CC BY
51
HEPATOPROTECTTVE ACTIVITY OF DRY EXTRACT OF HIPPOPHAE RHAMNOIDES L.
S.A. Chukaev, S.M.Nicolaev, O.A.Rodnaeva, L.A.Nagaslaeva (Instittute of General and Experimental Biology SD RAS, Buryat State University, Ulan-Ude)
Pharmacotherapeutical efficiency of dry extract of Hippophae rhamnoides l. leafs in acute toxic hepatitis has been established in experimental condition. Use of phytoextract in the range of experimental therapeutical dose result in increase of enzymes of toxic agents metabolism as well as in decrease of reactions of lipid peroxidation. These effects promote normalization of structure of liver tissue and biochemical parameters of blood.
ЛИТЕРАТУРА
1. Автандилов Г.Г. Медицинская морфометрия. — М., 1990. - 336 с.
2. Карузина И.И., Арчаков АИ. Методы измерения гид-роксилазной активности. // Совр. методы в биохимии. - М.: Медицина, 1977. - С.53-57.
3. Колб В.Г., Камышников B.C. Справочник по клинической химии. — Минск, 1982. — 366 с.
4. Колесова O.E., Маркин А.А., Федорова Т.Н. Перекис-ное окисление липидов и методы определения продуктов липопероксидации в биологических средах. // Лаб. дело. - 1984. - №9. - С.540-546.
5. Королюк М.А., Иванова Л.И., Майорова И.Г. и др. Метод определения каталазы. // Лаб. дело. - 1988. -№ 1. - С. 16-19.
6. Крылова С.Г., Коновалова О.Н., Зуева Е.П. Коррекция экстрактом коры и побегов облепихи крушиновид-ной нарушений гормонально-метаболического статуса организма крыс в условиях стресса. // Эксперим. и клин. фармакол. - 2000. - Т.63, №№4. - С.70-73.
7. Кудрин А.Н., Левшин Б.И., Мехтиев М.А. Фармакотерапия препаратами селена экспериментального гепатита. - Баку, 1982. - 222 с.
8. Мизина Т.Ю., Ситникова С.Г. Противолучевая актив-
ность концентрата сока плодов Hippophae rhamnoides L. // Растит. ресурсы. - 1999. - Т.35, вып.3. - С.85-92.
9. Минаева В.Г. Лекарственные растения Сибири. 5-е изд., перераб. и доп. — Новосибсрск: Наука. Сиб. отд-ние, 1991. - 431 с.
10. Саратиков АС., Венгеровский А.И. Новые гепатопро-текторы природного происхождения. //Эксперим. и клин. фармакол. - 1995. - Т.58, №1. - С.8-11.
11. Скакун Н.П., Письмо Г.Т., Мосейчук И.П. Поражение печени четыреххлористым углеродом. - М., 1989. -164с.
12. Beutler E., Duron O., Kelly B.U. Improved method for the glutathione determination. // J. Lab. Clin. Med. - 1963. -Vol. 61. - P.882-890.
13. Habig W.H., Pabst M.J., Jakoby W.B. Glutathione-S-transferases. The first enzymatic step in mercapturic acid formation. // J.Biol.Chem. - 1974. - Vol.249, №№ 22. -P.7130-7139.
14. Lowry O.N., Roserbrougt N.J., Farr A.L. et al. Protein measurements with the Folin phenol reagent. // J. Biol. Chem. - 1951. - Vol.193, №№ 2. - P.265-275.
15. Nash T. Colorimetric estimation of formaldehyde by means of the hantzsen reaction. // Biochem. J. - 1953. - Vol. 55. - P.416-421.
