Научная статья на тему 'БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ПРИ ЭШЕРИХИОЗЕ'

БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ПРИ ЭШЕРИХИОЗЕ Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

CC BY
189
31
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Область наук
Ключевые слова
БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ / ИДЕНТИФИКАЦИЯ / ИНДИКАЦИЯ / СЕРОВАРИАНТЫ / ЭШЕРИХИОЗ / ПАТОЛОГИЧЕСКИЙ МАТЕРИАЛ / СКОШЕННЫЙ МПА / ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ / АГАР ЭНДО / ФЕЦЕС

Аннотация научной статьи по ветеринарным наукам, автор научной работы — Торопыно Анастасия Викторовна, Шевченко Александр Алексеевич, Шевченко Людмила Васильевна, Черных Олег Юрьевич, Зеркалев Дмитрий Юрьевич

Работа выполнялась в двух хозяйствах «Русь» и «50 лет Октября» Неклиновского рай-она Ростовской области. В каждой из исследуемых проб обнаружены мелкие грамотрицатель-ные неспорообразующие с закругленными концами палочки, расположенные одиночно или по-парно, что характерно для бактерий группы кишечных палочек. Для определения образования индола культуру высевали в пробирку с бульоном Хоттингера. Во всех образцах, кроме № 1371 отмечалось присутствие красного слоя на поверхности культуральной жидкости, что указыва-ет на положительную реакцию. Для определения способности утилизировать цитрат культуры высевали на поверхность среды Симмонса. Все испытуемые образцы, кроме № 1371, ферменти-ровали глюкозу, сахарозу, лактозу и манит, что характерно для Escherichia coli. Для определения образования сероводорода культуры делали посевы на трехсахарный агар. В образце № 1371 на-блюдали почернение на столбике питательной среды, что указывает на образование сероводоро-да, а в остальных исследованных образцах почернение среды не обнаружено. Для определения серогрупповой принадлежности, выделенные изоляты баккультур, идентифицированные по ферментативной активности к виду Escherichia coli, исследовали в реакции агглютинации на сте-кле с аглютинирующими антиадгезивными колисыворотками. Реакцию агглютинации (РА) ста-вили по общепринятой методике в соответствии с действующим наставлением по применению указанных сывороток. Культуры, не агглютинирующиеся с антиадгезивными колисыворотками, типировали по О-антигену в РА на стекле с набором поливалентных и серогрупповых агглюти-нирующих О-колисывороток в соответствии с действующим наставлением по их применению. В результате исследований был выявлен адгезивный антиген А20. Все культуры эшерихий, вы-деленные из печени с желчным пузырем, селезенки, кишечника, почек, трубчатой кости, фецес погибших телят, имеющие антиген А20, обладают 100%-ной патогенностью для белых мышей. Кроме этого, в хозяйстве «Русь» от одного теленка выделен возбудитель Pseudomonas aeruginosa

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по ветеринарным наукам , автор научной работы — Торопыно Анастасия Викторовна, Шевченко Александр Алексеевич, Шевченко Людмила Васильевна, Черных Олег Юрьевич, Зеркалев Дмитрий Юрьевич

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Текст научной работы на тему «БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ПРИ ЭШЕРИХИОЗЕ»

УДК 619:616.98:579.842(470.61)

Торопыно А. В., Шевченко А. А., Шевченко Л. В., Черных О. Ю., Зеркалев Д. Ю.

БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ПРИ ЭШЕРИХИОЗЕ

Ключевые слова: бактериологическое исследование, идентификация, индикация, серовариан-ты, эшерихиоз, патологический материал, скошенный МПА, питательные среды, агар Эндо, фе-цес.

