Научная статья на тему 'Белок CG9890 с доменами цинковых пальцев - новый компонент ENY2-содержащих комплексов дрозофилы'

Белок CG9890 с доменами цинковых пальцев - новый компонент ENY2-содержащих комплексов дрозофилы Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

CC BY
127
17
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Журнал
Acta Naturae (русскоязычная версия)
WOS
Scopus
ВАК
RSCI
PubMed
Ключевые слова
ENY2 / CG9890 / DROSOPHILA / IMMUNOPRECIPITATION / ZINC FINGERS / ДРОЗОФИЛА / ИММУНОПРЕЦИПИТАЦИЯ / ЦИНКОВЫЕ ПАЛЬЦЫ

Аннотация научной статьи по фундаментальной медицине, автор научной работы — Фурсова Н. А., Николенко Ю. В., Сошникова Н. В., Мазина М. Ю., Воробьева Н. Е.

Ранее мы показали, что инсуляторный белок Su(Hw), содержащий домен цинковых пальцев, взаимодействует с ENY2 и привлекает ENY2-содержащие комплексы на Su(Hw)-зависимые инсуляторы дрозофилы, участвуя одновременно в регуляции транскрипции и позиционировании ориджинов репликации. В данной работе обнаружено, что ENY2 взаимодействует еще с одним белком CG9890, который также содержит домен цинковых пальцев. Подтверждено взаимодействие ENY2 и CG9890. Показано, что белок CG9890 локализован в клеточном ядре и взаимодействует c белковыми комплексами SAGA, ORC, dSWI/SNF, TFIID, THO.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Zinc Finger Protein CG9890 - New Component of ENY2-Containing Complexes of Drosophila

In previous studies, we showed that the insulator protein Su(Hw) containing zinc finger domains interacts with the ENY2 protein and recruits the ENY2-containing complexes on Su(Hw)-dependent insulators, participating in the regulation of transcription and in the positioning of replication origins. Here, we found interaction between ENY2 and CG9890 protein, which also contains zinc finger domains. The interaction between ENY2 and CG9890 was confirmed. It was established that CG9890 protein is localized in the nucleus and interacts with the SAGA, ORC, dSWI/SNF, TFIID, and THO protein complexes.

Текст научной работы на тему «Белок CG9890 с доменами цинковых пальцев - новый компонент ENY2-содержащих комплексов дрозофилы»

УДК 577.21

Белок CG9890 с доменами цинковых пальцев — новый компонент ENY2-содержащих комплексов дрозофилы

Н. А. Фурсова, Ю. В. Николенко, Н. В. Сошникова, М. Ю. Мазина, Н. Е. Воробьева, А. Н. Краснов*

Институт биологии гена РАН, 119334, Москва, ул. Вавилова, 34/5 *E-mail: [email protected] Поступила в редакцию 18.05.2018 Принята к печати 28.09.2018

РЕФЕРАТ Ранее мы показали, что инсуляторный белок Su(Hw), содержащий домен цинковых пальцев, взаимодействует с ENY2 и привлекает ENY2-содержащие комплексы на Su(Hw)-зависимые инсуляторы дрозофилы, участвуя одновременно в регуляции транскрипции и позиционировании ориджинов репликации. В данной работе обнаружено, что ENY2 взаимодействует еще с одним белком - CG9890, который также содержит домен цинковых пальцев. Подтверждено взаимодействие ENY2 и CG9890. Показано, что белок CG9890 локализован в клеточном ядре и взаимодействует c белковыми комплексами SAGA, ORC, dSWI/SNF, TFIID, THO.

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА ENY2, CG9890, дрозофила, иммунопреципитация, цинковые пальцы. СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ AMEX - комплекс экспорта мРНК из ядра в цитоплазму; ENY2 - enhancer of yellow 2; C2H2 - цинковые пальцы типа C2H2; SAGA - гистон-ацетилтрансферазный комплекс; SWI/SNF - комплекс ремоделирования хроматина; ORC - комплекс позиционирования точек начала репликации в геноме.