© ЛУБСАНДОРЖИЕВА П.Б., АЖУНОВА T.A., ШАНТАНОВА Л.Н., УНАГАЕВА A.A., МУХАНОВА Л.Х. -
АНТИОКСИДАНТНАЯ АКТИВНОСТЬ ВОДНЫХ ИЗВЛЕЧЕНИЙ АНТИЯЗВЕННОГО СБОРА ТРАВ IN VITRO
П.Б. Лубсандоржиева, Т.А. Ажунова, Л.Н. Шантанова, А.А. Унагаева, Л.Х. Муханова (Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН, г. Улан-Удэ, директор - проф. В. М. Корсунов)
Резюме. Определена антиоксидантная активность in vitro отваров антиязвенного сбора с различным содержанием биологически активных веществ, отваров 9 отдельных компонентов сбора. Установлено, что АОА водных извлечений антиязвенного сбора определяется наличием фенольных соединений и веществ синергистов. Из изученных растений отвары шиповника, солодки, сушеницы проявляют наиболее высокую антиоксидантную активность.
Ключевые слова. Антиязвенный сбор, антиоксидантная активность, биологически активные вещества.
Практическое использование антиоксидантов (АО) растительного происхождения для регуляции свобод-норадикальных процессов при язвенной болезни желудка продиктовано важностью роли, которую играет система антиоксидантной защиты в течении трофических процессов в слизистой оболочке гастродуоденаль-ной зоны [8]. Известно, что многокомпонентные препараты проявляют более выраженный антиоксидант-ный эффект по сравнению с отдельными химическими соединениями. Этот факт объясняют одновременным комплексным действием БАВ на различные уров-
ни регуляции системы антиоксидантной защиты, усилением эффекта антиоксидантов за счет веществ - синергистов. К таким веществам можно отнести органические кислоты, свободные углеводы, которые не обладают значительной АО активностью, но в смеси с флавоноидами и другими фенольными АО повышают их суммарную АОА, регенерируя их, выводя радикалы АО из сферы реакции окисления [11,14].
Цель данной работы - определение содержания БАВ и антиоксидантной активности водных извлечений из антиязвенного сбора, отдельных компонентов сбора.
Методы и материалы
Антиязвенный сбор (АЯС) состоит из следующих лекарственных растений: соцветий календулы лекарственной, листьев подорожника большого, травы сушеницы топяной, корней солодки, девясила, плодов боярышника, шиповника, кориандра, облепихи. Отвар сбора готовили по методу ГФ XI изд. [4]. Сухой остаток отвара (1:10) антиязвенного сбора составляет 35,80±0,40 мг/мл (отвар сбора ОТ-1). Для получения отвара из указанного сбора с минимальным содержанием липофиль-ных веществ, сбор последовательно экстрагировали гек-саном, хлороформом, 96%-ным спиртом до осветления извлечений. Из высушенного при комнатной температуре шрота готовили отвар (1:10), сухой остаток — 22,20±0,20 мг/мл (отвар сбора ОТ-2). Для получения сбора с минимальным содержанием водорастворимых полисахаридов и аскорбиновой кислоты, сбор трижды экстрагировали дистиллированной водой при постоянном помешивании и при комнатной температуре. Водное извлечение отфильтровывали, сырье высушивали при 30оС. Сухой остаток отвара (1:10) составлял 4,60±0,02 мг/мл (отвар сбора ОТ-3).
Качественный анализ БАВ проводили методом хроматографии на бумаге (БХ), тонком слое сорбента (ТСХ) в различных системах растворителей в присутствии достоверных образцов анализируемых соединений [16]. Для проведения анализа отвар сбора экстрагировали последовательно хлороформом (тритерпеновые сапонины, агликоны флавоноидов), этилацетатом (феноло-кислоты, флавоноиды). Использованы системы растворителей: бензол-ацетон (8:2) -I; гексан-этила-цетат- муравьиная кислота (15:9:2) —II; этилацетат — муравьиная к-та- уксусная к-та - вода (100:11:11:26) -III; бензол-этилацетат (2:1) — IV; 15%-ная уксусная кислота — V; бутанол - уксусная кислота - вода (4:1:2)— VI; хлороформ — этанол (40:17) — VII. Количественное определение БАВ в отварах проведено по описанным в литературе методам: флавоноидов, дубильных веществ, анто-цианов, водорастворимых полисахаридов по методикам ГФ XI [4]; аскорбиновой кислоты — фотоколориметрическим методом [10]; тритерпеновых сапонинов [9], фенолокислот — спектрофотометрическим методом [7], глицирризино-вой кислоты - хроматоспектрофотометрическим методом [12]. Данные исследований приведены в таблице 1. Антиоксидантная активность отваров определена по методу, основанной на способности биологической жидкости тормозить накопление продуктов, реагирующих с тиобарбитуровой кислотой (ТБК) в суспензии желточных липопротеидов (ЖЛП) взятой в качестве
модельной системы окисления [5].