Резюме: Работа выполнялась в двух хозяйствах «Русь» и «50 лет Октября» Неклиновского района Ростовской области. В каждой из исследуемых проб обнаружены мелкие грамотрицатель-ные неспорообразующие с закругленными концами палочки, расположенные одиночно или попарно, что характерно для бактерий группы кишечных палочек. Для определения образования индола культуру высевали в пробирку с бульоном Хоттингера. Во всех образцах, кроме № 1371 отмечалось присутствие красного слоя на поверхности культуральной жидкости, что указывает на положительную реакцию. Для определения способности утилизировать цитрат культуры высевали на поверхность среды Симмонса. Все испытуемые образцы, кроме № 1371, ферментировали глюкозу, сахарозу, лактозу и манит, что характерно для Escherichia coli. Для определения образования сероводорода культуры делали посевы на трехсахарный агар. В образце № 1371 наблюдали почернение на столбике питательной среды, что указывает на образование сероводорода, а в остальных исследованных образцах почернение среды не обнаружено. Для определения серогрупповой принадлежности, выделенные изоляты баккультур, идентифицированные по ферментативной активности к виду Escherichia coli, исследовали в реакции агглютинации на стекле с аглютинирующими антиадгезивными колисыворотками. Реакцию агглютинации (РА) ставили по общепринятой методике в соответствии с действующим наставлением по применению указанных сывороток. Культуры, не агглютинирующиеся с антиадгезивными колисыворотками, типировали по О-антигену в РА на стекле с набором поливалентных и серогрупповых агглютинирующих О-колисывороток в соответствии с действующим наставлением по их применению. В результате исследований был выявлен адгезивный антиген А20. Все культуры эшерихий, выделенные из печени с желчным пузырем, селезенки, кишечника, почек, трубчатой кости, фецес погибших телят, имеющие антиген А20, обладают 100%-ной патогенностью для белых мышей. Кроме этого, в хозяйстве «Русь» от одного теленка выделен возбудитель Pseudomonas aeruginosa.

Введение

Важной отраслью народного хозяйства является животноводство, которое в последние годы интенсивно развивается. Дальнейшему развитию скотоводства препятствуют различные болезни, которыми болеют животные. Особенно опасными для животных являются инфекционные болезни, из них у крупного рогатого скота регистрируются инфекционные болезни вирусной и бактериальной этиологии. Из вирусных болезней крупный рогатый скот болеет инфекционным ринотрахеитом, ро-то-короновирусными инфекциями, пара-гриппом-3, из бактериальных заболеваний выявляют: эшерихиоз, сальмонеллез, стрептококкоз, псевдомоноз, стафилокок-коз и другие, которые наносят экономический ущерб отрасли скотоводство, складывающийся из-за массовой заболеваемости, гибели, потерей продуктивности животных и затрат на проведение лечебно-профилактических мероприятий. В последние годы в животноводстве наибольшее рас-

пространение получают такие инфекционные болезни как эшерихиоз, стрептокок-коз, псевдомоноз, стафилококкоз, сальмо-неллез, которые регистрируют в виде моно- и ассоциативных инфекций. Одной из самых распространенных бактериальных инфекций является колибактериоз. Эше-рихиоз регистрируется во всех странах, служит одной из основных причин заболевания и гибели молодняка разных видов животных, поэтому наносит животноводству значительный ущерб [1, 2, 3, 4, 5, 6, 7].

По данным многих исследователей, в этиологии желудочно-кишечных заболеваний телят играют роль нарушения санитарно-гигиенических и технологических режимов получения и выращивания молодняка, в частности, при эшерихиозе. Ведущими факторами являются воздействие патогенных серологических вариантов кишечной палочки и низкая резистентность новорожденных телят вследствие различных причин [8, 10, 11].

Эшерихиоз у животных проявляется

в любой период года. Заболевание возникает у разных видов животных независимо от сезона года, но в зимний и весенний период количество заболевших и павших животных обычно возрастает [12, 13].

Диагноз на эшерихиоз поставить непросто, так как болезнь проявляется в различных формах, часто осложняется другими возбудителями инфекционных заболеваний или сочетается с неинфекционными болезнями. Поэтому диагностику эшери-хиоза надо проводить комплексно. На основании анализа эпизоотологических данных, учитывая возраст заболевших животных, стационарность, массовость заболевания, инцидентность, сезонность; важных клинических признаков болезни: диарею, лихорадку, обезвоживание организма; па-томорфологических изменений и результатов бактериологических исследований [13, 14, 15].

Этиологическим фактором желудочно-кишечных заболеваний телят в первые дни их рождения являются энтеропатоген-ные штаммы E. coli. Диарею телят вызывают энтеротоксигенные штаммы E. coli, синтезирующие адгезивные антигены К88, К99, F41, А20, Att25. У больных телят по структуре антигена установлено более 165 вариантов О-антигена, 55 Н-антигена и 90 вариантов К-антигена.

