CC BY
53
2010 г. Январь Февраль Март 60 57 56 5 3 2 8,33 5,26 3,57 54,2±5,4 45,7±5,2 34,9±4,8
В среднем: 8,62 132,6±6,3
Повышение экстенсивности инвазии сопровождалось, как правило, увеличением количества яиц в фекалиях инвазированных животных. Начиная с ноября, отмечали снижение зараженности ягнят M.benedeni до 13,11%. Экстенсивность инвазии животных составила в декабре 10,00%, феврале 5,26% и в марте 3,57%. С апреля яйца M.benedeni в фекалиях молодняка не обнаруживали.
Следовательно, можно полагать, что в условиях Самарской области ягнята начинают заражаться M.expansa и M.benedeni сразу после выгона на пастбище, т.е. с конца апреля месяца. Принимая во внимание тот факт, что продолжительность развития имагинальной стадии M.expansa равна 27-50 суткам и M.benedeni - 55-64 суткам (В.А. Потемкина, 1965).
Литература: 1. Сафиуллин Р.Т. // Ветеринария. - 1997. - № 6. - С. 28-32. 2. Цолоев А.Х. Особенности краевой эпизоотологии, биологии и экологии возбудителей мониезиозов и тизаниезиоза овец и разработка мер профилактики в условиях Ингушетии: Автореф. дис. ... канд. биол. наук. - Махачкала, 2002. -21с. 3. Четвертнов В.И. Мониезиоз овец и коз в Ставропольском крае (сезонно -возрастная динамика, терапия) // Автореф. дис. . канд. вет. наук. -Ставрополь, 2009. - 23с. 4. Шлычков М.И. Г ельминты и основные гельминтозы овец в Куйбышевской области // Автореф. дис. ... канд. вет. наук. - Куйбышев, 1966. - 22с.
Terms of infection of sheep by Moniezia spp. in conditions of the Samara Region. Belova E.E. Samara Scientific Research Veterinary Station.
Summary. One determined the terms of infection of sheep by Moniezia spp. It had been established that sheep were infected by M. expansa and M. benedeni following the oncet of grazing namely at the end of April. M. expansa infection extensity appeared to be 19,44% as while the same index for M. benedeni was 8,62%.
АНТИГЕН ИЗ ПРОТОСКОЛЕКСОВ CYSTICERCUS TENUICOLLIS В ДИАГНОСТИКЕ ТЕНУИКОЛЬНОГО ЦИСТИЦЕРКОЗА И ЭХИНОКОККОЗА ОВЕЦ
Бережко В.К., Тхакахова А.А.
ГНУ ВНИИ гельминтологии им. К.И. Скрябина
Введение. Дифференциальная диагностика ларвальных цестодозов была и остается одной из трудновыполнимых задач, поскольку в антигеном спектре
62
разных видов цестод значительное число компонентов являются общими, что отрицательно сказывается на специфичности иммунотестов.
От антигенной близости различных видов цестод свидетельствуют безуспешные попытки Yong et al (1978) в разработке дифференциальной диагностики тенуикольного и овисного цистицеркоза и ларвального эхинококкоза с использованием в качестве антигена в НРГА жидкости цист паразитов. Об антигенном родстве Tenia hydatigena и T.ovis сообщали Graid, Rickard (1982). Перекрестные реакции между Cysticercus cellulosae, T. solium и T. hydatigena регистрировали Varma et al (1986). Экспериментальными исследованиями установлено, что специфичный для Echinococcus granulosus антиген - «Arc-5» содержится в жидкости тенуикольного пузыря. (Varella-Diaz et al., 1977). Еще ранее Баллад (1973) при исследовании динамики антител при экспериментальном бовисном цистицеркозе установила, что на разных этапах инвазии антитела синтезировались к трем различным антигенам паразита, но у большинства телят и наиболее часто эти антитела регистрировались перекрестно-реагирующим компонентом с Cysticercus tenuicollis. Причем, по мнению автора, очистка антигена C.bovis от общего с C.tenuicollis компонента может снизить его диагностические качества.
Исходя из представленных данных, была поставлена цель - оценить диагностическую эффективность антигена из протосколексов C.tenuicollis при тенуикольном цистицеркозе и ларвальном эхинококкозе в иммуноферментной реакции (ИФР).