Результаты и обсуждение
С достоверными образцами идентифицированы: в хлороформной фракции отвара - олеаноловая кислота (ТСХ) с Rf— 0,40 (I), 0,65 (IV); урсоловая кислота (ТСХ) с R ! — 0,55 (IV); глицирризиновая кислота (ТСХ) с R Г
- 0,36 (VII); этилацетатной фракции отвара — рутин (ТСХ) с R Г—0,35 (III), (БХ) с R Г - 0,48 (V), 0,18 (VI); гиперозид (ТСХ) с R Г— 0,55 (II), (БХ) с R Г - 0,3 (V), 0,41 (VI); кофейная кислота (ТСХ) с R Г — 0,46 (II), (БХ) с Rf
- 0,48 (V), 0,70 (VI); феруловая кислота (ТСХ) с Rf — 0,28 (II), (БХ) с R Г — 0,23 (V), 0,78 (VI). После водной экстракции сбора в отвар ОТ-3 переходит большее количество флавоноидов (на 58%), дубильных веществ (в 5,5 раза), антоцианов (на 68 %), органических кислот (на 55%), чем в отвар антиязвенного сбора ОТ-1 (табл. 1). Липофильные вещества составляют 38 % от количества экстрагируемых в отвар веществ. В отвар ОТ-2 (обезжиренного сбора) переходит на 49 % больше дубильных веществ, на 33 % - антоцианов, но на 43 % - меньше флавоноидов, на 91 % - фенолокислот, чем в отвар ОТ-1.
В сумме фенольные соединения ОТ-3 составляют 21 %, ОТ-1 — 5,3 %, ОТ-2 — 6,3 % экстрагируемых в отвар веществ. Самой высокой АОА обладает отвар ОТ-3, эффективная концентрация которого для подавления образования МДА в 3,0 раза ниже таковой ОТ-1. Несмотря на высокое содержание АО — антоцианов и дубильных веществ, АОА ОТ-2 низкая, что можно объяс-
Таблица1
нить недостаточным количеством эффективных АО — флавоноидов и фенолокислот. Таким образом, АОА отваров антиязвенного сбора определяется содержанием фенольных антиоксидантов: флавоноидов, фенолокис-лот, дубильных веществ, антоцианов и веществ - синер-гистов.
В таблице 2 приведены данные о содержании БАВ и АОА отваров отдельных компонентов антиязвенного
Количественное содержание биологически активных веществ (БАВ) в отварах и
антиязвенном сборе
Наименование Содержание БАВ в
отварах, мг/мл
ОТ-1 ОТ-2 ОТ-3
Экстрактивные вещества, извлекаемые водой; 35,8 22,2 4,6
Аскорбиновая кислота 0,188 0,074 0,011
Флавоноиды 0,533 0,187 0,108
Антоцианы, в пересчете на цианидин-3,5- 0,160 0,139 0,035
диглюкозид
Дубильные вещества, в пересчете на таннин 1,200 1,090 0,850
Органические кислоты, в пересчете на яблочную кислоту 3,110 1,380 0,620
Полисахариды 7,500 8,600 1,300
Тритерпеновые сапонины, в пересч. на 0,081 0,009 0,037
урсоловую кислоту
Глицирризиновая кислота 0,73 - 1,05
Антиоксидантная активность отваров, С 8, мг/мл 0,8 0,96 0,26
Примечание: * - означает среднее из трех определений; прочерк означает, что вещества не обнаружены; ОТ-1 — отвар сбора; ОТ-2 — отвар сбора после удаления липофильных веществ, ОТ-3 — отвар сбора после удаления водорастворимых полисахаридов; С 8 , мг/мл - здесь и далее, концентрация отвара, необходимая для ингибирования перекисного окисления липидов на 50%.
