CC BY
84
УДК 616.155.36 - 076 - 092.9 : 616 - 003.725 - 092.4 Кубанский научный медицинский вестник № 6 (129) 2011
Таким образом, при первичных формах мегауретера основными показаниями к проведению реконструктивно-пластических операций являются прогрессирование стадии мегауретера, неэффективность консервативного лечения, рецидивирующий пиелонефрит, прогрессирование почечной недостаточности. При оценке отдаленных результатов хирургического лечения необходимо учитывать морфофункциональное состояние почки и мочеточника до и после операции. При этом основными критериями являются: дилатация ЧЛС и мочеточника, функция почки, активность течения пиелонефрита, наличие или отсутствие стриктуры дистального сегмента мочеточника, пузырно-мочеточниковый рефлюкс.
ЛИТЕРАТУРА
1. Хворостов И. Н., Зоркин С. Н., Смирнов И. Э. Обструктивная уропатия // Урология. - 2005. - № 4. - С. 73-76.
2. Ческис А. Л., Виноградов В. И., Леонова Л. В. и соавт. Оперативная коррекция первичных нерефлюксирующих форм мегауретера у детей и её отдаленные результаты // Урология. -2004. - № 2. - С. 59-64.
3. Coyen S. I. Ureterozis toncostomic eine nene antirefluxteehik // Akt. urol. - 1975. - № 6. - Р. 1-8.
4. Hendren W. H. Operative repair of megaureter in children // J. urol. (Baltimore). - 1969. - Vol. 101. № 1. - P. 191-507.
5. Hemal A. K., Ansari M. S., Doddamani D., Gupta N. P. Symptomatic and complicated adult and adolescent primary obstructive megaureter - indications for surgery: analysis, outcome, and follow-up // Urology. - 2003. - Vol. 61. - P. 703-707.
6. Shukla A. R., Cooper J., Patel R. P. et al. Prenatally detected primary megaureter: a role for extended followup // J. urol. - 2005. -Vol. 173. № 4. - P. 1353-1356.
Поступила 22.06.2011
Е. М. НОСЕЙКИНА, А. Е. ХВОСТОВА, Т. И. ЛАРИНА, Н. М. МИТРОХИН
базофилы крови морской свинки как тестовая система ДЛЯ ОЦЕНКИ ПРОТИВОАЛЛЕРГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ХИМИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ iN viTRo
Всероссийский научный центр по безопасности биологически активных веществ,
Россия, 142450, Московская область, г. Старая Купавна, ул. Кирова, 23.
E-mail: vnc@dio.ru, тел. 524-09-15
Предложенный нами метод позволяет провести количественную оценку дегрануляции базофилов крови морской свинки и тестировать антиаллергическую активность биологически активных соединений in vitro. Постановка теста предполагает проведение следующих этапов: активная сенсибилизация животных, взятие крови из сердца морских свинок, постановка теста овальбумин (ОА)-индуцированной дегрануляции базофилов, окраска клеток альциановым синим и количественный цитологический анализ. С целью усиления реакции была использована схема многократной сенсибилизации животных ОА, приводящая к развитию системной базофилии и увеличению количества дегранулированных клеток в реакции ОА-индуци-рованной дегрануляции с 24-35% до 40-55%. В качестве референтного препарата был протестирован гидрокортизона геми-сукцинат, который проявил противоаллергическую активность в концентрации 0,5 х10'4 М, вызвав торможение ОА-индуциро-ванной дегрануляции базофилов in vitro на 71% и уменьшение ИД. Результаты исследования показали, что предложенный нами метод позволяет тестировать прямую противоаллергическую активность ХС in vitro с высокой частотой повторяемости результатов.
Ключевые слова: базофилы, ОА-индуцированная дегрануляция, гидрокортизон.
