Научная статья на тему 'Антиоксидатное и иммунопротекторное действие экстракта личинок восковой моли при окислительном стрессе у крыс, вызванном потреблением корма, обогащенного железом'

Антиоксидатное и иммунопротекторное действие экстракта личинок восковой моли при окислительном стрессе у крыс, вызванном потреблением корма, обогащенного железом Текст научной статьи по специальности «Медицина и здравоохранение»

CC BY
139
24
Поделиться

Аннотация научной статьи по медицине и здравоохранению, автор научной работы — Овсепян А. А., Венедиктова Н. И., Захарченко М. В., Казаков Р. Е., Кондрашова М. Н., Литвинова Е. Г., Саакян И. Р., Сирота Т. В., Ставровская И. Г., Шварцбурд П. М.

Антиоксидантное и иммунопротекторное действие экстракта личинок восковой моли Galleria mellonella биологически активной добавки, разработанной нами на основе старинного противотуберкулезного средства народной медицины, исследовалось на модели окислительного стресса, вызванного пищевой перегрузкой железом. Длительное потребление крысами корма, обогащенного железом в дозах, близких к принятым в ветеринарии, вело к развитию окислительного стресса и нарушениям иммунных и митохондриальных функций. Одновременное с железом добавление экстракта устраняло или снижало окислительный стресс и патологические изменения, вызванные длительным потреблением железа

Похожие темы научных работ по медицине и здравоохранению , автор научной работы — Овсепян А.А., Венедиктова Н.И., Захарченко М. В., Казаков Р.Е., Кондрашова М.Н., Литвинова Е.Г., Саакян И.Р., Сирота Т.В., Ставровская И.Г., Шварцбурд П.М.,

The Antioxidative and Immunoprotective Effects of the Bee Moth Larvae Extract during Oxidative Stress in Rats Induced by Intake of Iron-Enriched Feed

The mechanism of biological activity of a new food additive that we have developed on the basis of the ancient folk antituberculosis remedy, the bee moth (Galleria mellonella) larvae extract, is presented. The antioxidative and immunoprotective effects were studied in a model of oxidative stress induced in rats by high-iron diet. A long-term consumption of feed supplemented by iron at doses close to those used in veterinary practice led to the development of oxidative stress in rats, and to disturbance of immune and mitochondrial functions. The administration of the extract to iron-fed rats eliminated or substantially reduced the oxidative stress and related pathological changes caused by long-term high-iron intake.

Текст научной работы на тему «Антиоксидатное и иммунопротекторное действие экстракта личинок восковой моли при окислительном стрессе у крыс, вызванном потреблением корма, обогащенного железом»

лась положительная динамика. На фоне курса лечебного ПА шло ослабление интенсивности основных симптомов климактерического синдрома. У всех женщин состояние улучшилось: уменьшились число и интенсивность «приливов», головные боли, потливость, изменение настроения, раздражительность, склонность к отекам, частота симпато-адреналовых кризов, боли в мышцах и суставах, наладился сон. В течение месяца после лечения отмечена положительная динамика самочувствия. При этом уменьшение выраженности симптомов или их исчезновение быстрее происходило у женщин, находящихся в перименопаузе.

Всего проведено 560 сеансов ПА, частота осложнений составила 1,8% - это были аллергические реакции на введение коллоидных плазмозаменителей. Тяжелых осложнений при проведении ПА не было ни в одном случае. После проведения курса лечебного ПА отмечается выраженный клинический эффект, причем наиболее значимые изменения происходят в нейро-вегетативном и психоэмоциональном синдромах, тогда как изменений в обменно-эндокринном синдроме практически нет.

Литература

1.Вихляева Е.М. и др. Руководство по эндокринной гинекологии.- М. МИА. 1997.- С.603-650.

2.Воинов В.А. Эфферентная терапия. Мембранный плазма-ферез.- СПб:. Эскулап. 2002.- 272 с.

3.Здоровье женщины и менопауза / Пер. с англ.- М.: ГЭО-ТАР-МЕД, 2004.- 528 с.

4.Кулаков В.И. и др. Руководство по климактерию.- М. МИА. 2001.- 685с.

5.Постников А.А. Прямое очищение крови (лабораторный контроль).- М. Триада-фарм. 2003.- 182 с.

