CC BY
12
УДК 636.227.28.053.2:636:612.111.7
Ключевые слова: телята, фаза новорожденное™, черно-пестрая порода, тромбоциты, агрегация, секреция
Кеу words: calves, newborn phase, black-and-white breed, platelets, aggregation, secretion
Кутафина Н. В., Макурина О. Н., Медведев И. Н.
БИОХИМИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ТРОМБОЦИТОВ У НОВОРОЖДЕННЫХ ТЕЛЯТ ЧЕРНО-ПЕСТРОЙ ПОРОДЫ
BIOCHEMICAL FEATURES OF PLATELETS IN NEWBORN CALVES OF BLACK-AND-WHITE BREED
'ФГБУН «Всероссийский научно-исследовательский институт физиологии, биохимии и питания животных» (ВНИИФБиП). Адрес: 249013, Россия, Калужская область, г. Боровск
1Russian Research Institute of Physiology, Biochemistry and Nutrition of Animals, Science Federal State Budgetary Institution. Address: 249013, Russia, Kaluga region, Borovsk 2ФГБОУ ВПО «Самарский государственный университет» Адрес: 443011, Россия, г. Самара, ул. Академика Павлова, 1 2Samara State University, Federal State Educational Institution of Higher Professional Education Address: 443011, Russia, Samara, Akademik Pavlov street, 1 3Курский институт социального образования (филиал) ФГБОУ ВПО Российский государственный
социальный университет. Адрес: 305029, Россия, г. Курск, ул. Карла Маркса, 53 3Kursk Institute of Social Education (Branch) Russian State Social University, Federal State Educational Institution of Higher Professional Education. Address: 305029, Russia, Kursk, Karl Marx street, 53
Кутафина Надежда Викторовна, мл. научн. сотрудник лаборатории биотехнологии микроорганизмов1. Тел. +7 (920) 711-80-12
Kutafina Nadezhda V., Junior Researcher of the Laboratory of Biotechnology of Microorganisms1. Tel. +7 (920) 711-80-12 Макурина Ольга Николаевна, д. б. н., проф. каф. биохимии2. Тел. +7 (910) 270-09-94 Makurina Olga N., Doctor of Biological Sciences, Professor of the Biochemistry Dept.2. Tel. +7 (910) 270-09-94 Медведев Илья Николаевич, д. б. н., проф. каф. социальной работы
и социальных технологий3. Тел. +7 (910) 273-22-63 Medvedev Ilya N., Doctor of Biological Sciences, Professor of the Dept. of Social Work and Social Technologies3. Tel. +7 (910) 273-22-63
Аннотация. У здоровых новорожденных телят черно-пестрой породы при нормальном содержании количества тромбоцитов в крови отмечается тенденция к усилению их функциональных свойств in vitro и in vivo. Важными механизмами, обеспечивающими наклонность к росту агрегационной активности тромбоцитов у черно-пестрых телят в фазу новорожденности, можно считать тенденцию к интенсификации обмена эндогенной арахидоновой кислоты и к росту содержания в тромбоцитах аденозинтрифосфата, аденозиндифосфата, актина и миозина. Summary. There is a tendency to strengthening functional properties ofplatelets in vitro and in vivo in healthy newborn calves of black-and-white breed with normal platelet count. The tendency to intensification of the exchange of endogenous arachidonic acid and to the increase of the content of adenosine triphosphate, adenosine diphosphate, actin and myosin in platelets can be considered to be important mechanisms providing tendency to the increase of platelet aggregation activity in black-and-white calves in the neonatal phase.
Введение
Важным элементом обеспечения гомео-стаза организма продуктивных животных является эффективное функционирование тромбоцитов, во многом определяющих успешность микроциркуляции [6] и, тем самым, оптимальность процессов развития организма, особенно в фазу новорожден-ности [3]. Есть основания считать, что с состоянием функционально-биохимических особенностей тромбоцитов в значительной
мере связано развитие структур организма и уровень их функциональной активности, основанный на оптимуме реализации наследственной информации [4, 5, 7, 8]. Учитывая генетические различия разных пород крупного рогатого скота, представляет большой научно-практический интерес оценка функционально-биохимических свойств тромбоцитов у телят черно-пестрой породы, достаточно широко распространенной в Центральной России. В связи с тем,
что наиболее ранней и важной для процессов роста является фаза новорожденности, представляет особый интерес оценка тромбо-цитарных характеристик именно на ее протяжении [1].
