CC BY
39
doi: 10.24411/0235-2451-2021-10108 УДК 579.86:579.22
Антииммуноглобулиновая активность бактерий рода Enterococcus, выделенных от животных
Е. Е. КОЧКИНА1, О. Л. КАРТАШОВА12, М. В. СЫЧЕВА12
'Оренбургский государственный аграрный университет, ул. Челюскинцев, 18, Оренбург, 460014, Российская Федерация
2Институт клеточного и внутриклеточного симбиоза Уральского отделения РАН, ул. Пионерская, 11, Оренбург, 460000, Российская Федерация
Резюме. Условно-патогенные микроорганизмы, к числу которых относятся бактерии рода Enterococcus, стремясь выжить в условиях биотопа, реализуют свои персистентные свойства, благодаря которым приобретают способность противостоять факторам естественной резистентности макроорганизма. При этом отдельные персистентные свойства энтерококков, выделенных от животных, в частности, антииммуноглобулиновая активность (АИгА), изучены недостаточно. Между тем, АИгА - важный фактор персистенции, который позволяет микроорганизмам сопротивляться бактерицидному действию иммуноглобулинов и продолжительное время находиться внутри макроорганизма. Цель исследования - охарактеризовать способность энтерококков, выделенных из различных биотопов организма здоровых животных и при патологии, инактивировать секреторный IgA (sIgA). Опыты in vitro проводили на 75 штаммах энтерококков разных видов, выделенных из кишечного биотопа здоровых продуктивных животных и птиц, а также от животных с инфекционно-воспалительными заболеваниями, sIgA-протеазную активность микроорганизмов определяли по методике О. В. Бухарина с соавторами (2004). АИгА в отношении секреторного иммуноглобулина А в популяции фекальных и клинических изолятов энтерококков широко распространена. Этиологически значимые штаммы достоверно (p < 0,01) чаще обладают АИгА в отношении sIgA, чем кишечные изоляты (61,8 % против 31,7 %). Уровень изучаемого фактора персистенции связан с видовой характеристикой культур энтерококков. Максимальная распространённость и выраженность АИгА характерна для штаммов E. faecalis. Культуры энтерококков, изолированные из кишечника птиц, отличаются более высокой распространенностью и выраженностью признака (50,0 % и 21,0 % соответственно), чем фекальные изоляты. Результаты сравнительного анализа частоты встречаемости и уровней выраженности АИгА могут быть использованы для дифференциации энтерококков, выделенных из организма животных, на этиологически значимые штаммы и представителей мутуалистической микробиоты, что открывает перспективы для отбора авирулентных производственно-ценных культур энтерококков. Ключевые слова: антииммуноглобулиновая активность, Enterococcus spp., фактор персистенции, sIgA. Сведения об авторах: Е. Е. Кочкина, аспирант (e-mail: [email protected]); О. Л. Карташова, доктор биологических наук, профессор, зав. лабораторией; М. В. Сычева, доктор биологических наук, зав. кафедрой, старший научный сотрудник (e-mail: [email protected]).
Для цитирования: Кочкина Е. Е., Карташова О. Л., Сычева М. В. Антииммуноглобулиновая активность бактерий рода Enterococcus, выделенных от животных // Достижения науки и техники АПК. 2021. Т. 35. № 1. С. 43-47. doi: 10.24411/02352451-2021-10108.