Главной задачей является изучение антигенных свойств выделенных изолятов E. coli. Учитывая, что у эшерихий в большинстве случаев отсутствует корреляция между серогрупповой принадлежностью и па-тогенностью целесообразно определять адгезины или непосредственно токсины [11, 12, 13, 16].

Целью работы являлось выделить и изучить антигенную структуру, патогенные свойства штаммов E. coli, циркулирующих в хозяйствах Ростовской области.

Материалы и методы исследований

Лабораторную диагностику по эшери-хиозу телят проводили в двух хозяйствах «Русь» и «50 лет Октября» Неклиновско-го района Ростовской области. Выделение чистой культуры возбудителя эшерихиоза и изучение основных свойств проводили в соответствии с «Методическими указаниями по бактериологической диагностике колибактериоза (эшерихиоза) животных», утвержденными 27.07.2000 г. №13-7-2/2117, Департаментом ветеринарии МСХ РФ. Для исследования отбирали сердце, долю печени с желчным пузырем, две почки, селезен-

ку, с изолированным участком тонкого кишечника с регионарными лимфатическими узлами, трубчатую кость. Фецес отбирали стерильными ватно-марлевыми тампонами непосредственно из прямой кишки.

Для определения морфологических и тинкториальных свойств возбудителя эше-рихиоза готовили на предметных стерильных стеклах мазки - отпечатки из поражённых органов павших животных, путем прикосновения обезжиренным стеклом к свежему разрезу пораженной ткани и последующей фиксацией над пламенем спиртовки, окрашивали их по методу Грама и микроскопировали.

Для определения культуральных свойств выделенного изолята E. coli делали посевы выделенной культуры из пат-материала на питательные среды в мясо - пептонный бульон (МПБ), на дифференциально-диагностическую питательную среду Эндо, на мясо - пептонный агар (МПА) и выращивали в термостате при 37°С в течение 16-24 часов. При посеве на чашки Петри с МПА учитывали рост колоний.

Из каждой чашки отбирали не менее 5 характерных колоний и пересевали на скошенную поверхность мясо-пептонного агара для получения чистой культуры. Инкубировали при температуре 37°С в течении 24 часов. Затем приготавливали мазки и окрашивали по методу Грама.

Для индикации и идентификации эше-рихий использовали питательные среды: мясо-пептонный бульон и агар, агар Эндо, агар Минка, питательный агар Симмонса, среды Гисса с сахарами, среды с мочевиной, среды с сернокислым железом, среду Левина, Хоттингер, а также микроскопию мазков-отпечатков из различных органов и мазков из питательной среды (МПБ), окрашенных по Граму.

Серологическую типизацию выделенных культур эшерихий проводили при помощи реакции агглютинации. Типировали по О-антигену с набором поливалентных и серогрупповых О-колисыровоток, а так же исследовали с агглютинирующими антиадгезивными сыворотками.

Результаты и обсуждение

Из патологического материала, а также первичных культур и фецес на МПБ засевали на дифференциально-диагностическую среду Эндо. Из выросших на среде Эндо типичных для эшерихий колоний (круглых с гладкой, выпуклой поверхностью, ровными краями, диаметром 2-4 мм,

Таблица 1. Изучение культур, выделенных из фецесс

Название хоз-ва Исследован о проб от телят Выделено культур Идентифицировано баккультур Микрос копия

Е. coli Salmon ella Psendomon as aeruginosa E. coli Salmonella Pseudomonas aeruginosa

серологии еские биохимич еские серологии еские биохимич еские серологич еские биохимич еские

с. Боцманово «Русь» 31790 + - - - + - - - - +

31789 + - - - + - - - - +

560 + - - - + - - - - +

3173 + - - - + - - - - +

1369 + - - - + - - - - +

1371 - - + - + - - + + -

с. Носово 1343 + - - - + - - - - +

«50 лет Октября» 1344 + - - - + - - - - +

842 + - - - + - - - - +

31773 + - - - + - - - - +

31754 + - - - + - - - - +

31750 + - - + + - - - - +

Таблица 2. Изучение ферментативной активности выделенных культур Е. coli из фецес