ВВЕДЕНИЕ

Регуляция экспрессии генов эукариот - комплексный многофакторный процесс, который может происходить на нескольких последовательных этапах транскрипции (инициация и элонгация), процессинга мРНК, экспорта мРНП из ядра, трансляции и фолдин-га белков [1]. Локальная структура хроматина, положение гена относительно функциональных ядерных компартментов и дальние взаимодействия регулятор-ных элементов являются дополнительным уровнем регуляции генетических процессов в контексте сложной организации генома эукариот в трехмерном пространстве ядра [2-4]. Белок ENY2 - мультифункцио-нальный фактор, участвующий в различных стадиях экспрессии генов [5-15]. Разнообразные клеточные функции ENY2 определяются активностями тех белковых комплексов, в составе которых он обнаруживается. Так, ENY2 является субъединицей деубикви-тинирующего модуля SAGA - важного коактиватора транскрипции у дрозофилы [13, 16]. Этот комплекс обладает гистон-ацетилтрансферазной активностью. Вносимая им модификация узнается бромодоменами ремоделирующих хроматин комплексов семейства SWI/SNF, за счет чего происходит их привлечение на гены, регулируемые SAGA [17]. В результате активного ремоделирования структуры хроматина

происходит локальное удаление или дестабилизация нуклеосом, что создает благоприятные условия для связывания РНК-полимеразы и различных факторов транскрипции, необходимого для регуляции транскрипции [18, 19]. Кроме того, ENY2 обнаружен в составе комплекса AMEX, взаимодействующего с белками ядерной поры (NPC) и участвующего в экспорте мРНК из ядра [14]. Будучи общим компонентом двух указанных комплексов, ENY2 отвечает за локализацию части SAGA-регулируемых генов у ядерной поры, тем самым участвуя в создании локальных транскрипционно активных участков на периферии ядра. ENY2-зависимое позиционирование определенных генетических локусов вблизи NPC обеспечивает высокую скорость экспорта новосинтезированной РНК, что абсолютно необходимо при ответе на стресс или гормональный сигнал. Осуществляемое белком ENY2 привлечение комплексов, участвующих в создании участков локально открытого хроматина, играет важную роль в обеспечении барьерной активности Su(Hw)-зависимых инсуляторов [15]. Кроме того, Su(Hw) - первый белок высших эукариот, роль которого была показана в позиционировании ориджинов репликации в геноме дрозофилы [20, 21]. Привлечение комплексов SAGA и dSWI/SNF на сайты связывания этого белка приводит к образованию областей с низкой

локальной плотностью нуклеосом, что способствует связыванию комплекса ORC, ответственного за сборку преинициаторного комплекса репликации. По всей видимости, ENY2-содержащие комплексы принимают участие не только в регуляции экспрессии генов, но также важны для синхронизации транскрипции и репликации в ходе клеточного цикла.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

Клеточные линии и трансфекция

В работе использовали линию клеток S2 Drosophila melanogaster. Трансфекцию клеток проводили при помощи Effectene Transfection Reagent (Qiagen) по протоколу производителя. Генетическая конструкция, использованная для трансфекции, кодировала белок CG9890, маркированный 3XFLAG-эпитопом.

Антитела

Были использованы следующие антитела: полученные в нашей лаборатории поликлональные кроличьи антитела к GCN5, Xmas-2, OSA, N-концу TBP, Thoc5, ORC2, ORC3, PB, Moira, любезно предоставленные L. Tora кроличьи антитела к ADA2b. Поликлональные антитела a-CG9890 получены из сыворотки крови кролика, иммунизированного полноразмерным белком CG9890, экспрессирован-ным в Escherichia coli. Все кроличьи антитела были очищены. Концентрация всех антител, полученных в лаборатории, составляла около 1 мг/мл. Также использовали мышиные антитела против ламина Dm0 (Developmental Studies Hybridoma Bank, University of Iowa, Department of Biological Sciences), антитела к FLAG-эпитопу (Sigma), а также антитела к FLAG-эпитопу, конъюгированные с пероксидазой хрена. Разведение коммерческих антител 1 : 500, разведение антител, полученных в лаборатории, варьировало для получения оптимального сигнала на вестерн-блоте. В качестве вторичных антител использовали антитела козы или осла к иммуноглобулинам кролика и мыши, узнающие как полноразмерные иммуноглобулины, так и специфичные только к легким цепям антител (разведение 1 : 5000). Вторичные антитела были конъюгированы с пероксидазой хрена. Кроме того, для флуоресцентной микроскопии использовали вторичные антитела Cy3 и AlexaFluor™ 488 (разведение 1 : 500).