Antiimmunoglobulin activity of bacteria of the genus Enterococcus isolated from animals
E. E. Kochkina1, O. L. Kartashova12, M. V. Sycheva12
1Orenburg State Agrarian University, ul. Chelyuskintsev, 18, Orenburg, 460014, Russian Federation
2Institute of Cellular and Intracellular Symbiosis, Ural branch, Russian Academy of Sciences, ul. Pionerskaya, 11, Orenburg, 460000, Russian Federation
Abstract. Conditionally pathogenic microorganisms, striving to survive in a biotope, realize their persistent properties, thanks to which they acquire the ability to withstand the factors of natural resistance of the macroorganism. An important persistence factor that allows microorganisms to resist the bactericidal action of immunoglobulins and to stay inside the macroorganism for a long time is anti-immunoglobulin activity (AIgA). The purpose of the study was to characterize the ability of enterococci isolated from various biotopes of the body of healthy animals and in pathology to inactivate secretory IgA (sIgA). In vitro experiments were conducted on 75 strains of enterococci of different species isolated from the intestinal biotope of healthy productive animals and birds, as well as from animals with infectious and inflammatory diseases; the sIgA-protease activity of microorganisms was determined by Bukharin's method (2004). AIgA against secretory immunoglobulin A is widespread in the population of faecal and clinical isolates of enterococci. Etiologically significant strains significantly (p was less than 0.01) more often possess AIgA against sIgA than intestinal isolates (61.8% versus 31.7%). The level of the studied persistence factor is associated with the species characteristics of enterococcal cultures. The maximum prevalence and severity of AIgA in the experiment was characteristic of E. faecalis strains. Cultures of enterococci isolated from the intestines of birds were distinguished by a higher prevalence and severity of the trait (50.0% and 21.0%, respectively) than faecal isolates. The results of a comparative analysis of the frequency of occurrence and severity levels of AIgA can be used to differentiate enterococci isolated from the body of animals into etiologically significant strains and representatives of the mutualistic microbiota that opens up prospects for the selection of avirulent production-valuable enterococci cultures.
Keywords: anti-immunoglobulin activity; Enterococcus spp.; persistence factor; sIgA.
Author Details: E. E. Kochkina, post graduate student (e-mail: [email protected]); O. L. Kartashova, D. Sc. (Biol.), prof., head of laboratory; M. V. Sycheva, D. Sc. (Biol.), head of department, senior research fellow (e-mail: [email protected]). For citation: Kochkina EE, Kartashova OL, Sycheva MV. [Anti-immunoglobulin activity of bacteria of the genus Enterococcus isolated from animals]. Dostizheniya nauki i tekhniki APK. 2021;35(1):43-7. Russian. doi: 10.24411/0235-2451-2021-10108.
Энтерококки - представители нормального микробиоценоза человека и животных. В течение многих лет их не рассматривали в качестве
клинически значимых возбудителей инфекционной патологии. Однако в последние годы бактерии этого рода стали предметом пристального внимания
клинической микробиологии из-за возрастающей роли в развитии инфекционно-воспалительных заболеваний [1, 2, 3].
Известно, что условно-патогенные микроорганизмы, в том числе энтерококки, стремясь выжить в условиях биотопа, реализуют свои персистентные свойства, благодаря которым они приобретают способность противостоять факторам врождённого и адаптивного иммунитета макроорганизма [4, 5]. Изучению персистентных свойств энтерококков, выделенных от животных, посвящен ряд исследований [6, 7], однако отдельные их свойства, в частности, антииммуноглобулиновая активность (АИгА), еще не рассмотрены. Между тем, АИгА - это важный фактор персистенции, который позволяет микроорганизмам сопротивляться бактерицидному действию иммуноглобулинов и продолжительное время находиться внутри макроорганизма [8]. Особый интерес представляет изучение способности микроорганизмов деградировать секреторный иммуноглобулин А, который не только обеспечивает эффективную антиинфекционную защиту, реализующуюся на поверхности эпителиального барьера, но и способен нейтрализовать патогены как внутри энтероцитов, так и на уровне собственной пластинки слизистой оболочки.
Цель исследования - охарактеризовать способность бактерий рода Enterococcus, выделенных из различных биотопов организма животных в норме и при патологии, инактивировать секреторный IgA.
Для реализации поставленной цели решали следующие задачи:
определить пенетрантность антииммуноглобули-новой активности среди фекальных и клинических изолятов энтерококков, выделенных от животных.
оценить выраженность АИгА бактерий рода Enterococcus, изолированныхотживотных, сучётом их видовой и клинической значимости.
