CC BY
35
2012, Т. 2, № 1-2
Современное лабораторное обеспечение.
СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ МОНИТОРИНГА ИММУНИТЕТА К ДИФТЕРИИ: НОВЫЕ МЕТОДОЛОГИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ ОЦЕНКИ НЕВОСПРИИМЧИВОСТИ К ИНФЕКЦИИ
Л.А. Краева1, Г.Я. Ценева1, Н.В. Сабадаш2, Г.И. Беспалова3
ФБУН НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера, Санкт-Петербург; 2Санкт-Петербургский медицинский университет им. акад. И.П. Павлова, Санкт-Петербург; Санкт-Петербургская медицинская академия последипломного образования федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию, Санкт-Петербург
В настоящее время, спустя 15-летний период после эпидемии дифтерии, на фоне снижения уровня популяционного иммунитета и его утраты у отдельных категорий, а также увеличения числа циркулирующих штаммов, изменивших свои биологические свойства (патогенность, чувствительность к антибиотикам), возникла необходимость принципиально нового подхода к организации эпидемиологического надзора и профилактике дифтерии.
Исследованиями 185 образцов сывороток крови взрослых лиц было показано, что наиболее достоверный ответ о защищенности населения от дифтерии может быть получен при совместной оценке двух показателей: индекса авидности и уровня суммарных антитоксических противодифтерийных антител с определяющей ролью высокоавидных антител. Индекс авидности более 30% соответствует вероятности защиты от заболевания дифтерией на 95%, индекс авидности 10% является показателем критического уровня, ниже которого вероятность заболевания возрастает до 99% (р < 0,001). Комплексный показатель, полученный на основании данных о количестве антитоксических антител и индексе авдности, указывает на вероятность заболевания дифтерией обследуемого в случае его контакта с дифтерийным больным. При этом коэффициент Стьюдента (1) = 16,4; достоверность (р) < 0,001; коэффициент Фишера (Б) = 83,7, р < 0,001.
В результате изучения 400 образцов сывороток крови взрослых лиц было выявлено, что динамика созревания суммарных и высокоавидных антител, а также их регрессия, имеют разный характер. Период сохранения высокоавидных антител короче, чем суммарных: через 5 лет после очередной ревакцинации индекс авидности антител достигает минимального (критического) уровня (10%).
С целью совершенствования мониторинга иммунитета к дифтерии предложены: 1) методика оценки защищенности населения от инфекции путем использования данных о суммарных антитоксических антителах и индексе авидности, 2) схема расчета сроков очередной ревакцинации или контрольного обследования, 3) перечень контингентов «риска» по защищенности от дифтерии для проведения противоэпидемических мероприятий.
НАРУШЕНИЕ РАВНОВЕСИЯ НОРМОФЛОРЫ ПРИ ДИСБАКТЕРИОЗЕ КИШЕЧНИКА
Е.Б. Краснова, Ф.Н. Шевердина, Н.И. Суздальцева
ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Приморском крае», г. Владивосток
Микробный состав фекалий чрезвычайно изменчив, не отражает многообразную картину кишечного микробиоценоза и не дает возможности получить
оперативную информацию о составе микроорганизмов в кишечнике. На практике для диагностики дис-бактериоза приходится довольствоваться сведениями о 15—20 видах микробов, содержащихся в кале.
За 7 лет (2005—2011 гг.) было выполнено 2540 анализов на дисбактериоз кишечника. Оценка полученных результатов проводились в соответствии с действующим отраслевым стандартом ОСТ 91500.11.0004-2003. Для проведения сравнительного анализа за основу были взяты количественные и качественные изменения базовой микрофлоры кишечника соответственно возрастам: до 1 года (1071), от 1 года до 60 лет (1446) и старше 60 лет (23).
Согласно полученным результатам у 51% обследованных лиц выявлено отклонение содержания бифидобактерий в сторону снижения, в том числе: до 1 года у 60%, от 1 года до 60 лет у 44,7%, в возрастной группе старше 60 лет у 65,2%.
Уменьшение количества лактобактерий отмечалось у 81% обследованных и установлено по всем возрастам: до 1 года — 86,8%, от 1 года до 60 лет — 77,5%, старше 60 лет-87%.
