Антимикотическая активность штамма Bacillus subtilis 534 - основы лекарственного препарата пробиотика споробактерина Текст научной статьи по специальности «Биотехнологии в медицине»

Антимикотическая активность штамма Bacillus subtilis 534 — основы лекарственного препарата пробиотика споробактерина

Н. И. ГАБРИЭЛЯН', И. В. ДРАБКИНА', Т.В. КРУПЕНИО', М. В. ДЕМЬЯНКОВА'2, И. А. МАЛАНИЧЕВА2, Б. Ф. ВАСИЛЬЕВА2, Т. А. ЕФИМЕНКО2, И. Г. СУМАРУКОВА2, А. А. ГЛУХОВА2, Ю. В. БОЙКОВА2, Н. Д. МАЛКИНА2, В. В. УДАЛОВА2, В. А. АЛФЕРОВА2, В. А. КОРШУН2, О. В. ЕФРЕМЕНКОВА2*

' Федеральный научный центр трансплантологии и искусственных органов им. академика В. И. Шумакова Минздрава России, Москва 2 НИИ по изысканию новых антибиотиков имени Г. Ф. Гаузе, Москва

Antimycotic Activity of the Bacillus subtilis 534 Strain — Foundations of Probiotic Sporobakterin

N. I. GABRIELYAN', I. V. DRABKINA', Т. В. KRUPENIO', M. V. DEMYANKOVA'2, I. A. MALANICHEVA2, B. F. VASILIEVA2, Т. А. EFIMENKO2, I. G. SUMARUKOVA2, A. A. GLUKHOVA2, YU. V. BOYKOVA2, N. D. MALKINA2, V. V. UDALOVA2, V. A. ALFEROVA2, V. A. KORSHUN2, *O. V. EFREMENKOVA2

' Academician V. I. Shumakov Federal Research Center of Transplantology and Artificial Organs of the Ministry of Health of the Russian Federation, Moscow

2 Gause Intitute of New Antibiotics, Moscow

Цель исследования заключалась в изыскании антимикотической активности пробиотического штамма Bacillus subtilis 534 в условиях культивирования in vitro. В качестве тестов для определения антимикотической активности использовали 36 клинических изолятов патогенных грибков Candida albicans, C.catenulata, C.glabrata, C.krusei, C.lusitaniae, C.parapsilosis, C.tropicalis, Cryptococcus neoformans, Trichosporon sp. и водоросли Prototheca sp. Клинические изоляты отличаются по устойчивости/чувствительности к антимикотикам амфотерицину, миконазолу, кетоконазолу, итраконазолу и флуконазолу, причём 10 изолятов устойчивы ко всем пяти антимикотикам. Из 36 клинических изолятов 34 чувствительны к культураль-ной жидкости штамма B.subtilis 534 и выделенным из неё активным компонентам. Предположительно в кишечнике человека штамм 534 также образует антимикробные соединения, активные в отношении патогенных грибков, что обусловливает его лекарственную антимикотическую эффективность. Длительное применение в медицинской практике лекарственного препарата споробактерина, представляющего суспензию спор штамма B.subtilis 534, свидетельствует об отсутствии побочных эффектов.

Ключевые слова: пробиотик споробактерин, Bacillus subtilis 534, резистентность, антимикотическое действие.

The aim of the study was to find the antimycotic activity of the probiotic strain Bacillus subtilis 534 under conditions of in vitro cultivation. 36 clinical isolates of pathogenic fungi Candida albicans, C.catenulata, C.glabrata, C.krusei, C.lusitaniae, C.parapsilosis, C.tropicalis, Cryptococcus neoformans, Trichosporon sp. and algae Prototheca sp. were used as test items for the determination of antimycotic activity. Clinical isolates differ in resistance/sensitivity to antimycotics amphotericin, miconazole, ketoconazole, itraconazole, and fluconazole, with 10 clinical isolates resistant to all five of these drugs. Out of 36 clinical isolates, 34 are sensitive to the culture liquid of the strain B.subtilis 534 and the active components isolated from it. Presumably, in human intestine strain 534 forms antimicrobial compounds that are active against pathogenic fungi, which causes its antimycotic efficacy. The long-term use of Sporobacterin drug, which is a spore suspension of B.subtilis strain 534, in medical practice indicates no side effects.

Keywords:probiotic sporobacterin, Bacillus subtilis 534, resistance, antimycotic action.

