Научная статья на тему 'Антирадикальная активность этилового эфира (±)-11,15- дидезокси-16-метил-16-гидроксипростагландина e1'

Антирадикальная активность этилового эфира (±)-11,15- дидезокси-16-метил-16-гидроксипростагландина e1 Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

CC BY
113
18
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
ПРОСТАГЛАНДИНЫ / АНТИОКСИДАНТНАЯ АКТИВНОСТЬ / АНТИРАДИКАЛЬНАЯ АКТИВНОСТЬ / PROSTAGLANDINES / ANTIOXIDANT ACTIVITY / ANTIRADICAL ACTIVITY

Аннотация научной статьи по фундаментальной медицине, автор научной работы — Катаева Р. М., Степанова Е. М., Аглетдинов Э. Ф.

Многие природные простагландины и их синтетические аналоги обладают неоднократно подтвержденной антиоксидантной и антирадикальной активностью, которой в свою очередь объясняются их цитопротекторная и иммуностимулирующая активность. В настоящей работе исследованы антиоксидантные и антирадикальные свойства этилового эфира (±)11,15-дидезокси-16-метил-16-гидроксипростагландина Е1 в концентрациях 2×10-6 и 1×10-8 г/мл. С этой целью использованы модельные системы с генерацией гидроксильного радикала, супероксиданион-радикала, генерации активных форм кислорода в цельной крови с хемилюминесцентной детекцией, система определения стабильного радикала α-дифенил-βпикрилгидразина для выявления антирадикальной активности. Показаны относительно высокая неспецифическая дисмутазная активность в отношении O •, способность 11-ДМП к восстановлению в модельной смеси, содержащей радикал αдифенил-β-пикрилгидразина, способность ограничивать форболмеристатацетатзависимый процесс активации фагоцитарных клеток крови. Установлено, что 11-ДМП не обладает активностью в отношении гидроксильного радикала.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по фундаментальной медицине , автор научной работы — Катаева Р. М., Степанова Е. М., Аглетдинов Э. Ф.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

ANTIRADICAL ACTIVITY OF ETHYL ESTER (±) -11,15- DIDEOXY-16-METHYL-16-E1 HYDROXYPROSTAGLANDIN E1

Many natural prostaglandins and their synthetic analogues have repeatedly confirmed antioxidant and anti-radical activity, which, in turn, is explained by their cytoprotective and immunostimulatory activity. The present study shows the antioxidant and antiradical properties of ethyl (±)-11,15-dideoxy-16-methyl-16-hydroxyprostaglandin E1 in concentrations of 2×10-6 and 1×10-8 gr/ml. To this end, we used the model systems with generation of the hydroxyl radical, superoxide anion radical, active oxygen forms generation system in the whole blood with chemiluminescent detection, the system determining stable α-diphenyl-β-picrylhydrazine radical to identify antiradical activity. It shows a relatively high nonspecific dismutase activity against O2•, ability to restore a model mixture containing radical α-diphenyl-β-picrylhydrazine, the ability to restrict activation process of phagocyte blood cells. It is shown that (±)-11,15-dideoxy-16-methyl-16-hydroxyprostaglandin E1 has no activity against hydroxyl radical.

Текст научной работы на тему «Антирадикальная активность этилового эфира (±)-11,15- дидезокси-16-метил-16-гидроксипростагландина e1»

2. Гильмутдинова, Л.Т. Медицинская реабилитация больных с травмами верхних конечностей / Л.Т. Гильмутдинова, Н.С. Кут-лиахметов, А.Р. Сахабутдинова // Фундаментальные исследования. - 2014. - № 10. - C. 647-650.

3. Гублер, Е.В. Информатика в патологии, клинической медицине и педиатрии / Е.В. Гублер. - Л.: Медицина, 1990. - 176 с.

4. Деревцова, С.Н. Соматотип и особенности восстановления объема движений верхней конечности больных, перенесших инсульт / С.Н. Деревцова, В.Г. Николаев, С.В. Прокопенко // Сибирское медицинское обозрение. - 2009. - N° 5. - С. 54-57.