Наряду со снижением содержания лактобакте-рий и бифидобактерий выявлено нарушение состава нормофлоры по содержанию типичных E. coli в 38,5% случаях: до 1 года — 48,7%, от 1 года до 60 лет — 31,3% и у лиц старше 60 лет — 30,4%. Превышение уровня колонизации E. coli с измененными свойствами обнаруживалось у 30,4% обследованных. Наибольший удельный вес отклонений по данному показателю установлен у детей до 1 года — 39%, от 1 года до 60 лет — 24%, у лиц старше 60 лет — 26%.
Условно-патогенные энтеробактерии в количествах превышающих нормируемые установлены в 22,7% случаях. По всем возрастным группам доминировали представители родов Enterobacter в 54,8%, Citrobacter в 40%, Protaeae в 5,2%. Золотистый стафилококк выделен у 41,9%, при этом наибольший процент обнаружения у детей до 1 года (59,2%). Дрожжеподобные грибы рода Candida выявлены в 9% случаев, с наибольшей частотой они изолировались в возрастной группе от 1 года до 60 лет (10,3%).
Результаты исследований подтверждают, что при дисбактериозе могут исчезать некоторые представители нормальной микрофлоры и появляться редко встречающиеся микроорганизмы, наиболее часто этим изменениям подвержены дети до 1 года и взрослые старше 60 лет. Что касается степени микробиологических нарушений в кишечнике, то из 2540 обследованных лиц: I степень определена у 28,6%, II у 60%, III у 7%. В 4,4% случаях качественные и количественные изменения микрофлоры кишечника не выявлены.
БАКТЕРИОФАГИ ПАРАГЕМОЛИТИЧЕСКИХ ВИБРИОНОВ СЕРОГРУППЫ О3:К6
Т.А. Кудрякова, Н.Е. Гаевская, Л.Д. Македонова, Г.В. Качкина
ФКУЗ Ростовский-на-Дону противочумный институт Роспотребнадзора, г. Ростов-на-Дону
Во Владивостоке спорадические кишечные заболевания, вызванные парагемолитическими и ал-гинолитическими вибрионами, отмечались с 1977 г. на протяжении 20 лет, а в июле-августе 1997 г. зарегистрирована вспышка этой инфекции (Маслов Д.В., 1997; Тарасенко Т.Т. с соавт., 1999). Из материала
Материалы X съезда ВНПОЭМП, Москва, 12-13 апреля 2012 г.
Инфекция и иммунитет
от больных были выделены галофильные вибрионы. Другие микроорганизмы при исследовании на патогенную кишечную флору не обнаружены. Штаммы Vibrio parahaemolyticus, обусловившие вспышку пищевой токсикоинфекции в г. Владивостоке в 1997 г. относились к серогруппе О3:К6 и не были охарактеризованы по продукции умеренных фагов.
Целью нашей работы стало изучение лизогении у штаммов парагемолитических вибрионов серо-группы О3:К6, а также характеристика выделенных умеренных бактериофагов по их специфичности и литической активности.
В исследования были включены 33 штамма парагемолитических вибрионов серогруппы О3:К6. В качестве индикаторных штаммов использовались культуры V. parahaemolyticus КМ-97 и КМ-184. В экспериментах испытали односуточные бульонные культуры, половина которых была инактивированна хлороформом, другая — прогреванием при 56°С в течении 40 мин. Выделение фагов и их изучение проводили по общепринятым методам (Адамс М., 1961).
Результаты показали, что 13 штаммов V. para-haemolyticus являются продуцентами умеренных фагов. Фаги формировали на газонах индикаторных штаммов типичные негативные колонии с полупрозрачным плотным центром 0,5—2 мм, с ровным краем. Концентрацию фаговых частиц выявляли методом агаровых слоев по Грациа. Титр фагов составлял n х 108 БОЕ/мл.
Фаги, продуцируемые лизогенными штаммами парагемолитических вибрионов, являются специфичными, лизируя парагемолитические и алги-нолитические вибрионы. Среди микроорганизмов близкородственных видов, родов и семейств чувствительных к умеренным фагам не обнаружено.
Выделенные умеренные фаги, при изучении диапазона действия, проявляли активность в отношении штаммов V. parahaemolyticus, у которых отсутствовали детерминанты вирулентности (tdh-trh-). Штаммы V. parahaemolyticus с детерминантами вирулентности в различных сочетаниях не лизировались фагами.
Таким образом, нами впервые выделены фаги из штаммов V. parahaemolyticus серогруппы О3:К6 и проведена их первичная характеристика по специфичности и литической активности.
