CC BY
53
1 1. Тслятьсв В.В. Полезные растения Центральной Сибири / В.В. Тслятьсв. - Иркутск: Вост.-Сиб. кн. изд-во, 1985. -41 7 с.
12. Химический анализ лекарственных растений. /Под ред. И.И. Гринкевич. - М.: Высшая школа, 1983. -176 с.
13. Са1арапо А.Ь. Ап1к>х1<1ап1 еН'ес! оГ Пavonoids /
А.Ь. Са1арапо // Angiology. - 1997. - 1ап.48(1). -Р.39-44.
14. Furchgoll K.F. The pharmacological differcnlialion of adrenergic receptors / K.F Furchgoll // Ann. N.-Y. Acad. Sci. - 1967. - Vol. 139. - P.553-570.
15. Karber G. Beilrasur kollekliven Behandlung pharmakologischcr Reihcnversuchc / G. Karber // Arch. Exp. Path. - 1931. - Bd.162. - S.480-483.
<0 ГУН БИЛИ Г Д., МЯГМАР Л., НАРАНТУЯА С. -УДК 615.322:633.88.03+615.2761(519.3)
АНТИФЛОГИСТИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ СУММЫ СЕСКВИТЕРПЕНОВ, ВЫДЕЛЕННЫХ ИЗ Achillea asiatica (L.) SERG, ПРОИЗРАСТАЮЩЕГО НА ТЕРРИТОРИИ МОНГОЛИЯ
Д. Гунбилиг, А. Мягмар, С. Нарантуяа.
(Институт химии и химической технологии АН Монголии, директор - д.х.н., проф. Б. Пурэвсурэн; Монгольский государственный медицинский университет, ректор - д.м.н., проф. Ц. Лхагвасурэн, кафедра фармакологии, зав. - проф. Л. Мягмар)
Резюме. Продолжая фитохимическое изучение представителей рода Achillea, мы изучили се-сквитерпены, выделенные из тысячелистника азиатского, включающих три новых высоко-гидроксилированных гуайанолидов без экзоциклических метиленовых групп и несколько других сесквитерпенов с потенциальной биологической активностью. Была изучена их антифлогисти-ческое влияние на развитие пролиферативного воспаления. Установлено, что сумма сесквитерпенов тысячелистника азиатского оказывает противовоспалительное действие на модели воспаления и изменяет выраженность воспалительной реакции. Также установлено, что сумма сесквитерпенов при оральным введении обладают выраженной противовоспалительной активностью. Однако препарат достоверно уменьшал воспалительную реакцию через 30 и 120 минут после индукции воспаления и эффект был непродолжителен и уменьшался в конце эксперимента.
В последние годы все большее признание получает лечение воспалительных заболеваний с помощью средств базисной терапии. Препараты этой группы в отличие от других противовоспалительных средств, влияют на молекулярном уровне на воспалительные энзимы iNOS, СОХ-2, 5-LOX, фосфолипаза Ат и транскрипционный фактор NF-KB [3,4], который регулирует транскрипцию воспалигельных медиаторов как цитокины и хе-мокины.
Некоторые сесквитерпены и сесквитерпеновые лактоны выделены из разных видов произрастающих в Европейских территории Achillea, которые не могут ингибировать транскрипционный фактор NF-кВ. Чтобы ингибировать их эти соединения должны иметь а-метилен-у-лактоновый или
а,Р-ненасыщенные карбонильные группы [8]. Выделение и характеристика этих сильнополярных проазуленов и непроазуленов, структурно знакомых нам [10] и грех новых сесквитерпенов из Achillea asiatica (L.) Serg. выполнялись и излагались впервые авторами в ряде предыдущих публикаций [5,6].
В Монгольской традиционной медицине A.asiatica (L.) Serg. часто использовалась при воспалениях, геморроидальных кровотечениях, патологиях менструаций и опухолей внутренних органов, при лечении ран и укусов змей. Монгольскими синонимами являются Бампо, Найтаалж и Яз.ху.
Обладая горьким вкусом, острым и холодными свойствами, она используется при лечении комплексов симптомов, определяемых в монгольской и тибетской традиционной медицине как Чих-хаа [2]. До сегодняшнего дня не сообщалось о позитивных или негативных эффектах при взаимодействиях между традиционным лекарственным препаратом из A.asiatica (L.) Serg. и другими препаратами. Кроме того, не имеется никаких исследований о том, как Монгольская A.asiatica (L.) Serg. влияет на воспалительный процесс. Таким образом, представляло интерес изучить влияние природных сесквитерпенов на развитие воспаления в эксперименте. В связи с литературными данными [7,8] появляется необходимоеть определения их биологической активности.