Условия, материалы и методы. Материалом для исследования служили 75 культур энтерококков, из которых 41 штамм выделен из фекалий здоровых продуктивных животных и птиц. Энтерококки были представлены видами E. faecium, E. hirae, E. faecal is, E. durans, E. casseliflavus и E. flavescens. Клинические изоляты бактерий рода Enterococcus были представлены 34 культурами, выделенными от продуктивных животных с инфекционно-воспалительными заболеваниями, принадлежащих учебному хозяйству Покровского сельскохозяйственного колледжа (филиал ФГБОУ ВО Оренбургский ГАУ), и от мелких животных-компаньонов, поступавших на лечение в ветеринарные клиники г. Оренбурга. Энтерококки, изолированные из клинического материала, Рис. включали 13 штаммов из кокков.
экскрета половых органов самок при эндометритах (E. faecalis, E. durans, E. faecium); 18 культур из раневого отделяемого (E. faecalis, E. faecium, E. casseliflavus, E. flavescens) и 3 изолята из секрета молочных желёз при маститах (E. hirae, E. casseliflavus, E. faecalis).
Б1дА-протеазную активность микроорганизмов определяли по методике О.В. Бухарина с соавторами (Бухарин О. В., Чайникова И. Н., Валышев А. В. Способ определения антииммуноглобулиновой активности микроорганизмов //Патент РФ № 2236465, 20.09.2004). Для этого в пластиковые пробирки типа «эппендорф» вносили 20 мкл микробной взвеси с концентрацией клеток 109/мл и 20 мкл раствора иммуноглобулина. В контрольную пробу, вместо микробной взвеси вносили 20 мкл забуференного физиологического раствора. Через 24 ч инкубации при 37 °С пробы центрифугировали 20 мин. при 8000 об./мин. при +5 °С. Остаточную концентрацию иммуноглобулинов в опытных и контрольной пробах определяли иммуноферментным анализом с использованием набора «1дА секреторный - ИФА-БЕСТ» в соответствии с инструкцией использования этих реагентов. Оптическую плотность опытной и контрольной проб измеряли на фотометре STAT FAX 2100 при Л 492 нм.
Расчет sIgA-протеазной активности проводили по формуле:
АИгА = х 100 %,
Ск
где Ск - концентрация иммуноглобулина в контроле, мкг/мл; Со - концентрация иммуноглобулина в опыте, мкг/мл.
Статистическую обработку результатов исследований проводили с использованием автоматизированной программы «Биостатистика». Она предусматривала определение средних значений, среднего квадратичного отклонения и средней ошибки. Достоверность различий сравниваемых показателей оценивали по t-критерию Стьюдента (АшмаринИ. П., Воробьев А. А. Статистические методы в микробио-
1. Распространенность (1) и выраженность (2) АИгА у фекальных изолятов энтеро-
логических исследованиях. Л.: Гос. изд-во мед. лит., 1962. 180 с.).
Результаты и обсуждение. Колонизация биотопов организма животных различными микроорганизмами связана с наличием у них факторов, способствующих либо уходу от защитных механизмов макроорганизма, либо их инактивации. Один из таких факторов - антииммуноглобулиновая активность. В связи с этим мы изучили способность клинических и кишечных изолятов энтерококков, выделенных от животных, деградировать секреторный иммуноглобулин А.
При изучении антииммуноглобулиновой активности энтерококков установлено, что способностью инактивировать секреторный иммуноглобулин А обладали 13 фекальных изолятов (31,7 ± 7,3 %). Средняя величина изучаемого фактора персистен-ции у культур, выделенных из кишечника, составляла 18,5 ± 1,6 %. Чаще всего способность деградировать секреторный иммуноглобулин А регистрировали у штаммов вида E. faecalis (30,8 ± 12,8 %), реже - у E. Ы^ (23,1 ± 11,7 %), E. faecium (23,1 ± 11,7 %), E. durans (7,7 ± 7,4 %), E. casseliflavus (7,7 ± 7,4 %) и E. flavescens (7,7 ± 7,4 %). Экспрессия антиимму-ноглобулинового признака в отношении секреторного иммуноглобулина А среди фекальных культур энтерококков нарастала (рис. 1) в ряду E. hirae (15,9 ± 0,8 %) - E. faecium (16,7 ± 0,0 %), E. casseliflavus (16,7 %), E. flavescens (16,7 %) - E. faecalis (19,1 ± 3,2 %) - E. durans (33,3 %). При этом следует отметить, что среди энтерококков видов E. casseliflavus, E. flavescens, E. durans только по одному штамму обладали изучаемым свойством.
