Бактериологическое выделение и идентификация бактерий рода Lactobacillus при нарушении биоценоза кишечника у жителей Севера Bacteriologic isolation and identification of bacteria of the genus Lactobacillus in case of the infringement of the intestine biogenesis of the Northern residents
Л.А. Сайгушева, A.A. Куяров, А.Г. Харева
Кафедра физиологии, лаборатория «Экология микроорганизмов» ГОУ ВПО «Сургутский государственный университет Ханты-Мансийского автономного округа-Югры»
Saygusheva LA, Kuyarov A.A., Chareva A.G.
Department of Physiology, Laboratory «Ecology of microorganisms « SEIHPE «Surgut State University, Khanty-Mansi Autonomous Region-Ugra»
Исследованием микрофлоры кишечника у жителей Севера установлено, что у лиц с дисбактериозом изменения биоценоза характеризуются глубокими биоценотическими изменениями по трем, четырем и более показателям. У подавляющего большинства исследуемых лиц установлено сниженное количество лактобактерий. При видовой идентификации определено преобладание представители видов L. delbrueskii, L. сasei, L. brevis.
The study of intestinal microflora in northern residents revealed that people with dysbiosis are characterized by deep biocenotic changes in three, four or more indicators. The vast majority of the investigated persons found reduced number of lactobacilli. In case of species identification the predominance of L. delbrueskii, L. casei, L. brevis. representatives was determined.
ВВЕДЕНИЕ
Бактерии рода
Lactobacillus являются одним из важных компонентов микрофлоры желудочно-кишечного тракта [1, 2]. Частота встречаемости лактобацилл варьирует в разных возрастных группах и территориях [3, 4]. Значимость данных микроорганизмов по отношению к организму человека сводится к взаимосвязанным функциям:
участию их в обменных процессах и защите от проникновения инфекции извне. Обладая выраженным антагонистическим потенциалом, лактобактерии способны оказывать подавляющее действие по отношению к большому количеству патогенных и условно- патогенных микроорганизмов [5].
Вопрос, связанный с идентификацией лактобактерий и значением их в
□ 1 показатель ■ 2 показателя □ 3 показателя □ 4 и более
нарушении биоценоза кишечника у жителей Севера, не изучался. Поэтому целью настоящей работы явились бактериологическое выделение и идентификация бактерии рода Lactobacillus при нарушении биоценоза кишечника у жителей Севера.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДы ИССЛЕДОВАНИЯ
В работе использованы бактериологические, биохимические и статистические методы исследования.
Материалом исследования явились результаты бактериологического обследования микрофлоры кишечника 179 больных в возрасте 20 лет и старше с клиническими проявлениями дисбактериоза. Исследования выполнены в баклаборато-рии Сургутской окружной клинической больницы (зав. лабораторией О.Е. Хорева) с последующей идентификацией лактобактерий в научно-исследовательской лаборатории «Экология микроорганизмов» СурГУ (зав. лабораторией профессор А.В. Куяров). Видовую идентификацию проводили по сбраживанию 13 углеводов: глюкоза, мальтоза, маннит, лактоза, сахароза, рамноза, арабиноза, сорбит, тре-галоза, салицин, раффиноза, фруктоза, целлобиоза. Посевы инкубировали при 37°С, от 2-7 суток. Результаты учитывали по изменению окраски среды с помощью таблицы «Сбраживание углеводов видами рода Lactobacillus» согласно определителю Берджи.
Для подтверждения достоверности полученных результатов использовались методы параметрической статистики [6].
результаты
исследований
И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
В результате проведенных исследований микрофлоры кишечника (рис. 1) установлено, что в исследуемой группе у лиц с дисбактериозом изменения биоценоза по одному и двум показателям наблюдались в равном количестве по 15,1% случаев. Значительно увеличивалась доля лиц с изменениями биоценоза кишечника по трем (в 1,8 раз), четырем и более показателям (в 2,8 раза).
Уровень изменения биоценоза у лиц с дисбактериозом в условиях Севера составил 2,7±0,1, что значительно выше, чем аналогичные показатели в других регионах [4].
Показатели изменения видового состава микрофлоры кишечника при дисбио-тических изменениях представлены на рис. 2, из которого следует, что видовой состав микрофлоры кишечника при дисбактериозе изменен
Рис. 1.
Показатели состояния микрофлоры кишечника в исследуемой группе по величине уровня отклонения
Рис. 2.
Показатели изменения видового состава микрофлоры кишечника при дисбактериозе
У подавляющего большинства исследуемых лиц с дисбактериозом кишечника установлено сниженное количество лактобактерий (87,2%) на фоне снижения общего количества представителей вида Е. гоИ, из которых преобладают кишечные палочки с гемолитической активностью.
по всем показателям бактериологического анализа.
Оценивая случаи с проявлением дисбактериоза по одному показателю, следует отметить частое выявление лиц со сниженным количеством лактобактерий (ЛКБ, 33,3%) и лиц с повышенным содержанием представителей вида Е. тН c гемолитической активностью (ГКП, 29,6%). Реже отмечены число случаев снижения общего количества кишечных палочек (ОККП, 18,5%) и увеличение числа лиц с лактозонегативными кишечными палочками (ЛНКП, 18,5%).