УДК 612.017+615.399

АНТИОКСИДАТНОЕ И ИММУНОПРОТЕКТОРНОЕ ДЕЙСТВИЕ ЭКСТРАКТА ЛИЧИНОК ВОСКОВОЙ МОЛИ

ПРИ ОКИСЛИТЕЛЬНОМ СТРЕССЕ У КРЫС, ВЫЗВАННОМ ПОТРЕБЛЕНИЕМ КОРМА, ОБОГАЩЕННОГО ЖЕЛЕЗОМ

А.А. ОВСЕПЯН, Н.И. ВЕНЕДИКТОВА, М. В. ЗАХАРЧЕНКО, Р.Е. КАЗАКОВ, М.Н. КОНДРАШОВА, Е.Г. ЛИТВИНОВА, И.Р. СААКЯН,

Т.В. СИРОТА, И.Г. СТАВРОВСКАЯ, П.М. ТТТВАРТТБУРД

Антиоксидантное и иммунопротекторное действие экстракта личинок восковой моли Galleria mellonella — биологически активной добавки, разработанной нами на основе старинного противотуберкулезного средства народной медицины, исследовалось на модели окислительного стресса, вызванного пищевой перегрузкой железом. Длительное потребление крысами корма, обогащенного железом в дозах, близких к принятым в ветеринарии, вело к развитию окислительного стресса и нарушениям иммунных и митохондриальных функций. Одновременное с железом добавление экстракта устраняло или снижало окислительный стресс и патологические изменения, вызванные длительным потреблением железа

Наряду с созданием новых высокоэффективных синтетических лекарств накапливаются данные о неблагоприятных побочных действиях при их применении, что заставляет обратиться к немедикаментозным природным лечебным средствам, которые, к сожалению, становятся уже малоизвестными. Одним из таких средств является экстракт личинок большой восковой моли, использовавшейся в народной медицине при лечении туберкулеза. Биологические исследования препарата проводили Мечников, его ученики и др. Особенно большой вклад в клиническое изучение препарата внес крупный московский кардиолог и врач широкого профиля С.А. Мухин. Помимо успешного применения препарата для лечения туберкулеза он открыл его лечебное действие при сердечных заболеваниях и общеукрепляющее действие на лиц пожилого возраста. В личном контакте С.А.Мухина и М.Н. Кондрашовой начались исследования в нашей лаборатории механизмов биологического действия препарата, который при поддержке ОАО ДИОД мы разрабатываем в качестве БАД, названной в знак уважения к С. А. Мухину «Натуральным экстрактом доктора Мухина». Разработанный препарат защищен патентом и имеет разрешение на применение.

Это остро востребованное средство не находит до сих пор широкого применения из-за недостаточных знаний механизмов его действия. Ранее мы показали, что спиртовый экстракт личинок восковой моли (ЭВМ) улучшает состояние туберкулезных

больных и людей с ослабленным иммунитетом [1-4]. В экспериментах на животных было показано, что ЭВМ повышает физическую активность, силу сердечных сокращений и устойчивость изолированного сердца крыс к высоким дозам строфантина. Прием ЭВМ также вел к повышению уровня гликогена в сердце и к аэробному сдвигу окислительного метаболизма в ткани сердца и аорты, что проявлялось в увеличении числа пирувата [5]. ЭВМ повышает эффективность энергетических процессов в митохондриях, особенно в сердце. Было обнаружено в опытах на стареющих крысах, что прием ЭВМ повышает устойчивость сердечной мышцы к искусственной ишемии [6]. Показано, что ЭВМ стимулирует рост и дифференцировку культивируемых клеток [7].

Многие заболевания, включая кардиологические, воспалительные и инфекционные, как острые, так и хронические сопровождаются развитием окислительного стресса. Умеренная перегрузка пищевым железом может служить моделью таких патологических состояний. При этом такая модель имитирует реальные состояния, сопровождающиеся избытком железа в организме. Широкая практика обогащения многих пищевых продуктов, напитков и лекарств железом с целью оздоровления может приводить к перегрузке железом у людей, потребляющих такие продукты длительное время. Мы предположили, что ЭВМ содержит антиоксиданты и что антиоксидантная активность (АОА) препарата определяет широкий спектр его биологического действия. Ранее мы обнаружили АОА в ЭВМ in vivo с использованием нескольких модельных систем [8]. Мы использовали модель окислительного стресса и иммуносупрессии у крыс, вызванных длительным приемом пищи, обогащенной ветеринарным препаратом железа, чтобы определить, проявляет ли ЭВМ АОА in vivo и чтобы выявить связь между АОА и иммунопротекторными свойствами ЭВМ. Препараты железа используют для предотвращения анемии у растущих животных. Окислительный стресс будет резко выраженным у взрослых животных, так как они менее нуждаются в железе, чем растущие. Поэтому мы провели сравнительные исследования на молодых и взрослых животных.