ПЕРСИСТЕНЦИЯ ВИРУСА ЭПШТЕЙНА-БАРР
В СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКЕ ЖЕЛУДКА
ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ ГАСТРОДУОДЕНИТЕ У ДЕТЕЙ
Г.В. Кузьмина1, М.Ю. Деменчук1, К.Б. Кочетко1, И.В. Федосеева1, Р.М. Левит2
ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Ярославской области»; ГУЗ ЯО ДКБ № 1, г. Ярославль
В последние годы существенно расширились представления об этиологии хронического гастро-дуоденита (ХГД). При сохраняющейся значительной роли Helicobacter pylori (Нр), активно обсуждается вопрос о значении некоторых вирусных инфекций, среди которых большое внимание уделяется герпес-вирусам, в частности вирусу Эпштейна—Барр (ВЭБ).
Цель работы: Определить частоту персистенции вируса Эпштейна—Барр в слизистой оболочке верхних отделов желудочно-кишечного тракта, ее ассоциацию с Helicobacter pylori-инфекцией при хроническом гастродуодените у детей.
Материалы и методы. обследовано 97 детей в возрасте от 7 до 15 лет больных ХГД. Программа исследования включала в себя оценку клинико-анамнестических данных, эзофагогастродуодено-скопию с последующим морфологическим исследованием материала биоптатов слизистой оболочки желудка и двенадцатиперстной кишки. Выявление инфекции Helicobacter ру^п осуществлялось с помощью 5 методик: быстрого уреазного теста, гистологического, определение ДНК инфекта в слизистой оболочке желудка методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с использованием тест систем фирмы «ДНК-Технология», г. Москва, серологического метода с применением тест-системы «ХеликоБест— антитела» для определения суммарных антител к антигену Cag АНр в сыворотке крови (производитель «Вектор-Бест», г. Новосибирск), дыхательного теста. Диагностика ВЭБ-инфекции осуществлялась с использованием ИФА сыворотки крови с качественным и количественным определением антител к антигенам вируса (ядерному антигену, капсидному антигену класса М и G к ранним белкам вируса ВЭБ класса G). Маркеры VCA — IgM и ЕА — IgG ВЭБ соответствуют активации вирусной инфекции и определялись качественно, а NA — IgG и VCA — IgG ВЭБ — количественно и выражались в условных единицах на 1 мл сыворотки (усл. ед/мл). Выявление ДНК вируса Эпштейна—Барр в слизистой оболочке желудка осуществлялось с использованием тест систем фирмы «ДНК-Технология» (г. Москва) методом ПЦР.
Результаты. Установлено, что персистенция ВЭБ в слизистой оболочке верхних отделов желудочно-кишечного тракта при хроническом гастродуоде-ните у детей имеет место у трети пациентов, причем в большинстве случаев (79%) ассоциируется с ^l^obacter pylori-инфекцией. При Нр-негативном варианте заболевания вирус обнаруживается в единичных случаях. Выявлено прямое влияние персистенции вируса Эпштейна—Барр на характер па-томорфологических нарушений при хроническом гастродуодените у детей. Показано, что ассоциация ВЭБ — и Нр-инфекцией приводит к распространенному воспалительному процессу с формированием пангастрита, увеличению степени его выраженности и активности.
Таким образом, при диагностике хронического гастродуоденита у детей следует принимать во внимание его полиморфизм в отношении различных сочетаний ^l^obacter pylori и Эпштейна—Барр-инфекции. Детей с хроническим гастродуоденитом при ассоциации ^l^obacter pylori и Эпштейна— Барр-инфекции следует рассматривать как угрожаемых по более тяжелому течению и устойчивому к лечению заболевания.
РАЗРАБОТКА И ИСПЫТАНИЯ НОВОГО ПОКОЛЕНИЯ ПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ГЕННОЙ ДИАГНОСТИКИ ЧУМЫ И ТУЛЯРЕМИИ
В.Е. Куклев, Н.А. Осина, А.С. Абдрашитова, А.М. Сеничкина, Т.В. Бугоркова, И.В. Шульгина, О.А. Лобовикова, С.А. Щербакова, В.В. Кутырев
ФКУЗ Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб», г. Саратов
На основании проведенных нами ранее исследований были разработаны качественно новые генодиагностические препараты для индикации возбуди-