Наименования хозяйств Номер, теленка Материал Среды

Гисса Симмонса С мочевиной С сернокислым Fe МПБ (на индол) Скошенный МП А

глюкоза сахароза лактоза маннит

с. Боцманово 31790 фекалий + + + + - - - + +

«Русь» 31789 фекалий + + + + - - - + +

560 фекалий + + + + - - - + +

3173 фекалий + + + + - - - + +

1369 фекалий + + + + - - - + +

1371 фекалий - - - - + + + - -

с. Носово 1343 фекалий + + + + - - - + +

«50 лет Октября» 1344 фекалий + + + + - - - + +

842 фекалий + + + + - - - + +

31773 фекалий + + + + - - - + +

31754 фекалий + + + + - - - + +

31750 фекалий + + + + - - - + +

красно-малинового цвета) готовили мазки, окрашивали по Граму и микроскапирова-ли. Мы наблюдали в мазках клетки типичной для эшерихий морфологию (мелкие грамотрицательные палочки с закругленными концами, расположенные одиночно или попарно) эти колонии пересевали на пластичный МПА и среду Минка (табл. 1.).

Таким образом, при бактериологическом исследовании сделаны посевы от 3 павших телят из печени с желчным пузырем, сердца, селезенки, кишечника, лимфатических узлов, почек, трубчатой кости и фецес. От 3-х телят исходного материала выделили кишечную палочку из: печени с желчным пузырем, селезенки, кишечника, почек, трубчатой кости, фецес.

Из данных табл. 1. видно, что при исследовании фецес нами во всех 11 образцах выделена культура E. coli, а в одном образце № 1371 обнаружена Pseudomonas aeruginosa.

С целью родовой и видовой идентификации бактериологическому исследованию подвергали 12 баккультур, выделенные из фецес по биохимическим тестам. Для этого культуры засевали на среды Гис-са с глюкозой, лактозой, сахарозой, мани-том, среду с мочевиной, цитратный агар Симонса, две пробирки МПБ (тесты на индол и сероводорд), на скошенный МПА для последующего определения серогруп-повой принадлежности (табл. 2.).

Для определения образования индола культуру высевали в пробирку с бульоном Хоттингера. Затем к 5 см3 24-х часовой культуры добавляли 1 см3 реактива Ковача. В результате во всех образцах, кроме №1371, отмечалось присутствие красного слоя на поверхности культуральной жидкости, что указывает на положительную реакцию.

Для определения способности утилизировать цитрат культуры высевали на поверхность среды Симмонса. В образце № 1371 наблюдали изменение зеленого цвета среды на синий, что указывает на положительную реакцию.

Все испытуемые образцы, кроме № 1371, ферментировали глюкозу, сахарозу, лактозу и манит, что характерно для E. coli.

Для определения образования сероводорода культуры засевали на трехсахар-ный агар. В образце № 1371 отмечалось почернение на столбике среды, что указывает на образование сероводорода, а в остальных исследованных образцах почернение среды не обнаружено.

Таким образом, из 12 исследуемых об-

разцов, образец под № 1371 не ферментировал с образованием кислоты и газа глюкозу, лактозу, вырос на агаре Симмонса, не образовал индол и образовал сероводород, что позволяет отнести его к бактериям вида Pseudomonas aeruginosa. А одиннадцать образцов ферментируют с образованием кислоты и газа глюкозу, лактозу, не растут на агаре Симмонса и не утилизируют цитратно-аммонийные соли, не расщепляют мочевину, образуют индол и не образуют сероводород, это свидетельствует об их принадлежности к бактериям группы E. coli.

Для определения серогрупповой принадлежности изоляты бактерий, идентифицированные по биохимическим показателям и отнесенные к роду Escherichia, исследовали в реакции агглютинации на стекле с аглютинирующими антиадгезивными колисыворотками. РА проводили по общепринятой методике, в соответствии с действующим наставлением по применению указанных сывороток. Культуры эше-рихий, неагглютинирующиеся с антиадгезивными колисыворотками, типировали по О-антигену в РА на стекле с набором поливалентных и серогрупповых агглютинирующих О-колисывороток, в соответствии с действующим наставлением по их применению. В результате исследований был выявлен адгезивный антиген А20.