Цель проведенного исследования - оценить физиолого-биохимические свойства тромбоцитов у здоровых телят черно-пестрой породы в течение фазы новорожденности.
Материалы и методы исследований
Исследования выполнены на 32 телятах черно-пестрой породы, полученных от здоровых коров с нормально протекавшей стельностью, которых осматривали и обследовали в фазе новорожденности 5 раз: на 1-2-е сутки, 3-4-е, 5-6-е, 7-8-е и на 9-10-е сутки.
Косвенная оценка обмена в тромбоцитах арахидоновой кислоты (АА) с определением в них активности циклооксигеназы (ЦО) и тромбоксансинтетазы (ТС) проведена с помощью трех проб переноса по методу Ермолаевой Т. А. с соавт. [2] с определением агрегации тромбоцитов на фотоэлектро-колориметре. Количественное содержание в тромбоцитах АТФ и АДФ, уровень их секреции и особенности белкового состава цитоскелета кровяных пластинок (актин и миозин) в ходе активации и агрегации тромбоцитов под влиянием АДФ и тромбина выясняли по Ермолаевой Т. А. с соавт. [2].
Выраженность агрегации тромбоцитов (АТ) регистрировали визуальным микрометодом [9] с применением в качестве индукторов АДФ (0,5х10-4 М), коллаген (разведение 1 : 2 основной суспензии), тромбин (0,125 ед./мл), адреналин (5,0х10_6 М), ристоми-цин (0,8 мг/мл), а также комбинации АДФ и коллагена, АДФ и адреналина, коллагена и адреналина в тех же концентрациях со стандартизированным числом тромбоцитов в исследуемой плазме 200*109 тр. Результаты исследования обработаны критерием Стью-дента.
Результаты исследований и обсуждение
Оценка тромбоцитарной активности у здоровых телят черно-пестрой породы в фазу новорожденности выявило тенденцию
к росту функциональных характеристик кровяных пластинок при стабильно нормальном количестве тромбоцитов в их крови. Так, у обследованных телят черно-пестрой породы на 1-2-е сутки жизни АТ наступала в ответ на коллаген за 32,2±0,12 с., а к 9-10 суткам жизни - за 31,5±0,10 с. Сходная тенденция к ускорению АТ выявлена для АДФ и ристо-мицина, наступавшая к концу наблюдения за 39,7±0,11 с. и 47,4±0,18 с., соответственно. Также отмечена склонность к ускорению тромбиновой (до 52,6±0,14 с.) и адреналиновой (до 97,0±0,18 с.) АТ. Аналогичная тенденция к сокращению времени развития АТ отмечена и на фоне сочетаний индукторов: для АДФ и адреналина - до 37,5±0,09 с., для АДФ и коллагена - до 27,4±0,13 с., для адреналина и коллагена - до 30,5±0,09 с.
Одним из механизмов, вызывающих выявленную тенденцию к росту АТ у телят черно-пестрой породы в течение фазы ново-рожденности, можно считать наклонность к интенсификации у них обмена АА в тромбоцитах при невыраженном усилении тромбок-санообразования, о чем косвенно удавалось судить по повышению АТ в простой пробе переноса (на 9-10 сутки жизни - 30,5± 0,08 %). Тенденция к усилению метаболизма АА в тромбоцитах наблюдаемых животных была связана со склонностью к нарастанию у них активности обоих ферментов ее превращения в кровяных пластинках - ЦО и ТС. Величина восстановления АТ в коллаген-аспириновой пробе, косвенно характеризующая активность ЦО в тромбоцитах, достигала к концу наблюдения 79,8±0,10 %. При этом восстановление АТ в коллаген-имидазольной пробе, дающее возможность косвенно оценить активность ТС в кровяных пластинках, также у наблюдаемых телят нарастало в течение первых 10 суток жизни, составляло к 9-10 суткам 41,1±0,07 %.