5. Корольков, А.Н. Точность ощущения движений пронации-супинации свободных верхних конечностей / А.Н. Корольков, К.О. Ольховикова // Известия Тульского государственного университета. Физическая культура. Спорт. - 2014. - № 4. - С. 95-100.

6. Корянова, М.М. Эффективность этапного восстановительного лечения детей с последствиями родовых периферических парезов верхней конечности: дис. ...канд. мед. наук. - Пятигорск, 2005. - 78 с.

7. Мусилов, М.М. Возможности реабилитации больных и инвалидов с последствиями сочетанной травмы магистральных сосудов и периферических нервов верхних конечностей (клиническое исследование): дис. ... канд. мед. наук. - Махачкала, 2004. - 111 с.

8. Панина, О.В. Восстановление двигательной функции верхней конечности у больных с церебральным инсультом в острый период течения заболевания: автореф. дис. ... канд. мед. наук. - М., 2005. - 45 с.

9. Пекшев, Г.Г. Диагностика и лечение хронического болевого синдрома и нарушений функции верхней конечности после комбинированного и комплексного лечения рака молочной железы: дис. ... канд. мед. наук. - Барнаул, 2004. - 150 с.

10. Kubo, M. Coordination of pelvis-HAT (head, arms and trunk) in anterior-posterior and medio-lateral directions during treadmill gait in preadolescents with/without Down syndrome / M. Kubo, B. lrich // J. Gait Posture. - 2006. - Vol. 23. - P.512-518.

11. Ortega, J. 2008 Effects of aging and arm swing on the metabolic cost of stability in human walking / J. Ortega, L. A. Fehlman, C. T. Farley // J. Biomech. - 2008. - Vol. 41. - P. 3303-3308.

12. Rietdyk, S. Anticipatory locomotor adjustments of the trail limb during surface accommodation / S. Rietdyk // J. Gait Posture. - 2006. -Vol. 23. - P. 268-272.

13. Umberger, B. 2008 Effects of suppressing arm swing on kinematics, kinetics, and energetics of human walking. / B. Umberger // J. Biomech. - 2008. - Vol. 41. - P. 2575-2580.

14. van der Krogt, M. M. Walking speed modifies spasticity effects in gastrocnemius and soleus in cerebral palsy gait / M. M. van der Krogt, C. A. Doorenbosch, J. G. Becher, and J. Harlaar // J. Clin. Biomechs. - 2009. - Vol. 24. - P. 422-428.

УДК 615.275.4

© Р.М. Катаева, Е.М. Степанова, Э.Ф. Аглетдинов, 2016

Р.М. Катаева, Е.М. Степанова, Э.Ф. Аглетдинов АНТИРАДИКАЛЬНАЯ АКТИВНОСТЬ ЭТИЛОВОГО ЭФИРА (±)-11,15-ДИДЕЗОКСИ-16-МЕТИЛ-16-ГИДРОКСИПРОСТАГЛАНДИНА E1

ФГБОУ ВО «Башкирский государственный медицинский университет» Минздрава России, г. Уфа

Многие природные простагландины и их синтетические аналоги обладают неоднократно подтвержденной антиокси-дантной и антирадикальной активностью, которой в свою очередь объясняются их цитопротекторная и иммуностимулирующая активность. В настоящей работе исследованы антиоксидантные и антирадикальные свойства этилового эфира (±)-11,15-дидезокси-16-метил-16-гидроксипростагландина Е1 в концентрациях 2х10"6 и 1х10-8 г/мл. С этой целью использованы модельные системы с генерацией гидроксильного радикала, супероксиданион-радикала, генерации активных форм кислорода в цельной крови с хемилюминесцентной детекцией, система определения стабильного радикала а-дифенил-Р-пикрилгидразина для выявления антирадикальной активности. Показаны относительно высокая неспецифическая дисму-тазная активность в отношении O^, способность 11-ДМП к восстановлению в модельной смеси, содержащей радикал а-дифенил-Р-пикрилгидразина, способность ограничивать форболмеристатацетатзависимый процесс активации фагоцитарных клеток крови. Установлено, что 11-ДМП не обладает активностью в отношении гидроксильного радикала.

Ключевые слова: простагландины, антиоксидантная активность, антирадикальная активность.

