CC BY
20Антитела к гетерогенному ядерному рибонуклео -протеину B1 (RA33) - потенциальный биомаркер в персонализированном лечении ревматоидного
артрита
Волкова М.В.
Белорусская медицинская академия последипломного образования, Минск, Республика Беларусь
Введение
Ревматоидный артрит (РА) представляет собой аутоиммунное заболевание, характеризующиеся прогрессирующим эрозивным артритом и поражением внутренних органов. У большинства пациентов с РА обнаруживаются аутоантитела, которые имеют важное диагностическое и патогенетическое значение и могут использоваться в качестве биомаркеров в персонализированном лечении РА. В качестве антигенных мишеней для аутоантител при РА недавно были идентифицированы гетерогенные нуклеарные рибонуклеопротеины (hnRNPs). Аутоантитела к РНП В1, В2 и гетерогенному комплексу А2/В являются наиболее изученными и обозначаются как «антиген RA33». При формировании аутоиммунного ответа происходит потеря толерантности и выработка аутоантител к комплексу RA33 (анти-RA33), состоящему из hnRNP A2 и его альтернативных сплайсированных вариантов B1 и B2. Клиническое значение анти-RA33 при РА продолжает изучаться, поэтому вопрос как о диагностической и патогенетической значимости этих аутоантител у пациентов с РА остаёется открытым.
Цель
Целью настоящего исследования было изучение частоты встречаемости анти-RA33 у пациентов с РА и сопоставление данных с клиническими проявлениями и иммунологическими показателями заболевания для дальнейшей стратификации пациентов с РА и выработки персонализированных подходов для лечения заболевания.
Материалы и методы
В исследование были включены 146 пациентов с РА. Диагноз верифицирован согласно классификационным критерии ACR/EULAR 2010 г. Аутоантитела к РНП B1 IgG оценивали в образцах сыворотки крови пациентов методом иммуно-ферментного анализа (ИФА; Medipan AG, Германия). В качестве антигена использовался рекомбинантный человеческий антиген РНП B1, который был синтезирован в системе продукции белка Е. coli. Согласно рекомендациям фирмы — производителя верхняя граница нормы (ВГН) соответствует 20 ед/ мл. РФ, АЦЦП, и антитела к мутилированному виментину (анти-MCV) оценивали методом ИФА согласно инструкциям производителя тест-систем фирмы Euroimmun AG (Германия). Результаты выражались в относительных единицах (ед/мл). Статистическая обработка данных осуществлялась с помощью программного обеспечения Statistica 7.0 (StatSoft, США) и Medcalc 12.5.0.0 (США), включая общепринятые методы параметрического и непараметрического анализа. Различия считались значимыми прир < 0,05.
Результаты
В нашей когорте пациентов с РА частота встречаемости РФ IgM составила 96,02 %, АЦЦП — 81,75 %, анти-МЦВ — 69,88 % пациентов, анти-RA33 — 35,97 % пациентов. Для дальнейшего анализа клинического значения анти-RA33 пациенты были разделены на 2 группы: позитивные по анти-RA33 и негативные по анти-RA33.
По основным характеристикам, таким как возраст, пол, длительность болезни, а также по показателям активности заболевания (уровень СРБ, индексы DAS28, SDAI, CDAI) позитивные и негативные по анти-RA33 пациенты не различалисьр > 0,05. В отличие от данных, полученных Маслянским А.С. и соавторами [1] корреляционных взаимосвязей между уровнями анти-RA33 и показателями активности заболевания, а также
длительности болезни установлено не было. В то же время определена более высокая частота встречаемости системных проявлений РА у серонегативных по анти-RA33 пациентов. Следует полагать, что анти-RA33 может расцениваться в качестве биомаркера более благоприятного течения РА.
При анализе частоты встречаемости АЦЦП, РФ ^М, анти-МЦВ и анти-RA33 аутоантител, не выявлено различий между группами серопозитивного и серонегативного по анти-ЯА33 РА. Корреляционных взаимосвязей между уровнями исследованных аутоантител не установлено.