Открытие и внедрение в медицинскую практику антибиотиков было одним из самых важных достижений медицины XX века, однако постепенно ответной реакцией патогенных микроорганизмов стала выработка механизмов устойчивости к применяемым препаратам. В настоящее время распространение патогенных штам-

© Коллектив авторов, 2018

*Адрес для корреспонденции: E-mail: [email protected]

мов с множественной устойчивостью к антибиотикам достигло критического уровня, в связи с чем существует потребность в разработке новых антибиотиков, а также иных антимикробных препаратов, сочетающих эффективность и отсутствие токсичности [1—3]. К числу последних относят пробиотики — лекарственные препараты на основе живых микроорганизмов, воздействующие на патогенную микрофлору человека или нормализующие баланс нормальной кишечной микрофлоры.

К микроорганизмам-пробиотикам относят как естественных обитателей кишечника, например, кишечную палочку, лактобацилл и бифидобакте-рий, так и транзиторныж (самоэлиминирующихся) бактерий. В России и в других странах в последние десятилетия активно изучают бацилл в качестве транзиторныж пробиотиков, в частности штаммы вида Bacillus subtilis, чему посвящён ряд обзорных статей [4—8]. Данный вид бактерий широко распространён в природе и попадает в организм человека разными путями: с воздухом, водой, пищевыми продуктами. В связи с этим некоторые авторы рассматривают его в качестве одного из естественных компонентов микрофлоры кишечника [8, 9].

В России более четверти века применяют лекарственный препарат споробактерин, основой которого является штамм-пробиотик B.subtilis 534 [10]. Ранее нами было показано, что штамм 534 в условиях культивирования in vitro образует несколько антимикробных веществ, активных в отношении ряда коллекционных тест-штаммов и клинических изолятов бактерий Acinetobacter bau-mannii, Bacillus spp., Micrococcus luteus, Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus aureus (включая MRSA), S.epidermidis, S.haemolyticus, S.hominis, а также грибков Aspergillus niger, Candida spp., Saccharomyces cerevisiae [11—13].

Целью данного исследования бышо с помощью клинических изолятов патогенных грибов с различной устойчивостью/чувствительностью к противогрибковым антибиотикам (антимикотикам) определить в опытах in vitro антимикотическую активность пробиотического штамма Bacillus subtilis 534.

Материал и методы

Объектом исследования служил штамм Bacillus subtilis 534 — основа лекарственного препарата «споробактерин жидкий».

Условия культивирования. Глубинное культивирование штамма 534 осуществляли с использованием модифицированной среды №2 Гаузе следующего состава (в %): глюкоза — 1, пептон — 0,5, триптон — 0,3, NaCl — 0,5, вода водопроводная; рН 7,2—7,4. В колбы Эрленмейера объёмом 750 мл со 150 мл среды вносили суспензию спор штамма 534 в количестве 106/мл, после чего засеянные колбы помещали на роторную качалку со скоростью вращения 220 об/мин при температурном режиме 28°С. Антимикотическую активность культураль-ной жидкости (КЖ) определяли на 2-е, 4-е и 7-е сутки культивирования. Для поверхностного культивирования штамма 534 и клинических изолятов грибов использовали агаризованный вариант модифицированной среды № 2 Гаузе с добавлением 2% агара, культивирование осуществляли при 37°С.

Определение антимикотической активности. Антимикотическую активность культуральной жидкости штамма 534 и отдельный: выщеленныгх из неё ранее компонентов [12] определяли методом диффузии в агар. Для этого на поверхность агаровой среды с высеянным газоном исследуемого штамма клинического изолята помещали бумажные диски диаметром 6 мм с нанесёнными сырцами отдельный: компонентов КЖ в количестве 10 мкл или по 100 мкл КЖ штамма 534 закапывали в лунки диаметром 9 мм. Через сутки инкубирования при 37°С определяли диаметры зон задержки роста грибков вокруг дисков или лунок, являющиеся показателем антимикотической активности.

Характеристика изолятов патогенных грибков. Видовую идентификацию клинических изолятов грибков и их отношение к антимикотикам проводили на автоматическом бактериологическом анализаторе для идентификации микроорганизмов Siemens MicroScan Walk Away — 96 Plus System (США). Определяли чувствителыносты/устойчивосты изолятов патогенных грибков к следующим антимикотикам медицинского назначения: амфотерицину B (AB), миконазолу (MCZ), кето-коназолу (KET), итраконазолу (ITR), флуконазолу (FLU).

