УДК 636.4:619.615
АНТИОКСИДАНТНЫЙ ЭФФЕКТ ПРЕПАРАТА «ПОЛИСОРБ ВП» ПРИ МИКОТОКСИКОЗАХ СВИНЕЙ
А.А. Грекова, асп. (ГНУ СНИИЖК)
Введение: В условиях продолжительного окислительного стресса, вызванного патологическими факторами, среди которых важное место отводится токсическим веществам, собственные защитные системы зачастую не справляются с обезвреживанием генерируемых свободных радикалов, что приводит к повреждению клеточных структур, и в первую очередь мембран. В таких случаях стратегия фармакологического вмешательства предусматривает оптимизацию антирадикальных мероприятий. В связи с чем мы изучали антиоксидантное действие препарата «Полисорб ВП» при «окислительном» стрессе, вызванном действием микотоксинов.
Материалы и методы: Работа проводилась на
сельскохозяйственных животных - свиньях крупной белой породы 7-9 месяцев, средний вес которых составил 65±2,5 кг. Для проведения эксперимент нами было выбрано хозяйство «Восход» Петровского района Ставропольского края. Для профилактики и лечения микотоксикоза нами был выбран препарат - энтеросорбент «Полисорб ВП» производства ЗАО «Полисорб» Россия, который был апробирован для лечения микотоксикозов птиц и показал хорошие результаты. Нами были сформированы следующие группы животных: 1-я опытная группа -в рацион добавлялась профилактическая доза (0,2 г/кг массы животного) препарата - сорбента «Полисорб ВП» и 2-я опытная группа - в рацион добавлялась лечебная доза (0,5 г/ кг массы) препарата - сорбента «Полисорб ВП». Во всех группах животных находилось по 8 голов. Животным опытных групп препарат-сорбент «Полисорб ВП» задавался вместе с кормом 2 раза в день в течение 7-10 дней до исчезновения симптомов микотоксикоза.
В кормах из этого хозяйства уже на протяжении нескольких лет Петровской межзональной ветеринарной лабораторией обнаруживались микотоксины. В зимний период этого года в данном хозяйстве отмечался массовый падеж молодняка свиней. В кормах из этого хозяйства и в этом году были обнаружены следующие микотоксины: зеараленон, Т 2-токсин.
Перед началом эксперимента свиньи прошли ветеринарный осмотр, в результате которого у большинства животных были обнаружены симптомы хронического микотоксикоза.
Содержание малонового диальдегида (МДА) определяли спектрофотометрическим методом - измерением реагирующих с тиобарбитуровой кислотой соединений, активность каталазы определяли спектрофотометрически в реакции Н202 с молибдатом аммония, содержание а-токоферола и ретинола определяли методом жидкостной хроматографии на хроматографе «Милихром 4»,
содержание холестерина в сыворотке крови определяли с помощью набора фирмы «І_асІіета» (Чехия), кислотную резистентность эритроцитов определяли спектрофотометрически (к = 730 нм) по проценту гемолиза эритроцитов при pH = 4.
Результаты и их обсуждение: Исследование состояния про -антиоксидантного баланса в организме свиней при микотоксикозах показало активацию процесса перекисного окисления липидов (ПОЛ), о чем свидетельствует повышенное образования в крови больных животных альдегидных продуктов пероксидации липидов и снижение антиоксидантной защиты. Так, мы наблюдаем повышение содержания в крови больных животных одного из конечных продуктов ПОЛ -малонового диальдегида (МДА). Активация свободно-радикальных процессов, как правило, приводит к снижению антиоксидантной защиты. В нашем эксперименте при микотоксикозах свиней мы наблюдаем низкую активность каталазы и содержание антиоксидантных витаминов Е и А в крови больных животных (табл. 1, 2). Применение препарата «Полисорб ВП» в дозах 0,2-0,5 г/кг уменьшает содержание МДА, увеличивает активность каталазы и содержание антиоксидантных витаминов А и Е. Эффект от применения препарата «Полисорб ВП» дозозависим.
Таблица 1. - Влияние препарата «Полисорб ВП» на показатели
антиоксидантной системы у свиней на откорме
Группы МДА Каталаза мкМольН2О2/мл*мин.
Исх. данные до лечения 3,99±0,75 1,058+0,09
Полисорб ВП (0,2г/кг) 2,89±0,25* 1,14±0,03
Полисорб ВП (0,5г/кг) 2,68±0,29* 1,13±0,02
*-Р<0,05 по сравнению с исходными данными.
