CC BY
14
УДК 577.125.33:636.6:612.34/.35
Цехмктренко С.1., д-р с.-г. наук, професор Пономаренко Н.В., канд. с.-г. наук (e-mail: Ponomarenkon@ukr.net) Яремчук Т.С., канд. с.-г. наук ® Быоцершеський нацюнальний аграрный утеерситет
АНТИОКСИДАНТНИЙ СТАТУС П1ДШЛУНКОВО1 ЗАЛОЗИ ТА ПЕЧ1НКИ
ПЕРЕПЕЛ1В
Висетлет результаты дослгдження актиеност1 фермент1е супероксиддисмутази i каталази, а також емкту продуктге пероксидного окиснення лiпiдiе у тдшлункоет залозi та печтщ перепелiе у постнатальному перiодi онтогенезу. Доеедено низьку актиетсть системи антиоксидантного захисту протягом першого мкяця життя птищ, що призеодить до тдеищення емкту продуктiе пероксидного окиснення лiпiдiе.
Ключовi слова: тдшлункоеа залоза, печтка, пероксидне окиснення лiпiдiе, ферменти антиоксидантного захисту, перепели.
Вступ. Утвореш у процесах пероксидного окиснення лпдав (ПОЛ) активш форми Оксигену зустрiчаються в рiзних кл^инних органелах, а сам цей процес за юнуючими даними е не тшьки ушверсальним модифжатором властивостей бюлопчних мембран, але й важливим фiзiологiчним регулятором !х структури та функцш [1]. Надзвичайно реакцшноздатними активними формами Оксигену е супероксидний анюн-радикал (О2), гiдроксильний радикал (ОН^), штроксильний радикал (NO^) i пероксид гщрогену (Н2О2). Змiна рiвня ПОЛ кл^инних мембран е характерною особливiстю стресу рiзноl етюлоги [2].
Постнатальний перюд розвитку органiзму супроводжуеться встановленням механiзмiв метаболiчноl адаптаци до нових умов дихання та живлення. Важливе мкце у формуваннi механiзмiв пристосування оргашзму до навколишнього середовища належить системi антиоксидантного захисту (АОЗ) [3]. Висока актившсть антиоксидантно! системи притаманна тканинам з штенсивним перебiгом вiльнорадикальних процеЫв, до яких належать тканини печшки та шдшлунково1 залози.
Метою роботи було дослщження функцiонування системи антиоксидантного захисту та вмюту продуктiв пероксидного окиснення лшвдв у пiдшлунковiй залозi й печiнцi перепелiв у постнатальному перiодi онтогенезу.
Матер1ал i методи. У дослщах використовували групу перепелiв породи фараон - 50 голiв. Доступ до корму i води був вшьним. Вся птиця одержувала стандартний комбiкорм Пiсля декаттаци птищ пiд легким ефiрним наркозом проводили бiохiмiчнi дослiдження у пiдшлунковiй залозi та печiнцi, починаючи з 1-денного до 4-тижневого вiку з штервалом 1-2 тижнi. Активнiсть каталази (КФ 1.11.1.6; КАТ) визначали спектрофотометричним методом за здатшстю Н2О2
® Цехмктренко С.1., Пономаренко Н.В., Яремчук Т.С., 2011
244
утворювати стшкий забарвлений комплекс iз молiбдатом амонш [4]. Визначення активност супероксиддисмутази (КФ 1.15.1.1; СОД) проводили за допомогою тетразолш нiтросинього, який вступав у реакцш iз супероксидними радикалами, утвореними внаслщок взаемоди NADH iз феназинметасульфатом [5]. Рiвень процесiв ПОЛ оцiнювали шляхом визначення вмюту ТБК-активних продуктiв [6], дieнових кон'югатiв (ДК) [7] та гiдропероксидiв лiпiдiв (ГПЛ) [8]. Бюметричну обробку результатiв проводили на комп'ютерi з урахуванням t-критерiю Стьюдента.
Результати дослщження. У результатi проведених дослiджень встановлено (табл. 1), що печiнка та тдшлункова залоза добових перепелят характеризуются високим вмiстом ДК, ГПЛ та високою активнiстю СОД.
