской области.......32
Гнеушева И.А., Павловская Н.Е., Яковлева И.В. Биологическая активность грибов
рода Trichoderma и их промышленное применение.................................... 36
Резвякова С.В. Отбор зимостойких гибридных сеянцев яблони в раннем возрасте......39
Догадина М.А. Влияние нетрадиционных удобрений и биологически активных веществ
на укореняемость зеленых черенков хризантем...................................... 42
Стародубцев В.Н., Степанова Л.П. Коренькова Е.А. Экологическая оценка эффективности действия различных форм биологически активных веществ на посевные
качества и урожайность яровой пшеницы............................................47
Колбасова Н.И., Решетникова С.Н., Игнатова Т.Д. Сравнительный анализ адаптированности растител.ных семейств-ценозообразователей в различных фитоценозах Среднего Поволжья.....................................................50
экономические аспекты развития аграрного сектора
Воропаев А.И., Петрова А.Н. Земельно-ипотечное кредитование сельского хозяйства... 54 Жиляков Д.И., Зарецкая В.Г. Современные проблемы анализа финансовоэкономического состояния организаций различных сфер деятельности................. 58
Сухорукова Н.В. Совершенствование экономических отношений в молочном
подкомплексе АПК................................................................. 65
Анохин A.A., Мальцева Е.С. Временная занятость несовершеннолетних граждан как фактор социально-экономического развития региона (на примере Орловской области). 70 Фидирко И.А. Современные тенденции формирования качества жизни сельского
населения........................................................................ 73
Малыгина Т.Ю. Вопросы формирования рационального землепользования
сел.скохозяйственных организаций................................................. 75
Волобуева Т. А. Экономическое положение и приоритеты развития малого бизнеса на селе............................................................................. 78
актуальным вопросы1 животноводства и ветеринарии
Козлов A.C., Пискунова О.Г., Митин А.Н., Мартынов В.Ю. Эффективная система выращивания ремонтного молодняка - важное условие увеличения производства молока 82 Дедкова А.И., Сергеева H.H. Клинико-физиологическое состояние свиней на откорме
при уплотненном содержании....................................................... 84
Шадская A.B. Влияние электропунктурной рефлексотерапии на течение острого
асептического синовита у собак................................................... 88
Самусенко Л.Д., Мамаев A.B. Стимуляция репродуктивной функции коров
биоэнергетическими методами...................................................... 92
Дементьев C.B. Влияние пробиотиков, тонизирующих препаратов, минеральных
добавок и средств природного происхождения на молочную продуктивность коров...... 95
Учасов Д.С., Ярова il Н.И., Сеин О.Б. Влияние пробиотического препарата «Проваген» на физиолого-биохимический статус и продуктивность молодняка свиней.............. 97
© ФГОУ ВПО Орел ГАУ, 2010
