Abidueva Lygzhima Ranzhurovna - candidate of Nagaslaeva Larisa Andreevna - research fellow,
biological sciences, senior lecturer, department of infectious department of biological active substances, IGEB SB
diseases, Buryat State University. tel: 89503841718. RAS.
УДК 581.198
A.A. Торопова, C.T. Кохан, Л.М. Танхаева, Д.Н. Олейников
АНТИОКСИДАНТНАЯ АКТИВНОСТЬ РАСТИТЕЛЬНОГО СРЕДСТВА «АРУРА-ТАН-7»
Проведено исследование антиоксидантной активности растительного средства «Арура-тан-7» с применением методов in vitro. Установлено, что водное извлечение «Арура-тан-7» обладает выраженной инактивирующей активностью в отношении радикалов ДФПГ, супероксид-радикалов (02'~), молекул оксида азота (NO). Выявлено наличие Fe2+-хелатирующей активности и способности к защите биологического субстрата от перешеного повреждения (CBA-метод).
Ключевые слова: Арура-тан-7, антиоксидантная активность, ДФПГ, супероксид-радикалы, оксид азота.
A.A. Toropova, S.T. Kokhan, L.M. Tankhaeva, D.N. Olennikov
ANTIOXIDANT ACTIVITY OF PLANT REMEDY «ARURA-TAN-7»
The research aimed at revealing the antioxidant activity ofplant remedy «Arura-tan-7» with the use of the methods in vitro has been conducted. It has been defined that the water extract of «Arura-tan-7» possesses the expressed inactivate activity in relation to DPPH radicals, superoxide-radicals (O2'~) and the molecules of nitrogen oxide (NO). The presence of Fe2+-chelating activity and ability to protect biological substrate of peroxidation damage (CBA-method) has been revealed.
Key words: Arura-tan-7, antioxidant activity, DPPH, superoxide-radicals, nitrogen oxide.
В настоящее время природные антиоксиданты вызывают значительный интерес в связи с тем. что их применение снижает возможность развития окислительного стресса, вызванного дисбалансом антиоксидантно-прооксидантных систем. и являющегося причиной различных хронических патологических состояний, таких, как атеросклероз, заболевания кардиоваскулярной и мочеполовой систем, мутагенез, рак, нейродегенеративные и возрастные расстройства [9].
При этом предпочтительным является использование антиоксидантов природного происхождения, поскольку применение синтетических антиоксидантов зачастую осложняется развитием побочных эффектов. Как известно, растительные средства характеризуются широким спектром фармакологических свойств, обладающих низкой токсичностью и отсутствием побочных эффектов при длительном приеме [3].
В Институте общей и экспериментальной биологии СО РАН разработано комплексное растительное средство, условно названное «Арура-тан-7». Установлено, что указанное средство обладает выраженной адаптогенной активностью, повышает сопротивляемость организма животных к действию экстремальных факторов различ-
ной природы: гипоксии, интоксикации и др.
Целью настоящей работы является определение антиоксидантной активности «Арура-тан-7» в экспериментах in vitro.
Maтepиaлы и методы
«Арура-тан-7» представляет собой сбор, состоящий из 5 видов лекарственных растений: трава Thymus serpillum L., корневище и корень Eleutherococcus senticosus (Rupr.et Maxim.) Maxim, корни Glycyrrhiza uralensis Fisch., побеги Vaccinium myrtillus L., корневища и корни Rhodiola rosea L. Растительное сырье соответствовало требованиям фармакопейных статей [1].
Антирадикальную активность определяли с применением DPPH-метода [9]. Антиоксидантную активность оценивали по степени влияния исследуемого фитосредства на динамику пере-кисной деградации ß-каротина (CBA-метод) в системе линолевая кислота-ДМСО-Н202 [7]; влияние исследуемого средства на связывание супе-роксидных анион-радикалов (О2-) - в неэнзиматической системе феназин метосульфат / НАДН [5]; Fe2+-xeлатиpyющyю активность определяли фенантролиновым методом [4]; связывание молекул оксида азота (NO) - по методу [6]. Все эксперименты проводили в трехкратной повторности.
В работе использовали кверцетин (Fluka) и аскорбиновую кислоту (Sigma). Спектрофотометрические исследования проводили на спектрофотометре UV-Vis-mini (Shimadzu) в кварцевых кюветах с толщиной поглощающего слоя 10 мм.