Тысячелистник очень широко применялся в традиционной медицине Тибета и Монголии, из чего можно сделать вывод о наличии у него широкого спектра действия и возможно противовоспалительном влиянии. Растения рода Achillea, являющиеся природными источниками сесквитерпенов, издавна применялись в терапевтических целях намного шире, чем в декоративных и кулинарных целях. В связи с широким спектром действия, такими как антифлогистическое, кровоостанавливающее, вяжущее, антисснтичсскос, ветрогонное, ранозаживляющее и возможно анестетическое, они использовались в медицине многих
стран мира. К показаниям по применению Achillea относятся желудочные и кишечные заболевания, воспаление кожи и слизистой оболочки. Эго связано с противовоспалительной активностью про-азуленов, похожие на матрицин в ромашке [7]. Под влиянием кислот, света и температуры гуайа-нолиды превращаю гея в хамазулены. Проазулены и хамазулены проявляю!' противовоспалительную активность на каррагенинную эдемную модель и кро гоно-масло-ушном тесте [8]. Проазулены не вызываюг аллергической реакции, в то время, как гуайанолиды, выделенные из гексаплоидной группы A.millefolium, содержащие а-метилен-у-лак гоны, провоцирую!' аллергическую реакцию [6].
Материалы и методы
С целью выделения суммы сесквитерпенов были применены только цветки растений для которых характерно относительно высокое содержание проазуленов и меньшее количество хлорофилла, воска и жира. Грубоизмельченных цветков растений A. asiatica (L.) Serg. [1] в количестве 1000.0 собранных в июле 1999 г. в центральной части Монголии (Тев аймак, около реки Шаварт) в период их полного цветения настаивали три раза по 15 минут с дихлоромеганом при комнатной температуре в ультразвуковой ванне. После высушивания in vacuo при максимуме 40°С был получен неочищенный экстракт (29,0 г). Этот экстракт повторно был очищен 50% раствором метанола с целью концентрирования сесквитерпенов, которые составили 3,9 г ароматических масел [5,6].
С целью установления биологически активного действующего начала A. asiatica (L.) Serg. Мы
Влияние суммы
определили противовоспалительное действие суммы сескви терпенов, содержащихся в данном растении. Исследование было проведено на кафедре фармакологии Монгольского государственного медицинского университета.
Воспалительную реакцию у мышей воспроизводили субплан гарным введением 0,15 мл овааль-бумина в заднюю конечность [9]. Выраженноеть отечной реакции оценивали онкометрически при помощи илетизмометра UB 7140 (UGO Basile, Италия) через Уг, 1 и 2 ч после индукции воспаления. Суммы сескви терпенов вводили в виде 0,2% масленных растворов в объеме 0,3 мл орально за 30 минут до воспаления. Раствор суммы сескви-терпенов вводили в течение 5 дней в суточных дозах 24,5 мг/кг соответственно. Во всех опытах животные контрольных групп получали дистиллированную воду и 2% раствор амидопирина соответственно объему и способу введения изучаемых препаратов. Действие препаратов изучали на 20 беспородных животных обоего пола массой
22,5-28,5 г.
Для всех полученных данных определяли
среднее арифметическое значение (Л/) и ошибку средней арифметической (/и). Статистическая обработка результатов выполнена с использованием г-критсрия Стыодента.
Результаты п обсуждение
Из разных литературных данных можно узнать о высокой противовоспалительной активности
многих представителей группы сесквитерпенои дов [7,11]. В ходе работы через 20 минут после введения оваальбумина в область конечности, у мышей можно было наблюдать экссудативный
Таблица 1.
в па развитие воспаления
Вещество Выраженность отека лапы, мкл
До Через '/г часа Через 1 час Через 2 часа
1 0,30 0,36 0,32 0,27
£ 3 Ті 2 0,21 0,33 0,21 0,17
S S 3 Э 5 3 0,1 0,43 0,28 0,25
G 1 а 4 0,20 0,30 0,28 0,27
и 5 0,12 0,28 0,25 0,21
L Хі 0,93 1,7 1,34 1,17
М+т 0,186±0,03 0,34+0,02 0,268+0,02 0,234+0,02
га 1 0,21 0,43 0,33 0,18
ч о 2 0,20 0,37 0,28 0,26
н 3 0,25 0,42 0,37 0,24
о к 4 0,14 0,40 0,38 0,22
11 5 0,13 0,38 0,32 0,26
L Хі 0,93 2,0 1,68 1,16
М+т 0,186±0,02 0,4+0,02 0,336+0,02 0,232+0,01
Г 1 0,17 0,51 0,43 0,38
9- S. 2 0,38 0,66 0,52 0,46
'° о 3 0,21 0,46 0,34 0,30
ч (X S 4 0,17 0,41 0,30 0,27
S га 5 0,25 0,44 0,43 0,40
£ Хі 1,18 2,48 2,02 1,81
М+т 0,236+0,03 0,496+0,04 0,404+0,02 0,362+0,03
Рис. 1. Влияние суммы сесквитерпенов на развитие воспалительного процесса в области конечное гей мышей.