Материалы и методы. В работе использовали ветеринарный препарат железа «Ферроглюкин-75», содержащий 75 мг/мл железо-декстрана производства «Белмедпрепарат» (НПК Биогель, Белорусь). Компоненты буферных растворов, субстраты и ингибиторы дыхания - Sigma. ЭВМ готовили из личинок большой восковой моли путем экстракции 40% этанолом. Личинки выращивали в стандартных условиях, как описано в [9]. В работе использовались крысы Wistar, содержащиеся в виварии ИТЭБ РАН. Было проведено две серии экспериментов: на растущих и взрослых животных. В первой серии использовали 1,5 месячных самцов (начальный вес 100-130 г.). Животные были разделены на три группы: I - контрольная группа - получала стандартный рацион; II группа вместе с основным рационом ежедневно в течение 10 недель получала препарат железа (1 мл/жив/сут); III группа получала препарат железа (1мл/жив/сут) а также ЭВМ (100 мкл/жив/сут). Добавки давались отдельно с небольшим объемом пищи. Во второй серии использовали 3-месячных самок крыс Wistar (вес 180-200 г.). Группы животных были такие же, как в первой серии, добавки давались в течение 12 недель.

В конце эксперимента животных декапитировали и исследовали состояние внутренних органов, уровень малонового диальдегида (МДА) в тканях, антиоксидантную активность (АОА) в крови, размер ассоциатов и дыхательную функцию митохондрий, иммунную активность нейтрофилов. Митохондрии сердца выделяли по методу Чанса и Хагихары за исключением добавления протеиназ к среде. После декапитации животных сердце быстро извлекали и помещали в охлажденную среду выделения, содержащую 250 мМ сахарозы, 10 мМ HEPES 1 мМ ЭГТА, 0,5% альбумин, рН 7,4. Ткань измельчали, отмывали от крови и гомогенизаровли (соотношение ткани и среды 1:10). Гомогенат центрифугировали 7 мин при 400g. Супернатант центрифугировали в течение 10 мин при 12000g. Осадок суспензировали в среде, содержащей 250 мМ сахарозы, 10 мМ HEPES рН 7,4 и центрифугировали 12 минут при 12000g. Осадок суспендировали в той же среде в соотношении 1 : 0,1. Митохондрии хранили в ледяной бане. Митохондрии мозга выделяли как описано у Lai & Clark [10] с небольшими изменениями. Размельченную ткань мозга гомогенизировали на льду в 14 мл среды выделения, содержащей 250 мМ сахарозы, 10 мМ HEPES, 0,5 мМ ЭГТА, рН 7,4 и центрифугировали 3 мин при 2000 g. Супернатант центрифугировали 10 мин при 2000g и полученный суперна-

тант центрифугировали при 125GGg 8 минут. Осадок суспензировали в G,25 мл среды без ЭГТА.

Эритроциты получали из гепаринизированной крови и разбавляли двумя объемами физраствора. Эритроциты осаждали центрифугированием при 1GGG g 1G мин и дважды отмывали физраствором. G,G5 мл осажденных эритроцитов суспендировали в G,3 мл воды и встряхивали в течение 15 минут при 4°С. Центрифугировали при 1GGGg 15 мин, осадок удаляли. Гемолизаты цельной крови получали, добавляя G,1 мл физраствора и G,35 мл дистиллированной воды к G,G5 мл гепаринизированной крови и оставляя смесь на 15 мин при 4°С. МДА в гомогенатах печени, эритроцитах, митохондриях мозга и сердца определяли спеткрофотометриче-ски по реакции с тиобарбитуровой кислотой [11]. АОА гемолизатов цельной крови и эритроцитов измеряли по степени ингибирования аутоокисления адреналина в щелочном (рН Ю,б) карбонатном буфере. Образование адренохрома регистрировали на спектрофотометре UVIKON 923 при 347 нм [8].