E. M. NOSEYKINA, A. E. KHVOSTOVA, T. I. LARINA, N. M. MITROKHIN
BASOPHILS OF THE GUINEA PIG AS A TEST SYSTEM FOR ESTIMATING ANTI-ALLERGIC ACTIVITY
OF CHEMICAL COMPOUNDS IN VITRO
The All-Russia centre of science on safety of biologically active substances,
Russia, 142450, Moscow region, Old Kupavna, street of Kirov, 23. E-mail: vnc@dio.ru, tel. 524-09-15
The method are presented for measuring of the guinea pig blood basophil degranulation in vitro and anti-allergic activity for biologically active compounds testing in vitro. The following steps were performed in sequence: active sensitization, harvest blood from the heart of the guinea pigs, test for the ovalbumin (OA)-induced basophil degranulation, alcian blue staining and analysis. The assay was carried out by using of the Fuchs-Rosenthal chamber and microscoupe. Index of the degranulation cells (ID) was determined on smears of leukocytes. We used the ways for repeated daily sensitization of guinea pigs with OA which led to basophilia and increased the number of degranulating cells in test from 24-35% to 40-55%. Hydrocortisone in different concentration was tested. It was demonstrated the ID reduction and inhibition of OA-induced basophil degranulation in vitro to 71% with its concentration 0,5 х10-4 М. Results of the investigation suggest that proposed method allows to test direct anti-allergic activity of the chemical compounds in vitro with high frequency repeatability.
Key words: basophils, OA-induced degranulation, hydrocortisone.
Введение
Одним из методов изучения прямого противоаллергического эффекта химических соединений (ХС) является их тестирование в реакции торможения дегрануляции тучных клеток (ТК) и базофилов in vitro, индуцируемой различными секретогенами. Наиболее популярным объектом в таких исследованиях являются перитонеальные ТК крысы [2], и гораздо реже используются базофилы кролика или человека [7]. Несмотря на определенное морфофункциональное и фенотипическое сходство с ТК, базофилы по своему развитию и дифференцировке проявляют большее сходство с эозинофилами. Базофилы инфильтрируют различные ткани, затронутые аллергическим воспалением [6], и являются важным самостоятельным звеном в регуляции 1И2-опосредованного иммунного процесса [10]. Трудность использования базофилов периферической крови лабораторных животных в реакциях in vitro заключается в малочисленности их популяции (от 0% у крысы до 3-6% у кролика) [1] и, соответственно, в необходимости поиска дополнительных методов обогащения выделенной лейкоцитарной фракции этими клетками. Тем не менее целесообразность их применения обоснована усилением интереса к роли базофилов в патогенезе большинства аллергических заболеваний в качестве как эффекторных [10], так и антиген-презен-тирующих [14] клеток.
Нами предложен несложный усовершенствованный метод морфологической оценки ОА-индуцирован-ной дегрануляции базофилов сенсибилизированных морских свинок, позволяющий с высокой частотой воспроизведения результатов тестировать in vitro противоаллергическую активность водорастворимых биологически активных соединений.
Материалы и методы
В экспериментах использовались трехцветные морские свинки обоего пола весом 300-450 г на момент начала иммунизации. Животные содержались в стандартных условиях вивария ОАО «ВНЦ БАВ». Для тестирования предложенной нами методики оценки противоаллергической активности ХС in vitro был использован гидрокортизон (ГК) в растворимой форме (натриевая соль гемисукцината гидрокортизона,«Sigma-Aldrich») в концентрациях
0,5х10-4, 0,5х10-5 и 0,5х10-6 М.
Статистическая обработка результатов проводилась с использованием t-критерия Стьюдента (двухвыборочный t-тест с различными дисперсиями, «Microsoft Excel», 2010).