Результаты и обсуждение

Антимикотическую активность КЖ штамма

B.subtilis 534 и выделенных из неё трёх компонентов определяли в отношении 33 штаммов патогенных грибков и 3 штаммов патогенной водоросли Prototheca sp., инфекции которой также лечат противогрибковыми антибиотиками. Из табл. 1 следует, что КЖ штамма 534 подавляет рост 26 штаммов из 36, причём рост 8 штаммов, а именно Candida catenulata 1507 и 6093, C.glabrata 13,

C.krusei 247, C.parapsilosis 1380, C.tropicalis 455, C.neoformans 25 и Prototheca sp. 6017, подавляется не КЖ, а отделыными выделенными из неё компонентами. Это объясняется тем, что при выделении и очистке сырцов отделыных компонентов КЖ, их упаривании и последующем растворении в небольшом объёме воды концентрация активных веществ возрастает примерно в 500 раз, и, с учётом описанных выше различий в методе определения антимикотической активности КЖ и её компонентов, в наносимом на диск образце содержание антимикотиков выше примерно в 50 раз по сравнению с их содержанием в образце КЖ, внесённом в лунку.

В табл. 2 суммировано, что 10 из 36 клинических изолятов устойчивы ко всем 5 представителям медицинских антимикотиков трёх исследуемых групп, а именно полиенов, имидазолов и триазолов, но рост этих штаммов подавляет кулы-туралыная жидкость штамма B.subtilis 534 или её компоненты (табл. 1). Толыко 2 штамма C.albi-cans, а именно 1610 и 2122, устойчивы и к КЖ, и к сконцентрированным сырцам отделыных компонентов КЖ штамма 534. Посколыку эти два штамма чувствителыны к исследованным медицинским антимикотикам, можно предположиты иную химическую природу антимикотиков штамма B.subtilis 534 (см. табл. 1).

Наряду с такими свойствами, как усиление неспецифического и специфического иммунитета, стимуляция роста нормалыной микрофлоры кишечника и выделение пищеварителыных ферментов, действие пробиотиков может быты связано с синтезом антибиотических веществ различной химической природы. Пребывание B.subtilis в кишечнике теплокровных животных сохраняется от 10 до 30 сут., причём бактерии присутствуют в форме вегетативных клеток и спор, и до выведения из организма с калом неоднократно повторяется процесс прорастания спор

Таблица 1. Антимикотическая активность культуральной жидкости штамма В.зиЬЯНз 534 и выделенных из неё компонентов 1, 2 и 3, а также медицинских антимикотиков, в отношении клинических изолятов грибов