Патогенность выделенных баккультур из органов павших телят и 11 культур из фецеса телят 1-7-дневнего возраста определяли на белых мышах. Для этой цели делали смывы 0,85 %-ным стерильным раствором хлорида натрия с суточной культуры E. coli, выращенной на скошенном агаре, приготавливали суспензию в концентрации 1 млрд. микробных клеток в 1 см3 по оптическому стандарту мутности Тара-севича. Полученную суспензию вводили внутрибрюшинно по 0,5 см3 трем белым мышам. За зараженными животными проводили наблюдение в течение трех суток (табл. 3.).

Из данных табл. 3. видно, что все культуры эшерихий, выделенные из печени с желчным пузырем, селезенки, кишечника, почек, трубчатой кости, фецес павших телят, имеющие антиген А20, обладают 100%-ной патогенностью для белых мышей.

Выводы

1. В двух хозяйствах «Русь» и «50 лет Октября» Неклиновского района Ростовской области при бактериологическом ис-

Таблица 3. Результаты определения патогенности культур E. coli

№ Серовариант Исследуемый Количество зараженных белых мышей (голов)

п/п культуры патматериал павших (гол.) выживших (гол.)

1 А20 печень с желчным пузырем 2 0

2 А20 селезенка 1 1

3 А20 кишечник 0 1

4 А20 почки 2 0

5 А20 трубчатая кость 2 0

6 А20 фецес 1 1

Всего: 8 3

следовании патологического материала от одиннадцати павших телят из фецес по морфо-культуральным, биохимическим и биологическим свойствам выделен возбудитель эшерихиоза E. coli.

2. По серологическим свойствам выде-

ленные культуры E. coli отнесены к серо-типу А20.

3. При бактериологическом исследовании патологического материала из хозяйства «Русь» от одного теленка выделен возбудитель Pseudomonas aeruginosa.

Библиографический список:

1. Васильев Н. В. Роль E. coli в этиологии кишечных

инфекций сельскохозяйственных животных / Н.

B. Васильев // Международная научно-практическая конференция: Современные тенденции в образовании и науке. Сборник научных трудов. -Тамбов, Часть 12. - 2013. - С. 33-34.

2. Васильев Н. В. Энтеропатогенные инфенкции в

нозологическом профиле болезней крупного рогатого скота в Ставропольском крае / Н. В. Васильев, Н. А. Ожередова // Вестник АПК Ставрополья. - 2015. - № 1. - С. 66-69.

3. Джупина С.И. Эпизоотический процесс и его кон-

троль при факторных инфекционных болезнях /

C. И. Джупина // - М.: РУДН, 2000. - 267 с.

4. Конопаткин А. А. Этиологическая и эпизоотоло-

гическая характеристика факторно-инфекционных болезней животных / А. А. Конопаткин, А. А. Глушков // III Всесоюзная конференция по эпизоотологии. Тезисы докладов. - Новосибирск,

- 1991. - С. 22-23.

5. Куликовский А. В. Токсигенные эшерихии - акту-

альная проблема ветеринарии и медицины / А. В. Куликовский, А. Н. Панин, В. В. Соснина // Ветеринария. - М., - 1997. - № 3. - С. 25-27.

6. Kaper J. B., Pathogenec Escherichia coli / J. B. Kaper,

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

J. B. Nataro, H. L. Mobley // Nature Reviews Microbiology. - 2004. - № 2 (2).

7. Mateus Matiuzzi da Costa Virulence factors and

antimicrobial resistance of Escherichia coli isolated from urinary tract of swine in southern of Brazil / Mateus Matiuzzi da Costa, G. Drescher. IF Maboni, S. Weber, S nia de Avila Botton, Marilene Henning Vainstein, Irene Silveria Scharank, Agueda Castagna de Vargas // Brazilian Journal of Microbiology. - 2008.

- № 39 (4).

8. Hagberg L. Adhesion, hemagglutination, and virulence

of Escherichia coli causing urinary tract infections / L. Hagberg, U. Jodal, T. K. Korhonen // Infection and

Immunity. - 1981. - № 31 (2)

9. Методические указания по бактериологической

диагностике колибактериоза (эшерихиоза) животных / (утв. Департаментом ветеринарии МСХ РФ 27.07.2000) // - М., 2000. - 17 с.