R.M. Kataeva, E.M. Stepanova, E.F. Agletdinov ANTIRADICAL ACTIVITY OF ETHYL ESTER (±) -11,15-DIDEOXY-16-METHYL-16-E1 HYDROXYPROSTAGLANDIN E1

Many natural prostaglandins and their synthetic analogues have repeatedly confirmed antioxidant and anti-radical activity, which, in turn, is explained by their cytoprotective and immunostimulatory activity. The present study shows the antioxidant and antiradical properties of ethyl (±)-11,15-dideoxy-16-methyl-16-hydroxyprostaglandin E1 in concentrations of 2x10"6 and 1x10"8 gr/ml. To this end, we used the model systems with generation of the hydroxyl radical, superoxide anion - radical, active oxygen forms generation system in the whole blood with chemiluminescent detection, the system determining stable а-diphenyl-P-picrylhydrazine radical to identify antiradical activity. It shows a relatively high nonspecific dismutase activity against O2% ability to restore a model mixture containing radical а-diphenyl-P-picrylhydrazine, the ability to restrict activation process of phagocyte blood cells. It is shown that (±)-11,15-dideoxy-16-methyl-16-hydroxyprostaglandin E1 has no activity against hydroxyl radical.

Key words: prostaglandines, antioxidant activity, antiradical activity.

Благодаря высокой и разносторонней биологической активности простагландины (ПГ) находят все более широкое применение в медицинской практике в качестве лекарственных препаратов. Постоянно расширяется и область их применения [7,8].

11-дезоксимизопростол - этиловый эфир (±)-11,15-дидезокси-16-метил-16-

гидроксипростагландина Е1 (11-ДМП), синтетический аналог простагландина Е1, близок по химическому строению с мизопростолом и существенно превосходит последний по фармакологической активности [4]. К настоящему моменту описаны утеротоническая, противоязвенная, противовоспалительная, иммуностимулирующая и гепатопротекторная активность 11-

ДМП [3,4,7]. Показана целесообразность использования простагландинов в лечении и профилактике заболеваний сердечно - сосудистой системы, продемонстрированы антиагрегаци-онные свойства 11-ДМП [3]. Поскольку природные ПГ и их синтетические аналоги обладают неоднократно подтвержденной антиокси-дантной активностью, многие эффекты 11-ДМП также объясняются его потенциально возможными антиоксидантными свойствами [4,7,8]. Однако, конкретные механизмы антиоксидант-ных эффектов 11-ДМП по-прежнему не изучены. В то же время известно, что ближайший аналог 11-ДМП мизопростол обладает выраженной антирадикальной активностью [10].

Цель исследования - изучение антирадикальной активности этилового эфира (±)-11,15-дидезокси- 16-метил- 16-гидроксипростаглан-дина E1.

Материал и методы

В серии экспериментов in vitro изучена антиоксидантная и антирадикальная активность 11-ДМП. С этой целью использованы модельные системы с генерацией гидроксильного радикала (Off), супероксиданион - радикала (O2^), генерации активных форм кислорода (АФК) в цельной гепаринизированной крови с хемилюминесцентной детекцией, система определения стабильного радикала а-дифенил-Р-пикрилгидразина (ДФПГ) для выявления антирадикальной активности. Тестируемые вещества в реакционной смеси содержались в концентрациях, сопоставимых с концентрациями, достигаемыми в крови при их внутрижелудоч-ном введении [5]. Изучена антиоксидантная и антирадикальная активность 11-ДМП в концентрациях 2*10~6 и 1х10"8 г/мл (в виде натриевой соли). В качестве препарата сравнения использовали препарат Мизопростол (ЗАО "ПЕНТКРОФТ ФАРМА") в концентрациях 2*10"6 и 1х10"8 г/мл. Число измерений для каждого тестируемого препарата составило 10.

Степень подавления генерации Off в реакции Фентона оценивали, регистрируя динамику окислительной деструкции 2-дезокси-D-рибозы с образованием низкомолекулярных диальдегидов, концентрация которых определялась по реакции с тиобарбитуровой кислотой (оптическая плотность растворов регистрировалась при длине волны 532 нм) [1,6]. Полученные показатели оптической плотности выражали в процентах ингибирования. Регистрация оптической плотности растворов производилась с помощью спектрофотометра СФ-56 (ОКБ «Спектр», Россия).