Структурное и функциональное состояние митохондрий исследовали разработанным нами методом [12]. Размер ансамблей митохондрий и эндоплазматического ретикулума в гомогенатах тканей определяли путем компьютерной видеомикроскопии. 3G мкл гомогената добавляли к 97G мкл среды гомогенизации (125 мМ KCl, 1G mM HEPES), перемешивали в течение 5 минут при разных температурах (18 и 28 °С) и помещали в камеру Горяева. Ансамбли исследовали микроскипией в темном поле и изображения фиксировали с помощью видеокамеры. Для каждого препарата проводили морфометрический анализ девяти случайно выбранных полей зрения, содержащих около 2GGG объектов. Дыхание митохондрий исследовали полярографически, используя термостатируемую полярографическую ячейку с компьютерной регистрацией и обработкой полярограмм. Измерения проводили при 2б и 37°С для митохондрий сердца и мозга, соответственно. Скорость дыхания вычисляли по снижению содержания кислорода в ячейке в 1 мин на 1 мг митохондриального белка. Для определения фагоцитарной активности нейтрофилов использовали реакционную смесь состава: гепарин G,8 мкл; кровь 2G мкл; G,2% нитросиний тетразолий 2G мкл; Смесь наносили на предметное стекло и добавляли 1G мкл G,1% липополисахарида из Salmonella typhimurium. После перемешивания каплю смеси термостатировали в течение 3G минут при 37 °С во влажной камере. Каплю смывали G, 15 М фосфатным буфером (рН 7,2), готовили прижизненный препарат и число фагоцитирующих нейтрофилов в площади препарата определяли, регистрируя клетки, содержащие гранулы формазана.

Количество генерируемой митохондриями перекиси водорода определяли в присутствии сукцината и антимицина А [13] при 25°С по интенсивности хемилюминесценции люминола в присутствии пероксидазы хрена при 425 нм. Митохондрии сердца (G,5 мг белка) добавляли к 1 мл среды, содержащей 12G mM KCl, 1G mM HEPES (pH 7.4), G.5 mM EDTA, 12,5 мкМ люминола и 1,1 единиц пероксдазы. Концентрацию перекиси выражали в нмоль/мин/мг белка. Белок определяли по Лоури. Статистический анализ результатов проводили по критерию Стьюдента

Результаты. В табл. 1 представлен вес животных в конце эксперимента и данные исследования органов. Длительное включение в рацион железа являлось очевидным стрессом для животных, особенно старых. Все животные этой группы имели серую взъерошенную шерсть. Наблюдались задержка роста, снижение накопления внутреннего жира, инволюция тимуса. Средняя масса печени и внутреннего жира была соответственно в 1,2 и 1,б раз меньше, чем у контрольных животных. Брыжейка выглядела опустошенной. Тимус большинства животных, потреблявших железо, был вялым и имел точечные кровоизлияния и очаги некроза. Другие органы (легкие, почки, сердце и селезенка) не отличались от контроля. У растущих животных по сравнению со взрослыми изменения были менее выражены. Потребление железа привело в этой группе животных даже к росту веса по сравнению с контролем, что связано с более интенсивной утилизацией железа в растущем организме. Добавление ЭВМ к рациону получающих железо крыс устраняло вызванные железом повреждения у взрослых животных: все физиологические показатели были близки к контролю. У растущих животных ЭВМ усиливал увеличение веса тела, печени, внутреннего жира и, особенно, тимуса.

Потребление с пищей железа увеличивало уровень МДА в митохондриях мозга и сердца, в печени растущих и взрослых

Таблица 1

Масса тела и внутренних органов крыс, получавших корм с добавкой железа или железа и ЭВМ