10. Терехов В. И. Антигенный состав и патогенные свойства штаммов E. coli, изолированных от телят и поросят в Краснодарском крае / В. И. Терехов [и др.] // Сельскохозяйственные животные.

- 2008. - № 4. - С. 6-8.

11. Терехов В. И. Этиология и эпизоотология желудочно-кишечных болезней новорожденных телят / В. И. Терехов // Ветеринария сельскохозяйственных животных. - 2012. - № 1. - С.15.

12. Шевченко А. А. Лабораторная диагностика инфекционных болезней животных / А. А. Шевченко [и др.] // Краснодар. - 2008. - С. 55-65.

13. Шевченко А. А. Совершенствование специфической профилактики крупного рогатого скота / А. А. Шевченко, Л. В. Шевченко, А. Р. Литвинова [и др.] // Труды Кубанского государственного аграрного университета. Серия: Ветеринарные науки, 2009. - № 1. (ч. 1). - С. 127-129.

14. Шевченко А. А. Эпизоотологические особенности инфекционных болезней крупного рогатого скота в Краснодарском крае / А. А. Шевченко, А. И. Двадненко // Научный журнал «Труды Кубанского государственного аграрного университета». - Краснодар: Куб ГАУ Выпуск 2 (35). - 2012.

- С. 365-367.

15. Шевченко А. А. Лабораторная диагностика инфекционных болезней животных / А. А. Шевченко [и др.] // Учебное пособие. - Краснодар: Куб-ГАУ, 2009. - С. 93-104.

16. Шевченко А. А. Микробиология / А. А. Шевченко [и др.] // Учебное пособие. - Краснодар: КубГАУ, 2009. - С. 220-238.

References:

1. Vasilev N. V Rol E. coli v etiologii kishechnyh infekciy selskohozyaystvennyh zhivotnyh [The role of E. coli in the etiology of intestinal infections in farm

animals] / N. V Vasilev // Mezhdunarodnaya nauchno-prakticheskaya konferenciya: Sovremennye tendencii v obrazovanii i nauke. Sbornik nauchnyh

trudov. - Tambov, Chast 12. - 2013. - S. 33-34.

2. Vasilev N. V Enteropatogennye infenkcii v nozologicheskom profile bolezney krupnogo rogatogo skota v Stavropolskom krae [Enteropathogenic Infenctions in the Nosological Profile of Cattle Diseases in the Stavropol Territory] / N. V Vasilev, N. A. Ozheredova // Vestnik APK Stavropolya. - 2015. - № 1. - S. 66-69.

3. Dzhupina S.I. Epizooticheskiy process i ego kontrol

pri faktornyh infekcionnyh boleznyah [Epizootic process and its control in factor infectious diseases] / S. I. Dzhupina // - M.: RUDN, 2000. - 267 s.

4. Konopatkin A. A. Etiologicheskaya i epizootologicheskaya harakteristika faktorno-infekcionnyh bolezney zhivotnyh [Etiological and epizootological characteristics of factor-infectious diseases of animals] / A. A. Konopatkin, A. A. Glushkov // III Vsesoyuznaya konferenciya po epizootologii. Tezisy dokladov. - Novosibirsk, - 1991. - S. 22-23.

5. Kulikovskiy A. V. Toksigennye esherihii - aktualnaya

problema veterinarii i mediciny [Toxigenic escherichia - an urgent problem of veterinary medicine and medicine] / A. V. Kulikovskiy, A. N. Panin, V V Sosnina // Veterinariya. - M. - 1997. - № 3. - S. 25-27.

6-8. Vide supra.

9. Metodicheskie ukazaniya po bakteriologicheskoy diagnostike kolibakterioza (esherihioza) zhivotnyh [Methodological instructions for bacteriological diagnosis of colibacteriosis (escherichiosis) of animals] / (utv. Departamentom veterinarii MSH RF 27.07.2000) // - M., 2000. - 17 s.

10. Terehov V I. Antigennyy sostav i patogennye svoystva shtammov E. coli, izolirovannyh ot telyat i porosyat v Krasnodarskom krae [Antigenic composition and pathogenic properties of strains of E. coli isolated

from calves and pigs in the Krasnodar Territory] / V. I. Terehov [i dr.] // Selskohozyaystvennye zhivotnye.