При оценке дисбиотиче-ских состояний по двум показателям также установлено преобладание числа лиц со сниженным количеством лактобактерий (52,3%) и лиц с повышенным содержанием представителей вида Е. тН c гемолитической активностью (48,1%). На фоне снижения количества лактобактерий и увеличения гемолитических кишечных палочек сохраняются изменения и по другим выше отмеченным показателям (ОККП и ЛНКП по 25,0%) и наблюдается увеличение числа лиц с повышенным содержанием дрожжеподобных клеток (ДК, 22,2%).
Более значимые изменения в видовом составе микроорганизмов наблюдалось у лиц с дисбактериозом по трем и четырем показателям. Наряду с отмеченными изменениями по видовому составу биоценоза у этих больных установлено увеличение случаев с повышенным содержание кокковых форм микроорганизмов (КФМ, 25,0%) и снижением содержания бифидобактерий (БФБ, 25,0%).
Важно отметить, что у подавляющего большинства исследуемых лиц с дисбактериозом кишечника установлено сниженное количество лактобактерий (87,2%) на фоне снижения общего количества представителей вида Е. coli, из которых преобладают кишечные палочки с гемолитической активностью.
При проведении видовой идентификации представителей рода Lactobacillus, выделенных при дисбактериозе кишечника (рис. 3) установлено, что наиболее часто определялись представители видов L. delbrueskii (23,6%), L. сasei (20,7%), L. brevis (17,7%), реже L. rhamnosus (8,8%), L. fermentum (5,9%), L. corynoformis (5,9%) и в единичных случаях L. lactis, L. jensenii, L. cellobiosus, L. plantarum, L. acidophilus, L. trichodes (2,9%).
При сравнении видового состава лактобактерий, выделенных из кишечника человека при дисбиозе у взрослого населения города Сургута и города Оренбурга [7], отмечено, что видовой состав лактобактерий, выделенных из кишечника при дисбиозе у жителей Сургута, отличается от жителей Оренбурга. У жителей Севера отмечено снижение таких видов, как L. acidophilus и L. plantarum, в то время как у жителей Оренбурга указанные виды встречались
наиболее часто и составляли от 18,0 до 38,0% случаев. У жителей Оренбурга отмечено отсутствие L. delbrueskii, в то время как у жителей Сургута данный вид встречался наиболее часто (20,8% случаев). Следовательно, те виды лактобактерий, которые присутствовали у жителей Оренбурга в наибольшем количестве, у жителей Сургута встречались значительно реже.
Заключение
В результате проведенных исследований микрофлоры кишечника у жителей Севера установлено, что в исследуемой группе лиц с дисбактериозом изменения биоценоза характеризуются преобладанием глубоких биоценотических изменений по трем, четырем и более показателям. У подавляющего большинства лиц с дисбактериозом кишечника установлено сниженное количество лактобактерий (87,2%) на фоне снижения общего количества представителей вида Е. coli, из которых преобладают кишечные палочки с гемолитической активностью. При проведении видовой
идентификации представителей рода Lactobacillus, выделенных при дисбактериозе кишечника установлено, что наиболее часто определялись представители видов L. delbrueskii (23,6%), L. сasei (20,7%), L. brevis (17,7%), реже L. rhamnosus (8,8%), L. fermentum (5,9%). Представители вида L. acidophilus, характерные микроорганизмы для организма человека, у жителей Севера выделялись в единичных случаях. |
Рис. 3.
Идентифицированные виды бактерий рода Lactobacillus, выделенных при дисбактериозе кишечника.
ЛИТЕРАТУРА
1. Бондаренко В.М., Грачева Н.М., Мацулевич Т.В. Дисбактериозы кишечника у взрослых. - М., 2003. - 275 с.
2. Annuk H, Shchepetova J., Kullisaar T. et al. Characterization of intestinal lactobacilli as putativ probiotic candidates // J. Appl. Microbiol. 2003.-94(1-3): 403-407.
3. Коршунов В.М., Поташник Л.В., Ефимов БА. Микроэкология кишечника взрослого
населения Монголии, Швейцарии и России // Журн. ми-кробиол. -2001. -№1. - С. 71-73.
4. Захарченко М.П., Захарченко М.М., Захарченко В.М. и др. Проблемы реабилитации здоровья при развитии дисбио-зов под влиянием факторов окружающей среды // Гиг. и сан. - 2005. - №6. - С. 72-75.
5. Куяров А.В., Куярова Г.Н., Клюева ЛА. Микробная экология детей Севера (клиника нарушений, диагностика, коррекция):
монография.-Ханты-Ман-сийск: Полиграфист, 2008.100 с.
6. Зайцев В. М. Прикладная медицинская статистика: учебное пособие / В. М. Зайцев, В. Г. Лифляндский, В. И. Миренкин. - СПб: Филиант, 2003. - 256 с.
7. Забирова Т.М. Биологические свойства лактобацилл биотопов человека в норме и при дисбиозе/ Т.М. Забирова, О.В.Бухарин. - Авт. дис. ... к. м. н.- Оренбург, 2001.- 24с.