CC BY
24
Российский кардиологический журнал 2021;26(10):4549
doi:10.15829/1560-4071-2021-4549 https://russjcardiol.elpub.ru
ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ ISSN 1560-4071 (print) ISSN 2618-7620 (online)
Ассоциации генетических вариантов генов ангиотензиногена и рецептора I ангиотензина II с биомаркерами углеводного и липидного обмена при сахарном диабете 2 типа и артериальной гипертензии у жителей Дагестана
Саидов М. З.1, Маммаев С. Н.1, Магадова Г. М.1, Баламирзоева Р. М.2, Магомедова З. Ш.1, Магомедова З. С.1, Гамзаева А. У1
Цель. Изучение ассоциаций генетических вариантов ге4762(С521Т) и ге699(Т704С) гена ангиотензиногена (AGT), генетического варианта ге5186(А1166С) гена рецептора I ангиотензина II с сывороточными
уровнями инсулина, глюкагона, С-пептида, лептина, а также с дислипидемией и показателями гликемии при сахарном диабете 2 типа (СД2), СД2 в сочетании с артериальной гипертензией (АГ) и изолированной АГ у жителей Дагестана. Материал и методы. Обследовано 126 больных: 16 с СД2, 59 с СД2 в сочетании с АГ и 51 больной АГ, все жители Дагестана, у которых были исследованы генетические варианты генов AGT и AGTR1. Уровни инсулина, глюкагона, С-пептида, лептина исследовали методом иммуноферментного анализа, ли-пидный и углеводный баланс — биохимическими методами. Результаты. У больных СД2 определена ассоциация СС-генотипа генетического варианта ге4762(С521Т) гена AGT со снижением уровня лептина, а СТ-генотип того же генетического варианта ассоциирован с увеличением уровня триглицеридов в сыворотке крови. ТС-генотип генетического варианта ге699(Т704С) гена AGT ассоциирован с увеличением уровня лептина, тригли-церидов и глюкозы. Генотип АА генетического варианта ге5186(А1166С) гена AGTR1 ассоциирован с увеличением уровня инсулина и глюкозы и со снижением уровня лептина. При СД2 в сочетании с АГ тестировалась ассоциация СС- и СТ-генотипов генетического варианта ге4762(С521Т) гена AGT со снижением уровня глюкагона. Генотип ТТ генетического варианта ге699(Т704С) гена AGT ассоциирован с увеличением уровня инсулина, триглицеридов, глюкозы и индексом массы тела (ИМТ). При изолированной АГ генотипы СС и СТ генетического варианта ге4762(С521Т) гена AGT ассоциированы со снижением уровня глюкагона. Генотип ТТ генетического варианта ге699(Т704С) гена AGT ассоциирован с увеличением уровней инсулина, липопротеинов низкой плотности и ИМТ Заключение. Ассоциации генетических вариантов ге4762(С521Т) и ге699(Т704С) гена AGT и ге5186(А1166С) гена AGTR1 с изменениями обмена углеводов и липидов при СД2 и АГ являются важным патогенетическим звеном СД2 и АГ и персонифицированного прогноза развития этих заболеваний у жителей Дагестана.
Ключевые слова: сахарный диабет, артериальная гипертензия, генетические варианты, ренин-ангиотензин-альдостероновая система, инсулин, глю-кагон, С-пептид, лептин.
Отношения и деятельность: нет.
1ФГБОУ ВО Дагестанский государственный медицинский университет Минздрава России, Махачкала; Республиканский медико-генетический центр Минздрава Республики Дагестан, Махачкала, Россия.
Саидов М. З.* — д.м.н., профессор, зав. кафедрой патологической физиологии, ORCID: 0000-0001-6246-4482, Маммаев С. Н. — д.м.н., профессор, зав. кафедрой госпитальной терапии, ORCID: 0000-0001-8898-8831, Магадова Г. М. — врач-эндокринолог, аспирант кафедры госпитальной терапии, ORCID: 0000-0002-9925-4793, Баламирзоева Р. М. — к.б.н., н.с. ПЦР лаборатории, ORCID: 0000-0003-0017-9648, Магомедова З. Ш. — к.м.н., доцент, зав. кафедрой фармакологии, ORCID: 0000-0002-9860-9820, Магомедова З. С. — к.м.н., доцент кафедры патологической физиологии, ORCID: 0000-0003-4547-1642, Гамзаева А. У — к.м.н., доцент кафедры патологической физиологии, ORCID: 0000-0003-0958-2644.
*Автор, ответственный за переписку (Corresponding author): marat.saidov.55@mail.ru
АГ — артериальная гипертензия, АД — артериальное давление, АПФ — ангио-тензинпревращающий фермент, ИМТ — индекс массы тела, ИР — инсулино-резистентность, ИФА — иммуноферментный анализ, ЛВП — липопротеиды высокой плотности, ЛНП — липопротеиды низкой плотности, ЛР — лептино-резистентность, МС — метаболический синдром, РААС — ренин-ангиотензин-альдостероновая система, СД2 — сахарный диабет 2 типа, ТГ — триглицериды, ФР — фактор риска, AGT — ген ангиотензиногена, AGTR1 — ген рецептора I ангиотензина II, АТ II — ангиотензин II, НЬА1с — гликированный гемоглобин.
Рукопись получена 13.06.2021
Рецензия получена 16.07.2021 ^СС^ТТИЯ
Принята к публикации 17.07.2021 ^ JьЛЛШ^^^^Ж
Для цитирования: Саидов М. З., Маммаев С. Н., Магадова Г. М., Баламирзоева Р. М., Магомедова З. Ш., Магомедова З. С., Гамзаева А. У. Ассоциации полиморфизмов генов ангиотензиногена и рецептора I ангиотензина II с биомаркёрами углеводного и липидного обмена при сахарном диабете 2 типа и артериальной гипертензии у жителей Дагестана. Российский кардиологический журнал. 2021;26(10):4549. doi:10.15829/1560-4071-2021-4549
Association of angiotensinogen and angiotensin II receptor type I polymorphisms with biomarkers of carbohydrate and lipid metabolism in Dagestan residents with type 2 diabetes and hypertension
Saidov M. Z.1, Mammaev S. N.1, Magadova G. M.1, Balamirzoeva R. M.2, Magomedova Z. Sh.1, Magomedova Z. S.1, Gamzaeva A. U.1
Aim. To study the associations of angiotensinogen (AGT) (s4762(C521T), rs699(T704C)) and angiotensin II receptor type I (AGTR1) (rs5186(A1166C)) genetic polymorphisms with serum levels of insulin, glucagon, C-peptide, leptin, as well as with dyslipidemia and glycemic levels in Dagestan residents with combination of type 2 diabetes (T2D) and hypertension (HTN), as well as with isolated T2D/HTN.
Material and methods. We examined 16 patients with isolated T2D, 59 patients with T2D+HTN and 51 patients with isolated HTN from Dagestan. Genetic polymorphisms of the AGT and AGTR1 genes were studied. The levels of insulin, glucagon, C-peptide, and leptin were studied by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), while lipid and carbohydrate metabolism — by biochemical methods.
Results. In patients with T2D, the association of CC genotype of AGT gene rs4762(C521T) polymorphism with a leptin decrease was determined, while its CT genotype was associated with an increase in serum level of triglycerides. The TC genotype of AGT gene rs699(T704C) polymorphism was associated with an increase in leptin, triglyceride and glucose levels. The AA genotype of AGTR1 gene rs5186(A1166C) polymorphism was associated with an increase in insulin and glucose levels, as well as a decrease in leptin level. In patients with a combination of T2D and HTN, CC and CT genotypes of AGT gene rs4762(C521T) polymorphism was associated with a decrease in glucagon level. The TT genotype of AGT gene rs699(T704C) polymorphism was associated with an increase in insulin, triglyceride, glucose and body mass index (BMI) levels. In isolated HTN, the CC and CT genotypes of AGT gene rs4762(C521T) polymorphism were associated
with a decrease in glucagon level. The TT genotype of AGT gene rs699(T704C) polymorphism was associated with increased levels of insulin, low density lipoproteins, and BMI.