Корреляционный анализ проводили с применением пакета программ Advanced Grapher ver. 2.11 (Alentum Software Inc.), статистическую обработку - согласно рекомендациям [2]. Результаты и их обсуждение В модельных системах in vitro, в которых происходила генерация свободных радикалов, исследуемое фитосредство «Арура-тан-7» проявляются выраженные антиоксидантные свойства (табл. 1).
В эксперименте показано, что «Арура-тан-7» обладает антирадикальной активностью в отношении DPPH-радикала (ДФПГ-метод) - IC50 = 17,70 мкг/мл. Показано, что фитопрепарат проявляет способность к защите биологического субстрата от перекисного повреждения (CBA-метод). Антиоксидантная активность «Аруры-тан-7», определенная методом CBA, составляет
Антиоксидантная а
15,65 мкг/мл. Для кверцетина (препарат сравнения) данный показатель составляет 6,02 мкг/мл (1С50 = 6,02 мкг/мл).
При изучении влияния исследуемого средства на ряд активных форм кислорода (02'- и N0) и ионы Fe2+ выявлено, что фитосредство «Арура-тан-7» обладает способностью к их инактивации, причем, по выраженности действия не уступает, а в некоторых случаях превосходит активность действия стандартных антиоксидантов (табл. 1). В эксперименте по определению хелатирования ионов Fe2+ установлено, что 1С50 исследуемого фитосредства составляет 642 мкг/мл, что превышает активность препарата сравнения - кверцетина (1С50 > 5000 мкг/ мл). Данный факт объясняется присутствием в его составе полисахаридных компонентов.
В отношении связывания супероксид-анион радикалов 02'- характерна большая выраженность действия (1С50 = 17,50 мкг/мл), чем для кверцетина (1С50 = 31,82 мкг/мл) и аскорбиновой кислоты (1С50 = 101,00 мкг/мл). Данное явление обусловлено, вероятно, присутствием фенольных соединений.
Таблица 1
[вность «Арура-тан-7»а
DPPH, IC50, мкг/мл CBA, Fe2+ O/- NO
Объект IC50, IC50, IC50, IC50,
мкг/мл мкг/мл мкг/мл мкг/мл
Apypа-тан-7 17,70± 0,37 15,65± 0,14 642,00± 0.01 17,50± 0,37 405,00± 15,03
Кверцетин 6 9,85± 0,18 6,02± 0.03 > 5000 31,82± 1,02 149,77± 3,59
Acкopбинoвая кислота 6 4,81± 0,15 - 150,00± 0.01 101± 3,21 1140,0±34.21
а DPPH - антирадикальная активность в отношении ДФПГ-радикала, СВА - перекисная деградация Р-каротина, Бе2+ -Ее2+-хелатирующая активность, 02" - связывание супероксид-анион радикала, N0 - связывание молекул оксида азота (II); 6 вещество сравнения.
Установлено, что «Арура-тан-7» обладает способностью к связыванию молекул N0 (1С50 = 405.00 мкг/мл), превосходящей таковую препарата сравнения - аскорбиновую кислоту (1С50 = 1140 мкг/мл).
Таким образом, полученные данные свидетельствуют о том, что фитосредство «Арура-тан-7» обладает способностью к восстановлению биологических субстратов, проявляет выраженное антирадикальное действие и ингибирует процесс перекисной деградации Р-каротина. Результаты проведенных исследований дают основание рассматривать исследуемое фитосредство в качестве потенциального антиоксидантного средства,
характеризующегося присутствием ряда биологически активных веществ, представителей классов фенольных соединений и полисахаридов.
Литература
1. Государственная фармакопея СССР. XI изд. Вып. 2. - М.: Медицина, 1990.
2. Дерффель К. Статистика в аналитической химии. - М.: Мир, 1994.
3. Костюк В.А., Потапович А.И. Биорадикалы и биоантиоксиданты. - Минск, 2004. - 174 с.
4. Олейников Д.Н., Зилфикаров И.Н., Торопова А.А., Ибрагимов Т.А. Химический состав сока калли-зии душистой (Callisia fragrans Wood.) и его антиоксидантная активность (in vitro) // Химия растит. сырья.
- 2008. - №4. - С. 95-100.
5. Chen A.-S., Taguchi Т., Sakai K., Kikuchi K., Wang M.-W., Miwa I. Antioxidant activities of chitibiose and chititriose // Biol. Pharm. Bull. - 2003. - Vol. 26. - N 9 -P. 1326-1330.