Клинические изоляты грибов Чувствительность к КЖ штамма 534 Чувствительность

и ее компонентам 1, 2 и 3* к антимикотикам

(зоны задержки роста в мм) полиен имидазолы триазолы

К.Ж, . 1 2 3 AB MCZ KET ITR FLU

Ñandida albicans 58 18 0 0 0 R R R R R

Ñ.albicans 182 19 0 0 0 S S S S S

Ñ.albicans 265 29 0 8 0 R S S I S

Ñ.albicans 317 20 0 0 0 S R R R R

Ñ.albicans 456 23 0 0 0 R I I I S

Ñ.albicans 458 17 7 0 0 R R R R R

Ñ.albicans 848 28 0 0 0 R R R R R

Ñ.albicans 922 24 0 0 0 I R R R R

Ñ.albicans 1187 19 0 0 0 I I S I S

Ñ.albicans 1294 31 0 0 0 R R R R R

Ñ.albicans 1610 0 0 0 0 S R I S S

Ñ.albicans 2122 0 0 0 0 S I I I I

Ñ.albicans 2356 12 0 0 0 R R R R R

Ñ.albicans 4166 25 7 0 0 I R R I R

Ñ.albicans 4244 25 0 0 0 R R R I R

Ñ.albicans 4438 24 0 0 0 S I S I R

Ñ.albicans 4895 24 0 0 0 R I R R R

Ñ.albicans 4897 24 0 0 0 S S I R R

Ñ.albicans 5228 14 8 0 0 R I R R R

Ñ.albicans 5721 24 0 0 0 R I R R R

Ñ.albicans 5963 18 7 0 0 R R R R R

Ñ.albicans 6107 17 0 0 0 R R I R S

C.catenulata 1507 0 7 0 0 I I I I R

C.catenulata 6093 0 8 0 12 R I I R I

C.glabrata 13 0 7 0 11 R I I I I

Ñ.glabrata 212 18 9 8 11 R R R R R

C.krusei 247 0 8 0 0 S R S I S

C.lusitaniae 5254 22 0 0 0 R I S I S

C.parapsilosis 1380 0 7 0 0 S S S I S

Ñ.tropicalis 455 0 8 0 0 R R R R R

Cryptococcus neoformans 25 0 7 0 12 R I I R I

Cr.neoformans 245 25 0 0 9 R S I I I

Prototheca sp. 110 27 0 0 0 R R R R R

Prototheca sp. 6017 0 7 0 10 R I R R I

Prototheca sp. 6047 24 0 0 0 R R R R R

Trichosporon sp. БМ1.5 24 0 0 13 S I I I S

Всего R 10 23 34 29 23 17 18 20 20

Всего S и I 26 13 2 7 13 19 18 16 16

Примечание. АВ - амфотерицин В; МО - миконазол; КЕТ - кетоконазол; 1ТР - итраконазол; РШ - флуконазол; Р -устойчивость к антимикотику; Б - чувствительность к антимикотику; I - промежуточная чувствительность к антимико-тику; * - выделение компонентов описано ранее [12].

Таблица 2. Чувствительность/устойчивость 36 клинических изолятов к пяти антимикотикам медицинского назначения амфотерицину В, миконазолу, кетоконазолу, итраконазолу, флуконазолу, а также к культуральной жидкости штамма В.виЬАНв 534 или выделенным из неё трём компонентам

Чувствительность к 5 антимикотикам 5

Чувствительность к 4 антимикотикам 9

Чувствительность к 3 антимикотикам 3

Чувствительность к 2 антимикотикам 3

Чувствительность к 1 антимикотику 6

Устойчивость ко всем 5 антимикотикам 10

Чувствительность к КЖ штамма 534 и/или к выделенным из неё трём компонентам 34

Устойчивость к КЖ штамма 534 и/или к выделенным из неё трём компонентам 2

и респоруляции [14]. Можно предположить, что в кишечнике и в питательной среде в колбах процессы развития B.subtilis схожи и возможно выделение антибиотических веществ in vivo, что можно рассматривать как один из механизмов действия споробактерина.

Методом дисков нами была определена чувствительность/устойчивость штамма B.subtilis 534 к применяемым в медицине антибиотикам. Штамм B.subtilis 534 устойчив к линкомицину и оксацил-лину, поэтому возможно назначение споробакте-рина одновременно с этими антибиотиками. Сле-

дующие антибиотики подавляют рост штамма B.subtilis 534: амикацин, амоксициллин/клавула-новая кислота, ампициллин, ампициллин/суль-бактам, азитромицин, ванкомицин, доксицик-лин, клиндамицин, левомицетин, фосфомицин, гентамицин, канамицин, левофлоксацин, метро-нидазол, налидиксовая кислота, неомицин, ново-биоцин, норфлоксацин, окситетрациклин, оф-локсацин, пенициллин, спектиномицин, тетрациклин, тобрамицин, триметоприм, цефазолин, цефалотин, цефотаксим, цефотаксим/клавулано-вая кислота, цефтриаксон, ципрофлоксацин, эритромицин, поэтому целесообразно применять споробактерин за несколько суток до лечения этими антибиотиками или после его завершения для нормализации кишечной микрофлоры.

ЛИТЕРАТУРА

1. World Health Organization. Antimicrobial resistance. 2016. http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs194/en/

2. Butler M.S., Blaskovich M.A., Cooper M.A. Antibiotics in the clinical pipeline in 2013. J Antibiotics 2013; 66 (10): 571—591.

3. Butler M. S, Blaskovich M. A. T, Cooper M. A. Antibiotics in the clinical pipeline at the end of 2015. J Antibiotics 2017; 70 (1): 3—24.

4. Похиленко В.Д., Перелыгин В В. Пробиотики на основе спорообра-зующих бактерий и их безопасность. Химическая и биологическая безопасность. — 2007. — № 32—33 (2—3). — С. 20—41. / Pokhilenko V.D., Perelygin V.V. Probiotiki na osnove sporoobrazuyushchikh bakter-ij i ikh bezopasnost'. Khimicheskaya i biologicheskaya bezopasnost' 2007; 32—33 (2—3): 20—41. [in Russian]

