CC BY
40
© Коллектив авторов., 2007 УДК 616.36-008.51-008.9
БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ КРОВИ ПРИ ПРИЕМЕ ЛОВАСТАТИНА В ЭКСПЕРИМЕНТЕ НА ЖИВОТНЫХ
В.Г. Макарова, Т.В. Моталова, Д.Г. Узбекова
Рязанский государственный медицинский университет имени академика И.П.Павлова
В настоящее время в развитых странах мира до 80-95% больных ишемической болезнью сердца принимают статины. Однако, их широкое внедрение в клиническую практику в нашей стране затруднено по ряду причин: высокая стоимость, гепатотоксичность и др. В исследовании на 150 крысах продемонстрировано влияние воспроизведенного препарата ловастатина «Холетар» на основные функциональные ферменты печени (АСТ, АЛТ, ЩФ, у-ГТП). Рассматриваются возможные механизмы поражения печени. Сделан вывод о целесообразности исследования активности у-ГТП и ЩФ - маркёров холестаза в клинической практике для оптимизации безопасности применения статинов.
Сердечно-сосудистые заболевания остаются наиболее частой причиной смертности в большинстве экономически развитых стран мира. Главным патологическим процессом, лежащим в основе этих заболеваний, является атеросклеротическое поражение сосудов. Эпидемиологические исследования последних лет показали прямую корреляцию между нарушениями липидного обмена и риском развития сердечно-сосудистых осложнений [1,5].
В настоящее время статины (ингибиторы Р-гидрокси-Р-метил-глутарил-коэнзим А - редуктазы) являются наиболее эффективными гиполипидемическими средствами. Однако, несмотря на многочисленные доказательства преимущества статинов, в России назначение этих препаратов явно недостаточно [2].
Одной из причин, ограничивающей применение статинов, является высокая стоимость препаратов этой группы. Интенсивная гиполипидемическая терапия с помощью статинов может быть расширена за счет применения генерических препаратов (дженериков) - лекарственных средств, выпускаемых различными фармацевтическими компаниями после прекращения срока действия патента на оригинальный препарат [8]. Регистрация нового генерического препарата происходит после успешного прохождения исследования на биоэквивалентность с оригинальным препаратом [4,7].
Вторым фактором, ограничивающим применение статинов - является наличие побочных явлений при длительном применении препаратов. Ингибиторы ГМГ-КоА-редуктазы как все лекарственные средства, метаболизирующиеся в печени, оказывают неблагоприятное воздействие на её функцию. Гепатотоксичность относится к главным осложнениям лечения статинами и проявляется в основном функциональными нарушениями печени, а именно, увеличением активности более чем в 3 раза аспартатаминотрансферазы (АСТ) и аланинаминотрансферазы (АЛТ), а также повышением активности щелочной фосфатазы (ЩФ) [6].
Актуальной является проблема безопасности воспроизведенных препаратов, так как препараты, имеющие одни и те же активные вещества, но выпускаемые различ-
ными производителями, могут существенно различаться как по терапевтической эффективности, так и по частоте и выраженности вызываемых ими побочных эффектов [6,7].
В связи с этим, представляется интересным изучение безопасности воспроизведенных статинов в условиях эксперимента.
Цель исследования - изучение влияния наиболее доступного по цене воспроизведенного препарата ловастатина «Холетар» ("KRKA", Slovenia) на активность печеночных ферментов: АСТ, АЛТ, ЩФ и у-глутамилтранспептидазы (у-ГТП) в эксперименте на животных.
Материалы и методы
Исследование проводили на 150 нелинейных крысах самцах массой 150-220 г. Ловастатин вводили подопытным животным через зонд в желудок в суточной дозе 20 мг/кг. Стандартизация условий предусматривала введение ловастатина в одно и то же время суток - в 1800, так как синтез холестерина максимально происходит в вечерние и ночные часы. Контрольным животным в те же сроки перорально вводили дистиллированную воду. Исследование проводилось на 7, 14, 21, 30 сутки назначения ловастатина и на 10 день после отмены препарата для оценки последействия. Для проведения биохимических исследований забор крови осуществляли из брюшной аорты у животных, наркотизированных эфиром. В сыворотке крови оценивали активность ферментов: АЛТ, АСТ, у-ГТП, ЩФ спектрофотометрическим методом с помощью стандартных наборов реагентов фирмы «HUMAN», Германия. Активность ферментов выражали в единицах на 1 л (U/L).