Conclusion. Associations of AGT (s4762(C521T), rs699(T704C)) and AGTR1 (rs5186(A1166C)) genetic polymorphisms with carbohydrate and lipid metabolism changes are an important pathogenetic link of T2D and HTN, which allows developing an individual prognosis of these diseases in Dagestan residents.
Keywords: diabetes, hypertension, genetic options, renin-angiotensin-aldoste-rone system, insulin, glucagon, C peptide, leptin.
Relationships and Activities: none.
1Dagestan State Medical University, Makhachkala; 2Republican Medical Genetics Center, Makhachkala, Russia.
Saidov M. Z.* ORCID: 0000-0001-6246-4482, Mammaev S. N. ORCID: 0000-00018898-8831, Magadova G. M. ORCID: 0000-0002-9925-4793, Balamirzoeva R. M. ORCID: 0000-0003-0017-9648, Magomedova Z. Sh. ORCID: 0000-0002-98609820, Magomedova Z. S. ORCID: 0000-0003-4547-1642, Gamzaeva A. U. ORCID: 0000-0003-0958-2644.
'Corresponding author: marat.saidov.55@mail.ru
Received: 13.06.2021 Revision Received: 16.07.2021 Accepted: 17.07.2021
For citation: Saidov M. Z., Mammaev S. N., Magadova G. M., Balamirzoeva R. M., Magomedova Z. Sh., Magomedova Z. S., Gamzaeva A. U. Association of angio-tensinogen and angiotensin II receptor type I polymorphisms with biomarkers of carbohydrate and lipid metabolism in Dagestan residents with type 2 diabetes and hypertension. Russian Journal of Cardiology. 2021;26(10):4549. doi:10.15829/1560-4071-2021-4549
Сахарный диабет 2 типа (СД2) относится к группе метаболических (обменных) заболеваний, при которых множество патогенетически обоснованных причинно-следственных взаимосвязей продолжают оставаться предметом дальнейших исследований. Именно это обстоятельство позволило отнести СД2 к группе многофакторных заболеваний с необходимостью стратификации всех известных факторов риска (ФР). Сочетание СД2 с артериальной гипер-тензией (АГ), заболеваниями почек, сосудов, ожирением, дислипидемией, генетическими факторами и другими существенно осложняет интерпретацию патогенеза СД2, а также персонификацию схем лечения.
Коморбидность СД2 и АГ достаточно распространена. По данным авторов [1], среди первично госпитализированных пациентов в эндокринологический стационар в 98% случаев встречалась АГ и в 59% случаев — ишемическая болезнь сердца. По другим данным, частота АГ у больных СД2 составляет от 60 до 80% в нашей стране, а в странах Европы этот показатель составляет 30-60%. У 50% больных СД2 дебют заболевания связан с повышением артериального давления (АД), а изменения углеводного обмена наступают позже [2]. На основании анализа 25451 истории болезни (г. Новосибирск) показано, что рост частоты встречаемости всех случаев АГ связан с повышением частоты случаев АГ в сочетании с ожирением и СД2. На этом фоне средняя частота встречаемости СД2 в сочетании с АГ и ожирением за период с 2003г по 2011г повысилась у женщин в 2,23 раза, а у мужчин — в 2 раза. Авторы подчеркивают, что ожирение является ведущим фактором в увеличении числа всех случаев сочетания СД2 и АГ [3].
Сочетание СД2 и АГ обусловлено общностью некоторых патофизиологических механизмов и ФР, ускоряющих сосудистое поражение органов-мишеней — почек, сердца, сетчатки, мозга, а также магистральных (кровеносных) сосудов. В основе коморбидности СД2 и АГ лежит снижение чувстви-
тельности периферических тканей к инсулину — ин-сулинорезистентность (ИР), являющаяся также патогенетической основой метаболического синдрома (МС). К важнейшим ассоциированным ФР МС, входящим в диагностические критерии МС, относят СД2, АГ и ожирение. Течение этих заболеваний сопровождается активацией ренин-ангиотензин-аль-достероновой системы (РААС). Этот факт позволяет отнести гиперпродукцию ангиотензина II (АТ II) к одному из существенных факторов коморбидности СД2 и АГ. Множество работ подтверждают подобную точку зрения. Так, активацию РААС и повышение уровня АТ II относят к ведущему патофизиологическому механизму повышения АД при СД2 и про-грессированию диабетической болезни почек [4]. Восьмилетнее наблюдение за больными СД2 показало, что развитие ИР сопряжено с активацией РААС и синхронным увеличением сывороточного уровня альдостерона, ренина и АТ II [5]. Взаимосвязь между РААС и ИР подчеркивают также данные, в соответствии с которыми увеличение активности АТ II в скелетных мышцах, жировой ткани и в поджелудочной железе патогенетически связано с развитием ИР. Применение ингибиторов РААС увеличивает чувствительность к инсулину по сравнению с другими антигипертензивными средствами [6]. Весьма демонстративны данные, подчеркивающие, что на содержание глюкагоноподобного пептида-1 (ОЬР-1) интегрирующее и координирующее влияние оказывает РААС. Продукт активации РААС — АТ II — усиливает экспрессию р(3)-адренергического рецептора и продукцию норадреналина в бурой жировой ткани, что влияет на вес тела в сторону снижения и уменьшения потребления пищи. Авторы приводят факты уменьшения ИР и улучшения течения СД2 при применении ингибиторов ангиотензинпревращающего фермента (АПФ) и блокаторов рецепторов АТ II [7]. На основании анализа уровня систолического АД и альбуминурии на модели регрессии Кокса показано, что пациенты с СД2 в сочетании с АГ с низким
ответом на лечение ингибиторами АПФ (10% больных) имеют более высокий риск развития кардио-васкулярных осложнений, в то время как в группе больных СД2 в сочетании с АГ с хорошим ответом на лечение ингибиторами АПФ риск сердечно-сосудистых осложнений в 51% случаев был статистически значимо ниже по сравнению с группой пациентов СД2 в сочетании с АГ и низким ответом на лечение ингибиторами АПФ [8].
Интересны данные о прямой корреляции между сывороточными уровнями ренина и гликированного гемоглобина (ИЪА1с), а также креатинина и альдосте-рона у больных СД2 в сочетании с АГ [9]. Влиянию РААС подвержены и ключевые гормональные регуляторы уровня глюкозы в крови с разнонаправленными функциональными свойствами — инсулин и глюкагон [10].
Жировая ткань, относимая к эндокринным органам и продуцирующая адипокины, включает в себя и РААС. ИР и нарушения липидного обмена ассоциированы с активацией АПФ в жировой ткани и усилением продукции АТ 1-7 (7 вариантов ангиотензи-нов) [11]. Активность РААС повышена у пациентов с абдоминальным ожирением. 80-90% больных СД2 имеют избыточную массу тела, при этом ожирение I степени увеличивает риск развития СД2 в 2 раза, ожирение II степени — в 5 раз и ожирение III степени — в 10 раз. При этом у большинства больных определяется и АГ [12].
Одним из ключевых регуляторов массы тела и пищевого поведения является лептин и его рецепторы. Изменения активности этого гормона, продуцируемого жировой тканью, рассматриваются в качестве одного из патогенетических звеньев СД2, МС и ожирения. Повышение сывороточного уровня лептина, снижение чувствительности тканей к лептину — леп-тинорезистентность (ЛР), ассоциировано с развитием ожирения, ИР, дислипидемии и др. [13]. ЛР является патогенетическим звеном МС, СД2 и ожирения. ЛР часто сочетается с ИР, поскольку увеличение уровня лептина в сыворотке крови приводит к блокированию инсулинового сигнала в клетках инсу-линзависимых тканей [14]. При метаболическом синдроме ЛР прямо коррелирует с индексом НОМА-Ж, ИР и уровнем НЪА1с [15].