сбора. Наибольший вклад в суммарную АОА антиязвенного сбора вносят отвары шиповника, солодки, сушеницы. В сумме фенольные АО (флавоноиды, дубильные вещества, антоцианы) отвара шиповника составляют 5,3% от экстрагируемых в отвар веществ, полисахариды! — 50%, аскорбиновая кислота — 1,7%. Известно, что аскорбиновая кислота вносит 23% вклада в суммарную АОА настоя шиповника, являясь синергистом АО, как и органические кислоты, регенерирующие фе-
отвар солодки и сушеницы. Известно, что АОА настоя и настойки календулы быта одинакова, несмотря на их различия в содержании фенольных соединений [11], что указытает на преимущественный вклад в суммарную АОА других веществ. Этими веществами, отрицательно влияющими на АОА календулы in vitro, могут быгть календулозиды — гликозиды олеаноловой кислоты, содержащиеся в больших количествах в соцветиях календулы [6]. У отвара боярышника с большим количеством
Таблица 2
Содержание биологически активных веществ и антиоксидантная активность отваров растений, входящих в
состав антиязвенного сбора
Наименование С S, Содержание БАВ, мг/мл
отваров (1:10) мг/мл Флаво- Анто- Дубильные Аскорбиновая Полиса- Тритерпено-
ноиды цианы в-ва к-та хариды вые сапонины
Солодка 0,12 0,835 - 0,507 0,483 5,75 2,480
Сушеница 0,15 0,742* 0,004 0,636 0,312 3,10 0.177
Календула 0,48 0,939 0,025 0,840 2,159 6,70 5,860 а
Шиповник 0,07 0,230 0,013 2,078 0,738 21,8 0,338
Боярышник 0,45 0,015** 0,103 0,757 1,545 1,80 6,410 а
Облепиха 0,42 0,050 0,062 4,090 3,409 17,90 0.268
Кориандр 0,97 0,006 0,019 1,014 1,318 3,80 0,097
Подорожник 0,38 0,662** 0,016 1,064 0,483 10,75 0,387
Девясил 2,60 - - 0,918 - 7,25 0.255
Примечание: прочерк означает, что не обнаружено; * - флавоноиды в пересчете на лютеолин; ** - в пересчете на гиперозид; а — тритерпеновые вещества в пересчете на олеаноловую кислоту.
нольные АО с повышением их концентрации до исходного уровня [1]. Основное действующее вещество солодки — глицирризиновая кислота (ГК) и ее производные являются эффективными «ловушками» свободный радикалов. Благодаря своей гидрофильной (диглюку-ронидной) и гидрофобной (тритерпеновой) части в молекуле, ГК присутствует в водных и гидрофобных средах [3]. Индивидуальные флавоноиды (8 веществ), выделенные из корней солодки, по АОА уступали а-токо-феролу, но АОА смеси флавоноидов солодки была более высокой, что объясняется явлением синергизма [14]. Наличие сильнейшего АО — ГК и большого количества флавоноидов определяют высокую АОА отвара солодки [3, 14]. Наличием в отварах большого количества флавоноидов можно объяснить и высокую активность сушеницы, подорожника. Трицин — флавоноид из травы сушеницы проявлял АОА [2]. В подорожнике присутствуют вещества синергисты — полисахариды!, способные обеспечивать восстановление высоких концентрации фенольных АО. Отвар календулы, несмотря на большее количество эффективных АО — флавоноидов, ингибирует ПОЛ в более высоких концентрациях, чем
тритерпеновык веществ также наблюдается низкое значение АОА. Известно, что антиоксидантная активность плодов боярышника имеет линейную зависимость от содержания фенольных АО: флавоноидов, проантоци-анидинов, катехинов [13]. Величина АОА отвара облепихи сопоставима с активностью отваров календулы, боярышника. При наличии большого количества веществ восстанавливающего характера — полисахаридов (37% от экстрагируемых в отвар веществ), в отваре облепихи содержится небольшое количество мономерных фенольных АО (0,23% от экстрагируемого в отвар веществ).