Результаты и их обсуждение
У интактных крыс активность АЛТ составила - 63,08±3,26 U/L, активность ACT
- 92,5±2,6 U/L, активность ЩФ - 667,2±200,06 U/L, активность у-ГТП - 2,5 ± 0,6 U/L.
40000-
30000-
20000-
10000-
BY- ГТП □ контроль
Рис. 1. Изменение активности у-ГТП и ЩФ в сыворотке крови при назначении ловастатина По оси ординат - процент к контролю, по оси абсцисс - дни опыта.
Статистическая значимость * - p<0,05; ** - p<0,01; *** - p<0,001.
Достоверное увеличение активности у-ГТП выявлено на 14 сутки эксперимента на 76% (p<0,01), на 21 и 30 сутки отмечалось резкое увеличение её активности по сравнению с контролем соответственно в 420 (p<0,001) и 436 (p<0,001) раз. Причем, активность у-ГТП сохранялась достоверно повышенной в 356 (p<0,001) раз и в периоде последействия ловастатина (40 день опыта).
Активность ЩФ повышалась постепенно и достоверно превышала контрольные значения на 14 сутки на 35% (p<0,05), на 21 - на 50% (p<0,05), на 30 - на 52% (p<0,05), а затем имела тенденцию к нормализации в периоде последействия (рис. 1).
Таким образом, при курсовом введении воспроизведенного препарата ловастатина «Холетар» наблюдалось значительное повышение активности у-ГТП и ЩФ в сыворотке крови, особенно выраженное с удлинением курса применения препарата.
Наряду с повышением активности у-ГТП и ЩФ - биохимическими маркерами холестаза, отмечалось умеренное повышение активности трансаминаз (АСТ, АЛТ), характеризующих цитолитический синдром.
при назначении ловастатина По оси ординат - процент к контролю, по оси абсцисс - дни опыта.
Статистическая значимость * - p<0,05; ** - p<0,01; *** - p<0,001.
Достоверное увеличение активности АСТ и АЛТ при использовании ловастатина выявлено на 7 сутки - на 83% (p<0,001) и 33% (p<0,05); на 14 сутки - на 84% (p<0,001) и 48% (p<0,05); на 21 сутки - на 24% (p<0,001) и на 18% (p<0,05); на 30 сутки - на 24% (p<0,001) и 16% (p<0,05) соответственно (рис 2). Следовательно, активность АЛТ и ACT имела сходный профиль динамики: максимум увеличения наблюдался на 14 сутки применения, с постепенным медленным снижением активности ферментов и тенденцией к нормализации показателей после отмены препарата, однако более значительно повышалась активность АСТ по сравнению с АЛТ.
Изменения активности трансаминаз находились в пределах рекомендуемого для статинов "коридора безопасности", то есть не превышали верхние границы нормы более чем в 3 раза [6].
Таким образом, воспроизведенный препарат ловастатина при курсовом назначении оказывал отчетливое влияние на органоспецифические и неспецифические ферменты печени. Это действие проявлялось умеренным цитолитическим синдромом, на что указывает повышение активности трансаминаз АСТ, АЛТ (в 1,5 - 2 раза от исходных значений), и значительным холестатическим синдромом - активность у-ГТП повышалась в 436 раз.
Обращает на себя внимание факт преобладания холестатического синдрома над цитолитическим при курсовом применении ловастатина, в пользу которого свидетельствует резкое увеличение активности у-ГТП, повышение активности ЩФ и более значительное увеличение активности АСТ по сравнению с АЛТ. Имеются литературные данные о том, что превышение активности АСТ над АЛТ указывает на холестаз [12]. Причинами внутрипеченочного холестаза при лекарственной терапии, могут быть нарушения функции транспортных систем гепатоцитов [9].
Механизм повышения активности изучаемых ферментов печени при длительном введении ловастатина ещё полностью не установлен. В литературе имеются предположения о том, что изменение активности печеночных ферментов возможно связано с усилением перекисного окисления липидов, либо с изменениями в систе-
ме микросомальных механизмов детоксикации [3,11,12]. Как показали наши исследования, возможной причиной повышения трансаминаз может быть внутрипече-ночный холестаз.