О способности 11-ДМП к дисмутации O2^ судили по ингибированию накопления адрено-

хрома в окислительно-восстановительной системе адреналин/адренохром. Накопление адре-нохрома, образующегося в щелочной среде из адреналина, детектировали при длине волны 480 нм [1,6]. Полученные показатели оптической плотности выражали в процентах ингиби-рования. Регистрация оптической плотности растворов производилась с помощью спектрофотометра СФ-56 (ОКБ «Спектр», Россия).

Влияние исследуемых препаратов на генерацию активных форм кислорода активированными нейтрофилами изучали методом индуцированной люминолзависимой хеми-люминесценции (ХЛ) с использованием цельной гепаринизированной крови [9]. Генерацию АФК инициировали форболмеристатаце-татом (ФМА, концентрация в реакционной смеси 1,6 мкМ). Исследуемые препараты добавляли в реакционную среду, содержащую буфер ХЭНКС с 0,1% раствором глюкозы (рН 7,2), люминол (конечная концентрация в реакционной смеси 2*10-5М) и гепаринизиро-ванную кровь. Общий объем реакционной смеси составлял 1 мл. Температура проведения реакции - 37о С. Измерения проводили на приборе «ХЛМ-003» (УГАТУ, Россия). Уровень генерации АФК нейтрофилами цельной крови оценивали по интегральному показателю светосуммы с использованием специализированного программного обеспечения. По изменению характера ХЛ при добавлении препарата в модельную систему, генерирующую АФК, судили о действии вещества на процессы свободнорадикального окисления.

Для изучения антирадикальной активности дополнительно нами использована система определения стабильного радикала а-дифенил-Р-пикрилгидразина (ДФПГ). Принцип метода основан на восстановлении ДФПГ под действием тестируемого вещества с изменением оптической плотности реакционной смеси при 517 нм [6]. Регистрация оптической плотности растворов производилась с помощью спектрофотометра СФ-56 (ОКБ «Спектр», Россия). Полученные показатели оптической плотности выражали в процентах ингибирования ДФПГ.

Результаты обрабатывались общепринятыми методами вариационной статистики и выражались в виде среднеарифметической (М) и её стандартной ошибки (т). Применялся критерий непараметрической статистики Манна-Уитни. Обработка полученных данных производилась с использованием пакета прикладных программ Statistica 6.

Результаты и обсуждение. По результатам анализа полученных данных выявлено,

что исследуемые вещества как 11-ДМП, так и препарат сравнения (мизопростол) практически не обладают активностью в отношении гидроксильного радикала: степень ингибиро-вания генерации ОН в модельной системе не превышала 5% (табл. 1). Статистически значимых отличий между значениями показателей, полученных в реакционных смесях с различными концентрациями тестируемых веществ, не выявлено.

11-ДМП проявлял достаточно высокую неспецифическую дисмутазную, превышающую значения препарата сравнения активность в отношении супероксиданион-радикала, что продемонстрировано результатами, полученными в окислительно-восстановительной системе адрена-лин/адренохром. При этом активность не имела прямой зависимости от концентрации исследуемых веществ (см. таблицу).

Модельная система 11-ДМП Мизопростол

2х10"6 г/мл 1х10"8 г/мл 2х10-6 г/мл 1х10-8 г/мл

Ингибирование генерации ОН % 2,03±0,84 4,32±0,97 4,93±1,01 2,32±0,97

Ингибирование генерации О2% % 32,77±3,85 * 31,63±3,38 24,92±3,74 21,58±2,06

Степень ингибирования ДФПГ, % 70,40±3,56 * 48,76±2,61 * 33,77±0,86 26,27±0,86

Генерация активных форм кислорода нейтрофилами, светосумма, ед./мин. 12,88±0,52 * 38,91±0,56 * 22,47±1,17 68,45±3,61

Таблица

Влияние изучаемых препаратов на процессы генерации активных форм кислорода и органических радикалов в модельных системах

* Статистически значимые отличия от показателей, полученных в реакционной смеси, содержащей препарат сравнения.