Таблиця 1
Показники пероксидного окиснення лтЫв 1 актившсть фермент1в антиоксидантного захисту у печшщ та пiдшлунковiй залозi перепелiв
__(М ± т, п = 5)_
Показник Матер1ал В1к, тижн1
Добов1 1 2 4
Пдропероксиди лшщв, ум.од/г Печ1нка 19,15 ±0,82 16,71 ±0,61 21,22 ±0,47лл 19,73 ±0,54
П1дшлункова залоза 21,09 ±1,76 17,75 ±0,89 25,99 ±0,82лл 23,80 ±0,16
Д1енов1 кон'югати, ум.од/г Печ1нка 6,96 ±0,15 2,50 ±0,09ллл 2,65 ±0,10 3,22 ±0,06лл
Шдшлункова залоза 11,52 ±0,89 4,69 ±0,12ллл 5,69 ±0,15лл 6,37 ±0,17
ТБК-активш продукти, мкмоль/г Печ1нка 9,86 ±0,63 13,15 ±0,90 11,43 ±0,86 15,48 ±0,62л
П1дшлункова залоза 7,52 ±0,80 9,90 ±1,45 13,04 ±1,16 19,14 ±1,03
Супероксид-дисмутаза, ум.од/г Печшка 9,09 ±0,27 4,23 ±0,29ллл 4,62 ±0,20 6,41 ±0,34лл
П1дшлункова залоза 29,31 ±3,21 11,56 ±1,47лл 37,14 ±4,24лл 7,92 ±0,43ллл
Каталаза, мккат/г Печ1нка 12,46 ±0,85 17,76 ±1,24л 19,04 ±0,80 20,81 ±0,60
П1дшлункова залоза 2,44 ±0,28 3,32 ±0,39 2,60 ±0,22 3,23 ±0,23
Прим1тка: л - р1зниця в1ропдна пор1вняно з показниками попереднього в1ку: л - р<0,05; лл -р<0,01; ллл - р<0,001.
Процес виведення пташенят може розглядатися як критичний фiзiологiчний перiод 1х розвитку, пов'язаний iз тдвищеною концентрацieю атмосферного оксигену пiд час переходу на легеневе дихання, а також з ктотним тдвищенням метаболiчноl активностi тканин i посиленням генераци активних форм оксигену [3].
Протягом першого тижня постнатального онтогенезу вщбуваеться зменшення вмiсту супероксиданiонрадикалiв завдяки високш активностi СОД у
печшщ та пщшлунковш 3ano3i добових пташенят. Включення у мехашзм антиоксидантного захисту СОД у перший тиждень життя птицi пщтверджуеться зниженням у пiдшлунковiй зaлозi 1-тижнево1 птицi вмiсту ДК майже в два рази (р<0,001), ГПЛ - на 15,8% з одночасним зниженням активност СОД майже втричг Подiбнi змiни вiдбувaються i в печшщ 1 -тижневих пташенят.
Певна зaкономiрнiсть виявлена в aктивностi каталази, яка шактивуе пероксид гiдрогену, утворений тд час перетворення супероксидaнiонрaдикaлу СОД. Оскшьки aктивнiсть каталази у пiдшлунковiй зaлозi в першi тижнi постнатального онтогенезу невисока, то надлишок пероксиду гщрогену, утворений у результат високо1 активност СОД не iнaктивуeться в повному обсязi каталазою та знижуе актившсть СОД. У печшщ перепелiв у цьому вщ спостерiгaeться вiрогiдне тдвищення aктивностi каталази на 42,5% (р<0,05), що свiдчить про бiльшi компенсаторш можливостi тканин цього органа та висою детоксикaцiйнi можливостi.
Одержaнi даш вказують на те, що у печшщ та пщшлунковш зaлозi 2-4-тижневих пташенят вiдмiчaeться вiрогiдне пiдвищення вмiсту дieнових кон'югaтiв та гiдропероксидiв лiпiдiв (р<0,01). У печiнцi виявлеш бiльш динaмiчнi змiни вмiсту ТБК-активних продукив, нiж у пiдшлунковiй залозг Вiрогiдно пiдвищуeться вмiст ТБК-активних продукив у печiнцi 4-тижнево1 птицi (р<0,05). Це означав, що iнтенсивнiсть вшьнорадикальних процесiв зумовлюеться, перш за все, особливостями метaболiзму певних тканин та 1хшм функцiонaльним навантаженням.
Активнiсть СОД у пщшлунковш залози 2-тижневих пташенят вiрогiдно пiдвищуеться у 3,2 рази порiвняно з 1-тижневою птицею, а в 4-тижневому вiцi знижуеться в 4,6 рази (р<0,001). У печiнцi актившсть СОД пщвищуеться лише в 4-тижневому вiцi на 38,7%. Актившсть каталази у цей час у дослщжуваних органах змшюеться не вiрогiдно. Пiдвищення вмiсту продуктiв ПОЛ у печшщ та пщшлунковш зaлозi 2-4-тижнево1 птицi, ймовiрно, е реaкцiею на фiзiологiчний стрес, пов'язаний з штенсивними процесами росту перепелiв. Характер змш aктивностi СОД i каталази свщчить про недостатню сформовaнiсть системи АОЗ в цей перюд.