Процедура сенсибилизации животных
С целью оптимизации проведения реакции дегрануляции были применены три схемы активной сенсибилизации животных: однократная системная овальбуми-ном (ОА) («Sigma-Aldrich»), с гидроокисью алюминия в качестве адъюванта (100 мг геля А1(ОН)3 + 10 мкг OA на животное) по Andersson [5], однократная по Andersson [5] с последующим через 18 месяцев после нее локальным внесением антигена на слизистую носовой полости (по 25 мкл 20%-ного солевого раствора ОА интра-назально в правый носовой ход) ежедневно в течение 23-28 дней [13] и схема, предложенная Sompolinsky [13] с целью создания системной базофилии, которая заключалась в интраперитонеальном двукратном введении с 7-дневным интервалом смеси ОА (10 мкг в 0,5
мл солевого раствора) и 0,5 мл полного адъюванта Фрейнда (ПАФ) («Sigma-Aldrich») с последующим через 25 дней ежедневным локальным внесением антигена, как описано выше. Сенсибилизированные однократно по Andersson [5] животные использовались не ранее чем через месяц после внесения антигена. Количество базофилов в пробах крови сенсибилизированных животных и выраженность реакции ОА-индуцированной дегрануляции оценивались в различные временные периоды после окончания интраназальной сенсибилизации в течение 20 месяцев. С целью увеличения количества проб для тестирования фармакологической активности ХС брали кровь у 2-3 животных, предварительно подобранных по совместимости крови. Общее количество крови, необходимое для адекватного проведения реакции, составляло не менее 15-20 мл.
Выделение лейкоцитарной взвеси из крови морской свинки
У сенсибилизированных морских свинок осуществляется забор крови из сердца в количестве 7-10 мл/животное посредством перфорации иглой (22G x1 ). После взятия крови животным дважды вводится стерильный физиологический раствор (по 5 мл, интраперитонеально) с интервалом 15-20 мин. Животные используются в качестве доноров многократно с интервалом между взятием крови не менее 10 дней. Для выделения базофилов в составе лейкоцитарной взвеси используется двухэтапное осаждение клеток посредством ЭДТА и далее с помощью цитрат-содер-жащей осаждающей жидкости (4).
1. Кровь смешивается с 5%-ным раствором ЭДТА•Na2•2H2O («Sigma-Aldrich») в соотношении 9:1 непосредственно после взятия и через 50 мин мягко центрифугируется (12 мин при 80 g). Надосадочная жидкость центрифугируется 15 мин при 500 g, тром-боцитарный осадок не используется, а надосадочная плазма возвращается обратно в пробирки с кровью (2 в модификации).
2. К обедненной тромбоцитами крови добавляется цитрат-содержащая осаждающая жидкость в пропорции 3:10 [2], кровь перемешивается и разделяется по пробиркам по 2 мл в каждой, затем термостатируется (37° С, 30 мин). Обогащенная лейкоцитами надосадочная светлая фракция собирается и центрифугируется 7 мин при 100 g. Надосадочная жидкость не используется, а к полученному осадку лейкоцитов добавляется свободный от бивалентных катионов солевой буфер (137 мМ NaCl, 2,7 мМ KCl, 5,6 мМ глюкозы, 10 мМ HEPES, и 0,46 мМ NaH2PO4 x H2O («Sigma-Aldrich»), pH 5,6-5,8 (9 в модификации) или солевой раствор (146,6 мМ NaCl, pH 5,6-5,8) в объеме, определяемом количеством проб из расчета на 5 мл крови 1,2 мл буфера. Уменьшение количества буфера приводит к ар-тефактной конгломерации лейкоцитов и затруднению цитологической идентификации базофилов в счетной камере.
Постановка теста дегрануляции базофилов in vitro
Постановка реакции дегрануляции проводится по предложенной схеме (табл. 1) в пластиковых или стеклянных пробирках. Объем вносимых растворов составляет 150 мкл, конечный объем пробы составляет 450 мкл. Каждая исследуемая группа дублируется трижды. В качестве дегранулирующего агента
Кубанский научный медицинский вестник № 6 (129) 2011
Кубанский научный медицинский вестник № 6 (129) 2011
используется 1%-ный солевой раствор ОА в конечной концентрации 0,35%. После проведения реакции и суправитального окрашивания клеток альциановым синим проводится их подсчет в каждой пробе с использованием камеры Фукса-Розенталя с помощью светового микроскопа при увеличении х200 и оценивается содержание альциан-положительных клеток. По уменьшению количества альциан-положитель-ных клеток в пробах с дегранулятором относительно контрольных проб без добавления ОА оценивается выраженность реакции дегрануляции. Анализ количества альциан-положительных клеток в пробах с добавлением ХС позволяет оценить противоаллергическую активность исследуемых веществ. Процесс торможения полной дегрануляции (ТПД) рассчитывается по формуле 1:
ТПД =
/
-(
ГМср(контр) — Мср(иссх ХС) Мср(контр) — Мср(ОА)
)]*
100 (%)'
дики Линднер с соавт. [3], предложенной для анализа дегрануляции тучных клеток на гистологических препаратах. Количественные данные, полученные при оценке полной дегрануляции базофилов в счетной камере, используются при подсчете ИД в качестве клеток с максимальной степенью дегрануляции.