Материалы и методы. Протосколексы C.tenuicollis выделяли из тенуикольных пузырей от естественно инвазированных овец. Собранный материал промывали, замораживали и растирали в ступке, помещенной в посуду со льдом. Процесс замораживания и оттаивания с одновременным растиранием биоматериала в ступке повторяли не менее 3-5 раз. Полученную суспензию гомогенизировали в электрическом гомогенизаторе при 2500 об./мин в течение 15 мин, экстрагирование белков проводили фосфатным буферным раствором pH 7,2-7,4 при 40 в течение 24-48 час при постоянном перемешивании на магнитной мешалке.
Гомогенат центрифугировали в центрифуге с охлаждением при 12000 об./мин в течение 15-20 мин.
Надосадочную жидкость (экстракт) освобождали от низкомолекулярных соединений путем диализа против фосфатного буфера pH 7,2, разбавленного дистиллированной водой в соотношении 1:10.
Результаты и обсуждение. Диагностическую эффективность антигена из протосколексов C. tenuicollis при тенуикольном цистицеркозе оценивали в ИФР с сыворотками естественно инвазированных овец в количестве 29 проб. Специфичность реакции устанавливали на основании анализа сывороток овец с очаговыми изменениями печени в количестве 9 проб и без видимых паразитарных изменении - 24 пробы (табл. 1). Аналогичный анализ этого антигена провели с сыворотками овец, инвазированных в количестве 23
63
пробы, а также с 11 пробами сывороток животных с очаговыми изменениями печени и 25 пробами без видимых паразитарных изменений (табл. 2).
Полученные результаты показали, что чувствительность ИФР при тенуикольном цистицеркозе составила 79,3%, поскольку 5 проб сывороток дали ложноотрицательный ответ, а 2 - сомнительный.
Специфичность теста, которую оценивали с 33 сыворотками овец с очаговыми изменениями печени и без видимых паразитарных отклонений, составила 69,7%.
Аналогичный анализ по оценке диагностической эффективности антигена из протосколексов C.tenuicollis c набором сывороток овец с естественной инвазией E.granulosus показал чувствительность ИФР 65,2%, специфичность - 52,6%. Набор сывороток, по которой определяли
специфичность, в этом варианте реакции несколько отличался (табл.2), что повлияло на ее показатели.
Таблица 1.
Оценка чувствительности и специфичности антигена из протосколексов
Сыворотки животных Количество проб Результаты реакции Ч, % С, %
+ положит. ± сомн. отриц.
Цистицеркоз тенуикольный 29 23 2 5 79,3 69,7
Очаговые изменения печени 9 3 2 4
Без видимых паразитарных изменений 24 5 - 19
Всего 62
Оценка чувствительности и специ Cysticercus tenuicollis в ИФР Таблица 2. фичности антигена из протосколексов * при ларвальном эхинококкозе
Сыворотки животных Количество проб Результаты реакции Ч, % С, %
+ положит. ± сомн. отриц.
Эхинококкоз ларвальный 23 15 - 8 65,2 55,6
Очаговые изменения печени 11 6 1 4
Без видимых паразитарных изменений 25 7 2 16
Всего 59
64
Тем не менее полученные нами данные убедительно доказали, что антиген из протосколексов C.tenuicollis не обладает строгой специфичностью и дает ложноположительную реакцию как с сыворотками животных с очаговыми изменениями в печени, так и без видимых паразитарных отклонений. Однако наибольшее число ложноположительных ответов, превышающих 50% исследуемого материала, регистрировали при эхинококкозе. Полученные данные дают еще больше оснований, подтверждающих не только антигенное родство этих паразитов, но и то, что на определенном этапе инвазионного процесса эхинококкоза и тенуикольного цистицеркоза у инвазированных животных вырабатываются антитела на идентичные иммуногены паразитов, что не позволяет проводить в этот период строгую дифференциацию этих гельминтов.
По данным А. Мунтяна (1971) один из функциональных компонентов
E.granulosus, вызывающий синтез антител у инвазированных эхинококками овец, проявлял общность с антигенным компонентом C.tenuicollis. Кожноаллергическими реакциями в НРГА перекрестную реактивность антигенов эхинококков с личиночной стадией Taenia hydatigena установили ранее Шульц и Шихобалова (1937).
Убедительным подтверждением перекрестной реактивности антител, синтезируемых при эхинококкозе и тенуикольном цистицеркозе, явились ранее проведенные нами иммунодиагностические исследования при ларвальном эхинококкозе и тенуикольном цистицеркозе свиней, в которых установили более 30% положительных ответов в гетерологичных системах реакции (Бережко, 1994). И, тем не менее, на наш взгляд, иммунотест на основе ИФР с антигеном из протосколексов C.tenuicollis может использоваться для проведения сероэпизоотологического мониторинга ларвальных цестодозов, причем для большей объективности такие исследования лучше проводить одновременно с эхинококковым антигеном.