Изначально невысокое содержание в тромбоцитах животных АТФ и АДФ имело склонность к легкому повышению, достигая 5,50±0,15 и 3,30±0,06 мкмоль/109 тромбоцитов к концу фазы новорожденности. При этом уровень их секреции из тромбоцитов имел тенденцию к увеличению за время наблюдения на 6,5 % и 6,6 %, соответствен-
но, составляя к концу наблюдения 30,6±0,20 и 40,7±0,14 %.
Количество актина и миозина на 1-2-е сутки в тромбоцитах наблюдаемых телят составляло 26,5±0,14 и 12,3 ±0,17 % общего белка в тромбоците, а к концу фазы новорожденное™ - 27,3±0,16 и 13,7±0,19 % общего белка в тромбоците. Выраженность дополнительного образования актина на фоне активации сильным или слабым индуктором и в ходе последующей агрегации под их влиянием у телят черно-пестрой породы также испытывало тенденцию к росту в течение всей фазы новорожденности.
Найденная склонность к повышению активности кровяных пластинок у здоровых новорожденных телят черно-пестрой породы, обеспечивающаяся тенденцией к усилению оцененных их отдельных функциональных механизмов, во многом определяет у них физиологически необходимые реологические и гемостатические свойства крови, в т. ч. в последующие фазы онтогенеза [10]. В связи с этим анализ уровня активности тромбоци-тарного гемостаза и тонких механизмов его реализации у здоровых телят весьма распространенной в центральных регионах России черно-пестрой породы в фазе молозивного питания имеет практическую значимость.
У обследованных новорожденных телят имевшаяся тенденция к повышению адгезивной способности кровяных пластинок может быть связана с легким нарастанием концентрации в их крови фактора Виллебранда (FW) - кофактора адгезии тромбоцитов и/ или увеличения числа рецепторов к нему в) на поверхности кровяных пластинок, что было определено на основе тенденции к ускорению агрегации тромбоцитов с ристо-мицином, который по способности влиять на тромбоциты идентичен субэндотелиаль-ным структурам сосудов [12]. Склонность к ускорению АТ с остальными испытанными индукторами определялась также наклонностью к увеличению у телят в первые 10 суток жизни количества рецепторов к ним на мембранах кровяных пластинок [11].
Оценка одновременного влияния двух индукторов агрегации на процесс агрегации тромбоцитов у новорожденных живот-
ных говорит об их взаимопотенциирующем влиянии в физиологических условиях [12]. Регистрация агрегации тромбоцитов при сочетании ее индукторов моделирует реальные условия кровотока у растущих телят, позволяя оценить АТ при ее стимуляции по различным путям, что свойственно для обычных условий кровотока.
Заключение
Выявленные закономерности тромбоци-тарной активности у здоровых телят черно-пестрой породы в фазе новорожденно-сти обусловливают оптимальный уровень адаптации их внутрисосудистой активности тромбоцитов и микроциркуляции в тканях к влияниям внешней среды и связаны с реализацией их генетической программы приспособительных реакцией к началу внеутробно-го существования.
Список литературы
1. Глаголева, Т. И. Ферроглюкин и гамавит в коррекции антиагрегационных свойств сосудов у новорожденных телят с дефицитом железа / Т. И. Глаголева, С. Ю. Завалишина, И. Н. Медведев // Успехи современного естествознания. - 2013. - № 5. - С. 17.
2. Ермолаева, Т. А. Программа клинико-лабора-торного обследования больных тромбоцитопатиями / Т. А. Ермолаева, О. Г. Головина, Т. В. Морозова. -СПб, 1992. - С. 25.
3. Завалишина, С. Ю. Тромбоцитарная активность у новорожденных телят при железодефицитной анемии / С. Ю. Завалишина // Ветеринария. - 2012. -№ 2. - С. 51-52.
4. Завалишина, С. Ю. Гемостатическая активность сосудов у телят при растительном кормлении / С. Ю. Завалишина // Ветеринария. - 2013. - № 8. -С. 43-45.
5. Краснова, Е. Г. Антиагрегационная активность сосудов поросят молочного питания / Краснова Е. Г., Медведев И. Н. // Актуальные вопросы ветеринарной биологии. - 2011. - № 2. - С. 7-12.