Рис. 3. Распространенность (1) и выраженность (2) АИгА у клинических изолятов энтерококков.
1,1 %. Среди клинических изолятов высоким уровнем признака характеризовались штаммы E. faecalis -16,8 ± 1,4 % и E. faecium, E. casseliflavus, E. durans -14,3 % (рис. 3). Культуры E. flavescens и E. hirae не обладали антииммуноглобулиновой активностью в отношении секреторного иммуноглобулина А.
АИгА клинических изолятов энтерококков зависела от источника выделения: чаще способность к деградации секреторного иммуноглобулина А регистрировали у штаммов, выделенных из экскрета половых органов самок при эндометритах (69,2 ± 12,8 %). Способность инактивировать действие секреторного 1дА обнаружена у двух из трех культур (66,7 ± 27,2 %), выделенных из секрета молочных желёз при маститах. Среди культур, изолированных из гнойного экссудата, антииммуноглобулиновый признак в отношении секреторного иммуноглобулина А отмечали у 56,0 ± 12,4 % энтерококков (рис. 4). Степень выраженности антииммуноглобулинового признака изменялась в зависимости от источника выделения, убывая в ряду: гнойный экссудат (17,2 ± 1,9 %) - экскрет половых органов самок (15,9 ± 1,6 %) - секрет молочных желёз (14,3 %).
Рис. 2. Распространенность и выраженность АИгА у культур энтерококков, выделенных из кишечного биотопа птиц (1) и млекопитающих (2).
Стоит отметить, что способность к инактивации секреторного иммуноглобулина А чаще регистрировали у штаммов, выделенных из кишечного биотопа птиц (50,0 ± 14,4 %), в то время как у бактерий рода Enterococcus, изолированных из кишечника млекопитающих, АИгА отмечали лишь в четверти случаев (24,1 ± 7,9 %). Степень экспрессии признака (рис. 2) так же была выше у энтерококков, выделенных из кишечного биотопа птиц (21,0 ± 3,2 %), по сравнению с фекальными изолятами Enterococcus врр. от млекопитающих (16,3 ± 0,3 %).
Проведенные исследования по изучению АИгА у этиологически значимых штаммов энтерококков позволили обнаружить это свойство у 21 испытуемой культуры (61,8 ± 8,3 %). Среднее значение изучаемого фактора персистенции было равным 16,3 ±
Рис. 4. Распространенность (1) и выраженность (2) АИгА среди клинических изолятов энтерококков в зависимости от источника выделения.
Сравнительный анализ частоты встречаемости и уровня выраженности антииммуноглобулиновой активности энтерококков, выделенных от животных в норме и при инфекционно-воспалительных заболеваниях, показал, что пенетрантность исследуемого свойства была значимо (р < 0,01) выше среди клинических культур энтерококков (61,8 ± 8,3 %). При
Рис. 5. АИгА клинических (1) и фекальных (2) изолятов ЕМвгососсив врр. (** различия достоверны при р < 0,01).
этом средние показатели антииммуноглобулиновой активности (рис. 5) у этиологически значимых штаммов Еп1вгососсив врр. (16,3 ± 1,1 %), были меньше, чем у фекальных изолятов (18,5 ± 1,6 %).
Распространённость и уровень выраженности антииммуноглобулинового признака характеризовались межвидовой вариабельностью. Так, пенетрант-ность антиммуноглобулиновой активности у культур Е. faвcaliв была выше, чем у представителей поп-ГавсаНв видов: 63,0 ± 9,3 % против 57,1 ± 18,7 %. Средние величины АИгА у представителей вида Е. faвcaliв также были выше, чем у штаммов пoп-faвcaliв видов: 16,8 ± 1,4 % и 14,3 % соответственно (рис. 6).