У постнатальному перiодi онтогенезу перепелiв у печшщ виявлеш сильш корелятивнi зв'язки мiж вмiстом ТБК-активних продуктiв та актившстю каталази (г=0,81), дiенових кон'югaтiв та СОД (г=0,79). Вiд'емнi помiрнi зв'язки вiдмiчaються мiж вмiстом дiенових кон'югаив i ТБК-активними продуктами (г=-0,66), гщропероксидами лiпiдiв та ТБК-активними продуктами (г=-0,56), aктивнiстю СОД i каталази (г=-0,55). Вiд'емний сильний корелятивний зв'язок -мiж вмiстом дiенових кон'югаив та aктивнiстю каталази (г=-0,83). Такими ж корелятивними зв'язками характеризуются дослщжуваш показники у пiдшлунковiй зaлозi, а також проявляеться вщ'емний помiрний зв'язок мiж вмiстом ГПЛ та актившстю каталази (г=-0,69), помiрний зв'язок мiж вмiстом ГПЛ i ДК (г=0,66) та ГПЛ i СОД (г=0,57). Зaзнaченi вище зaкономiрностi свiдчaть про те, що у печшщ та пщшлунковш зaлозi кнують подiбнi зaкономiрностi у метaболiчних процесах, що пщтверджуе скооперовaнiсть та взaемообумовленiсть
функцюнування дослщжуваних оргашв. Але поряд i3 цим мiж актившстю СОД i КАТ у печшщ та пiдшлунковiй залозi не виявлеш корелятивнi зв'язки. Це означав, що в дослiджуваних органах е характернi лише для них мехашзми АОЗ, пов'язанi з участю рiзних антиоксидантних ферментiв.
Висновки. Таким чином, характер змш дослiджуваних ферментiв антиоксидантно! системи на фонi пiдвищення вмюту продуктiв лшопероксидаци у печiнцi та пщшлунковш залозi свiдчить про низьку актившсть ферментативно! ланки системи антиоксидантного захисту протягом першого мiсяця життя перепелiв. Перспективою подальших дослiджень е дослщження змiн функцiонування системи антиоксидантного захисту в печшщ та пщшлунковш залозi перепелiв за ди стрес-факторiв та корекцiя природними антиоксидантами.
Л1тература
1.Зенков Н.А., Ланкин В.З., Меньщикова Е.Б. Окислительный стресс: биохимический и патофизиологический аспекты. - М.: МАИК Наука / Интерпериодика, 2001. - 343 с.
2.Барабой В.А. Стресс: природа, биологическая роль, механизмы, исходы. -Киев: Фитосоциоцентр, 2006. - 424 с.
3.Барабой В.А. Биоантиоксиданты. - К.: Книга плюс, 2006. - 462 с.
4.Метод определения активности каталазы / М.А. Королюк, А.И. Иванова, И.Т. Майорова, В.Е. Токарев // Лаб. дело. - 1988. - № 1. - С. 16-19.
5.Чевари С., Чаба И., Секей Й. Роль супероксиддисмутазы в окислительных процессах клетки и метод определения ее в биологических материалах // Лаб. дело. - 1985. - № 11. - С. 678-681.
6.Стальная И.Д., Гаришвили Т.Г. Метод определения малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты // Современные методы в биохимии / Под ред. В.Н. Ореховича. - М.: Медицина, 1977. - С. 66-68.
7.Стальная И.Д. Метод определения диеновой конъюгации ненасыщеных высших жирных кислот // Современные методы в биохимии / Под ред. В.Н. Ореховича. - М.: Медицина, 1997. - С. 63-64.
8.Романова Л.А., Стальная И.Д. Метод определения гидроперекисей липидов с помощью тиоцианата аммония // Современные методы в биохимии / Под ред. В.Н. Ореховича. - М.: Медицина, 1977. - С. 64-66.
Summary
S. Tsekhmistrenko, N. Ponomarenko, Т. Yaremchuk ANTIOXIDANT STATUS OF PANCREAS AND LIVER OF QUAILS
In the article the results of research of activity of enzymes of superoxide dismutase and catalase, and also amount of products of lipid peroxidation, are represented in fabrics of liver and pancreas of quails in the postnatal period of ontogenesis. Low activity of the system of antioxidant defence during the first month of life of birds.
Key words: pancreas, liver, lipid peroxidation, enzymes of antioxidant defence,
quails.
Рецензент - д.с.-г.н., проф., чл.-кор. НААНУ Кирил1в Я.1.