Иммунофлуоресцентная микроскопия клеток линии S2 D. melanogaster

Прикрепившиеся к покровным стеклам клетки линии S2 дважды промывали 1XPBS, фиксировали 3.7% ПФА (pH 7.5) в течение 10 мин, промы-

вали lxPBS 2 раза по S мин. Затем обрабатывали 0.2% раствором Triton X-100 в lxPBS в течение б мин, промывали lx PBS 2 раза по S мин, после чего в течение 10 мин инкубировали в 3% обезжиренном сухом молоке, разведенном в lxPBS. Первичные антитела разводили в 3% молоке/PBS, препараты инкубировали с антителами (l ч, комнатная температура, влажная камера). Использовали антитела мыши против ламина Dm0 (Developmental Studies Hybridoma Bank, University of Iowa, Department of Biological Sciences) в разведении l : S000, поликло-нальные антитела кролика против CG9890 (разведение 1 : 1000). Препараты промывали 3 раза по ö мин в 1xPBS, затем инкубировали со вторичными антителами в течение 1 ч при комнатной температуре во влажной камере, закрытой фольгой. В качестве вторичных антител использовали: антитела против IgG (H+L) кролика, конъюгированные с Cy3 (Amersham), антитела против IgG мыши, конъ-югированные с AlexaFluor 488 (Molecular Probes) в разведении 1 : S00. Закрытые фольгой препараты промывали 3 раза по S мин в 1xPBS и инкубировали с DAPI (разведение 1 : 1000, Sigma) в течение 10 с. Препараты отмывали в течение S мин в 1x PBS. После высушивания покровное стекло заключали в трис-глицериновый буфер (Vectashield) на предметном стекле. Края покровного стекла покрывали лаком во избежание высыхания препарата и попадания иммерсии внутрь него. Препараты смотрели непосредственно после получения, используя световой микроскоп Leica. Использовали объектив x100 с иммерсией. Обработку изображений проводили с помощью программы ImageJ.

Иммунопреципитация

Для выделения ядер клетки центрифугировали в течение S мин при S00g при +40C. Осадок промывали 1 мл буфера LB cyto 3 (3 hM MgCl2, 20 hM HEPES NaOH, pH 8.0) с добавлением бутирата натрия (ингибитор деацетилаз) до конечной концентрации 20 mM. Затем проводили повторное центрифугирование в тех же условиях, тщательно ресуспендировали осадок клеток в 200 мкл буфера LB cyto 3 с добавлением бутирата натрия до конечной концентрации 10 mM и ингибитора протеаз (Protease Inhibitor Cocktail (PIC), Roche). После чего инкубировали на льду в течение 1S мин. После центрифугирования избавлялись от супернатанта, и далее использовали только ядерную фракцию.

Осадок ядер растворяли в S00 мкл MN буфера III (20 mM HEPES KOH, 3 mM MgCl2, 0.1% NP40, 0.1 M KCl, pH 8.0) с добавлением бутирата натрия до конечной концентрации 20 mM (ингибитор деацетилаз) и ингибитора протеаз (PIC, Roche). ДНК фрагменти-

TOM 10 № 4 (39) 2018 | ACTA NATURAE | 111

ровали, обрабатывая клетки ультразвуком (2 раза по 10 с, перерыв 1 мин, средняя мощность прибора) на льду. После ресуспендирования клетки инкубировали в течение 30 мин с 2 ед. ДНКазы I на льду и центрифугировали при 16 000g в течение 20 мин при +4°C.

Для коиммунопреципитации использовали поли-клональные антитела к белку CG9890 и иммуноглобулины сыворотки крови неиммунизированного кролика в качестве отрицательного контроля. Антитела были иммобилизованы на МаЬ-сефарозе.

Лизат клеток линии S2 (200 мл) инкубировали с 15 мкл 50% МаЬ-сефарозы с иммобилизованными на ней антителами в течение 3 ч на качалке при +4°С. Сефарозу отмывали буфером MN III (3 раза по 10 мин) при +4°С. Результаты анализировали с помощью вестерн-блотинга.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