Рис. 6. Распространенность и выраженность АИгА в отношении секреторного иммуноглобулина А у культур Е. faвcaliв (1) и штаммов пoп-faвcaliв видов (2).
Таким образом, результаты наших исследований позволили установить ранее неизвестное свойство энтерококков - их антииммуноглобулиновую активность. Выявлена широкая распространенность АИгА в отношении секреторного иммуноглобулина А в популяции фекальных и клинических изолятов энтерококков.
Более широкая распространенность АИгА у изолятов энтерококков, выделенных при инфекционно-воспалительных заболеваниях, по сравнению с кишечными штаммами Еп1вгососсив врр., может свидетельствовать о том, что в процессе эволюционного развития у этиологически значимых штаммов сформировались механизмы персистенции, в том числе антииммуноглобулиновая активность в отношении секреторного 1дА, что позволяет им длительно находиться в организме хозяина и реализовывать свой патогенный потенциал на всех этапах инфекционного процесса.
Наши данные согласуются с аналогичными результатами, полученными другими авторами [9, 10],
которые показали, что клинические изоляты энтерококков характеризуются более высокой частотой встречаемости факторов персистенции, по сравнению с культурами, выделенными из кишечника.
Различия в распространенности АИгА у штаммов, выделенных при маститах и эндометритах, и культур, изолированных из отделяемого гнойных ран, можно объяснить тем, что содержание секреторного иммуноглобулина А в гнойном экссудате меньше, чем на слизистых половых органов и протоках молочной железы [11, 12, 13]. Уместно предположить, что в условиях биотопов макроорганизма с высокой концентрацией в1дА происходит селекция культур с наибольшей экспрессией антииммуноглобулинового признака.
Другой важный аспект заключается в том, что распространенность и выраженность антииммуноглобулиновой активности у бактерий Е. faвcaliв была больше, чем у пoп-faвcaliв видов. Возможно, это связано с тем, что традиционно основной возбудитель инфекционно-воспалительных заболеваний энтерококковой этиологии - Е. faвcaliв. Наличие АИгА у пoп-faвcaliв культур энтерококков, вероятно, можно объяснить значительно возросшей ролью этих микроорганизмов в развитии экзогенных и эндогенных инфекционных процессов [14].
Известно, что концентрация иммуноглобулинов разных классов у различных видов животных может существенно отличаться [15, 16], с чем, вероятно, связана установленная в работе разница пенетрант-ности и выраженности признака у штаммов энтерококков, выделенных от птиц и млекопитающих. Кроме того, это может быть связано со структурными особенностями в1дА у птиц и млекопитающих. Поскольку у первых этот иммуноглобулин состоит из четырех доменов, у вторых - из трех. А, как известно, большее количество доменов повышает чувствительность иммуноглобулина к действию бактериальных протеаз.
Результаты сравнительного анализа частоты встречаемости и уровней выраженности АИгА могут быть использованы для дифференциации бактерий рода Еп1вгососсив, выделенных из организма животных, на этиологически значимые штаммы и представителей мутуалистической ми-кробиоты, что открывает перспективы для отбора авирулентных производственно-ценных культур энтерококков.
Выводы. Бактерии рода Еп1вгососсив способны деградировать секреторный 1дА, что способствует их персистенции в макроорганизме.
Этиологически значимые штаммы энтерококков значимо чаще обладают антииммуноглобулиновым признаком в отношении секреторного 1дА, чем кишечные изоляты, что, вероятно, позволяет им ослабить действие иммунной системы и может существенно влиять на течение и исход инфекционного процесса.
Уровень изученного фактора персистенции связан с видовой характеристикой культур энтерококков. Максимальная распространённость и выраженность антииммуноглобулиновой активности характерна для штаммов Е. faвcaliв.