Известно, что стратификация ФР СД2, АГ и ожирения вывела в число наиболее значимых генетическую составляющую. Наиболее демонстративно это патогенетическое звено представлено в отношении функциональной активности РААС, продуктов активации РААС, а также спектра гормонов и гормо-ноподобных веществ. Показано, в частности, что в кавказской популяции точечные мутации ге2493134 и ^699 гена ангиотензиногена (ЛОТ) статистически значимо ассоциированы с уровнем сывороточного ангиотензиногена и чувствительностью к инсу-
лину [16]. На китайской популяции показано, что I/D-полиморфизм гена АПФ (ACE) ассоциирован с такими ФР СД2, как семейный анамнез, ожирение, индекс массы тела (ИМТ), АГ и др. [17]. В азиатской популяции определены ассоциации I/D-полиморфизма гена ACE и полиморфизма A1166C гена рецептора I АТ II (AGTR1) с развитием диабетической нефропатии [18]. С учетом клинической и прогностической значимости полиморфных вариантов генов РААС (гены ACE, AGT и AGTR1) при СД2 и АГ, результаты тестирования полиморфизмов этих генов используются в качестве независимых генетических предикторов возникновения и развития СД2 и АГ [19].
Таким образом, представленные данные литературы свидетельствуют о многообразии патогенетических механизмов сочетания СД2, АГ и ожирения, и генетическая составляющая является одной из ведущих.
В предыдущей работе [20] мы показали, что у жителей Дагестана при сочетании СД2 и АГ генотип СТ генетического варианта rs4762(C521T) гена AGT, а также генотип ТС генетического варианта rs699(T704C) гена AGT ассоциированы с меньшей вероятностью развития СД2 в сочетании с АГ. У носителей генотипа СС генетического варианта rs699(T704C) гена AGT вероятность развития СД2 в сочетании с АГ повышается, а у больных с изолированной АГ генотип АА генетического варианта rs5186(A1166C) гена AGTR1 ассоциирован со снижением вероятности развития АГ. Очевидно, что представляло интерес изучить ассоциации указанных и других генетических вариантов генов AGT и AGTR1 системы РААС с биомаркерами углеводного и липид-ного обмена при СД2 и АГ на этом же контингенте больных.
Целью настоящего исследования явилось изучение ассоциаций генетических вариантов ге4762(С521Т) и rs699(T704C) гена ангиотензиногена (AGT), генетического варианта rs5186(A1166C) гена рецептора I АТ II (AGTR1) с сывороточными уровнями инсулина, глюкагона, С-пептида, лептина, а также с дисли-пидемией и показателями гликемии при СД2, СД2 в сочетании с АГ и изолированной АГ у жителей Дагестана.
Материал и методы
Работа относится к обсервационным многоцентровым одномоментным выборочным контролируемым нерандомизированным исследованиям. Набор пациентов осуществлялся в медицинских учреждениях г. Махачкалы (см. ниже). Протокол исследования включал подписание информированного согласия, заполнение карт амбулаторных больных с клиническими диагнозами СД2, АГ и сочетания СД2 с АГ, куда вносились анамнестические данные,
данные лабораторно-инструментальных методов обследования, результаты генетических исследований полиморфизмов генов ЛОТ и ЛОТЯ1, а также уровни инсулина, глюкагона, С-пептида, лептина, липидно-го спектра, глюкозы, НЬА1с в сыворотке крови.
В исследование включались 3 группы больных, а также контрольная группа.
1 группа больных — с установленным диагнозом СД2. 2 группа больных — с установленным диагнозом "эссенциальная АГ (гипертоническая болезнь)" при стойком повышении АД в диапазоне 140-159/9099 мм рт.ст. и выше. 3 группа больных — с сочетанием СД2 и АГ.
Базовая терапия больных СД2 включала в себя применение препаратов бигуанидового ряда — ти-офор, глюкофаж (от 0,5 до 2 гр в сут.), производные сульфонилмочевины — диабетон МВ (от 60 до 120 мг в сут.), инкретины — форсига, джардинс (от 10 до 25 мг в сут.), липидснижающие препараты — розува-статины, симвастатины (от 10 до 20 мг в сут.). Возраст, пол, ИМТ, продолжительность заболевания не относились к критериям включения/невключения в исследование. Контрольная группа включала 47 лиц с нормальным уровнем АД и с отсутствием симптомов СД2 в возрасте 59 (56;61) лет (26 мужчин и 33 женщин). Все добровольцы, давшие информированное согласие на проведение исследования, в течение последнего месяца перед началом исследования не переносили острых инфекционных заболеваний и не имели хронической патологии воспалительного генеза.
Критерии исключения. Из 2 группы обследованных больных с диагнозом "эссенциальная АГ (гипертоническая болезнь)" исключались больные с вторичными (симптоматическими) формами АГ, а также больные с хронической сердечной недостаточностью, инфарктом миокарда, инсультом, с патологией других органов и систем, не связанных с СД2 и эссенциальной АГ, которые могли бы повлиять на результаты исследования.
В работу были включены больные с диагнозами СД2, АГ и СД2 в сочетании с АГ, находившиеся на обследовании и лечении в эндокринологическом отделении Республиканской клинической больницы, на амбулаторном учете в Республиканском эндокринологическом центре Республики Дагестан, а также на лечении в Республиканском медицинском центре Республики Дагестан.
Всем пациентам проводился однократный забор крови из периферической вены в количестве 10 мл. Выделенная сыворотка аликвотировалась и использовалась для проведения биохимических и иммунологических исследований.
Основным результатом, оценивавшимся в ходе исследования, были различия в уровнях инсулина, глюкагона, С-пептида, лептина, липидного спектра, глюкозы, НЬА1с в сыворотке крови больных СД2,
СД2 в сочетании с АГ и изолированной АГ — носителей полиморфизмов C521T и T704C гена AGT, полиморфизма A1166C гена AGTR1.
Уровни инсулина, глюкагона, С-пептида и лептина в сыворотке крови определялись с использованием наборов для твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА).
Инсулин — на наборах ИФА Insulin ELISA Mono-bind компании AccuBind ELISA Microwells (США), Code 2425-300. Результат анализа фиксировался на многоканальном спектрофотометре Stat Fax 2600, AWRENESS, Technology Inc. (США) в двухволновом режиме: основной фильтр — 450 нм, референс-фильтр — 630 нм. Чувствительность метода — 0,182 мкМЕ/мл.
Глюкагон — на наборах ИФА Multispecies Glucagon ELISA компании Yanaihara Institute Inc (Япония), кат. No YK090. Результат определялся на том же спектрофотометре в двухволновом режиме: основной фильтр — 490 нм, референс-фильтр — 630 нм. Диапазон измеряемых значений — 50-10 000 пг/мл.
С-пептид — на наборах ИФА C-peptid Test System компании AccuBind ELISA Microwells (США), Code 2725-300. Результат замерялся в двухволновом режиме: основной фильтр — 450 нм, референс-фильтр — 630 нм. Чувствительность метода — 0,025 нг/мл.
Лептин — на наборах ИФА компании Diagnostics Biochem Canada Inc, Code CAN-L-4260. Результат замерялся в двухволновом режиме: основной фильтр — 450 нм, референс-фильтр — 630 нм. Чувствительность метода — 0,5 нг/мл.
Показатели липидного и углеводного баланса определяли на анализаторе RANDOX IMOLA™ с использованием наборов реактивов Randox Lab. Lim., на общий холестерин — REF CH 3810, на липопро-теиды высокой плотности (ЛВП) — REF CH 3811, на липопротеиды низкой плотности (ЛНП) — REF CH 3841, на триглицериды (ТГ) — REF TR 3823, на глюкозу — REF Gluc-HK GL 3881, на №А1с — REF HA 3830.
Исследуемые генетические варианты определялись методом Real-Time PCR. Выделение ДНК осуществлялось из цельной крови пациентов и здоровых добровольцев c помощью набора "ДНК-экспресс кровь" ("Литех", Россия) согласно инструкции производителя. Амплификацию и плавление изучаемого локуса ДНК проводили на амплификаторе ABI 7900 HT (Applied Biosystems, США) с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени. Аллель-специфическую полимеразную цепную реакцию проводили на наборах для генотипирования "SNP-ЭКСПРЕСС-РВ-Кардиогенетика" "Литех", Россия.