воспалительный процесс. На 30-ой минуте, в 1-ый и 2-ой час эксперимента мы измеряли величину отска (табл.1.). Как видно из таблицы, спустя 30 минут после опыта величина лапки увеличилась по сравнению с исходной на 82,8%. При дальнейшем наблюдении отёк с 1-го часа начал уменьшаться и снизился на 21,2% от максимальной величины, на 2-ом часу - на 3 1,2%.
При исследовании контрольной группы (дистиллированная вода) мышей на 30-ой минуте отёк увеличил объем конечностей на 25,4%, на 1-ом часу - 71,2%, на 2-ом - отёк снизился и составлял 53,4%.
При исследовании сравнительной группы мышей, котором вводили (2% р-р амидопирина) отек снизился у них на 30-ой минуте на 84,0%, через час - 63,0%, на 2-ом часу - 12,6%.
При сравнении задних лап было заменю, что сумма сесквитерпенов тысячелистника азиатского
снизила отёк на 31,7% и ограничила воспалительную альтерацию и экссудацию, что свидетельствует о его явном противовоспалительном дейст-ви и.
На основе полученных результатов данного эксперимента мы пришли к выводу, что биологически активным веществом тысячелистника азиатского (Achillea asiatica (L.) Serg.), оказывающим противовоспалительную активность являю гея сумма сесквитерпенов. На модели воспаления установлено, что сумма сесквитерпенов при оральном введении обладаюг выраженной противовоспалительной активностью, вызванной оваальбу-мином. А именно при исследовании выявлено, что препарат вызвал статически достоверное подавлении реакции на 13,4% по сравнению с контролем, через V2 часа - на 31,8%, через 1 час - на 38,0%, через 2 часа - на 26,9% после индукции воспаления.
ANTIPHLOGISTIC ACTIVITY OF TOTAL SESQUITERPENES ISOLATED FROM Achillea asiatica (L.) Serg, GROWING IN MONGOLIA
D. Gunbilig, L. Myagmar, S. Naranluya
(Institute for Chemistry and Chemical Technology, Mongolian Academy of Sciences,
Department of Pharmacology, Medical University of Mongolia)
In continuation of the phytochemical investigations of Mongolian Achillea species one of them (Achillea asiatica (L.) Serg.) was examined for its sesquiterpene constituents, yielding three new highly hydroxylated guaianolides without exocyclic methylene group and other several known sesquiterpenes with potential biological activity.
The antiphlogistic properties after oral administration of analytes were studied on experimental while mice. After 30 and 120 minutes it showed significant activity which decreased at the end of the experimental period.
Литература
1.Грубов В.И. Определи гель сосудистых растений Монголии (с атласом) Ленинград. Наука, 1982. -243 с.
2. Лигаа У. Монголы" уламжлалт эмнэлэгт эмийн ургамлыг хэрэглэх арга ба жор Улан-Багор, Арцат 1997. - С.236-238.
3. Barnes P.J.. Karin М. Nuclear ГасІог-kB. A pivotal transcription factor in chronic inflammatory disease // N. Eng. J. Med. 1997. - Vol.336. - P. 1066-1071.
4. Bauerle P.A., Henkel T. Function and activation of NF-kB in the immune system // Ann. Rev. Immun. 1994. - N. 12. - P. 141 -179.
5. Glasl S., Gunbilig D., Naranluya S.. Werner I. el al. Combination of chromatographic and spectroscopic methods for the isolation and characterization of polar guaianolides from Achillea asiatica II Journal of Chromatography A. - 2001. - Vol.936. - P. 193-200.
6. Glasl S., Prcsser A., Gunbilig D., Werner 1. el al. Highly hydroxylated guaianolides of Achillea asiatica
and Middleeuropean Achillea spccics // Phytochemistry. - 2001. -Vol.58. P. 1189-1194.
Jakovlev V., Isaac O., Flaskamp E. Pharmaklogische Unlersuchungen von Kamillen-InhallssloHen // Planla IVledica. - 1983. - Vol.49. - P.67-73.
Lyb G., Glasl S., Jurenilsch J., Pahl H.L. el al. A sesquiterpene and sesquiterpene lactones from the Achillea millefolium group possess antiinflammatory properties but do not inhibit the transcription factor NF-kB // Pharmaceutical and Pharmacological Letters. -2000,-Vol.10. - P. 13-15.