Анализ взаимодействия белков ENY2 и CG9890

Ранее с целью идентификации новых белковых партнеров ENY2 был проведен скрининг библиотеки кДНК эмбрионов дрозофилы в двугибридной дрожжевой системе. Идентифицировали более 10 взаимодействующих белков, часть из которых была изучена [11-15, 20-22]. В ходе скрининга выявили взаимодействие ENY2 с еще неохарактеризованным белком CG9890, изучению которого посвящена данная статья. Как предсказывает биоинформатический анализ аминокислотной последовательности CG9890, он относится к семейству белков, несущих домен цинковых пальцев C2H2 - самый часто встречающийся у эукариот ДНК-связывающий мотив [23]. Белки этого семейства вовлечены в разнообразные клеточные функции, что обеспечивается возможностью участия домена цинковых пальцев в специфическом узнавании не только ДНК, но также РНК и белков [24-26]. Для подтверждения взаимодействия белков ENY2 и CG9890 была создана генетическая конструкция для экспрессии белка CG9890, маркированного 3xFLAG-эпитопом. Создана линия клеток S2 D. melanogaster, экспрессирующая этот слитый белок, и проведена его иммунопреципитация из ли-зата клеток с использованием антител к белку ENY2 и неспецифических антител в качестве отрицательного контроля. Результаты иммунопреципитации анализировали с помощью вестерн-блотинга и детектировали с помощью антител к эпитопу 3XFLAG (Sigma). Как видно на рис. 1, антитела к белку ENY2 преципитируют белок 3XFLAG_CG9890 (дорожка 3), в то время как неспецифические антитела не преци-питируют (дорожка 2). Таким образом подтверждено взаимодействие белков ENY2 и CG9890.

100 70

55

Рис. 1. Проверка взаимодействия белков ENY2 и CG9890. Вестерн-блот-анализ коиммунопре-ципитации ENY2 и CG9890, маркированного эпи-топом 3XFLAG, из лизата трансформированных клеток S2. Для иммунопреципитации использовали антитела к белку ENY2 и неспецифические антитела из предыммунной сыворотки (как негативный контроль). Вестерн-блотинг проводили с использованием антител к эпитопу 3XFLAG (Sigma). 1 - исходный лизат клеток; 2 - иммунопреципитация с использованием неспецифических антител; 3 - иммунопреципитация с использованием антител к ENY2; 4 - маркер молекулярной массы

Для дальнейшего изучения CG9890 получены по-ликлональные антитела к этому белку и аффинно очищены на колонке, содержащей рекомбинант-ный белок CG9890. Анализ специфичности антител с помощью вестерн-блотинга показал, что данные антитела узнают полосу в районе 60 кДа, что близко к расчетной массе белка 53 кДа (данные не представлены).

Изучение внутриклеточной локализации белка С09890

Внутриклеточную локализацию белка CG9890 определяли с использованием иммуноокрашивания клеток линии S2 дрозофилы охарактеризованными нами поликлональными антителами. Результаты эксперимента представлены на рис. 2. В результате анализа серии микрофотографий установлено, что белок CG9890 локализуется преимущественно в клеточном ядре, хотя некоторое его количество присутствует и в цитоплазме.

Анализ взаимодействий белка С09890 с субъединицами ENY2-содержащих комплексов

Так как было подтверждено взаимодействие белков ENY2 и CG9890, предположили, что CG9890 участвует в некоторых ENY2-зависимых процессах, а его взаимодействие с отдельными партнера-

2

3

4

Л

a-CG9890

a-Lamin

Наложение

Input Output IP

IgG CG9890 IgG CG9890

Рис. 2. Иммуноокрашивание клеток линии S2 D. melanogasfer, трансфицированных конструкцией 3xFLAG_CG9890. А - для окрашивания использовали очищенные кроличьи поликлональные антитела к CG9890 (первая панель) и моноклональные антитела мыши к ламину (вторая панель). В качестве вторичных антител использовали антикроличьи антитела, конъю-гированные с Су3, и антимышиные антитела, конъюги-рованные с AlexaFluor 488. На третьей панели показано совмещенное изображение предыдущих панелей. Б - увеличенное изображение части третьей панели

ми ENY2 может определять механизм его функционирования в клетке. Для проверки данной гипотезы было решено исследовать, с какими субъединицами ENY2-содержащих комплексов взаимодействует белок CG9890. С этой целью проведен эксперимент по иммунопреципитации белков из лизата клеток S2 D. melanogaster поликлональными антителами a-CG9890 с последующим вестерн-блот-анализом, результаты которого представлены на рис. 3.