- 2008. - № 4. - S. 6-8.

11. Terehov V. I. Etiologiya i epizootologiya zheludochno-kishechnyh bolezney novorozhdennyh telyat [Etiology and epizootology of gastrointestinal diseases of newborn calves] /VI. Terehov // Veterinariya selskohozyaystvennyh zhivotnyh. -2012. - № 1. - S.15.

12. Shevchenko A. A. Laboratornaya diagnostika infekcionnyh bolezney zhivotnyh [Laboratory diagnosis of infectious animal diseases] / A. A. Shevchenko [i dr.] // Krasnodar. - 2008. - S. 55-65.

13. Shevchenko A. A. Sovershenstvovanie specificheskoy profilaktiki krupnogo rogatogo skota [Improvement of specific prevention of cattle] / A. A. Shevchenko, L. V. Shevchenko, A. R. Litvinova [i dr.] // Trudy Kubanskogo gosudarstvennogo agrarnogo universiteta. Seriya: Veterinarnye nauki, 2009. - № 1. (ch. 1). - S. 127-129.

14. Shevchenko A. A. Epizootologicheskie osobennosti infekcionnyh bolezney krupnogo rogatogo skota v Krasnodarskom krae [Epizootic features of infectious diseases of cattle in the Krasnodar Territory] / A. A. Shevchenko, A. I. Dvadnenko // Nauchnyy zhurnal «Trudy Kubanskogo gosudarstvennogo agrarnogo universiteta». - Krasnodar: Kub GAU, Vypusk 2 (35).

- 2012. - S. 365-367.

15. Shevchenko A. A. Laboratornaya diagnostika infekcionnyh bolezney zhivotnyh [Laboratory diagnosis of infectious animal diseases] / A. A. Shevchenko [i dr.] // Uchebnoe posobie. - Krasnodar: KubGAU, 2009. - S. 93-104.

16. Shevchenko A. A. Mikrobiologiya [Microbiology] / A. A. Shevchenko [i dr.] // Uchebnoe posobie. -Krasnodar: KubGAU, 2009. - S. 220-238.

Toropina A. V., Shevchenko A. A., Shevchenko L. V., Chernykh O. U., Zerkalev D. U. BACTERIOLOGICAL EXAMINATION IN ESHERIHIOZ

Key Words: bacteriological examination, identification, indication, serovariant, E. coli, pathological material, beveled MPA, nutrient medium, agar Endo, feces

Abstract: The work was carried out on two farms «Russia» and «50 years of October» Neklinovsky district of Rostov region. In each of the investigated samples detected small gram-negative nonspore with rounded ends of bacilli, arranged singly or in pairs, which is typical for bacteria of group of intestinal sticks. To determine the formation of indole culture were sown in a tube of broth Hottinger. In all samples, except No. 1371 noted the presence of the red layer on the surface of the culture fluid, indicating a positive reaction. To determine the ability to utilize citrate in the culture were sown on the surface environment of Simmons. All the samples, except No. 1371, fermented glucose, sucrose, lactose and attracts, which is characteristic of Escherichia coli. For the determination of hydrogen sulfide of culture did the crops on transfermy agar. In the sample No. 1371 observed blackening in the direction of the nutrient medium, indicating the formation of hydrogen sulfide, and in the other investigated samples the blackening of the medium is not detected. To determine serogrouping accessories, selected baculture isolates identified by enzymatic activity to the species Escherichia coli, was investigated in the reaction of agglutination on glass with glutinously complete adhesive caliciviridae. Reaction of agglutination (RA) were set according to the standard technique in accordance with the current guidance on the application of these serums. Culture is not agglutinate with anti-adhesive caliciviridae, were identified by for O-antigen in RA on the glass with a set of polyvalent and serogrouping agglutinating O-culicivorus in accordance with guidance on their application. As a result of the studies, adhesive A20 antigen. All cultures of E. coli isolated from the liver with the gall bladder, spleen, intestines, kidneys, bones, feces dead calves and consequently the antigen, the antigen is A20, have a 100 % pathogenicity for white mice. In addition, the farm «Russia» one calf from a selected pathogen Pseudomonas aeruginosa.