Индекс дегрануляции подсчитывается по формуле 2:
ИД =
Y. і х пі £ni
где М ср (контр) - среднее количество базофилов в контроле; М ср (ОА) - среднее количество базофилов в пробах с максимальной дегрануляцией; М ср (иссл ХС) -среднее количество базофилов в пробах с исследуемым соединением.
Морфологический анализ базофилов тестовой системы на фиксированных мазках клеток позволил ввести дополнительный критерий оценки эффективности ХС - индекс дегрануляции (ИД). Для этого после окончания 5-го этапа (табл. 1) производится отбор проб (100 мкл) в отдельные пробирки для окраски и оценки полной дегрануляции базофилов, а к оставшимся клеткам добавляется охлажденный солевой раствор (по 5 мл в каждую пробирку) для остановки реакции дегрануляции, центрифугируется 7 мин при 100 g, а из осадка готовятся препараты для микроскопирования. Фиксация и окраска препаратов проводятся по Seder с соавт. [11]. Для выявления специфической зернистости базофилов используется краситель 0,5%-ный альциа-новый синий (рН 1,0), ядра докрашиваются сафранином (0,1%-ный раствор в 1%-ной уксусной кислоте). Индекс дегрануляции подсчитывается на основе мето-
где i - степень дегрануляции (от 1 до 4); ni - количество клеток со степенью i (%).
1-я степень - вся цитоплазма заполнена гранулами, расположенными плотно или немного рыхловато; 2-я степень - отмечаются просветленные участки в цитоплазме, иногда отдельные гранулы расположены рядом с клеткой; 3-я степень - просветленные участки цитоплазмы составляют от 50% до 70% площади клетки, ядро оголено, гранулы расположены очень рыхло; 4-я степень - просветленные участки цитоплазмы составляли более 70% площади среза клетки (грануло-лизис) [3]. Данные, полученные при оценке полной дегрануляции базофилов, используются при подсчете ИД как клетки с 4-й степенью дегрануляции.
Результаты
Количество базофилов, выделенных предложенным нами способом из крови сердца морских свинок для использования в реакции дегрануляции in vitro, отличается индивидуальной вариабельностью как у интактных (от 3,8 ±0,35 до 10,2 ±0,69 (мкл), n=5), так и у сенсибилизированных различными способами животных (от 5,8±0,27 до 52,1±1,23 (в мкл), n=25). Однако в целом отмечается значимое увеличение количества альциан-положительных клеток у сенсибилизированных смесью ОА с ПАФ в качестве адъюванта животных относительно интактных почти в 2 раза уже непосредственно после окончания периода 28-дневной локальной сенсибилизации (12,8±1,69 (n=5) и 7,4±2,75 (n=5) в мкл; Р< 0,05 соответственно). Выраженность реакции ОА-индуцированной дегрануляции базофи-
Таблица 1
Схема постановки теста дегрануляции базофилов
\Пробы Этапы N. реакции Контроль ОА (максимальная дегрануляция) Исследуемое ХС
1 2 3 1 2 3 1 2 3
1 Внесение суспензии лейкоцитов в солевом буфере (по 150 мкл)
2 Солевой буфер (по 150 мкл) Раствор ХС ( по 150 мкл)
3 Преинкубация при +37° С в течение 15 мин
4 1%-ный раствор ОА ( по 150 мкл)
б Инкубация при +37° С в течение 12 мин
6 Остановка реакции охлаждением (помещение пробирок в воду со льдом)