Масса, г Печень, г Почки, г Жир, г Тимус, г Надпочечники, г

Самки крыс в возрасте 3 мес., начальный вес 18G—2GG г

Контроль 3GG±6,8 1 1±G,6 18,8±G,9

Fe 277±Ю,3 8,8±1,G* Ю,5±1,8*

Fe+ЭВМ 29б±8,4 1G,6±G,2 15±1,9

Самцы крыс в возрасте 1,5 мес., начальный вес 100-130 г

Контроль 4GG±1,8 14±G,35 3,4±G,12 11,3+1^ 0,067±0,007

Fe 429±14 14,5±1,2 3,3±G,G9 13±1,G G,6±G,1 0,075±0,006

Fe+ЭВМ 423±2б 15,3±1,G 3,4±G,28 15,8±1,7 0,95±0,09 0,064±0,011

* Р < 0,05 относительно контроля

животных (табл. 2). Увеличение было высоким (в 1,9 раз) в митохондриях мозга. В эритроцитах прием железа по-разному влиял на перекисное окисление липидов у животных разных возрастов: у взрослый животных увеличивал, у растущих - снижал уровень МДА. У растущих животных добавка железа расходуется на поддержание основного пути его утилизации - на формирование эритроцитов, снижая тем самым повреждающее действие железа на клетки и предотвращая окислительное повреждение.

У взрослых животных образование эритроцитов не столь интенсивно и перегрузка клеток железом и их окислительное повреждение более выражены, чем у растущих животных. Прием ЭВМ приводил к снижению МДА в обеих группах по сравнению с контролем. Это свидетельствует об антиоксидантном действии препарата. Развитие окислительного стресса, вызванного приемом железа, сопровождалось изменениями со стороны системы антиоксидантной защиты. У растущих животных АОА крови на фоне приема железа повышался, а ЭВМ нормализовал уровень АОА крови (рис. 1). Рост АОА крови на фоне приема железа у молодых животных является компенсаторной реакцией в ответ на повышение скорости генерации активных форм кислорода под действием приема железа и свидетельствует о напряжении системы антиоксидантной защиты организма. ЭВМ нормализует уровень АОА крови, что является следствием ослабления давления окислительного стресса на систему антиоксидантной защиты. У взрослых животных прием железа снижал уровень АОА крови, и ЭВМ не предотвращал этого спада (данные не представлены). На фоне приема железа шло изменение параметров дыхания митохондрий, что проявлялось в гиперактивации дыхания на сукцинате в митохондриях сердца и снижении скорости дыхания в мозге у особей, получавших железо (рис. 2А). Прием ЭВМ предотвращал изменение дыхания в митохондриях.

Митохондрии являются одними из основных источников супероксида и перекиси водорода в клетке. Генерация этих активных форм кислорода зависит от скорости дыхания: увеличение скорости дыхания приводит к снижению генерации Н2О2 [13-15]. Образование перекиси мы исследовали на митохондриях сердца, где низкий уровень каталазы.

□ Кровь 0 Эритроциты

Рис. 1 Антиоксидантная активность гемолизатов цельной крови и эритроцитов крыс, получавших корм, обогащенный железом или железом с добавкой ЭВМ. За условную единицу принимали 50% ингибирование аутоокисления адреналина в стандартных условиях. * Р < 0.05 относительно контроля

Как и ожидалось, скорость образования перекиси в митохондриях сердца с гиперактивированным дыханием (в группе, получавшей железо) была ниже, чем в контроле (рис 2Б). Однако, хотя ЭВМ приводил к снижению скорости дыхания митохондрий крыс, получавших железо, это не приводило к увеличению генерации Н2О2. Это может быть проявлением антиоксидантной активности ЭВМ, которая предотвращает избыточную продук-

цию перекиси, вызванную снижением скорости дыхания. По-видимому, это связано со способностью ЭВМ уничтожать супер-оксидный анион-радикал - предшественник перекиси.

160 -|

14O -

| 12O -

ф

ю

u 1OO -

Л

1 SO -о

s SO -от

2 4O -н

2O

O

.-RJ

ІГ| I I

1 ТІ

li-

A

Контроль

Fe Fe + ЭВМ

Рис. 2 Скорость дыхания и генерации перекиси водорода в митохондриях крыс, получавших корм, обогащенный железом или железом и ЭВМ. A: скорость дыхания; Б: генерация перекиси водорода. Сплошные линии -митохондрии сердца взрослых крыс, пунктирные линии - митохондрии мозга растущих крыс. * P < 0.05; ** P < 0.01 compared with control

Таблица 2

УровеньМДА в тканях крыс, получавших с пищей препарат железа или препарат железа в сочетании с ЭВМ