Анализ в подгруппах. Больные (n=126) были разделены на 3 подгруппы в соответствии с клиническим диагнозом. 1 подгруппа — с СД2 (n=16), 2 подгруппа — с СД2 и АГ (n=59) и 3 подгруппа — с изолиро-
Таблица 1
Сывороточные уровни инсулина, глюкагона, С-пептида и лептина у обследованных больных
Инсулин, мкМЕ/мл, Ме [25;75] Глюкагон, пг/мл, Me [25;75] С-пептид, нг/мл, Me [25;75] Лептин, нг/мл, Me [25;75]
СД2, n=16 75 [4;12,7] 1660 [900;3200] 0,35 [0,08;1,1]* 10,4 [8,17; 19,4]
СД2 и АГ, n=59 11 [8;175]* 860 [470;1625]* 1 [0,9;21] 20 [15,8;42,5]
АГ, n=51 11 [9;16,5]** 800 [500;2000]* 1,27 [0,5;1,9] 31,5 [15,8;43]
Контроль, n=45 8,9 [7; 11,5] 5250 [762;7750] 1,05 [0,2;1,35] 21,2 [612;29,5]
Примечание: * — p<0,05; ** — p<0,01 при сравнении с контрольной группой (Т-критерий Манна-Уитни). Сокращения: АГ — артериальная гипертензия, СД2 — сахарный диабет 2 типа.
Таблица 2
Сывороточные уровни инсулина, глюкагона, С-пептида и лептина у носителей генетического варианта ге4762(С521Т) гена ЛйТ
Генотипы генетического варианта rs4762(C521T) Инсулин, мкМЕ/мл, Ме [25;75] Глюкагон, пг/мл, Ме [25;75] С-пептид, нг/мл, Me [25;75] Лептин, нг/мл, Me [25;75]
СД2
СС, n=6 12,7 [11,3;15,7] 900 [680;2000] 11 [0,35;1,8] 10,3 [9,4;10,5]*
СТ, n=8 4,7 [3,6;8,6]* 1930 [1190;4800] 015 [0,07;0,66] 15,5 [7; 20,2]
ТТ, n=0 - - - -
СД2 и АГ
СС, n=41 10 [7,5;17,5] 740 [450;1775]* 114 [0,85;2,1] 27 [17,3;47]
СТ, n=13 11,3 [9,5;17] 1400 [1050;4100]* 1 [0,7; 1,6]* 32,2 [19,3;46]
ТТ, n=3 - - - -
АГ
СС, n=31 12 [9,8;17,5] 750 [487; 1800]* 1,36 [0,8;2,3] 32 [25;40]
СТ, n=15 10,3 [9,2;12,9] 820 [500;2850]* 1 [014;1,3]* 42 [28;45]
ТТ, n=2 - - - -
Контроль
СС, n=26 9,9 [7,5;11,7] 4225 [700;7650] 11 [0,57; 1,7] 37 [6,5;43]
СТ, n=17 8,9 [7; 12] 5400 [4200;6600] 0,33 [019;0,615] 28,5 [22;35]
ТТ, n=1
Примечание: * — p<0,05 при сравнении с такими же генотипами контрольной группы (Т-критерий Манна-Уитни). Сокращения: АГ — артериальная гипертензия, СД2 — сахарный диабет 2 типа.
ванной АГ (п=51). В каждой из указанных подгрупп были выделены больные — носители генетических вариантов ге4762 (С521Т) и ге699 (Т704С) гена ЛОТ, а также генетического варианта ге5186(А1166С) гена ЛОТЯ1, у которых были определены сывороточные уровни инсулина, глюкагона, С-пептида, лептина, липидного спектра, глюкозы и НЪА1с. Контрольная группа включала 47 лиц той же возрастной группы, в которой также была выделена подгруппа лиц — носителей тех же генетических вариантов, что и в опытных подгруппах.
Этическая экспертиза. Протокол исследования был одобрен Комитетом по этике при Дагестанском государственном медицинском университете, протокол № 9 от 34.10.2016. Все пациенты до включения в исследование подписали информированное согласие.
Статистический анализ. Размер выборки предварительно не рассчитывался, поскольку исследование носило популяционный характер и предполагало включение в анализ всех случаев СД2, СД2 в сочетании с АГ и изолированной АГ. Обработку данных
проводили с помощью статистического пакета Statistica (версия 6,0), а также Biostat 4.03. База данных создавалась с использованием редактора электронных таблиц Microsoft Excel 2007. Непрерывные переменные в исследуемых выборках представлены в виде медианы (Ме) с 25;75-процентилями. Статистическую значимость различий между двумя сравниваемыми выборками (опыт-контроль) определяли с помощью Т-критерия Манна-Уитни. Критический уровень значимости различий выбирали равным 5% (р<0,05).
Результаты
В исследование включены 16 больных СД2 в возрасте 58 (52;61) лет с длительностью заболевания 6,5 (5,2;9,5) года, 59 больных СД2 в сочетании с АГ в возрасте 61 (57;63) года с длительностью заболевания 12 (8,2;18) лет и 51 больной с АГ в возрасте 60 (54;61) лет с длительностью заболевания 10 (7,2;15) лет. Контрольная группа включала 47 лиц в возрасте 59 (56;61) лет. В соответствии с результатами на-
Таблица 3
Ассоциации генетического варианта 1^4762^521^ гена ЛйТ с дислипидемией и показателями гликемии
Генотипы генетического Холестерин общий, ммоль/л ЛНП, ммоль/л ЛВП, ммоль/л ТГ, ммоль/л Глюкоза, ммоль/л НЬА1с, % ИМТ, кг/м2
варианта гв4762(С521Т)
СД2
СС, п=6 5,2 (4,5;6) 3,8 (2,9;5) 1,2 (1;1,2) 1,6 (1,4;1,7) 9,5 (8,8;11) 8,2 (8;9) 30 (25;33)
СТ, п=8 5,5 (4,6;5,8) 4,3 (3;5) 1,2 (1;1,3) 3,1 (2,4;3.1)* 14,4 (10;17) 9 (8,4;9) 26 (25;27)
ТТ, п=0 в
СД2 и АГ
СС, п=41 5,6 (4,8;6) 3,2 (2,7;4) 1 (0,9;1,4) 1,8 (1,4;2,4) 9,5 (8;13,6) 9,5 (8;11) 31 (28;36)
СТ, п=13 6,4 (6;6,7)* 4.1 (2;5) 1 (0,9;1,5) 1,6 (1,4;2,5) 11 (9;14) 9,3 (7; 11) 32 (29;34)
ТТ, п=3 -
АГ
СС, п=31 5,7 (5,2;7) 3,3 (2,9;4) 1,3 (1.1 ;8) 1,5 (1;2) 5,5 (5,2;6) - 30 (26;32)
СТ, п=15 5,6 (4,9;6) 3,2 (2,7;5) 1,7 (1;2) 1,5 (1;3) 5 (5,5;4) - 29 (28;32)
ТТ, п=2 -
Контроль
СС, п=26 5,5 (5;6,5) 3 (2;3,8) 1,3 (1;1,8) 1,3 (1;2) 5,3 (4,9;5,6) - 28 (25;30)
СТ, п=17 5,5 (5;6,4) 4 (3;4,3) 1,5 (1 ;1,7) 1 (0,8;3) 5,4 (5;5,8) - 26 (24;27)
ТТ, п=1
Примечание: * — р<0,05 при сравнении с такими же генотипами контрольной группы (Т-критерий Манна-Уитни).
Сокращения: АГ — артериальная гипертензия, ИМТ — индекс массы тела, ЛВП — липопротеиды высокой плотности, ЛНП — липопротеиды низкой плотности, СД2 — сахарный диабет 2 типа, ТГ — триглицериды, НЬА1с — гликированный гемоглобин.
ших исследований [20] в указанных подгруппах и в контрольной группе были выделены лица — носители генетических вариантов ге4762(С521Т) и ге699(Т704С) гена ЛОТ, а также генетического варианта ге5186(А1166С) гена ЛОТЯ1. В этих подгруппах были определены уровни инсулина, глюкагона, С-пептида, лептина, липидного спектра, глюкозы и НЬА1с в сыворотке крови.