6. Govindarajan R., Rastogi S., Vijayakumar M. Studies on the antioxidant activities of Desmodium gagenticum // Biol. Pharm. Bull. - 2003. - Vol. 26. - N 10. - P. 1424-1427.
7. Olennikov D.N., Tankhaeva L.M. Lamiaceae carbohydrates. I. Pectinic substances and hemicelluloses from Mentha x piperita // Chem. Nat. Comp. - 2007. -Vol. 43. - N 5. - P. 501-507.
8. Oxidative stress and aging. Critical reviews / Eds. Calter R., Rodriges H. Singapore, 2003.
9. Seyoum A., Asres K., El-Fiky F.K. Structure-radical scavenging relationships of flavonoids // Phytochemistry.
- 2006. - Vol. 67. - N 18. - P. 2058-2070.
Торопова Анна Алексеевна - кандидат биологических наук, младший научный сотрудник лаборатории безопасности биологически активных веществ Учреждения РАН Института общей и экспериментальной биологии СО РАН. 670042, г. Улан-Удэ, ул. Сахьяновой, 6, тел. (3012) 433713, e-mail: [email protected]
Кохан Сергей Тихонович - кандидат медицинских наук, доцент, зав. кафедрой основ медицины ГОУ ВПО ЧитГУ 672039, г. Чита, ул. Александро-Заводская, 30.
Танхаева Лариса Максимовна - кандидат фармацевтических наук, старший научный сотрудник лаборатории медико-биологических исследований Учреждения РАН Института общей и экспериментальной
УДК 615.322:616-003.93
биологии СО РАН. 670047, Улан-Удэ, ул. Сахьяновой.
6. Тел. (3012) 433463, (9021) 600627. E-mail: oldaniil@ rambler.ru
Олейников Даниил Николаевич - кандидат фармакологических наук, старший научный сотрудник лаборатории медико-биологических исследований Учреждения РАН Института общей и экспериментальной биологии СО РАН. ул. Сахьяновой, 6, ИОЭБ СО РАН, Улан-Удэ, 670047. Тел. (3012) 433463, (9021) 600627. E-mail: [email protected].
Toropova Anna Alexeevna - candidate of biological sciences, research fellow, laboratory of safety of biological active substances, Institute of General and Experimental Biology, SB RAS. 670047, Ulan-Ude, Sakhyanova str., 6, tel. (3012) 433713, fax 433034, e-mail: [email protected]
Kokhan Sergei Tikhonovich - candidate of medical sciences, associate professor, head of department of fundamentals of medicine, GOU VPO Chita State University. 670039, Chita, Alexandro-Zavodskaya str., 30.
Tankhaeva Larisa Maximovna -candidate of pharmaceutical sciences, senior research fellow, laboratory of medical and biological research, Institute of General and Experimental Biology, SB RAS. Sakhyanova str., 6, Ulan-Ude, 670047. Tel.: (3012) 433463, (9021) 600627. E-mail: [email protected].
Olennikov Daniil Nikolaevich - candidate of pharmaceutical sciences, senior research fellow, laboratory of medical and biological research, Institute of General and Experimental Biology, SB RAS. Sakhyanova str., 6, Ulan-Ude, 670047. Tel.: (3012) 433463, (9021) 600627. E-mail: [email protected].
А.В. Бодоев, П.В. Алексеев ВЛИЯНИЕ ЭКСТРАКТА ЗУБЧАТКИ ОБЫКНОВЕННОЙ НА МИТОТИЧЕСКУЮ АКТИВНОСТЬ
В статье приведены результаты исследования по определению фармакологического действия зубчатки обыкновенной на митотическую активность клеток.
Ключевые слова: экстракт зубчатки обыкновенной, митотическая активность, регенерация.
A.V. Bodoev, P.V. Alekseev
THE INFLUENCE OF THE EXTRACT OF ODONTITES VULGARIS MOENCH ON THE MITOTIC ACTIVITY
This article presents the resalts of research of definition the pharmacological affect of the Odontites vulgaris Moench extract on mitotic activity of cells.
Ключевые слова: the extract of Odontites vulgaris Moench, mitotic activity regeneraition.
Изучение возможностей фармакокоррекции травматических повреждений вносит существенный вклад в теорию и практику лечения ран человека. В настоящее время все большее внимание врачей привлекают растительные препараты, воздействующие на процессы репаративной регене-
рации и при этом не обладающие токсичностью и другими побочными эффектами при их длительном применении [2, 3]. Одним из таких растений является зубчатка обыкновенная, которая потенциально может служить эффективным лекарственным препаратом, что позволяет рассма-