Группы Растущие животные Взрослые крысы

Митохонд- рии мозга, нмоль/мг белка Гомогенат печени, нмоль/мг белка Эритроци- ты, мкмоль/л Митохонд- рии сердца, нмоль/мг белка Эрит- роци- ты, мкмол ь/л

Кон- троль 8,7±0,14 G,9±G,14 309±19 2,2±0,4 553±8

Fe 13,3±0,45* 1,7±G,G9* 250±17 2,6±0,2 588±8

Fe+ЭВМ 9,4±0,85 — 266±26 2,0±0,2 5G6±1 4

* Р < 0.05 относительно контроля

Ранее нами был разработан тест, позволяющий оценивать состояние митохондрий, который включает измерение способности митохондрий в гомогенате образовывать комплексы - ансамбли с участием эндоплазматического ретикулума. Этот тест очень чувствителен к физиологическому состоянию организма [12]. Разрушение ансамблей говорит о повреждении митохондрий. Размер ансамблей митохондрий печени взрослых крыс, получавших железо, снижался на 30%. Одновременный прием ЭВМ предотвращал вызванное железом разрушение (табл. 3). У растущих животных прием железа не вел к изменению размера митохондриальных ансамблей, что говорит об отсутствии нарушений в структурном взаимодействии митохондрий и эндоплаз-матического ретикулума.

Таблица 3

Средняя площадь митохондриальных ансамблей в гомогенатах печени взрослых крыс

Группы животных Площадь митохондриальных ансамблей, |om2

Контроль 55,7±5,2

Fe 42^2^*

Fe+ЭВМ 56,G±2,8

В процессах фагоцитоза повреждающее действие железа и защитный эффект ЭВМ были особенно ярко выражены. У взрослых животных длительное включение железа в рацион приводило к значительному ингибированию иммунной активности полиморфноядерных лейкоцитов, что проявлялось по снижению способности к адгезии, уменьшению диаметра клеток и фагоцитарной активности после стимуляции липополисахаридом из

Salmonella typhimurium (рис. 3А). У принимавших железо животных способность нейтрофилов к адгезии снижалась на 75%, диаметр активированных клеток - на 50%, число клеток с включенными гранулами НСТ снижалось на 90%. Включение ЭВМ в рацион животных, получавших железо, в значительной степени предотвращало по всем показателям вызванные железом нарушения. Нарушения со стороны иммунной системы, вызванные железом, проявлялись также морфологическими изменениями другой иммунной ткани - тимуса, где наблюдались дряблость, точечные кровоизлияния, очаги некроза. У взрослых крыс эти изменения были более выраженными и наблюдались практически у всех животных (Рис3Б). Прием ЭВМ примерно втрое сокращал повреждения тимуса как у взрослых, так и у растущих крыс.

Рис. 3 ЭВМ предотвращает иммунные нарушения у крыс, вызванные Ее-обогащенной диетой. А: Адгезия, фагоцитоз, и диаметр (слева направо) активированных нейтрофилов у взрослых крыс, получавших обогащенный железом корм без добавки или с добавкой ЭВМ. Б: Процент животных с повреждениями в тимусе (кровоизлияния, очаги некроза, дряблость) при потреблении с кормом железа или железа в комбинации с ЭВМ. *Р < 0.001;

** Р < 0.05 относительно контроля.

Продолжительное включение в пищу добавки железа в низких лечебных дозах может вести к патологическим нарушениям, степень тяжести которых корреллирует с уровнем индуцированного железом окислительного стресса. У растущих животных повреждения менее выражены, чем у взрослых. Окислительный стресс проявлялся ростом уровня МДА в тканях и вел к увеличению или снижению АОА крови (в зависимости от тяжести окислительного стресса). На рис 4 видно, что вес тела и содержание МДА связаны обратной зависимостью в обеих экспериментальных группах. Чем успешнее проходило формирование организма, тем меньшее количество МДА содержалось в эритроцитах.