Таблица 2. - Влияние препарата «Полисорб ВП» на содержание антиоксидантных витаминов у свиней на откорме_______________
Группы Витамин Е мкг\мл. Витамин А МЕ\мл.
Исх. данные до лечения 1,62±0,21 0,24±0,07
Полисорб ВП (0,2г/кг) 3,56±2,13* 0,3±0,1
Полисорб ВП (0,5г/кг) 5,19±1,8* 0,45±0,08*
Норма 5,0-20,0 0,5-2,0
*-Р<0,05 по сравнению с исходными данными.
Образующиеся в клетке свободные радикалы могут инициировать вторичные свободнорадикальные реакции, вступая во взаимодействие с различными клеточными компонентами: белками, нуклеиновыми
кислотами и липидами. В результате происходит перекисная деградация молекул фосфолипидов, что влечёт за собой нарушение структуры клеточных мембран и липопротеидов. Витамин Е обладает антиоксидантными свойствами, т.е. защищает полиненасыщенные жирные кислоты и липиды клеточных мембран от перекисного окисления и повреждения свободными радикалами. Токоферол может выполнять структурную функцию, взаимодействуя с фосфолипидами биологических мембран. Бета-каротин способен нейтрализовать активные формы кислорода и тем самым защитить от разрушения иммунные клетки. Препарат «Полисорб ВП» снижает поступление микотоксинов в кровь, которые, в свою очередь, являются про-оксидантами, запуская процесс образования свободных радикалов. Снижение активности свободнорадикальных процессов приводит к уменьшению расходования витаминов А и Е на инактивацию микотоксинов. Так, в отличие от антиоксидантных ферментов, витамины при инактивации свободных радикалов расходуются в эквимолярном соотношении, т.е. количество инактивированных радикалов равно количеству окисленных при этом антиоксидантов. При снижении процесса ПОЛ происходит нормализация содержания данных витаминов в крови. Это связано с включением компенсаторных механизмов, таких как активация их поступления в кровь из желудочно-кишечного тракта, перераспределение между тканевыми депо и увеличение скорости их восстановления.
В нарушении микро- и макрореологических свойств крови немалая роль принадлежит интенсификации свободнорадикальных процессов. Так, показано, что активация в эритроцитах свободнорадикальных процессов уменьшает текучесть и деформируемость эритроцитарных мембран и морфологию эритроцитов, тем самым изменяя агрегационную и деформационную способность этих клеток. В нашем эксперименте активация процесса ПОЛ у больных животных приводит к повышению резистентности эритроцитов к окислительному стрессу. Так, в обеих группах экспериментальных животных наблюдается повышение кислотной резистентности эритроцитов. Применение препарата «Полисорб ВП» снижает уровень холестерина в крови и кислотную резистентность эритроцитов (табл. 3).
Таблица 3. - Влияние препарата «Полисорб ВП» на кислотную резистентность эритроцитов при рН=4 и содержание холестерина в крови при микотоксикозах свиней_______________________________
Данные Холестерин (мМ/л) Резистентность (% гемолиза)
До лечения 1,31 ±0,03 90,3 ±2,37
Полисорб ВП (0,2г/кг) 0,90±0,03* 94,8±2,6
Полисорб ВП (0,5г/кг) 0,80±0,04* 92,8±0,37
*-Р<0,05 по сравнению с исходными данными.
Повышение резистентности эритроцитов при микотоксикозах мы объясняем структурными изменениями в мембранах эритроцитов. Так, литературные данные свидетельствуют о повышении резистентности мембран к ПОЛ вследствие изменения их фосфолипидного состава, соотношения фосфолипиды/холестерин в сторону повышения содержания в них холестерина. Также изменяется жирнокислотный состав липидов и фосфолипидов мембран за счет снижения в них полиненасыщенных и увеличения насыщенных жирных кислот. Полученные результаты позволяют полагать, что немедленная реакция эритроцитов на изменение интенсивности ПОЛ характеризует высокую степень участия этих клеток не только в гемореологии, но и в системе антиоксидантной защиты. По-видимому, эритроцитарное звено первым реагирует на изменение активности свободнорадикального окисления. Таким образом, механизм антиоксидантного действия препарата связан со снижением поступления микотоксинов из желудочно-кишечного тракта в кровь. Данный эффект может быть обусловлен адсорбционной способностью препарата «Полисорб ВП» за счет содержащегося в нем кремнезема.