Результаты определения уровней инсулина, глю-кагона, С-пептида и лептина у больных СД2, СД2 и АГ и изолированной АГ представлены в таблице 1.
Видно, что уровень инсулина в подгруппах больных СД2, СД2 в сочетании с АГ и изолированной АГ был выше по сравнению с контролем (р<0,05, р<0,01), а уровень глюкагона у этих же больных, напротив, был понижен (р<0,05). Уровень С-пептида был снижен (р<0,05) только в общей подгруппе больных СД2. Можно отметить, что в этой же подгруппе больных видна тенденция к снижению и уровня инсулина. Что же касается лептина, то колебания уровня этого гормона носили статистически незначимый характер.
Результаты изучения уровней инсулина, глюкаго-на, С-пептида и лептина в сыворотке крови у носителей полиморфизма ге4762(С521Т) гена ЛОТ представлены в таблице 2.
Согласно полученным результатам, при СД2 статистически значимые изменения касались единственного случая — снижения уровня лептина у носителей генотипа СС генетического варианта
ге4762(С521Т) гена ЛОТ по сравнению с таким же генотипом контрольной группы (р<0,05). При СД2 в сочетании с АГ у носителей генотипов СС и СТ указанного генетического варианта отмечалось снижение уровня глюкагона, а у носителей генотипа СТ, напротив — увеличение уровня С-пептида в сыворотке крови (р<0,05). Как следует из данных таблицы 2, аналогичные изменения определяются и в отношении изолированной АГ, что является крайне интересным фактом.
Показатели биомаркеров углеводного и липидно-го обмена, а также ИМТ у этих же больных, носителей генетического варианта ге4762(С521Т) гена ЛОТ, представлены в таблице 3.
Отличительной особенностью представленных данных является то, что статистически значимые изменения касались только генотипа СТ генетического варианта ге4762(С521Т) гена ЛОТ. При СД2 у носителей этого генотипа определяется увеличение уровня ТГ в сыворотке крови, а при СД2 в сочетании с АГ тестируется увеличение сывороточного уровня общего холестерина по сравнению с контролем (р<0,05). Во всех остальных случаях колебания сывороточных уровней биомаркеров углеводного и липидного обмена, а также ИМТ носили статистически незначимый характер. Заметим, что различия в уровнях ТГ и общего холестерина определялись и при сравнении этих показателей у носителей генотипов СС и СТ между собой внутри одной подгруппы больных. Так, при СД2 уровень ТГ был выше у носителей генотипа СТ
Таблица 4
Сывороточные уровни инсулина, глюкагона, С-пептида и лептина у носителей генетического варианта ге699(Т704С) гена ЛйТ
Генотипы генетического варианта гв699(Т704С) Инсулин, мкМЕ/мл, Ме [25;75] Глюкагон, пг/мл, Ме [25;75] С-пептид, нг/мл, Ме [25;75] Лептин, нг/мл, Ме [25;75]
СД2
ТТ, п=1 - - - -
ТС, п=12 71 [3,9;12,7] 1440 [845;3900] 0,45 [0,13;1,2] 10,5 [78;20]*
СС, п=1 - - - -
СД2 и АГ
ТТ, п=11 12,8 [9;27]* 1500 [950;3760] 1,1 [0,5;3,9] 22 [14,7;35]
ТС, п=22 11 [8,7; 17] 950 [525;1000]* 1,3 [0,95;1,6]* 277 [19,2;41]
СС, п=24 10,5 [7,5;175] 800 [530;4350] 1 [0,8;2] 27 [15,6;47]
АГ
ТТ, п=6 17,8 [16;19]** 1125 [787; 1462] 2,4 [1,5;2,5] 35 [28,5;40,5]
ТС, п=32 10 [8,8;14,2] 1300 [500;2150]* 0,9 [0,3;1,5]* 45 [27;48]
СС, п=12 11,7 [10;21,5] 700 [540;2010] 1,3 [1;1,6] 37 [15,2;46,5]
Контроль
ТТ, п=7 79 [6,5;9,5] 7500 [3960;7650] 1,95 [1,5;2,9] 27 [16,7; 42]
ТС, п=27 10 [8;13] 5300 [1462;7750] 0,2 [01;0,7] 37 [10,2;39]
СС, п=10 72 [7; 10,4] 6200 [1960;7880] 1,03 [0,5;3,9] 24 [16;38]
Примечание: * — р<0,05; ** — р<0,01 при сравнении с такими же генотипами контрольной группы (Т-критерий Манна-Уитни). Сокращения: АГ — артериальная гипертензия, СД2 — сахарный диабет 2 типа.
Ассоциации генетического варианта ге699(Т704С) гена ЛйТ с дислипидемией и показателями гликемии
Таблица 5
Генотипы генетического варианта гв699(Т704С) Холестерин общий, ммоль/л ЛНП, ммоль/л ЛВП, ммоль/л ТГ, ммоль/л Глюкоза, ммоль/л НЬД1с, % ИМТ, кг/м2
СД2
ТТ, п=1
ТС, п=12 5,4 (4,3;5,8) 3,5 (3;5) 1,5 (0,9;1) 2,4 (1,9;31)* 10,5 (10;15)* 8,9 (8;9) 26 (25;30)
СС, п=1 в
СД2 и АГ
ТТ, п=11 6 (4,7;6,4) 3 (2,6;3,6) 1,6 (1;2) 21 (2;3,8)** 11 (9;13,6)* 10 (8;11) 32 (29;34)**
ТС,п=22 5,5 (5;6,5) 3(2;4) 1 (1;1,4)* 1,7 (1,3;2,4) 9,2 (8;13)* 8,4 (7; 11) 34 (30;35)**
СС, п=24 5,9 (5,4;6) 3(2,8;3,4) 1 (1;1,3)* 1,7 (1,4;2) 9,9 (8;13)* 9,3 (8;11) 29 (28;33)
АГ
ТТ, п=6 5,9 (5,6;6) 3,6 (3;4,7)* 1,5 (1,3;2) 1,1 (0,8;1,7) 5,7 (5,5;6) - 32 (30;33)**
ТС,п=32 5,9 (5,5;6) 3,3 (2,7; 4,3) 1,4 (1;2) 1,4 (1;2) 5,4 (5;5,6) - 30 (28;33)**
СС, п=12 5 (4,8;6,4) 3(2;4,7) 1,3 (1; 1,8) 2,6 (1;3)** 5 (4,8;5,7) - 29 (28;31)
Контроль
ТТ, п=7 5,3 (5;6,5) 2,6 (2;3,9) 1,4 (1;1,7) 1,5 (1;2,3) 5,2 (4,9;5,6) - 26 (25;28)
ТС,п=27 5,5 (5;6,4) 3,6 (2,5;4) 1,4 (1;1,8) 1,2(0,9;3) 5,6 (5;5,7) - 27 (25;29)
СС, п=10 5,6 (4,6;7) 3,7 (2,7;4) 1,9 (1; 1,3) 0,9 (0,7; 1) 5 (4,6;5,5) 27 (26;31)
Примечание: * — р<0,05; ** — р<0,01 при сравнении с такими же генотипами контрольной группы (Т-критерий Манна-Уитни).
Сокращения: АГ — артериальная гипертензия, ИМТ — индекс массы тела, ЛВП — липопротеиды высокой плотности, ЛНП — липопротеиды низкой плотности, СД2 — сахарный диабет 2 типа, ТГ — триглицериды, НЬД1с — гликированный гемоглобин.
по сравнению с носителями генотипа СС (3,1 (2,4;3,1) 1,6 (1,4;1,7), р<0,05). Такая же картина открывается и при СД2 и АГ только в отношении общего холестерина (6,4 (6;6,7) уя 5,6 (4,8;6), р<0,05).
Оценка уровней инсулина, глюкагона, С-пептида и лептина в сыворотке крови у носителей другого ге-
нетического варианта ге699(Т704С) гена ЛОТ представлена в таблице 4.