7 Добавление альцианового синего (0,5%-ный раствор, рН 1,0) в соотношении 1: 2 (краска:клетки)
8 Инкубация при комнатной температуре не менее 60 мин
9 Инкубация при +4° С в течение ночи
10 Подсчет альциан-положительных клеток (базофилов)
лов также носит индивидуальный характер у каждого животного. В течение первых 9 дней после окончания периода локальной сенсибилизации показатель количества полностью дегранулированных клеток в пробах с ОА наиболее высок и составляет 40-55% у большинства животных, однако уже через 1 месяц уменьшается до 30-35%, сохраняясь на этом уровне длительный период практически у всех животных. При использовании однократной иммунизации смесью ОА с Al (OH)3 через 2 месяца после нее и далее в течение наблюдаемого периода до 6 месяцев показатель количества дегранулированных клеток сохраняется в среднем на уровне 36,9±4,07 (%) у большинства животных. Через 18 месяцев после сенсибилизации ОА с различными адъювантами отмечается значительное уменьшение выраженности и стабильности реакции дегрануляции. При этом количество альциан-поло-жительных клеток в пробах, полученных в данный период из крови иммунизированных смесью ОА с ПАФ животных, в большинстве случаев увеличивается относительно молодых сенсибилизированных морских свинок с 12,8±1,69 (n=5) до 45,6±6,68 (n=4) (в мкл) (Р<0,01). Аналогичный показатель в группе животных, иммунизированных однократно смесью ОА с Al (OH)3, несколько ниже 27,3±5,09 (n=7; Р=0,1007). Введение дополнительной локальной сенсибилизации ОА согласно описанной выше схеме стабилизирует реакцию дегрануляции на уровне 28-34%, что позволяет продолжать исследования фармакологической активности ХС in vitro. В данный период появляется возможность увеличения количества тестируемых ХС в одном эксперименте, т. к. к этому времени отмечается формирование системной базофилии у многих животных, сенсибилизированных смесью ОА с ПАФ.
При тестировании противоаллергической активности референтного препарата гидрокортизона (ГК) был зафиксирован его противоаллергический эффект при использовании в тестовой системе в концентрации 0,5х10-4 М. При этом отмечалась нормализация показателя ИД, а торможение полной дегрануляции базо-филов составило 71%. Эффект имел дозозависимый характер, и при уменьшении концентрации до 0,5х10-5 М и менее отмечалось снижение данного показателя до 40% (табл. 2).
Обсуждение
Возможность выделения базофилов крови экспериментальных животных для оценки активности ХС является важной при исследовании их противо-
аллергической активности, т. к. позволяет использовать различные варианты активной сенсибилизации эффекторных клеток in vivo. Преобладающим веществом гранул базофилов, проявляющим тропность к основным красителям (альциановый синий), является глюкозаминогликан хондроитинсульфат [10]. Процесс дегрануляции базофилов сопровождается высвобождением ключевых медиаторов аллергического воспаления: гистамина, лейкотриена С4, интерлейкинов ИЛ4 и ИЛ13 [10], для выявления которых используют методы иммуноферментного и флюоресцентного анализа.