В результате проведенных экспериментов обнаружено взаимодействие белка CG9890 с белками, входящими в состав различных ENY2-содержащих комплексов. В частности, с субъединицами ORC2 и ORC3 комплекса ORC, участвующего в позиционировании ориджинов репликации. Также обнаружены взаимодействия с такими белками, принимающими участие в регуляции транскрипции, как TBP (субъединица комплекса TFIID - функционального партнера ENY2), GCN5 (субъединица гистон-ацетилтранс-феразного комплекса SAGA, содержащего ENY2), Thoc5 (субъединица ENY2-содержащего комплекса THO, участвующего в формировании мРНП и элонгации транскрипции). Факт взаимодействия CG9890 с комплексами, вовлеченными в транскрипцию, согласуется с данными о ядерной локализации этого белка. Также нами выявлено взаимодействие CG9890 с белком Polybromo (PB) - субъединицей ремодели-

CG9890

ORC3

ORC2

GCN5

TBP

Thoc5

PB

Рис. 3. Коиммунопреципитация белка CG9890 с субъединицами ENY2-содержащих комплексов. Для им-мунопреципитации использовали антитела к белку CG9890 и неспецифические антитела из предыммун-ной сыворотки (как негативный контроль). Input - 2.5% исходного лизата клеток; Output - несвязавшаяся фракция лизата после инкубации с неспецифическими антителами (IgG) или антителами к белку CG9890; IP -10% элюата с сефарозы (IgG или CG9890). Субъединицы ENY2-содержащих комплексов детектировали с помощью вестерн-блотинга с использованием соответствующих антител (указаны справа)

рующего хроматин комплекса dSWI/SNF, необходимого для создания области открытого хроматина при активации промотора. Взаимодействие с белком Xmas-2 (комплекс АМЕХ) показать не удалось (данные не представлены). Таким образом, CG9890 взаимодействует с транскрипционными комплексами, вовлеченными в инициацию и элонгацию транскрипции, но не с комплексом АМЕХ, связанным с экспортом мРНК из ядра в цитоплазму, что указывает на участие CG9890 в первых стадиях транскрипционного цикла.

Б

ТОМ 10 № 4 (39) 2018 | ACTA NATURAE | 113

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Ранее мы обнаружили, что инсуляторный белок Su(Hw), содержащий домен цинковых пальцев, взаимодействует с ENY2 и привлекает ENY2-содержащие комплексы на Su(Hw)-зависимые инсуляторы дрозофилы, участвуя одновременно и в регуляции транскрипции, и в позиционировании ориджинов репликации. В данной работе нами выявлено взаимодействие ENY2 еще с одним белком - CG9890, который, как и Su(Hw), содержит домен цинковых пальцев. По аналогии с Su(Hw) мы предполагаем, что CG9890 является ДНК-связывающим белком, который привлекает ENY2-содержащие комплексы на свои сайты связывания, организуя таким образом регуляторные элементы генома, необходимые для функционирования клетки. Нами показано, что белок CG9890 локализован в ядре клетки. Подтверждено взаимодействие ENY2

и CG9890. Биохимическими методами выявлена связь белка CG9890 с ENY2-содержащими комплексами SAGA, ORC, dSWI/SNF, TFIID и THOC. Взаимодействие с белком Xmas-2 (комплекс AMEX) показать не удалось. Таким образом, CG9890 взаимодействует с комплексами, вовлеченными в инициацию и элонгацию транскрипции, но не с комплексом AMEX, участвующим в экспорте мРНК из ядра в цитоплазму, что указывает на «работу» CG9890 на первых стадиях транскрипционного цикла. Кроме того, CG9890 взаимодействует с комплексом ORC, необходимым для позиционирования точек начала репликации.

Работа выполнена при поддержке Российского фонда фундаментальных исследований, грант № 17-04-02193.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Orphanides G., Reinberg D. // Cell. 2002. V. 108. № 4. P. 439-451.

2. Maksimenko O., Georgiev P. // Front. Genet. 2014. V. 5. P. 28.

3. van Bemmel J.G., Pagie L., Braunschweig U., Brugman W., Meuleman W., Kerkhoven R.M., van Steensel B. // PLoS One. 2010. V. 5. № 11. P. e15013.

4. Rando O.J., Chang H.Y. // Annu. Rev. Biochem. 2009. V. 78. P. 245-271.

5. Mardanov P.V., Krasnov A.N., Kurshakova M.M., Nabirochkina E.N., Georgieva S.G. // Genetika. 2005. V. 41. № 4. P. 536-541.