6. Кутафина, Н. В. Механизмы функционирования сосудисто-тромбоцитарного гемостаза / Н. В. Кутафина, С. Ю. Завалишина // Вестник Российского университета дружбы народов, серия «Экология и безопасность жизнедеятельности». - 2012. - № 1. - С. 30-37.
7. Парахневич, А. В. Микрореологические характеристики эритроцитов у поросят в течение фазы молочного питания / А. В. Парахневич, И. Н. Медведев, В. И. Максимов // Актуальные вопросы ветеринарной биологии. - 2012. - № 4 (16). - С. 3-7.
8. Парахневич, А. В. Особенности цитоархитекто-ники эритроцитов у новорожденных поросят породы
крупная белая / А. В. Парахневич, И. Н. Медведев, В. И. Максимов // Актуальные вопросы ветеринарной биологии. - 2013. - № 3 (19). - С.8-11.
9. Медведев, И. Н. Методические подходы к оценке агрегации и поверхностных свойств тромбоцитов и эритроцитов / И. Н. Медведев, С. Ю. Зава-лишина, Е. Г. Краснова, Н. В. Кутафина // Фундаментальные исследования. - 2014. - №2 10-1. - С. 117-120.
10. Краснова, Е. Г. Сосудистый контроль над гемостазом у поросят молочно-растительного питания /
Е. Г. Краснова, И. Н. Медведев // Актуальные вопросы ветеринарной биологии. - 2013. - № 2 (18). - С. 8-12.
11. Краснова, Е. Г. Физиологические особенности тромбоцитарного гемостаза у поросят растительного питания / Е. Г. Краснова // Ветеринария. - 2013. -№ 2. - С. 46-49.
12. Кутафина, Н. В. Механизмы функционирования сосудистого гемостаза / Н. В. Кутафина // Международный научно-исследовательский журнал. -2012. - № 5-3 (5). - С. 64-65.
АППАРАТ ДЛЯ ИМПУЛЬСНОЙ ЭЛЕКТРОМАГНИТНОЙ ТЕРАПИИ «УМИ-05»
На протяжении многих лет клиника БНПЦ ЧИН и Институт Ветери нарной Биологии (Санкт-Петербург) используют в своей практике уникальный прибор - генератор низкочастотного магнитного импульсного излучения большой мощности «УМИ-05» (ранее «УИМТ-2», «УИМТ-3»). Данный прибор применяется для моно-или комплексной терапии целого ряда заболеваний, которые ранее считались неизлечимыми или очень тяжело поддавались лечению.
Основные направления применения «УМИ-05»
• Заболевания мочевой системы: мочекаменная болезнь, пиелонефрит, поликистоз, цистит.
• Желчекаменная болезнь.
• Заболевания опорно-двигательного аппарата: остеохондроз позвоночника, дископатия, артрозо-артриты, бурсит, растяжение связок, ушибы, контрактуры суставов, миозит.
• Купирование эпилептических приступов и эпилептического статуса.
• Гипертензия.
• Отит гнойный.
• Отит аллергический.
Стандартный курс лечения
• 10 сеансов по 30-50 импульсов на одну патологическую область. Мощность 50-80 %. Курс можно повторить с перерывом в 10 дней.
• Профилактический курс для животных группы риска (остеохондроз, МКБ и пр.) -7-10 сеансов с интервалом 6 месяцев.
• Применение прибора не вступает в противоречие с использованием фармакологических и хирургических методов лечения.
• Магнитотерапию не следует проводить на области тела, содержащей металлоконструкции (например, штифты или пластины для остеосинтеза).
Экономика
• Быстрая окупаемость прибора.
• Минимальная затрата рабочего времени: длительность одного сеанса на одну патологическую зону - 2-3 минуты.
• Высокая эффективность лечения, полное излечение или введение животного в стойкую ремиссию по всем перечисленным заболеваниям гарантируют значительное увеличение рейтинга клиники в целом и приток новых клиентов.
Стоимость прибора 23 000 руб.
Заказать УМИ-05 можно по тел./факсу: (812) 927-55-92; по e-mail: virclin@mail.ru. Подробности на сайте: www.invetbio.spb.ru