Результаты изучения данного генетического варианта более многообразны. Так, при СД2 тестируется снижение уровня сывороточного лептина у носителей генотипа ТС генетического варианта ге699(Т704С)
Таблица 6
Сывороточные уровни инсулина, глюкагона, С-пептида и лептина у носителей генетического варианта ^5186^1166^ гена ЛйТЯ1
Генотипы генетического вариантагв5186(А1166С) Инсулин, мкМЕ/мл, Ме (25;75) Глюкагон, пг/мл, Ме (25;75) С-пептид, нг/мл, Ме (25;75) Лептин, нг/мл, Ме (25;75)
СД2
АА, п=9 12 (6;13,4)* 1450 (635;3900) 0,45 (0.12;1,3) 10,4 (9;18)*
АС, п=5 5,5 (3,8;7,5)** 1660 (1220;2200) 0,15 (0,08;1) 12,7 (5,6;19)
СС, п=0 - - - -
СД2 и АГ
АА, п=36 12,6 (8;18)** 1000 (410;1700)* 0,36 (0,8;2) 277 (18,7; 46,5)
АС, п=15 10,5 (6,8;15,7) 800 (575;940) 1 (0,98;1,5) 33,5 (9,6;52,7)
СС, п=6 9,7 (9,3;16) 780 (640;4600) 0,95 (0,6;2,4) 21,3 (13,7;28,3)
АГ
АА, п=25 11,7 (9,8;177)** 800 (500;1800)** 0,45 (1;2,3) 43 (22,7;53,5)
АС, п=16 11 (9,5;14,2) 820 (700;2550) 0,6 (0.1; 1,3) 42 (17,5;63)
СС, п=7 12,5 (7; 13,4) 450 (425;1525) 0,83 (0,7;2) 52 (43,5;60,5)
Контроль
АА, п=29 8 (7; 12) 7500 (950;7800) 0,9 (0.1 ;1,5) 32 (8,7; 40,5)
АС, п=12 9,9 (9,2;11,5) 2660 (1010;4200) 0,7 (0,2;1,7) 28 (9;43)
СС, п=3
Примечание: * — р<0,05; ** — р<0,01 при сравнении с такими же генотипами контрольной группы (Т-критерий Манна-Уитни). Сокращения: АГ — артериальная гипертензия, СД2 — сахарный диабет 2 типа.
гена ЛОТ (р<0,05). При СД2 и АГ видим увеличение уровня инсулина у носителей генотипа ТТ, а у носителей генотипа ТС это увеличение касается уровня С-пептида (р<0,05). Уровень глюкагона снижен у носителей генотипа ТС по сравнению с контролем (р<0,05). При изолированной АГ определяется увеличение уровня инсулина у носителей генотипа ТТ (р<0,01), увеличение уровня С-пептида у носителей генотипа ТС (р<0,05) и снижение уровня глюкагона у носителей генотипа ТС (р<0,05). Показатели ли-пидного и углеводного обменов, а также ИМТ в этих подгруппах больных представлены в таблице 5.
Видно, что при СД2 у носителей генотипа ТС определяется увеличение уровней ТГ и глюкозы в сыворотке крови (р<0,05). Увеличение ТГ, глюкозы, а также ИМТ видно у носителей генотипа ТТ при СД2 и АГ (р<0,05; р<0,01). Также при СД2 и АГ у носителей генотипа ТС изучаемого генетического варианта увеличиваются уровень глюкозы и ИМТ и снижается уровень ЛВП (р<0,05; р<0,01), а у носителей генотипа СС увеличивается уровень глюкозы и также снижается уровень ЛВП (р<0,05). При изолированной АГ у носителей генотипа ТТ тестируется увеличение ЛНП и ИМТ (р<0,05; р<0,01), при генотипе ТС — увеличение ИМТ (р<0,01), а при генотипе СС — увеличение уровня ТГ (р<0,01).
Следующий генетический вариант, который, согласно нашим исследованиям, статистически значимо ассоциирован с СД2 и АГ — это генетический вариант ге5186(А1166С) гена ЛОТЯ1. Результаты изу-
чения сывороточных уровней инсулина, глюкагона, С-пептида и лептина у носителей этого генетического варианта представлены в таблице 6.
Представленные в таблице 6 данные весьма разнообразны. Прежде всего отметим, что при СД2 у носителей генотипа АА уровень инсулина в сыворотке крови повышен по сравнению с контролем (р<0,05), а при генотипе АС, напротив, снижен (р<0,01), и этот факт заслуживает отдельного обсуждения. Также видно, что генотип АА ассоциирован со снижением уровня лептина (р<0,05).
При СД2 и АГ генотип АА ассоциирован с увеличением уровня инсулина (р<0,01) и с понижением уровня глюкагона в сыворотке крови (р<0,05). Аналогичные изменения в отношении этого генотипа определяются и при изолированной АГ.
Показатели углеводного и липидного обменов, а также ИМТ представлены в таблице 7.
При СД2 видно, что у носителей генотипа АС определяется увеличение уровня ТГ (р<0,05), а у носителей генотипов АА и АС — увеличение уровня глюкозы в сыворотке крови (р<0,05). Наибольшее количество статистически значимых изменений определялось при сочетании СД2 и АГ. Так, у носителей генотипа АА тестировалось уменьшение уровня ЛНП (р<0,05) и увеличение уровня глюкозы и ИМТ (р<0,05; р<0,01). При генотипе АС определялось только увеличение уровня глюкозы (р<0,05). Изолированная АГ сопровождалась увеличением ИМТ у носителей генотипа АА (р<0,01).
Таблица 7
Ассоциации генетического варианта ^5186(А1166С) гена ЛйТЯ1 с дислипидемией и показателями гликемии
Генотипы генетического вариантагв5186(Д1166С) Холестерин общий, ммоль/л ЛНП, ммоль/л ЛВП, ммоль/л ТГ, ммоль/л Глюкоза, ммоль/л НЬД1с, % ИМТ, кг/м2
СД2
АА, п=9 5,2 (4,3;6) 3,7 (3;5,8) 11 (0,9;1) 1,8 (1,6;31) 10 (9,5;15)* 8,6 (8;9) 30 (23;30)
АС, п=5 5,5 (5,2;5,8) 3,4 (3,2;5) 1,3 (1,2;1,6) 2,4 (2,2;2,7)* 12,5 (10;16)* 9(8;9) 26 (25;27)
СС, п=0
СД2 и АГ
АА, п=36 5,7 (4,6;6) 2,8 (2;4)* 1 (0,9;1,5) 1,7 (1,5;2,3) 10 (8;14)* 9,5 (76;11) 32 (29;38)**
АС, п=15 5,6 (5;6,5) 3,4 (3;4) 1 (0,9;1,2) 1,9 (1,4;2,9) 9,8 (8;12)* 8,3 (7; 11) 28 (28;33)
СС, п=6 61 (5,8;6) 4,5 (3,9;5) 1 (1;1,3) 1,7 (1;2) 11 (9;15) 9,5 (8;9,5) 29 (28;29)
АГ
АА, п=25 5,9 (5,2;7) 3,2 (3;4,2) 1 (1;1,6) 1,9 (1,4;2,7) 5,5 (5;6) - 31 (28;22)**
АС, п=16 5,7 (5;6) 3,5 (2,3;4,7) 1,7 (1;2) 1,3 (0,7;2,8) 5,2 (5;5,5) - 30 (28;32)
СС, п=7 6 (5,6;6) 4 (2,7;4,3) 1,5 (1,4;1,9) 1,3 (0,8;1,5) 6 (5,4;6,5) - 29 (25;34)
Контроль
АА, п=29 5,8(5;7) 3,7 (3;4,3) 1,3 (1;1,6) 1 (0,9;1,8) 5,2 (4,9;5,6) - 26(24;29)
АС, п=12 5,2 (5;5,5) 3,5 (2,2;8) 1,4 (1,2;1,8) 11 (0,8;2) 5,7 (5,4;6) - 28 (27; 30)
СС, п=3
Примечание: * — р<0,05; ** — р<0,01 при сравнении с такими же генотипами контрольной группы (Т-критерий Манна-Уитни).