Таким образом, данные опыгтов in vitro позволяют сделать следующие выводы: наибольший вклад в суммарную АОА водных извлечений антиязвенного сбора вносят фенольные антиоксиданты; снижение содержания водорастворимых полисахаридов в отваре антиязвенного сбора с 7,50 мг/мл до 1,30 мг/мл повышает суммарную АОА отвара в 3,0 раза; наибольшей антиокси-дантной активностью обладают отвары шиповника, солодки, сушеницы.
ANTIOXIDANT ACTIVITY OF ANTIULCEROGENIC PLANT DRUG MIXTURE DE COCTO IN
VITRO
P.B. Lubsandorjieva, T.A. Azunova, L.N. Shantanova, A.A. Unagaeva, L.Ch. Muchanova (Institute of the general and experimental biology SD RAS, Ulan-Ude)
The antioxidant activity of antiulcerogenic plant mixture and some raw materials de cocto was evaluated in vitro. The results showed that phenolic compounds caused high antioxidant activity de cocto. Rosa, Gnaphalium, licorice de cocto displayed highest antioxidant activity.
ЛИТЕРАТУРА
1. Абдуллин И.Ф., Турова Е.Н., Зиятдинова Г.К., Будни-ков Г.К. Потенциометрическое определение аскорбиновой кислоты. Оценка ее вклада в интегральную антиок-сидантную способность растительного материала. // Журнал аналит. химии. - 2002. - Т. 57, №№ 4. - С.418-421.
2. Биологически активные вещества растительного происхождения. В 3-х т. Т. 1. // Головкин Б.Н., Руденская Р.Н., Трофимова А.И., Шретер А.И. - М.: Наука, 2001.
- 350 с.
3. Бондарев А.И., Зарудий Ф.С., Русаков А.А. Солодка (обзор). // Химико-фармацевтический журнал. - 1995.
- Т.29, №№ 10. - С.33-39.
4. Государственная фармакопея СССР: вып. 1. Общие методы анализа. МЗ СССР. - 11-е изд., доп. -М.: Медицина, 1987. - 337 с.; вып. 2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье. МЗ СССР. - 11-е изд., доп. - М.: Медицина, 1990. - 400 с.
5. Клебанов Г.И., Бабенкова И.В., Теселкина Ю.О. и др. Оценка антиоксилительной активности плазмы крови с применением желточных липопротеидов. // Лабораторное дело. - 1988. - №№ 5. - С.59-62.
6. Коновалова О.А., Рыбалко К.С. Биологически активные вещества Calendula officinalis L. // Растит. ресурсы. - 1990. - Т. 26, вып. 4. - С.449-463.
7. Крупникова ТА. Количественное определение окси-коричных кислот в листьях кукурузы. // Растит. ресурсы. - 1971. - Т. 7, вып. 3. - С.449-453.
8. Махакова Г.Ч., Орлов В.А., Николаев С.М. Фармакологическая регуляция свободнорадикальных процес-
сов npn H3BeHHon 6oie3HH. — ynaH-Ynp: H^-bo BHD, CO PAH, 2001. - 193 c.