Культуры энтерококков, изолированные из кишечника птиц, обладают более высокой распространенностью и выраженностью признака, чем кишечные изоляты млекопитающих.
Литература.
1. Public health risks of multiple-drug-resistant Enterococcus spp. in southeast Asia / D. S. Daniel, S. M. Lee, G. A. Dykes, et al. //Applied and environmental microbiology. 2015. Vol. 81. No. 18. P. 6090-6097. doi: 10.1128/AEM.01741-15.
2. Evaluation of virulence factors in Enterococcus species / E. Mete, I. Kaleli, N. Cevahir, et al. // Mikrobyoloji bulteni. 2017. Vol. 51. No. 2. Р. 101-114. doi: 10.5578/mb.53992.ol
3. A three-year whole genome sequencing perspective of Enterococcus faecium sepsis in Australia / T. Lee, S. Pang, M. Stegger, et al. // PLoS ONE. 2020. Vol. 15. No. 2. Р. 1-15. doi: 10.1371/journal.pone.0228781.
4. Михайлова Е. А., Луда А. П., Бигеев М. И. Антииммуноглобулиновая активность бактерий и ее диагностическая ценность // Персистенция бактерий. 1990. № 10. С. 107-111.
5. Андрюков Б. Г., Ляпун И. Н. Молекулярные механизмы персистенции бактерий //Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2020. Т. 97. № 3. С. 271-279.
6. Бугеро Н. В., Потатуркина-Нестерова Н. И. Изменение факторов персистенции энтерококков при сокульти-вировании с простейшими Blastocystis hominis // Вестник новых медицинских технологий. 2012. Т. 19. № 2. С. 73.
7. Fiore E., Tyne D. V., Gilmore M. S. Pathogenicity of enterococci// Microbiology Spectrum. 2019. Vol. 7. No. 4. Р. 10. doi: 10.1128/microbiolspec.GPP3-0053-2018.
8. Косырева Т. Ф., Запорожская-Абрамова Е. С. Определение фактора патогенности микроорганизмов в ротовой жидкости у детей с генерализованным гингивитом // Вестник Российского университета дружбы народов. 2009. № 4. С. 436-439.
9. Бухарин О. В., Валышев А. В. Механизмы устойчивости энтерококков к антимикробным белкам и пептидам // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2012. № 5. С. 89-94.
10. Видовая характеристика и факторы персистенции энтерококков, выделенных от животных в норме и при патологии / Д. В. Пошвина, Н. Е. Щепитова, Т. М. Уткина и др. // Ветеринария. 2015. № 6. С. 26-30.
11. Зубарева Н. А., Ренжин А. В., Шмагель К. В. Местный иммунитет гнойных ран // Медицинская иммунология. 2010. Т. 12. № 12. С. 393-398.
12. Уровень sIgA, IgG, IgA в вагинальном секрете женщин с хроническими воспалительными заболеваниями органов малого таза / Л. В. Шибина, Л. И. Краснопрошина, И. М. Ордиянц и др. // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2013. № 4. С. 55-59.
13. Novak D., Svennerholm A. M. A comparison of seasonal variations in rotavirus antibodies in the breast milk of Swedish and Bangladeshi mothers //Acta Paediatrica, International Journal of Paediatrics. 2015. Vol. 34. No. 6. Р. 149-152. doi: 10.1097/ INF.0000000000000675.
14. Arias C. A., Murray B. E. The rice of the Enterococcus: beyond vancomycin resistance // Nature reviews. Microbiology. 2012. Vol. 10. No. 4. Р. 266-278. doi: 10.1038/nrmicro2761.
15. Voluntary exercise increases IgA concentration and polymeric Ig receptor expression in the rat submandibular gland / Y. Kurimoto, J. Saruta, M. To, et al. // Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry. 2016. Vol. 80. No. 12. P. 2490-2496. doi: 10.1080/09168451.2016.1217145.
16. Non-invasive quantification of immunoglobulin A in chimpanzees (Pan troglodytes schweinfurthii) at Gombe National Park, Tanzania / E. L. Lantz, E. V. Lonsdorf, M. R. Heintz, et al. // American Journal of Primatology. 2018. Vol. 80. No. 1. doi: 10.1002/ajp.22558.