9. Marlin G.J., Brendler J.M. Proc. Soc. Exp. Biol.
Med. - 1954. - Vol.86. - P.636-638.
10. Naranluya S., Glasl S., Balsuren D., Jurenilsch J. The
flavonoids and sesquiterpenes of Achillea asiatica (L.) Serg. 11 Scienlia Pharmaceulica. - 1999. - Vol.67. -P.69-76.
11. Zillerl-Eglseer K., Jurenilsch J., Korhammcr S.,
Haslinger E. el al. EnlzUndungshemmende Sesquiler-penlaclone von Achillea setacea* // Planla Medica. -1991. - Vol.57. - P..444-446.
<0 ХОБРАКОВА В.Б., СОДНОМОВА Л.Б., БАЛ ДА НОВА И.Р., БУРАЕВА Л.Б., ШЕЛУХЕЕВА М.Г. -УДК 615.32: 612.017.1
ВЛИЯНИЕ ОТВАРА ЛИШАЙНИКА О.АОША БТЕНАШБ И ЕГО ПОЛИСАХАРИДНОЙ ФРАКЦИИ НА СОСТОЯНИЕ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ ОРГАНИЗМА ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ИММУНОДЕПРЕССИИ
В.Б. Хобракова, Л.Б. Содномова, И.Р. Балданова, А .Б .Бураева, М.Г. Шелухеева.
(Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН, г.Улан-Удэ, директор - чл.-корр. РАН, проф. В.М. Корсунов)
Резюме. В опытах на мышах линии (СВАхС57В1/6) установлена иммунокорригирующая активность отвара таллома лишайника С1ас1та хГеПап'х (Оря.) Вгос1о в объеме 10 мл/кг и выделенной из него полисахаридной фракции в дозе 20 мг/кг в условиях азатиоприновой иммунодепрессии, которая выражалась в повышении показателей клеточного и гуморального звеньев иммунного ответа.
В условиях роста техногенного загрязнения и ухудшения социально-экономических условий жизни нарастает напряженноеть функционирования иммунной системы с последующим развитием иммунодефици ГНОГО СОСТОЯНИЯ - основы для хро-низации многих возникающих в организме патологических процессов. Вопросы коррекции иммунодефицита являются актуальными, в связи с чем интерес к иммуномодуля горам растительного происхождения, характеризующимся ноли валентностью действия и отсутствием токсического эффекта, сохраняется.
Объектами настоящего исследования явились отвар таллома лишайника кладины звездчатой (С1асНпа згеНапз) и выделенная из него полисахаридная фракция. Высокая эффективность лишайника как антимикробного средства при ожогах и воспалительных процессах, использование его в народной медицине в качестве противоракового средства предполагает наличие у него иммуномодулирующей активности [9]. Выбор полисахаридной фракции таллома лишайника обусловлен ее доминированием в химическом составе испытуемого средства и высокой иммуномодулирующей активностью растительных полисахаридов [5,12, 13].
Цель настоящего исследования - определение влияния отвара таллома лишайника СкиИпа $ге!-/аги и его полисахаридной фракции на состояние клеточного и гуморального звеньев иммунной системы в условиях экспериментальной иммунодепрессии, вызванной азатиоприном.
Материалы и методы
Эксперименты проведены на мышах обоего пола линии F, (СВАхС57В1/6) массой 18-20 г. Контролем служила группа мышей с иммунодефицитом, вызванным введением азатиоприна в дозе 50 мг/кг перорально в течение 5 дней [3]. Таллом лишайника в форме отвара и полисахаридную фракцию вводили опытным группам мышей на фоне азатиоприна в объеме 10мл/кг и в дозе 20 мг/кг, соответственно, перорально 1 раз в сутки в течение 14 дней. Действие испытуемых средств на состояние клеточного звена иммунитета оценивали в реакции гиперчувсгвигельносги замедленного типа (ГЗТ) [6], на состояние гуморального звена иммунного ответа - по количеству ап ги телообразующих клеток (АОК), определяемых методом локального гемолиза fill- Полученные результаты обработаны статистическим методом с помощью критерия Стыодента [1].
Результаты и обсуждение
Влияние испытуемых веществ на состояние клеточного звена иммунного ответа определяли по реакции ГЗТ. Азатиоприновая иммунодепрессия проявилась в угнетении индекса реакции ГЗТ на 47,0% по сравнению с таковым в интактной группе. При использовании отвара лишайника и полисахаридной фракции на фоне описанной выше иммуносупрессии наблюдалось достоверное относительно контроля повышение индекса ГЗТ-реакции на 30,2% и 40,6%, соответственно (табл. 1).