Сокращения: АГ — артериальная гипертензия, ИМТ — индекс массы тела, ЛВП — липопротеиды высокой плотности, ЛНП — липопротеиды низкой плотности, СД2 — сахарный диабет 2 типа, ТГ — триглицериды, НЬД1с — гликированный гемоглобин.
Обсуждение
В настоящей работе представлены ассоциации генетических вариантов генов РААС — ЛОТ и ЛОТЯ1 с биомаркерами обмена углеводов и липидов при СД2 в сочетании и без сочетания с АГ у жителей Дагестана, основанные на статистически значимых различиях изученных показателей у носителей тех или иных генотипов РААС. Отличительными особенностями полученных результатов являются их многообразие и разнонаправленность. Представить вероятную патогенетическую схему причинно-следственных взаимоотношений достаточно проблематично, поскольку интерпретация генетического материала сводится к констатации значимых ассоциаций генетических вариантов с теми или иными клиническими или лабораторно-инструментальны-ми признаками и расчетам соответствующих величин риска развития заболевания или синдрома. Тем не менее, при обсуждении основного результата нашего исследования можно выделить наиболее очевидные закономерности и попытаться оценить их практическую значимость.
Гиперинсулинемия была характерна для всех изученных подгрупп больных и во всех подгруппах была ассоциирована с генотипом АА генетического варианта ге5186(А1166С) гена ЛОТВ.1. Кроме этого, у больных СД2 в сочетании с АГ и изолированной АГ гипе-ринсулинемия была ассоциирована с ТТ-генотипом генетического варианта гя699(Т704С) гена ЛОТ. Это согласуется с данными ряда исследований, в соот-
ветствии с которыми одним из важных факторов ги-перинсулинемии и ИР при СД2 является активация РААС и увеличение сывороточного АТ II [4-6].
Весьма интересны ассоциации генетических вариантов РААС с сывороточными уровнями С-пеп-тида. По нашим данным, при СД2 таких ассоциаций не было, а при СД2 в сочетании с АГ и при изолированной АГ эти ассоциации присутствовали только в отношении одного гена — ЛОТ и затрагивали генотип СТ генетического варианта гя4762(С521Т), а также генотип ТС генетического варианта гя699(Т704С). Необходимо отметить, что, согласно нашим предшествующим результатам, эти же генотипы были ассоциированы с уменьшением риска развития СД2 в сочетании с АГ. Отметим также, что во всех случаях речь идет о повышенном уровне С-пептида в сыворотке крови по сравнению с контролем. Клиническая значимость этого показателя известна. С-пептид и инсулин продуцируются клетками поджелудочной железы в эквимолярных концентрациях. Но первый имеет больший период полураспада, что позволяет использовать концентрацию С-пептида в качестве более точной оценки функционального состояния инкреторной функции р-клеток поджелудочной железы [21]. Показано, что С-пептид позитивно ассоциирован с сердечно-сосудистыми заболеваниями и диабетической ретинопатией [22]. Несомненно, что учет генетической составляющей уровня С-пептида в сыворотке крови является информативным и прогностически обоснованным.
У обследованных больных мы определили снижение уровня глюкагона, антагониста инсулина, и это снижение было ассоциировано у больных СД2 в сочетании с АГ и изолированной АГ с генотипами СС и СТ генетического варианта ге4762(С521Т) гена ЛОТ, генотипом ТС генетического варианта ге699(Т704С) гена ЛОТ и генотипом АА генетического варианта ге5186(А1166С) гена ЛОТЯ1. Последний генотип, согласно нашим предыдущим результатам [20], был ассоциирован со снижением вероятности развития СД2 в сочетании с АГ. Следует отметить, что ассоциаций указанных генетических вариантов с уровнем глюкагона в сыворотке крови у больных только СД2 мы не обнаружили. Можно предположить, что наличие генетических вариантов системы РААС, активация этой системы оказывают влияние, прежде всего, на уровень АД, колебания которого в подгруппе обследованных нами больных СД2 не выходили за пределы 130-140/80-90 мм рт.ст. Очевидно, что гормональный баланс при СД2, СД2 в сочетании с АГ и изолированной АГ у жителей Дагестана имеет в качестве важной функциональной составляющей генетическую детерминированность, а также, вероятно, и региональные особенности. Последнее обстоятельство подчеркивается во всех популяционно-генетических исследованиях [17, 18].
Что же касается липидного обмена, то результаты также весьма интересны. Ассоциации сывороточного уровня лептина с генетическими вариантами системы РААС были определены только в подгруппе больных СД2. Снижение уровня лептина было ассоциировано с СС-генотипом генетического варианта ге4762(С521Т) гена ЛОТ и АА-генотипом генетического варианта ге5186(А1166С) гена ЛОТЯ1. А увеличение уровня этого гормона было ассоциировано с генотипом ТС генетического варианта ге699(Т704С) гена ЛОТ. Снижение чувствительности тканей к лептину на фоне повышения концентрации этого гормона в сыворотке крови — ЛР является па-то генетическим звеном СД2, МС, ожирения и дис-липидемии [13]. ЛР часто сочетается с ИР [14].
В соответствии с результатами наших исследований, гиперинсулинемия при СД2 в сочетании с АГ и гиперлептинемия при СД2 ассоциированы с генотипами ТТ и ТС генетического варианта ге699(Т704С) гена ЛОТ. Однако в подгруппе больных только с СД2 мы наблюдаем противоположную картину, а именно — генотип АА генетического варианта ге5186(А1166С) гена ЛОТЯ1 ассоциирован со снижением уровня лептина, и этот же генотип одновременно ассоциирован с увеличением уровня инсулина в сыворотке крови. Патофизиологическая интерпретация полученных результатов, как и всех популяционно-генетических исследований, весьма затруднительна, но подчеркивает участие генетических факторов в нарушении гормонзависимых про-
цессов обмена углеводов и липидов при СД2, причем это участие может носить как синергический, так и антагонистический характер.
Отдельного внимания заслуживает оценка ассоциаций генетических вариантов системы РААС с показателями дислипидемии. Гипертриглицеридемия во всех трёх изученных подгруппах, а также повышение уровня холестерина при СД2 в сочетании с АГ, были ассоциированы с генетическими вариантами единственного гена РААС — ЛОТ. Речь идет о генотипе СТ генетического варианта ге4762(С521Т) и генотипах ТТ и ТС генетического варианта ге699(Т704С). Кроме этого, отметим, что генетические варианты этого гена ассоциированы и с увеличением ИМТ при СД2 и АГ. Ассоциаций гипер-триглицеридемии и других показателей дислипидемии при СД2 и МС с генетическими вариантами РААС в литературе мы не встречали. Дислипидемия при СД2 и МС изучена в основном в отношении генетического варианта Рго12А1а и А1а12 аллеля гена РРЛЯ-у2, а также генетического варианта 276 Т/Т гена ЛБ1РО0 [20, 22]. Полученные результаты позволяют предположить участие генетических вариантов гена ЛОТ, помимо регуляции уровня АД, также и в изменениях липидного обмена при СД2.
Заключение
Ассоциации генетических вариантов генов ЛОТ и ЛОТЯ1 системы РААС с биомаркерами углеводного и липидного обменов при СД2, при СД2 в сочетании с АГ и изолированной АГ у жителей Дагестана свидетельствуют о вероятной патогенетической связи мутационного процесса в системе РААС с сывороточными уровнями инсулина, лептина, С-пептида, глюкагона и показателями дислипидемии. С учетом того, что все медико-генетические исследования касаются, в основном, оценки персонифицированной и прогностической значимости генетических тестов, результаты настоящей работы несколько расширяют горизонт интерпретации генетического материала. Речь идет о том, что на основании полученных результатов можно предположить связь генетических вариантов генов системы РААС не только с продуктами активации этой системы — активностью АПФ, уровнями ангиотензинов 7 видов и прежде всего АТ II, продукцией альдостерона, но и с гормонзави-симыми процессами обмена углеводов и липидов. Подтверждением подобного взгляда являются представленные в настоящей работе ассоциации генетических вариантов ге4762(С521Т) и ге699(Т704С) гена ЛОТ, генетического варианта ге5186(А1166С) гена ЛОТЯ1 с уровнями инсулина, лептина, С-пептида, глюкагона, ТГ, холестерина, глюкозы в сыворотке крови, а также ИМТ у обследованных больных. Разумеется, выявление ассоциаций генетических вариантов генов РААС является только небольшим
фрагментом сложной генетической системы, контролирующей обмен углеводов и липидов, и эти ассоциации пока не дают оснований для определения конкретизированных причинно-следственных взаимосвязей при СД2 и АГ с региональными особенностями. Но эти результаты помогут наметить пути дальнейших, более углубленных исследований в этом направлении. Персонифицированные результаты комплексного исследования генетических вариантов
Литература/References
1. Dedov II, Shestakova MV, Tarasov EV, et al. Pharmacoeconomic assessment of type 2 diabetes mellitus care on the base of Endocrinology Research Centre, Moscow. Diabetes Mellit. 2012;15(3):101-9. (In Russ.) Дедов И. И., Шестакова М. В., Тарасов Е. В. и др. Фармакоэкономическая оценка терапии пациентов с сахарным диабетом 2 типа на базе ФГБУ Эндокринологический научный центр. Сахарный диабет. 2012;15(3):101-9. doi:10.14341/2072-0351-6093.
