CC BY
17
культивирование мышиных тимоцитов и макрофагов in vitro\ изучение фагоцитарной активности макрофагов in vitro\ определение активности аденилатцик-лазы.
Основные результаты. Установлено, что иммуно-кортин в концентрациях 10'" - 10'7 М ингибирует рост клеток человеческой лимфобластной линии МТ-4. С помощью |251-мечсного “адресного” фрагмента АКТГ -[|2,1]АКТГ( 13-24) показано, что клетки МТ-4 экспрессируют специфические рецепторы к АКТГ {Kd = 97 пМ). Иммунокортин и АКТГ человека, в отличие от тяжелой цепи IgGl, конкурентно ингибировали связывание [п,1] АКТГ( 13-24) с этими рецепторами = 0.38 нМ и
К , = 0.34 нМ соответственно). Изучение влияния имму-нокортина на активность иммунокомпетентных клеток мышн показало, что он подавляет бластную трансформацию тимоцитов, снижает спонтанную подвижность перитонеальных макрофагов и их бактерицидность по отношению к бактериям вирулентного штамма Salmonella typhimurium 415. С помощью [|251]АКТГ(13-24) натимоцитах мыши обнаружены и охарактеризованы специфические рецепторы к АКТГ (Ktl = 5.8 нМ). Показано, что немеченный иммунокортин конкурируете меченым АКТГ( 13-24) за связывание с этими рецепторами (К1 = 1.8 нМ). Установлено, что связывание им-мунокортина с рецепторами на тимоцитах приводит к активации аденилатциклазы этих клеток и к увеличению внутриклеточного содержания цАМФ. Аналогичные результаты были получены для перитонеальных макрофагов.
Заключение: синтезирован АКТГ-подобный декапептид H-VKKPGSS VKV-OH, соответствующий аминокислотной последовательности 11-20 вариабельной части тяжелой цепи IgG 1 человека, обладающий антиросто-вой и иммуносупрессорной активностью in vitro.
Атеросклероз: реакганты острой фазы воспаления в патогенезе заболевания
Назаров П.Г., Косицкая JI.C., Полевщнков А.В., Галкина Е.В., Петров И.В., Денисенко А.Д.,
Нагорнев В.А., Рабинович B.C., Васильева JT.E.
Институт экспериментальной медицины РАМН Санкт-Петербург, Россия
Известно, что инфекционные заболевания и воспалительные процессы являются фактором риска развития атеросклероза, а факторы “иммунного воспаления” принимают участие в его патогенезе. Наше внимание привлекли белки острой фазы воспаления семейства пентраксинов: они имеют сродство к фосфорилхолину и способствуют депозиции липопротеинов в стенках сосудов. Была изучена роль одного из них - С-реактив-ного белка (СРБ) в механизме возникновения аутоиммунного ответа на атерогенные липопротеины плазмы. Установлено, что СРБ индуцирует у животных продукцию аутоантител к апо В-содержащим липопротеи-
нам (ЛПНГ1 и ЛПОНП) и продукцию антиидиотипичес-ких антител (анти-анти-апо-В). Кроме того, показано, что содержание кроликов на диете, богатой холестерином, в отсутствие каких-либо других воздействий, способных вызвать воспалительную реакцию, приводит к повышению в крови уровня СРБ и другого пентракси-на, сывороточного амилоида Р, и к развитию иммуно-морфологических изменений в печени, характерных для начальных этапов атеросклероза. Полученные данные позволяют заключить, что если у низших животных пен-траксины играют исключительно протективную роль, то у млекопитающих и у человека, где эти белки действуют в эволюционно усложнившемся иммунологическом окружении, платой за их участие в ранних событиях защиты становятся отдаленные негативные последствия, одним из которых является атеросклероз. Работа поддержана грантами РФФИ 98-04-49695 и 97-04-48012.
О влиянии перфторорганических соединений, применяемых в офтальмологии, на жизнеспособность фибробластоподобных клеток in vitro
Никитина ЕЛО.Соколов Д.И.Голубев С.Ю.2, Шишкин М.М.2,Фрейдлин И.С.1
'Институт экспериментальной медицины РАМН, отдел иммунологии;
■’Военно-медицинская академия, кафедра офтальмологии
Одним из осложнений травм глаза является отслойка сетчатки, возникающая вследствие пролиферативной витреоретинопатии. Её признаками являются поегтрав-матическая пролиферация фибробластов и повышенный синтез коллагена, причины которых не до конца изучены. Нельзя исключить, что применяемые в офтальмологии перфтороорганические соединения могут вызывать ретино- или нейропатии. В связи с этим представляет интерес влияние на жизнеспособность и пролиферацию клеток отдельных препаратов, вводимых в глаз в ходе оперативного вмешательства.
Мышиные фибробластоподобные клетки линии L929 инкубировали в присутствии препаратов, содержащих перфторовые соединения (“Перфтордекалин”, “6 МФ-130”, “6 МФ-240”, “Перфтороктилбромид”, “Перфтор-N-октан”), взятых в различных (от 1% до 100%) объёмных соотношениях с привычной для этих клеток средой, в течение 24 часов. Жизнеспособные клетки окрашивали кристаллическим фиолетовым. На основании оптических плотностей рассчитывали индекс цитотоксичности (ИЦ). Учитывая изменения ИЦ под влиянием акти-номицина Д (5 мкг/мл), вызывающего остановку пролиферации, в его отсутствие снижение числа жизнеспособных клеток на 10-40% расценивали как возможный цитотоксический эффект; более, чем на 40% — как несомненный.