5. Скрытник И.Н., Маслова А.С. Современные спорообразующие пробиотики в клинической практике. Сучасна гастроентеролопя — 2009. — № 3 (47). — С. 81—90. / Skrypnik I.N., Maslova A.S. Sovremennye sporoobrazuyushchie probiotiki v klinicheskoj praktike. Suchasna gastroenterologiya 2009; 3 (47): 81—90. [in Russian]

6. Савустъяненко A.B. Механизмы действия пробиотиков на основе Bacillus subtilis. Актуальная инфектология. — 2016. — № 2 (11). — С. 35—44. / Savust'yanenkoA.V. Mekhanizmy dejstviya probiotikov na osnove Bacillus subtilis. Aktual'naya infektologiya 2016; 2 (11): 35—44. [in Russian]

7. Sanders M.E., Morelli L, Tompkins T.A. Sporeformers as Human Probiotics: Bacillus, Sporolactobacillus, and Brevibacillus. CRFSFS: Comprehens Rev Food science Food Safety 2003; 2 (3): 101—110.

8. Cutting S.M. Bacillus probiotics. Food Microbiology 2011; 28: 214e220. doi:10.1016/j.fm.2010.03.007.

9. Sorokulova I. Modern Status and Perspectives of Bacillus Bacteria as Probiotics J Prob Health 2013; 1 (4): Numb. of publ. 1000e106.

10. Никитенко В.И., Полякова B.C., Никитенко М.В. Препарат споробак-терин. Новые данные о механизме действия этого и других живых бактериальныж препаратов. Научный вестник Тюменской медицинской академии. — 2001. — № 2. — С. 70—72. / Nikitenko V.I., Polyakova B.C., Nikitenko M.V. Preparat sporobakterin. Novye dannye o mekhanizme dejstviya ehtogo i drugikh zhivykh bakterial'nykh preparatov. Nauchnyj vest-nik Tyumenskoj meditsinskoj akademii 2001; 2: 70—72. [in Russian]

11. Габриэлян Н И, Давыдов Д.С., Горская Е.М. Использование споро-бактерина в послеоперационном периоде у пациентов кардиохи-

СВЕДЕНИЯ ОБ АВТОРАХ:

Габриэлян Нина Индзаровна — заведующая отделом, ФГБУ «Федеральный научный центр трансплантологии и искусственным: органов имени академика В. И. Шумакова» Минздрава России, Москва

Драбкина Ирина Василъевна — врач-бактериолог, ФГБУ «Федеральный научный центр трансплантологии и ис-кусственныгх органов имени академика В. И. Шумакова» Минздрава России, Москва

Крупенио Татъяна Владимировна — лаборант исследователь, ФГБУ «Федеральный научный центр трансплантологии и искусственных органов имени академика В. И. Шумакова» Минздрава России, Москва

Заключение

Штамм B.subtilis 534 при росте на питательной среде in vitro образует антимикробные соединения, в том числе эффективные в отношении патогенных грибков разных видов, устойчивых к современным антимикотикам. Предположительно в кишечнике человека штамм 534 также образует антимикробные соединения, активные в отношении патогенныж грибков, что обусловливает его лекарственную антимикотическую эффективность. Длительное применение в медицинской практике лекарственного препарата споро-бактерина, представляющего суспензию спор штамма B.subtilis 534, свидетельствует об отсутствии побочных эффектов.

рургического профиля. Антагонизм in vitro споробактерина в отношении нозокомиальных штаммов бактерий. Вестн трансплантол искусств органов. — 2008. — № 6. — С. 12—18. / Gabriehlyan N.I., Davydov D.S., Gorskaya E.M. Ispol'zovanie sporobakterina v posleoper-atsionnom periode u patsientov kardiokhirurgicheskogo profilya. Antagonizm in vitro sporobakterina v otnoshenii nozokomial'nykh shtammov bakterij. Vestn transplantol iskusstv organov 2008; 6: 12—18. [in Russian]

12. Габриэлян Н И, Горская Е.М., Крупенио Т.В., Зенкова В.А., Ефимен-ко Т.А., Маланичева И.А., Сумарукова И.Г., Ефременкова О.В., Ев-лашкина В.Ф., Давыдов Д.С. Оценка антимикробной активности бациллярного пробиотика Bacillus subtilis (штамм 534). Эпидемиология и инфекционные болезни. Актуальные вопросы. — 2016. — №1. — С. 41—47. / Gabriehlyan N.I., Gorskaya E.M., Krupenio T.V., Zenkova V.A., Efimenko T.A., Malanicheva I.A., Sumarukova I.G., Efremenkova O.V., Evlashkina V.F., Davydov D.S. Otsenka antimikrob-noj aktivnosti batsillyarnogo probiotika Bacillus subtilis (shtamm 534). Ehpidemiologiya i infektsionnye bolezni. Aktual'nye voprosy 2016; 1: 41—47. [in Russian]