§ 600 * г

х- 500

| 400 о

н 300 а £ 200 <

100 0

200 300 400 500 600

Масса тела в конце эксперимента, г

Рис. 4. Соотношение между массой тела животных в конце эксперимента и уровнем малонового диальдегида в эритроцитах

Заключение. Известно, что многие заболевания сопровождаются развитием окислительного стресса и нарушением обмена железа. Последнее приводит к снижению иммунитета. Мы обнаружили, что ЭВМ защищает иммунные клетки (белой крови и тимуса) от повреждения при развитии окислительного стресса in vivo, вызванного длительным приемом пищи, обогащенной железом. ЭВМ предотвращает развитие окислительного стресса в тканях и сохраняет структурную и функциональную активность митохондрий, особенно сердца. Выявленная нами способность улучшать функциональное состояние митохондрий сердца, а также способность увеличивать уровень гликогена и снижать

60 сек

Б

ацидоз в сердечной мышце подтверждают данные С.А.Мухина о лечебном действии препарата и показывает его механизмы.

Антиоксидантная активность, продемонстрированная нами in vivo, а также иммунопротекторные свойства препарата лежат и в основе его противотуберкулезного действия. Исследования позволяют надеяться, что ЭВМ может быть использован в терапии заболеваний, патогенез которых первично обусловлен нарушением реутилизации железа - атаксии Фридриха, р-талассемии, последствиями гемодиализа, для снижения побочных эффектов антибиотиков и профилактики инфекционных и респираторных заболеваний. Для лечения этих патологий применяют лекарственные средства с побочным действием. Особенно токсичны противотуберкулезные препараты новых поколений. Использование нетоксичного природного препарата, поддерживающего иммунную систему человека, весьма актуально.

Литература

I.LitvinovaE.G. et al. // Mitochondrion.- 2002.- Vol.1.- P.523.

2.Ovsepyan A.A. et al. Young doctors on the threshold of the

third millennium, materials of the conference.- Yerevan, 2001.- P.103

3.Дмитриева Н.В. и др. Апитерапия сегодня.- Рыбное, 1993.- С.59.

4.Гусак Ю.К. и др.// Проблемы эндокринол в акуш-ве и ги-некол.- М., 1997.- С.146.

5.Rachkov A.K. et al. // J. Pharm. Pharmacol.- 1994.- Vol.46, №3.- P.221-225.

6.Спиридонов Н.А. и др. Янтарная кислота в медицине, пищевой промышленности, сельском хозяйстве.- Пущино, 1996.-С. 187-195.

7.SpiridonovN.A. et al. // Comp. Biochem. Physiol (С).- 1992.-Vol. 102.- P.205-208.

8.Сирота Т.В. и др. // Биоантиоксидант. Тез. 6-й межд. конф.- М., 2002.- С.528-530.

9.Пат. 2038086 РФ. Способ получения биологически активного продукта из личинок большой восковой моли/ Спиридонов Н. А., Рачков А.К., Мухин С.А., Кондрашова М.Н.. // Бюл. №18.- 27.06.1995

10.Lai J. C. K, Clark J. B. // Methods in Enzymology.- 1979.-Vol.55.- P.51-59.

II.Ohkava H. // Analytical Biochemistry.- 1979.- Vol.95.-Р.351-358.

12.Kondrashova M. N. et al. // Mitochondrion.- 2001.- Vol.1.-P.249-267.

13.Litvinova E.G. et al. Proc.of the XIth Biennal Meet. of the Society for Free Radical Research International.- Paris, France, 2002.- P.93-96.

14.BarrostM. et al.//J.Biol. Chem.- 2004.- Vol.279.- P.49883.

15.Balaban R. S. et al // Cell.- 2005.- Vol.120.- P.483^95.

THE ANTIOXIDATIVE AND IMMUNOPROTECTIVE EFFECTS OF THE BEE MOTH LARVAE EXTRACT DURING OXIDATIVE STRESS IN RATS INDUCED BY INTAKE OF IRON-ENRICHED FEED

A.A. OVSEPYAN, N.I. VENEDIKTOVA, M.V. ZAKHARCHENKO.,

R.E. KAZAKOF, E.G. LITVINOVA, M.N. KONDRASHOVA,

I.R SAAKYAN, T.V. SIROTA, I.G. STAVROVSKAYA, P.M.SHVARZBURD

Summary

The mechanism of biological activity of a new food additive that we have developed on the basis of the ancient folk antituberculosis remedy, the bee moth (Galleria mellonella) larvae extract , is presented. The antioxidative and immunoprotective effects were studied in a model of oxidative stress induced in rats by high-iron diet. A long-term consumption of feed supplemented by iron at doses close to those used in veterinary practice led to the development of oxidative stress in rats, and to disturbance of immune and mitochondrial functions. The administration of the extract to iron-fed rats eliminated or substantially reduced the oxidative stress and related pathological changes caused by long-term high-iron intake.