9. MypaBbeB H.A., fflamno B.B., CeMerneHKo B.O. CneK-Tpo^oTOMeTpnHecKHH MeTo^ KonnnecTBeHHoro onpe^e-leHHa ypcoioBon khchoih. // Xhmhh npnpo^. coe^HH. — 1972. — № 6. — C.738.
10. npHcTyna E.A., nonoB fl.M. CoBepmeHciBoBaHHe Tex-hoioihh npnroToBneHHH h Kompoia KaneciBa BHiaMHH-Hbix naeB. // Akt. npo6ieMbi (apManeBTHHecKon TexHo-ioihh: Hayn.Tpyn^i BHHHO. — T. XXXII. — M., 1994. — C.151-159].
11. fflKapHHa E.H. H3yneHHe aHTHoKcH^aHTHbix CBOHCTB npenapaioB Ha ocHoBe jieKapcTBeHHoro pacTHTeibHoro cbipba.: ABiope(. ähc. ... Kann. (apM. HayK. — M., 2001. — 28 c.
12. ^Ky6oBa M.P., TeHKHHa RH., fflaKHpoB r.r. yO-cneKrpo-(oioMeipHHecKoe onpe^eieHHe riHUHppH3HHoBoH khc-iotm b Glycyrrhiza glabra. // Xhmhh npHpo^. coe^HH. — 1977. — №№ 6. — C.802-806.
13. Baborin T., Trotin F., Pommery J., Vasseur J., Pinkas M. Antioxidant activites of Crataegus monogyna extracts. // Planta med. —1994. — Vol. 60, №№ 4. — P.323-328.
14. Gordon M.N., An. Jing. Antioxidant activity of flavonoids isolated from licorice. // J. Agr. And Food Chem. — 1995. — Vol. 43, №№ 7. — P.1784-1788.
15. Larson R.A. The antioxidants of higher plants. // Phy-tochemistry. — 1988. — Vol. 27, №№ 4. — P.969-978.
16. Wagner H., Bladt S. Plant drug analysis — a thin layer chromatography atlas. — 2- nd ed. — Berlin.: Springer — Verlag, 1995. — 384 pp.
ОБРАЗ ЖИЗНИ, ЭКОЛОГИЯ
© НАПРАСНИКОВА Е.В., МАКАРОВА А.П. -
САНИТАРНО-МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ И БИОХИМИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ПОЧВЕННОГО ПОКРОВА ГОРОДОВ ПРИБАЙКАЛЬЯ
Е.Б Напрасникова., А.П. Макарова
(Институт географии СО РАН, директор - д.г.н. ВА Снытко, лаборатория геохимии ландшафтов и географии почв, зав. - д.г.н. Е.Г.Нечаева; Иркутский государственный университет, ректор - д.х.н., проф. АИ.Смирнов, кафедра
микробиологии, зав. - д.б.н., проф. И.Н. Огарков)
Резюме. В настоящей работе рассмотрены результаты изучения санитарно-микробиологических особенностей почвенного покрова урбанизированных территорий в условиях Прибайкалья. На примере городов Иркутска, Ангарска, Усо-лье-Сибирское, Саянска, Шелехово выявлен биохимический потенциал городских почв, как интегральный показатель их экологического состояния.
Ключевые слова. Микроорганизмы, сапрофиты, кишечная палочка, биохимический потенциал, почвенный покров, город, карта-схема.
Актуальность и своевременность изучения санитарных функций в том числе биохимического потенциала городских почв, как информативных экологических показателей не вызывают сомнений.
В настоящее время очевидны негативные последствия техногенеза и урбанизации, что отражено в активно накапливающейся научной информации о свойствах городских почв [8,10 и др.].
К концу XXI века ожидается вовлечение в урбанизацию до 20% всей жизнепригодной территории суши. По этой причине почвенный покров городских и пригородных зон обречен на существенные изменения структуры и функций: биоэкологической, биогеохимической, санитарной.
Особенности микробных сообществ городских почв настоящего времени и их индикационные возможнос-