13. Ефременкова О.В., Габриэлян НИ., Маланичева И.А., Ефименко Т.А., Ефременкова О.В., Габриэлян НИ., Маланичева И.А., Ефименко Т.А., Терехова Л.П., Удалова В В., Глухова А.А., Рогожин Е.А., Алферова В.А., Коршун В.А., Кубанова М.Х., Драбкина И.В., Крупенио Т.В. Антибиотическая активность пробиотического штамма Bacillus subtilis 534 в отношении клинических изолятов Acinetobacter baumannii. Антибиотики и химиотер. — 2016. — Т. 61. — № 9—10. — С. 3—7. / Efremenkova O.V., Gabriehlyan N.I., Malanicheva I.A., Efimenko T.A., Efremenkova O.V., Gabriehlyan N.I, Malanicheva I.A., Efimenko T.A., Terekhova L.P., Udalova V.V., Glukhova A.A., Rogozhin E.A., Alferova V.A., Korshun V.A., Kubanova M.KH., Drabkina I.V., Krupenio T.V. Antibioticheskaya aktivnost' probioticheskogo shtamma Bacillus subtilis 534 v otnoshenii klinicheskikh izolyatov Acinetobacter baumannii. Antibiotiki i khimioter 2016; 61 (9—10): 3—7. [in Russian]

14. Осипова И.Г., Сорокулова И.Б., Василъева Е.А., Буданова Е.В. Доклинические испытания новых споровых пробиотиков. Вестн РАМ- 2005. — № 12. — С. 36—40. / Osipova I.G., Sorokulova I.B., Vasil'eva E.A., Budanova E.V. Doklinicheskie ispytaniya novykh sporovykh probiotikov. Vestn. RAMN 2005; 12: 36—40. [in Russian]

15. Leser T.D., Knarreborg A., Worm J. Germination and outgrowth of Bacillus subtilis and Bacillus licheniformis spores in the gastrointestinal tract of pigs. J Appl Microbiol 2008; 104 (4): 1025—1033.

Демьянкова Мария Владимировна — лаборант исследова-телы ФГБНУ «Научно-исследователыский институт по изысканию новыгх антибиотиков им. Г. Ф. Гаузе», Москва Маланичева Ирина Алексеевна — с. н. с., ФГБНУ «Научно-исследователыский институт по изысканию новых антибиотиков им. Г. Ф. Гаузе», Москва

Васильева Бязиля Фейзулловна — н. с., ФГБНУ «Научно-исследователыский институт по изысканию новых антибиотиков им. Г. Ф. Гаузе», Москва Ефименко Татьяна Александровна — н. с., ФГБНУ «На-учно-исследователыский институт по изысканию новых антибиотиков им. Г. Ф. Гаузе», Москва

Сумарукова Ирина Георгиевна — н. с., ФГБНУ «Научно-исследовательский институт по изысканию новых антибиотиков им. Г. Ф. Гаузе», Москва

Глухова Алла Алексеевна — н. с., ФГБНУ «Научно-исследовательский институт по изысканию новых антибиотиков им. Г. Ф. Гаузе», Москва

Бойкова Юлия Вадимовна — н. с., ФГБНУ «Научно-исследовательский институт по изысканию новых антибиотиков им. Г. Ф. Гаузе», Москва.

Малкина Наталья Дмитриевна — н. с., ФГБНУ «Научно-исследовательский институт по изысканию новых антибиотиков им. Г. Ф. Гаузе», Москва.

Удалова Виктория Викторовна — н. с., ФГБНУ «Научно-исследовательский институт по изысканию новых антибиотиков им. Г. Ф. Гаузе», Москва

Алферова Вера Александровна — н. с., ФГБНУ «Научно-исследовательский институт по изысканию новых антибиотиков им. Г. Ф. Гаузе», Москва

Коршун Владимир Аркадьевич — руководитель лаборатории, ФГБНУ «Научно-исследовательский институт по изысканию новых антибиотиков им. Г. Ф. Гаузе», Москва Ефременкова Ольга Владимировна — руководитель сектора, ФГБНУ «Научно-исследовательский институт по изысканию новых антибиотиков им. Г. Ф. Гаузе», Москва