Key words: bee moth, Galleria mellonella larvae

УДК 615.015.21

КОМПЛЕКСНАЯ КОРРЕКЦИЯ БОЛЬНЫХ ДОРСОПАТИЯМИ МЕТОДАМИ БИОДИНАМИЧЕСКОЙ МАНУАЛЬНОЙ ТЕРАПИИ И ГОМЕОПАТИИ

О.Г. САФОНИЧЕВА, Г.А. КОРОЛЕВА*

Болезни позвоночника и мышечно-суставной системы все чаще встречаются у людей молодого и среднего возраста, сопровождаются длительной утратой трудоспособности и снижением качества жизни. Высокая обращаемость (второе место после ОРЗ) и большие экономические затраты, связанные с госпитализацией, способствуют разработке новых технологий реабилитации пациентов данной категории [1—5]. Широко используется термин «дорсопатия», который в МКБ Х пересмотра объединяет болевые синдромы в области туловища и конечностей невисцеральной этиологии, связанные с дегенеративными заболеваниями позвоночника и межпозвонковых дисков. К дорсалгиям относят не-вертеброгенные болевые синдромы, связанные с формированием триггерных точек в фасциях и мышцах. Часто в клинике болевого синдрома выделяют миофасциальный, вертеброгенный, висцеро-генный и психогенный компоненты.

В развитии дорсопатий шейно-грудной локализации большая роль отводится неадекватному позному напряжению, гиподинамии (чаще это встречается у лиц, ведущих гипокинетический образ жизни в связи с профессиональными нагрузками), метаболическим нарушениям (ожирение), которые при этом возникают, эмоциональным перегрузкам и стрессовым факторам. Наряду с вовлечением в патологический процесс костно-суставных структур, значительную роль в клинической картине болевого синдрома в спине играет поражение мышц, связок и регионарной сосудистой системы. Миофасциальные и мышечно-тонические синдромы шейной локализации становятся при этом и причиной боли, и причиной компрессии сосудистых сплетений на экстра-краниальном уровне, что вызывает ухудшение мозгового кровообращения. Вегето-сосудистый, ирритативно-компрессионный вертеброгенный компоненты и афферентно-эфферентная нейро-вазальная дизрегуляция ускоряют декомпенсацию в сосудистой системе вертебрально-базилярной системы.

В медицинскую практику широко входят нелекарственные методы, направленные на активизацию собственных защитных механизмов организма, нормализующие измененные показатели гомеостазиса. Среди нелекарственных методов, направленных «внутрь организма», наибольшей популярностью пользуются акупунктура, мануальная терапия, биорезонансная терапия, гомеопатия. Исследования показывают эффективность применения комплексных гомеопатических препаратов фирмы «Хеель» при терапевтических, неврологических и психосоматических патологических состояниях. Появляются работы, показывающие целесообразность использования методов мануальной терапии с целью коррекции биомеханических нарушений (функциональных блокад, постурального дисбаланса мышц) в значимых регионах позвоночника, которые лежат в основе болевого ирритативного или дефицитарного синдрома.

Однако в доступной литературе нет описания методики комплексного воздействия на основные патогенетические звенья и нормализующие механизмы саногенеза, с учетом структурной и информационно-метаболической составляющих гомеостаза у пациентов с шейно-грудной дорсопатией.

Цель - разработка комплексного восстановительного лечения шейно-грудной дорсопатии с применением методов мягкотканевой мануальной терапии и гомеопатии.

Материалы и методы. С целью постановки диагноза, а также объективизации эффективности лечения было обследовано и пролечено 98 больных с шейной дорсопатией. Средний возраст больных составил 45±1,4 лет. Мужчин - 40 человек, женщин - 58 человек. Длительность заболевания к моменту обследования составляла от нескольких месяцев до 18 лет. Средняя продолжительность заболевания составила от 3 до 10 лет (в среднем 5,1±1,32 лет), что говорит о хроническом течении дорсопатий.

Всем больным было проведено следующее обследование:

1. Клинико-неврологическое обследование.

* Кафедра нелекарственных методов лечения и клинической физиологии ММА им. И. М. Сеченова