Как было показано в ранних исследованиях [12], с использованием непрямого теста дегрануляции базо-филов человека процесс анафилактической дегрануляции завершается в течение 10 мин, что указывает на обоснованность выбора нами времени инкубации с ОА 12 мин. Также большое значение имеет время преинкубации исследуемых веществ с эффекторными клетками перед внесением в экстраклеточную среду секретогена (этап 3). Так, известное антиаллергиче-ское вещество кромогликат натрия при преинкубации в течение 10 или 15 мин перед внесением антигена не проявляло активности в реакции анафилактической дегрануляции как базофилов [7], так и ТК [8] in vitro, однако при сокращении времени преинкубации до 0 ингибирующий эффект составлял 90%, что позволило авторам предположить возможность проявления тахифилаксии in vitro [8]. Поэтому при исследовании фармакологической активности ХС in vitro следует учитывать возможность такого явления в тестовой системе, что позволит избежать ложно-отрицательных результатов. При преинкубации клеток в течение 15 мин с различными концентрациями ГК нами подтвержден его антиаллергический эффект in vitro (табл. 2), ранее отмеченный в реакции торможения анафилактической дегрануляции тучных клеток крысы и базофилов человека на уровне 45% [7]. Использование коммерческих ЛС в качестве референтных препаратов нежелательно, т. к. часто присутствующие в качестве наполнителя цитрат натрия, соли цинка и другие соединения могут заблокировать или существенно изменить реакцию дегрануляции [12], давая ложные результаты.
Показателем, определяющим количество тестируемых ХС in vitro в одном эксперименте, является содержание базофилов в крови экспериментальных животных. Количество базофилов в крови морской свинки меньше, чем у человека, и составляет в норме 0,10,3%, а в камере Фукса-Розенталя они обнаруживаются
Таблица 2
Тестирование противоаллергической активности гидрокортизона (ГК) in vitro в реакции ОА-индуцированной дегрануляции базофилов крови морской свинки, иммунизированной смесью ОА с Al (OH)3 по Andersson
Показатели Контроль ОА 0,35% ГК 0,5х10-4 М ГК 0,5х10-5 М ГК 0,5х10-6 М
Количество дегранулированных базофилов (%) - 33 ±3,1 10 ±2,0** 17,0±3,3* 20±2,4*
Торможение полной дегрануляции (%) - 0 71,0 ±2,00 48±1,33 40±0,66
Индекс дегрануляции 1,4 ±0,049 2,43±0,096# 1,63±0,071** 1,93±0,178 * 1,93±0,184*
Примечание: # - Р<0,001 относительно контроля, * - Р<0,05, ** - Р<0,01 относительно ОА без ГК.
Кубанский научный медицинский вестник № 6 (129) 2011
УДК 616.31-089:614.2 Кубанский научный медицинский вестник № 6 (129) 2011
в количестве 0-3 на одно животное [13]. Двухэтапный способ выделения лейкоцитов из крови интактных молодых морских свинок, использованный в нашей работе, позволяет увеличить количество базофилов в камере Фукса-Розенталя до 12-30 на одно животное. После активной сенсибилизации животных посредством ОА по различным схемам у некоторых особей через 18-20 месяцев число базофилов в камере достигает 160-170. Однако оптимальное их количество в счетной камере Фукса-Розенталя для анализа результатов реакции ОА-индуцированной дегрануляции, исходя из нашего опыта, составляет от 40 до 90 в контрольных пробах. Индивидуальная вариабельность ответа животных на сенсибилизацию ОА предполагает проведение их предварительной селекции по количеству базофилов в крови и выраженности реакции ОА-индуцированной дегрануляции с последующей коррекцией количества исследуемых ХС в одном эксперименте при постановке теста in vitro. Возможность использования выбранных животных для взятия крови многократно позволяет тестировать активность ХС практически в одинаковых условиях достаточно длительный промежуток времени. Периодически проводимая дополнительная локальная сенсибилизация поддерживает необходимый уровень активности эффекторных клеток в тестовой системе.
ЛИТЕРАТУРА
1. Бергхоф П. К. Мелкие домашние животные. Болезни и лечение. Серия «Практика ветеринарного врача» // Пер с нем. И. Кравец. 2-е изд., испр. - М.: Аквариум ЛТД, 2001. - 224 с.
2. Иммунологические методы / Под ред. Г. Фримеля. - М.: Медицина, 1987. - С. 222.
3. Линднер Д. П., Поберий И. А., Родкин М. Я., Ефимов В. С. Морфометрический анализ популяции тучных клеток // Архив патологии. - 1980. - № 6. - С. 60-64.