References
1. Daniel DS, Lee SM, Dykes GA, et al. Public health risks of multiple-drug-resistant Enterococcus spp. in southeast Asia. Applied and environmental microbiology. 2015;81(18):6090-7. doi: 10.1128/AEM.01741-15.
2. Mete E, Kaleli I, Cevahir N, et al. Evaluation of virulence factors in Enterococcus species. Mikrobyoloji bulteni. 2017;51(2):101-14. doi: 10.5578/mb.53992.
3. Lee T, Pang S, Stegger M, et al. A three-year whole genome sequencing perspective of Enterococcus faecium sepsis in Australia. PLoS ONE. 2020;15(2):1-15. doi: 10.1371/journal.pone.0228781.
4. Mikhailova EA, Luda AP, Bigeev MI. [Anti-immunoglobulin activity of bacteria and its diagnostic value]. Persistentsiya bakterii. 1990;(10):107-11. Russian.
5. Andryukov BG, Lyapun IN. [Molecular mechanisms of bacterial persistence]. Zhurnal mikrobiologii, epidemiologii i immunobiologii. 2020;97(3):271-9. Russian.
6. Bugero NV, Potaturkina-Nesterova NI. [Changes in persistence factors of enterococci during co-cultivation with protozoa Blastocystis hominis]. Vestnik novykh meditsinskikh tekhnologii. 2012;19(2):73. Russian.
7. Fiore E, Tyne DV, Gilmore MS. Pathogenicity of Enterococci. Microbiology Spectrum. 2019;7(4):10. doi: 10.1128/ microbiolspec.GPP3-0053-2018.
8. Kosyreva TF, Zaporozhskaya-Abramova ES. [Determination of the pathogenicity factor of microorganisms in the oral fluid in children with generalized gingivitis]. Vestnik Rossiiskogo universiteta druzhby narodov. 2009;(4):436-9. Russian.
9. Bukharin OV, Valyshev AV. [Mechanisms of resistance of enterococci to antimicrobial proteins and peptides]. Zhurnal mikrobiologii, epidemiologii i immunobiologii. 2012;(5):89-94. Russian.
10. Poshvina DV, Shchepitova NE, Utkina TM, et al. [Species characteristics and persistence factors of enterococci isolated from animals in health and disease]. Veterinariya. 2015;(6):26-30. Russian.
11. Zubareva NA, Renzhin AV, Shmagel' KV. [Local immunity of purulent wounds]. Meditsinskaya immunologiya. 2010;12(12):393-8. Russian.
12. Shibina LV, Krasnoproshina LI, Ordiyants IM, et al. [The level of sIgA, IgG, IgA in the vaginal secretions of women with chronic inflammatory diseases of the pelvic organs]. Zhurnal mikrobiologii, epidemiologii i immunobiologii. 2013;(4):55-9. Russian.
13. Novak D, Svennerholm AM. A comparison of seasonal variations in rotavirus antibodies in the breast milk of Swedish and Bangladeshi mothers. Acta Paediatrica, International Journal of Paediatrics. 2015;34(6):149-52. doi: 10.1097/ INF.0000000000000675.
14. Arias CA, Murray BE. The rice of the Enterococcus: beyond vancomycin resistance. Nature reviews. Microbiology. 2012;10(4):266-78. doi: 10.1038/nrmicro2761.
15. Kurimoto Y, Saruta J, To M, et al. Voluntary exercise increases IgA concentration and polymeric Ig receptor expression in the rat submandibular gland. Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry. 2016;80(12):2490-6. doi: 10.1080/09168451.2016.1217145.
16. Lantz EL, Lonsdorf EV, Heintz MR, et al. Non-invasive quantification of immunoglobulin A in chimpanzees (Pan troglodytes schweinfurthii) at Gombe National Park, Tanzania. American Journal of Primatology. 2018;80(1). doi: 10.1002/ ajp.22558.