Сведения об авторах:

Торопыно Анастасия Викторовна, аспирантка кафедры микробиологии, эпизоотологии и вирусологии, ФГБОУ ВО «Кубанский государственный аграрный университет

имени И.Т. Трубилина»; дом 43, ул. Котлостроительная, г. Таганрог, Россия, 347910; тел.: +7 (951) 845 06 79; e-mail: toropyno.89@mail.ru

Шевченко Александр Алексеевич, доктор вет. наук, профессор, зав. кафедрой микробиологии, эпизоотологии и вирусологии, ФГБОУ ВО «Кубанский государственный аграрный университет имени И. Т. Трубилина»; дом 13, ул. Калинина, г. Краснодар, Россия, 350044; тел.: +7 (918) 154 94 61; e-mail: Shevchenkoalexsandr@rambler.ru.

Шевченко Людмила Васильевна, доктор вет. наук, главный научный сотрудник Федерального агентства научных организаций «Северо-кавказский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт» (ФГБНУ СКЗНИВИ); Ростовское шоссе, г. Новочеркасск, Ростовская область, Россия, 346421; тел.: +7 (918) 170 06 77; e-mail: Shevchenkoalexsandr@rambler.ru.

Черных Олег Юрьевич, доктор вет. наук, директор ГБУ «Кропоткинская краевая ветеринарная лаборатория»; д. 303, ул. Красноармейская, г. Кропоткин, Краснодарский край, Россия, 352380; тел.: +7 (861) 386 23 14; e-mail: gukkvi50@kubanvet.ru.

Зеркалев Дмитрий Юрьевич, канд. биол. наук, доцент кафедры микробиологии, эпизоотологии и вирусологии, ФГБОУ ВО «Кубанский государственный аграрный университет имени И. Т. Трубилина», дом 13, ул. Калинина, г. Краснодар, Россия, 350044; тел.: +? (909) 451 98 36; e-mail: Dzerkalev@yandex.ru.

Author affiliation:

Toropyno Anastasia Viktorovna, postgraduate student of the Department of Microbiology, Epizootology and Virology of the Federal State Budgetary Educational Institution (FSBEI) of Higher Professional Education (HPE) «Kuban State Agrarian University named after I. T. Trubilin» house 43, Kоtlostroitelnaya str., Taganrog city, Russia, 347910; phone: +7 (951) 845 06 79; e-mail: toropyno.89@mail.ru

Shevchenko Alexander Alekseevich, D. Sc. in Veterinary Medicine, Professor, Head of the Department of Microbiology, Epizootology and Virology of the Federal State Budgetary Educational Institution (FSBEI) of Higher Professional Education (HPE) «Kuban State Agrarian University named after I. T. Trubilin»; house 13, Kalinin str. Krasnodar city, Russia, 350044; phone: +7 (918) 154 94 61; e-mail: Shevchenkoalexsandr@rambler.ru.

Shevchenko Lyudmila Vasil'evna, D. Sc. in Veterinary Medicine, Chief Researcher of the Federal Agency of Scientific Organizations «North-Caucasian Zonal Research Veterinary Institute» (FASO NCZRVI); Rostov Highway, Novocherkassk city, Rostov Region, Russia, 346421; phone: +7 (918) 170 06 77; e-mail: Shevchenkoalexsandr@rambler.ru.

Chernykh Oleg Yur'evich, D. Sc. in Veterinary Medicine, Director of the Kropotkin Regional Veterinary Laboratory; house 303, Krasnoarmeyskaya str., Kropotkin city, Krasnodar Region, Russia, 352380; phone: +7 (861) 386 23 14; e-mail: gukkvi50@kubanvet.ru.

Zerkalev Dmitry Yur'evich, Ph. D. in Biology, Associate Professor of the Department of Microbiology, Epizootology and Virology of the Federal State Budgetary Educational Institution (FSBEI) of Higher Professional Education (HPE) «Kuban State Agrarian University named after I. T. Trubilin»; house 13, Kalinin str. Krasnodar city, Russia, 350044; phone: +7 (909) 451 98 36; e-mail: Dzerkalev@yandex.ru.

344068, г. Ростов-на-Дону, ул.Фурмановская, д.106/43

(863)2926537 www.vetcentr.com

Й

ВЕТЕРИНЯРНЯЯ КПИНИКО

ЦЕНТР

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.