Литература: 1.Баллад Н.Е. //Мед. паразитология и паразитарные болезни. - 1973. - № 2. - С. 131-136. 2.Бережко В.К. //Дис... доктора биологических наук. - Москва. - 1994. - С. 354-412. З.Мунтян Н.А. // Мед. паразитология и паразитарные болезни. - 1971. - № 5. 1. - С. 558-665. 4.Шульц Р.С., Шихобалова Н.П. // Мед. паразитология и паразитарные болезни - 1937. - т. 1. - С. 116-133. 5.Graig P.S., Rickard M.D.// Z. Parasitekk. -1982. - v. 67, № 2. - P. 197-209. 6.Varella-Diaz V.M., Coltorti E.A., Rickard M.D., Torres J.M. // Res. Vet. Sc. - 1977. - v. 23, № 2. - P. 213-216. 7.Varma T.K., Malvija H.C., Ahuwalia S.S. // Indian. J. Anim. Sc. - 1986. - v. 56, № 6. - P. 621-627.8.Yong W.K., Heath D.D., Parmeter S.N. // New. Zealand. Vet. Sournal. -1978. - v. 26, № 9. - P. 231-234.
Cysticercus tenuicollis protoscolices antigen in diagnosis of Cysticercus tenuicollis and Echinococcus infections in sheep. Berezhko V.K., Thakahova A.A. All-Russian K.I. Skryabin Scientific Research Institute of Helminthology.
Summary. One represented the results of evaluation of diagnostic efficacy of C. tenuicollis protoscolises antigen at C. tenuicollis and Echinococcus infections in
65
sheep using ELISA. The sensitivity and specificity values in respect of C. tenuicollis appeared to be 79,3 and 69,7% as while the same indices for larval Echinococcus were 65,2 and 55,6% respectively.
«БРОНТЕЛ-ПЛЮСтм» - УНИВЕРСАЛЬНОЕ СРЕДСТВО ДЛЯ КОРРЕКЦИИ АССОЦИАТИВНЫХ ПАРАЗИТОЗОВ У ОВЕЦ И КОЗ
Березовский А.В*, Джураев С.Д. **
*Научно-производственная фирма «Бровафарма» (Украина) **Таджикский аграрный университет имени Ш. Шотемура (Республика
Таджикистан)
Введение. В большинстве овцеводческих хозяйств, особенно тех, где применяется пастбищная или отгонно-пастбищная технология содержания, овцы систематически бывают инвазированными целым «букетом» возбудителей [1-3]. Их сочетание и интенсивность инвазии - очень изменчивое и разнообразное, зависящее от целого ряда факторов обуславливающих эпизоотическую ситуацию. Однако наиболее часто ассоциации формируют: трематодозы (F.hepatica, D.lanceatum); цестодозы (M.expansa, M.benedeni); нематодозы (Bunomostum spp., Haemonchus spp., Nematodirus spp., Oesophagostomum spp., Tr. axei, Ch. ovina) и арахно-энтомозы (P. ovis, S. ovis, Ch.ovis, O.ovis, M.ovinus). Для лечения и профилактики каждой из их, разработано немалое количество химиотерапевтических средств [4, 5]. Среди них доминирующее положение снискали инъекционные формы препаратов. Из которых, в последние два десятилетия, преимущественно применяют средства на основе макроциклических лактонов (ивермектин, дорамектин, моксидектин, селамектин) или салицилаланидов (клозантел, оксиклозанид, рафензол). Первые, тем не менее, достаточно эффективны лишь относительно нематодозов и арахно-энтомозов. Вторые - наряду с назваными, еще довольно результативны относительно ключевых трематодозов. Но все они не эффективны для цестод [4, 6]. Учитывая все возрастающую значимость ассоциативных инвазий, нами создан комплексный препарат «Бронтел-плюс™», который в состоянии обеспечить оздоровление поголовья мелкого рогатого скота от возбудителей паразитозов всех четырех названных выше групп [7].
Материалы и методы. В ходе доклинических опытов мас-спектрометрическим методом удостоверили химическую совместимость и долговременную стабильность предложенных двух активно действующих компонентов в составе оригинальной комбинации наполнителей. Параметры острой токсичности нового препарата устанавливали двумя способами по общепринятым методикам [8].
Результаты. За основу нового комплексного препарата был взят препарат «Бронтел 10%», который успешно используется на рынке
66