Выводы
При курсовом применении в эксперименте ловастатин вызывал развитие холе-статического синдрома, который проявлялся увеличением активности ферментов -Y-ГТП, ЩФ и АСТ.
Повышение активности АСТ и АЛТ в сыворотке крови находилось в пределах «коридора безопасности».
В связи с вышесказанным, для оптимизации безопасности применения статинов в клинической практике рекомендуется дополнительно к анализу АСТ и АЛТ исследовать активность у-ГТП и ЩФ.
ЛИТЕРАТУРА
1. Аронов Д.М. Социальные аспекты атеросклероза и методы его лечения / Д.М. Аронов // Рус. мед. журн. - 2000. - № 7. -С. 276.
2. Аронов Д.М. Вопросы безопасности и переносимости статинов в постцери-вастатиновую эру / Д.М. Аронов // Consilium medicum. - 2004. - № 12. - С. 893-898.
3. Буеверов А.О. Лекарственные поражения печени / А.О. Буеверов // Рус. мед. журн. - 2001. - № 13-14. - С. 608-610.
4. Videau J.-Y. Воспроизведенные препараты: скрытые проблемы качества и стоимости / J.-Y. Videau, B. Fundafunda // Фарматека. - 2001. - № 2. С. 9-13.
5. Журавлева М.В. Кардиостатин: новый отечественный препарат для лечения гиперхолестеринемии и профилактики атеросклеротических осложнений / М.В. Журавлева, С.В. Желябовская // Фарматека. - 2003. - № 12. - С. 80-83.
6. Кухарчук В.В. Эффективность, безопасность и переносимость препарата Ме-достатин® у больных с первичными гиперлипидемиями / В.В. Кухарчук, Т. А. Рож-кова,Е. Ю. Соловьева [и др.] // Рус. мед. журн.. - 2003. - № 5. - С. 258-262
7. Леонова Ю.Л. Проблема непатентованных препаратов / Ю.Л. Леонова // Рус. мед. журн. - 2001. - № 12. - С. 524- 526.
8. Логачева И.В. Статины - клинические и метаболические эффекты у больных с прогрессирующей и стабильной стенокардией / И.В. Логачева, Т.И. Борисова, Л. А. Лешинский [и др.] // Кардиология. - 2005. - № 5. - 38-41.
9. Мухина Ю.Г. Холестаз и пути его коррекции в педиатрической практике: применение урсофалька / Ю.Г. Мухина, С.В. Бельмер, А.В. Дегтярева [и др.] // Фарматека. - 2005. - № 1. - С. 10-16.
10. Рахимов К.Д. Необходимость оценки эффективности и безопасности лекарственных средств на основе изучения их биоэквивалентности / биодоступности в республике Казахстан / К.Д. Рахимов, С.Н. Шин, И.К. Кудрина [и др.] // Клиническая фармакология в России: достижения и перспективы - 30 лет. - М., 2004. - С. 212-213.
11. Сусеков А.В. Флувастатин медленного высвобождения - вопросы эффективности и безопасности / А.В. Сусеков, В. В. Кухарчук // Атмосфера Кардиология.
- 2002. -№ 3. - С. 18-21.
12. Титов В.Н. Методические и диагностические аспекты исследования активности аминотрансфераз / В.Н. Титов, Н.А. Бочкова // Лабораторное дело. - 1990. -№ 8. - С.4-12.
BIOCHEMICAL BLOOD INDEXES IN EXPERIMENTAL ANIMALS FOLLOWING LOVASTATIN ADMINISTRATION
V.G. Makarova, T.V. Motalova, D.G. Uzbekova
In highly developed countries up to 80-90% patients suffering from coronary artery disease currently take statins. However, they are not introduced widely into clinical practice in our country, there are several reasons for it: high price, hepatotoxicity and others. Investigations on 150 rats show the effect of the reproduced preparation of lovastatin - «Choletar» on main functional liver enzymes: ALT, AST, GGT and alkaline phosphatase. The possible mechanisms of hepatic lesion after lovastatin administration are discussed. It is concluded that the study of GGT and alkaline phosphatase activities (as cholestases markers) in clinical practice is expedient for safety optimization of statins application.