4. Справочник по клиническим лабораторным методам исследования / Под ред. Е. А. Кост. - М., Медицина, 1975. - С. 130.
5. Andersson P. Antigen-induced bronchial anaphylaxis in actively sensitized guinea-pigs // Allergy. - 1980. - V. 35. - Р. 65-71.
6. Falcone F. H., Zillikens D., Gibbs B. F. The 21st century renaissance of the basophil? Current insights into its role in allergic responses and innate immunity // Exp dermatol. - 2006. - V. 15. № 11. - Р. 855-864.
7. Hofman J., Chyrek-Borovska S. Antigen-induced histamine release from mast cells and basophils after hydrocortisone and disodium cromoglycate treatment // Agent and actions. - 1981. -V. 11. № 1, 2. - Р. 107-109.
8. Mackay G. A., Pearse F. L. Extracellular guanosine 3,5-cyclic monophosphate and disodium cromoglycate share a similar spectrum of activity in the inhibition of histamine release from isolated mast cells and basophils // Int arch allergy immunol. - 1996. - V. 109. - Р. 258-265.
9. Peh K. H., Moulson A.,Wan B. Y. C. et al. Role of nitric oxide in histamine release from human basophils and rat peritoneal mast cells // European journal of pharmacology. - 2001. - V. 425. - Р. 229-238.
10. Schroeder J. T. Basophils: emerging roles in the pathogenesis of allergic disease // Immunol rev. - 2011. - V. 242. № 1. - Р. 144—160.
11. Seder R. A., Paul W. E., Dvorak A. N. et al. Mouse splenic and bone marrow cell populations that express high-affinity Fc-receptors and produce interleukin4 are highly enriched in basophils. - Proc. Natl. Acad. USA. - 1991. - V. 88. - Р. 2835-2839.
12. Shelly W. B. Indirect basophil degranulation test for allergy to penicillin and other drugs // JAMA. - 1963. - V. 184. № 3. - Р. 105-112.
13. Sompolinsky D., Katzenstein T., Lundberg L. Circulatory basophilia in guinea pigs with delayed-type hypersensitivity // Allergy. - 1992. - № 47. - Р. 303-308.
14. Yoshimoto T. Basophils as Th2-inducing antigen-presenting cells// International immunology. - 2010. - V. 22. № 7. -Р. 543—550.
Поступила 08.11.2011
х. М. ОМАР, О. В. цыМБАЛОВ
ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ ПРИМЕНЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНОГО ИНТЕРЛЕЙКИНА-1 в ПРИ ОПЕРАТИВНОМ ЛЕЧЕНИИ БОЛЬНыХ С ПЕРЕЛОМАМИ НИЖНЕЙ ЧЕЛюСТИ
Кафедра хирургической стоматологии и челюстно-лицевой хирургии государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Кубанский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (ГБОУ ВПО КубГМУ Минздравсоцразвития России), Россия, 350063, г. Краснодар, ул. Седина, 4. E-mail: tsimbal_OV@mail.ru
Проведено изучение эффективности применения рекомбинантного интерлейкина - 1р (беталейкина) в схеме комплексного оперативного лечения больных с переломами нижней челюсти. Установлено, что использование беталейкина способствует получению более эффективного результата, заключающегося в оптимизации раневого послеоперационного периода, ускорении формирования структурно-функционально-полноценного костного регенерата. Доказано, что эхоостеометрия может служить адекватным методом для диагностики диастаза костных отломков, оценки эффективности лечения. Приведены данные о том, что при остеосинтезе проведение ультразвуковых исследований имеет свои особенности.
Ключевые слова: перелом нижней челюсти, иммуноориентированная терапия, эхоостеометрия.
H. M. OMAR, O. V. TSYMBALOV
ASSESSMENT OF THE EFFECTIVENESS OF APPLICATION OF RECOMBINANT INTERLEUKIN 1B DURING OPERATIVE TREATMENT IN PATIENTS WITH MANDIBLE FRACTURES
Kuban state medical university, department of surgical dentistry and maxillofacial surgery,
