БАКТО-ХЕЛС
для лечения ценных видов рыб
Аннотация. Обоснована целесообразность применения нового пробиотического препарата Бакто-хелс для профилактики и лечения бактериальных болезней ценных видов рыб.
Ключевые слова: пробиотический препарат, патогены, осетровые и лососевые рыбы, спорообразующие бактерии.
Карина Кантор,
младший научный сотрудник лаборатории биотехнологии пробиотиков отдела биотехнологии средств биологического контроля Института микробиологии НАН Беларуси
Беларуси наблюдается тенденция к активизации рыбоводческой деятельности и, в частности, к увеличению объемов производства ценных видов рыб. Их интенсивное разведение предполагает получение максимального количества продукции с единицы производственной площади и, как правило, достигается за счет более высокой плотности посадки особей. Это приводит к значительному накоплению в воде экскрементов, слизи и других продуктов жизнедеятельности, а также остатков высокопитательных кормов, что отрицательно сказывается на состоянии культивируемых гидробионтов, способствует росту численности представителей условно-патогенной и патогенной микробиоты и распространению вызываемых ими заболеваний.
На поверхности тел рыб, в их жабрах и кишечнике условно-патогенные микроорганизмы постоянно присутствуют даже при благопри-
ятных условиях. А в случае их ухудшения скрытый очаг инфекций способен привести к вспышкам болезней, которые могут повлечь гибель до 100% особей. Долгое время практически единственным средством борьбы с проблемой были антибиотики. Однако массовое их применение приводит к снижению имму-нофизиологического статуса рыб, а также к повышению антибиотико-резистентности патогенных микроорганизмов. Кроме того, в продукции, получаемой из объектов аква-культуры, отмечается остаточное содержание антибиотиков, что, безусловно, снижает ее качество. Возникла потребность внедрения в рыбоводную практику новых, экологически безопасных препаратов для профилактики и лечения болезней рыб - пробиотиков, обеспечивающих нормализацию микрофлоры и увеличивающих естественную резистентность организма к заболеваниям различной этиологии благодаря широкому спектру антагонистической активности и способности стимулировать иммунную систему.
http://innosfera.by
/ №3 (205) / Март 2020 / НАУКА И ИННОВАЦИИ 29
ИХТИОФАУНА
Пробиотики представляют собой бактериальные препараты из живых микробных культур -представителей нормальной микро-биоты желудочно-кишечного тракта или сапрофитных микроорганизмов, нехарактерных для нормо-флоры, к которым относятся споро-образующие бактерии рода Bacillus. Благодаря высокой ферментативной и антагонистической активности, технологичности в производстве и стабильности при хранении бациллы наиболее перспективны для использования в качестве основы пробиотических препаратов. Основой созданного лабораторией биотехнологии пробиотиков биопрепарата служит штамм бактерий Bacillus amyloliquefaciens, выделенный из речного ила и отобранный в результате скрининга среди спо-рообразующих изолятов на основании его ярко выраженного антагонизма в отношении Aeromonas hydrophyla и Pseudomonas fluorescens, которые были получены непосредственно из внутренних органов пораженных рыб.
Отмечена способность штамма к продукции широкого спектра ферментов. Эта характеристика важна для пробиотических микроорганизмов, так как синтез энзимов способствует более активному разложению и усвоению различных питательных веществ, что улучшает конверсию корма и приводит к увеличению средней массы рыб и темпов их роста. При этом наиболее важна активность гидролитических ферментов, которые наряду с продуктивной утилизацией кормов обеспечивают возможность обеззараживания и очистки воды от биогенных и абиогенных загрязнений. Для изучаемого штамма бактерий характерна высокая активность протеиназы, эндо-1,4^-кси-ланазы, эндо-1,4-Р-глюконазы и а-амилазы. Штамм способен подавлять in vitro рост возбудителей основных болезней осетро-
вых и лососевых рыб в аквакуль-туре. В результате молекулярно-ге-нетических исследований в геноме штамма были обнаружены локусы, связанные с синтезом поликетид-ных антибиотиков (диффицидин, макролактин, бациллен) и липо-пептидов (сурфактин, фенгицин, бацилломицин, итурин), обладающих антимикробным действием. Следует отметить, что для бактерий рода Bacillus известно порядка 200 продуцируемых антибиотических соединений и, в отличие от синтетических антибиотиков, устойчивости к антибактериальным веществам пробиотических штаммов у патогенных микроорганизмов не вырабатывается, а у макроорганизма редко наблюдаются побочные эффекты.
У исследуемого штамма отсутствует резистентность к основным антибиотикам, применяющимся для лечения бактериальных болезней рыб в аквакультуре, что говорит о его экологической безопасности. Кроме того, для культуры штамма была отмечена значительная ростовая активность, характеризующаяся высоким титром коло-ниеобразующих единиц и спор (2,53,0-109 КОЕ/мл и 1,8-2,0-109 спор/мл соответственно), а также способность развиваться в широком спектре значений рН и температур. Это говорит о высоком биотехнологическом потенциале культуры как основы биопрепарата.
В результате проведенных исследований разработана технология получения на основе выделенного штамма пробиотического препарата Бакто-хелс в сухой препаративной форме. Он представляет собой лиофильно высушенную суспензию клеток спорообразующих бактерий B. amyloliquefaciens, смешанную с пшеничной мукой в качестве наполнителя и ковелосом в качестве антислеживателя. Для препарата характерен длительный срок годности: титр КОЕ, спор и уровень анта-
гонистической активности сохраняются в течение 12 месяцев при температуре +4-15 °С.
Лечебное и профилактическое действие Бакто-хелса обусловлено как прямым воздействием на представителей условно-патогенной и патогенной микрофлоры, так и активизацией неспецифических систем защиты рыб, что способствует повышению общей сопротивляемости организма к инфекциям. Так, применение пробиотика в составе комбикормов и в виде ванн оказывает выраженное положительное влияние на уровень естественной резистентности организма осетровых и лососевых рыб. Об этом можно судить по изменению таких показателей, как фагоцитарная активность лейкоцитов (ФА), фагоцитарный индекс (ФИ), фагоцитарное число (ФЧ) и бактерицидная активность сыворотки крови (БАСК). Например, у стерляди, получавшей с кормом пробиотик Бакто-хелс, БАСК выше на 32,2%, ФА - на 30,9%, ФИ - на 109% (более чем в 2 раза) а ФЧ, характеризующее агрессивность лейкоцитов, - на 175%; у форели БАСК выше на 69,4%, ФА - на 48,9%, ФИ - на 83,8% а ФЧ -на 172%. Кроме того, уровень контаминации внутренних органов рыб представителями условно-патогенной и сапрофитной микро-биоты после применения препарата снижается с 90-100% до единичных колоний, что приводит к элиминации скрытых очагов инфекции и имеет важное профилактическое значение.
Применение пробиотического препарата Бакто-хелс для профилактики и лечения бактериальных болезней ценных видов рыб позволит улучшить эпизоотическую ситуацию в рыбоводных организациях и получать жизнеспособный посадочный материал и качественную, экологически чистую рыбопродукцию. И
30 НАУКА И ИННОВАЦИИ / №3 (205) / Март 2020 /
http://innosfera.by