6. Krasnov A.N., Kurshakova M.M., Ramensky V.E., Mardanov P.V., Nabirochkina E.N., Georgieva S.G. // Nucl. Acids Res. 2005. V. 33. № 20. P. 6654-6661.

7. Georgieva S.G., Nabirochkina E.N., Pustovoitov M.V., Krasnov A.N., Soldatov A.V. // Genetika. 2001. V. 37. № 1. P. 18-23.

8. Orlova A.V., Kopytova D.V., Krasnov A.N., Nabirochkina E.N., Ilyin Y.V., Georgieva S.G., Shidlovskii Y.V. // Dokl. Biochem. Biophys. 2010. V. 434. P. 227-231.

9. Kopytova D.V., Orlova A.V., Krasnov A.N., Gurskiy D.Y., Nikolenko J.V., Nabirochkina E.N., Shidlovskii Y.V., Georgieva S.G. // Genes Dev. 2010. V. 24. № 1. P. 86-96.

10. Kopytova D.V., Krasnov A.N., Orlova A.V., Gurskiy D.Y., Nabirochkina E.N., Georgieva S.G., Shidlovskii Y.V. // Cell Cycle. 2010. V. 9. № 3. P. 479-481.

11. Kurshakova M.M., Kopytova D.V., Nabirochkina E.N., Soshnikova N.V., Georgieva S.G., Krasnov A.N. // Genetika. 2009. V. 45. № 3. P. 330-335.

12. Kurshakova M.M., Kopytova D.V., Nabirochkina E.N., NikolenkoIu V., ShidlovskiiIu V., Georgieva S.G., Krasnov A.N. // Genetika. 2009. V. 45. № 10. P. 1332-1340.

13. Zhao Y., Lang G., Ito S., Bonnet J., Metzger E., Sawatsubashi

S., Suzuki E., Le Guezennec X., Stunnenberg H.G., Krasnov A., et al. // Mol. Cell. 2008. V. 29. № 1. P. 92-101.

14. Kurshakova M.M., Krasnov A.N., Kopytova D.V., Shidlovskii Y.V., Nikolenko J.V., Nabirochkina E.N., Spehner D., Schultz P., Tora L., Georgieva S.G. // EMBO J. 2007. V. 26. № 24.

P. 4956-4965.

15. Kurshakova M., Maksimenko O., Golovnin A., Pulina M., Georgieva S., Georgiev P., Krasnov A. // Mol. Cell. 2007. V. 27. № 2. P. 332-338.

16. Helmlinger D., Tora L. // Trends Biochem. Sci. 2017. V. 42. № 11. P. 850-861.

17. Baker S.P., Grant P.A. // Oncogene. 2007. V. 26. № 37. P. 5329-5340.

18. Mazina M.Y., Nikolenko Y.V., Krasnov A.N., Vorobyeva N.E. // Genetika. 2016. V. 52. № 2. P. 164-169.

19. Krasnov A.N., Mazina M.Y., Nikolenko J.V., Vorobyeva N.E. // Cell Biosci. 2016. V. 6. P. 15.

20. Vorobyeva N.E., Mazina M.U., Golovnin A.K., Kopytova D.V., Gurskiy D.Y., Nabirochkina E.N., Georgieva S.G., Georgiev P.G., Krasnov A.N. // Nucl. Acids Res. 2013. V. 41. № 11.

P. 5717-5730.

21. Mazina M., Vorob'eva N.E., Krasnov A.N. // Tsitologiia. 2013. V. 55. № 4. P. 218-224.

22. Krasnov A.N., Vorobyova N.E., Mazina M.Y. // Dokl. Biochem. Biophys. 2018. V. 479. № 1. P. 80-82.

23. Razin S.V., Borunova V.V., Maksimenko O.G., Kantidze O.L. // Biochemistry (Mosc.). 2012. V. 77. № 3. P. 217-226.

24. Brayer K.J., Segal D.J. // Cell Biochem. Biophys. 2008. V. 50. № 3. P. 111-131.

25. Brown R.S. // Curr. Opin. Struct. Biol. 2005. V. 15. № 1. P. 94-98.

26. Fedotova A.A., Bonchuk A.N., Mogila V.A., Georgiev P.G. // Acta Naturae. 2017. V. 9. № 2. P. 47-58.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.