Наиболее выраженное антирадикальное действие 11-ДМП было зарегистрировано в модельной системе, содержащей ДФПГ. Скорость восстановления ДФПГ напрямую зависела от концентрации 11-ДМП в реакционной смеси (см. таблицу).

Исследуемые вещества проявили способность к подавлению вспышки кривой хе-милюминесценции в системе генерации АФК в цельной крови, что свидетельствует об их способности ограничивать ФМА-зависимый процесс активации фагоцитарных клеток (см. таблицу). При этом степень подавления ХЛ напрямую зависела от концентрации исследуемых веществ в модельной системе, а 11-

ДМП проявлял более выраженную антиокси-дантную активность, чем препарат сравнения.

Заключение

Таким образом, в настоящем исследовании продемонстрированы антиоксидантные и антирадикальные свойства 11-ДМП. Показаны относительно высокая неспецифическая дис-мутазная активность в отношении О2, способность 11 -ДМП к восстановлению в модельной смеси, содержащей радикал а-дифенил-Р-пикрилгидразина, способность ограничивать форболмеристатацетатзависимый процесс активации фагоцитарных клеток крови. Установлено, что 11 -ДМП не обладает активностью в отношении гидроксильного радикала.

Сведения об авторах статьи: Катаева Роксана Маратовна - аспирант ФГБОУ ВО БГМУ Минздрава России. Адрес: 450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3. E-mail: [email protected].

Степанова Евгения Михайловна - к.м.н., доцент кафедры эндокринологии ФГБОУ ВО БГМУ Минздрава России. Адрес: 450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3. E-mail: [email protected].

Аглетдинов Эдуард Феликсович - д.м.н., профессор кафедры патологической физиологии ФГБОУ ВО БГМУ Минздрава России. Адрес: 450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3. E-mail: [email protected].

ЛИТЕРАТУРА

1. Арутюнян, А.В. Методы оценки свободнорадикального окисления и антиоксидантной системы организма: методические рекомендации / А.В. Арутюнян, Е.Е. Дубинина, Н.Н. Зыбина. - СПб.: ИКФ «Фолиант», 2000. - 104 с.

2. Гастрозащитные свойства аналога простагландина Е1 11-дезоксимизопростола и его влияние на уровень сиаловых кислот в ткани желудка при язвенной болезни у крыс / Н.Ж. Басченко [и др.] // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины -2006. - Т. 142, № 1. - С. 451-454.

3. Влияние натриевой соли этилового эфира 11-дезоксимизопростола на агрегацию тромбоцитов и протромбиновое время / С.Ф. Габдрахманова [и др.]// Экспериментальная и клиническая фармакология. - 2008. - Т. 71, N°. 2. - С. 40-42.

4. Простаноиды LXXIV. Противоязвенная активность мизопростола и его 11-дезоксианалога. Синтез мизопростола / Н.А. Иванова [и др.] // Хим.-фарм. журн. - 1998. - № 11. - С. 12-14.

5. Изучение иммунотоксичности и аллергенных свойств 11-дезоксимизопростола /Р.М. Катаева [и др.] // Фундаментальные исследования. - 2014. - № 10. - С. 1938-1941.

6. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая // под ред. А.Н. Миронова. -М.: Гриф и К., 2012. - 944 с.

7. Противоязвенные свойства 11-дезоксимизопростола / Т.А. Сапожникова [и др.]//Экспер. и клин. фармакология.-2003.- № 1. - С. 16-17.

8. Сапожникова, Т.А. Некоторые биохимические механизмы фармакологической активности 2-дезметоксикарбонил-2-этоксикарбонил-11-дезоксимизопростола: дис. ... канд. биол. наук. - Уфа, 2004. - 145 с.

9. Фархутдинов, Р.Р. Хемилюминесцентные методы исследования свободнорадикального окисления в биологии и медицине / Р.Р. Фархутдинов, В.А. Лиховских // Биомедицинская химия. - 2005. - Т. 51. - С. 287.

10. Protective role of misoprostol against cisplatin-induced ototoxicity / M. Dogan [et al.] //European archives of otorhinolaryngology. -2016. - Vol.273. - Р. 3685-3692.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.