2. Sharipov RA. Arterial hypertension and diabetes mellitus. Russian Journal of Cardiology. 2008;(3):71-5. (In Russ.) Шарипов Р. А. Артериальная гипертензия и сахарный диабет. Российский кардиологический журнал. 2008;(3):71-5.
3. Pinkhasov BB, Selyatitskaya VG, Mitrofanov IM. Combination of arterial hypertension and type 2 diabetes mellitus with obesity. Clinical medicine. 2014;(9):65-9. (In Russ.) Пинхасов Б. Б., Селятицкая В. Г., Митрофанов И. М. Сочетание артериальной гипертензии и сахарного диабета 2-го типа с ожирением. Клиническая медицина. 2014;(9):65-9.
4. Libianto R, Batu D, MacIsaac RJ, et al. Pathophysiological Links Between Diabetes and Blood Pressure. Can. J. Cardiol. 2018;34(5):585-94. doi:101016/j.cjca.2018.01.010.
5. Joseph JJ, Echouffo-Tcheugui JB, Kalyani RR, et al. Aldosterone, Renin and Diabetes Mellitus in African Americans: The Jackson Heart Study. J. Clin. Endocrinol. Metab. 2016;101(4):1770-8. doi:101210/jc.2016-1002.
6. Underwood PC, Adler GK. The Renin Angiotensin Aldosterone System and Insulin Resistance in Humans. Curr. Hypertens. Rep. 2013;15(1):59-70. doi:101007/s11906-012-0323-2.
7. Das UN. Renin-angiotensin-aldosterone system in insulin resistance and metabolic syndrome. J. Transl. Intern. Med. 2016;4(2):66-72. doi:101515/jtim-2016-0022.
8. Apperloo EM, Pena MJ, de Zeeuw D, et al. Individual variability in response to renin angiotensin aldosterone system inhibition predicts cardiovascular outcome in patients with type 2 diabetes: A primary care cohort study. Diabetes, Obes. Metab. 2018;20(6):1377-83. doi:10.1111/dom.13226.
9. Griffin T, Wall D, Browne G, et al. Associations between glycaemic control and activation of the renin-angiotensin-aldosterone system in participants with type 2 diabetes mellitus and hypertension. Ann. Clin. Biochem. Int. J. Lab. Med. 2018;55(3):373-84. doi:10.1177/0004563217728964.
10. Ojha A, Ojha U, Mohammed R, et al. Current perspective on the role of insulin and glucagon in the pathogenesis and treatment of type 2 diabetes mellitus. Clin. Pharmacol. Adv Appl. 2019;11(3):57-65. doi:10.2147/CPAA.S202614.
11. Lelis D, Freitas DF, Machado AS, et al. Angiotensin-(1-7), Adipokines and Inflammation. Metabolism. 2019;95(3):36-45. doi:10.1016/j.metabol.2019.03.006.
12. Bagenova EA, Belaeva OD, Berezina AB, et al. The Renin Angiotensin Aldosterone System and Arterial hypertension on obesity. Arterial hypertension. 2013;19(5):389-96.
РААС, оценки гормонального статуса и липидного спектра при СД2 и АГ, несомненно, могут обладать достаточной прогностической мощностью, что позволит обоснованно представить рекомендации конкретным больным и их семьям.
Отношения и деятельность: все авторы заявляют об отсутствии потенциального конфликта интересов, требующего раскрытия в данной статье.
(In Russ.) Баженова Е. А., Беляева О. Д., Березина А. В. и др. Ренин-ангиотензин-альдостероновая система у больных абдоминальным ожирением и артериальной гипертензией. Артериальная гипертензия. 2013;19(5):389-96.
13. Litvinova LS, Vasilenko MA, Zatolokin PA. Adipokines in metabolic processes regulating during obesity treatment. Diabetes mellitus. 2014;3:51-9. (In Russ.) Литвинова Л. С., Василенко М. А., Затолокин П. А. и др. Роль адипокинов в регуляции метаболических процессов при коррекции ожирения. Сахарный диабет. 2014;3:51-9. doi:10.14341/ DM2014351-59.
14. Borodkina DA, Gruzdeva OV, Akbasheva OE, et al. Leptin resistance: unsolved diagnostic issues. Problems of Endocrinology. 2018;64(1):62-6 (In Russ.) Бородкина Д. А., Груздева О. В., Акбашева О. Е. и др. Лептинорезистентность, нерешенные вопросы диагностики. Проблемы эндокринологии. 2018;64(1):62-6. doi:10.14341/probl8740.
15. Marusyn OV. The relationship between obesity, glycemia and leptin level of type 2 diabetes mellitus patients with metabolic syndrome. Wiad. Lek. 2018;71(6):1165-8.
16. Underwood PC, Sun B, Williams JS, et al. The association of the angiotensinogen gene with insulin sensitivity in humans: a tagging single nucleotide polymorphism and haplotype approach. Metabolism. 2011;60(8):1150-7. doi:101016/j.metabol.201012.009.
17. Pan Y-H, Huang Y-M, Qiao Y-C, et al. Family history and renin-angiotensin system gene polymorphisms in Chinese patients with type 2 diabetes mellitus. Medicine (Baltimore). 2017;96(51):e9148. doi:10.1097/MD.0000000000009148.
18. Ahmad N, Jamal R, Shah SA, et al. Renin-Angiotensin-Aldosterone System Gene Polymorphisms and Type 2 Diabetic Nephropathy in Asian Populations: An Updated Meta-analysis. Curr. Diabetes. Rev. 2019;15(4):263-76. doi:10.2174/157339981466618 0709100411.
19. Joyce-Tan SM, Zain SM, Abdul Sattar MZ. Renin-Angiotensin System Gene Variants and Type 2 Diabetes Mellitus: Influence of Angiotensinogen. J Diabetes Res. 2016:1-7. doi:101155/2016/2161376.
20. Saidov MZ, Mammaev SN, Magadova HM, et al. Association of angiotensinogen and angiotensin II receptor I polymorphisms with biomarkers of carbohydrate and lipid metabolism in type 2 diabetes mellitus and arterial hypertension in residents of Dagestan. Diabetes mellitus. 2019;22(6):568-76. (In Russ.) Саидов М. З., Маммаев С. Н., Магадова Г. М. и др. Генетический полиморфизм ренин-ангиотензин-альдостероно-вой системы при сахарном диабете 2 типа и при сочетании с артериальной гипер-тензией у жителей Дагестана. Сахарный диабет. 2019;22(6):568-76. doi:10.14341/ DM10207.
21. Bandesh K, Prasad G, Giri AK, et al. Genomewide association study of C-peptide surfaces key regulatory genes in Indians. J. Genet. 2019;98(1):8. doi:101007/s12041-018-1046-1.
22. Wang Y, Wan H, Chen Y, et al. Association of C-peptide with diabetic vascular complications in type 2 diabetes. Diabetes Metab. 2020;46(1):33-40. doi:10.1016/j.diabet.2019.04.004.