Учитывая сведения о том, что присутствие анти-RA33 ассоциируется с длительностью заболевания [1], уровни и частоты встречаемости анти-RA33, а также АЦЦП, РФ ^М и анти-МЦВ были проанализированы у исследуемых пациентов в зависимости от длительности заболевания. Пациентов разделили на две группы: пациентов с ранним РА (длительность заболевания 12 и менее месяцев) и пациентов с развёрнутым РА (более 12 месяцев). В результате анализа было установлено, что частота встречаемости анти-МЦВ значительно выше при развернутой стадии РА, а показатели частоты встречаемости АЦЦП и РФ не отличается в ранней и развернутой стадии РА. Частота встречаемости анти-RA33 при раннем РА значимо выше по сравнению с развёрнутой стадией РА (табл. 1). В исследуемых группах также различаются и уровни аутоантител, однако значимые различия установлены только для анти-МЦВ и анти-RA33 (табл. 2).
Таблица 1
Частота встречаемости АЦЦП, РФ IgM, анти-МЦВ и анти-Я433 в зависимости от длительности РА
Показатель Ранний РА, n = 29 Развернутый РА, n = 117 Значимость различий
АЦЦП, % положительных случаев 71,43 79,63 p > 0,05
РФ ^М, % положительных случаев 96,30 95,58 p > 0,05
Анти-МЦВ, % положительных случаев 51,85 76,99 p < 0,01
Анти-RA33, % положительных случаев 58,62 34,19 p < 0,05
Таблица 2
Уровни аутоантител в зависимости от длительности РА
Показатель Ранний РА, n = 29 Развернутый РА, n = 117 Значимость различий
АЦЦП, ед/мл* 57,28; 0,002-160,26 129,94; 93,23-151,25 р = 0,24
РФ IgM, ед/мл* 462,83; 146,05-462,83 462,83;448,37-462,83 р = 0,31
Анти-МЦВ, ед/мл* 21,57; 12,10-27,42 33,10; 27,58-37,71 р = 0,0054
Aнти-RA33, ед/мл* 24,01; 4,25-25,23 12,11; 5,81-16,13 р = 0,09
* Результаты представлены как Медиана; 95 % ДИ для медианы.
Заключение
Таким образом, анти-РА33 является новым перспективным, независимым от других биомаркером РА, который имеет собственный потенциал. Перспективным представляется дальнейшее исследование ан-ra-RA33 в качестве диагностического биомаркера ранних стадий РА. Также следует учитывать возможную патогенетическую значимость анти-RA33 в качестве биомаркера более благоприятно течения РА, принимая во внимание установленные ассоциации с клиническим фенотипом заболевания. В поддержку этой гипотезы говорит и отрицательная корреляция между позитивностью по анти-РА33 и эрозивным статусом [2]. Для уточнения диагностической и патогенетической значимости анти-RA33 требуется проведение дальнейших исследований с большим объёмом выборки, сопоставление иммунологических данных с генетическими факторами, результатами других лабораторных и инструментальных исследований, клиническими проявлениями заболевания. Полученные данные позволят более досконально изучить патогенез РА и будут способствовать поиску новых возможностей в персонализированной терапии РА.
Литература
1. Maslyanskiy A.L., Olinek P.A., Lapin S.V., Schierack P., Hentschel C., Cuccato J. et al. Anti-hnRNP B1 (RA33) autoantibodies are associated with the clinical phenotype in russian patients with rheumatoid arthritis and systemic MS. J Immunol, 2014, Article ID 51659.
2. Ball E.M., Tan A.L., Fukuba E., McGonagle D., Grey A., Steiner G. et al. A study of erosive phenotypes in lupus arthritis using magnetic resonance imaging and anti-citrullinated protein antibody, anti-RA33 and RF autoantibody status. 2014, 53 (10): 1835—43.
