CC BY
9"BicHUK стоматологИ'", № 2, 2012
25
области / Л.М. Гаврикова, И.Т. Сегень // Стоматология. - 1996. -Спец. вып. - С. 49-50.
13. Гирин С. В. Модификация метода определения активности каталазы в биологических субстратах / С. В. Гирин // Лабораторная диагностика. - 1999. - № 4. - С. 45-46.
Поступила 22.02.12
УДК 616.36-102.2-07:616-078.33
Е. Н. Кушнир, И. В. Ходаков
Одесский национальный медицинский университет ГУ «Институт стоматологии НАМН Украины»
АНТИДИСБИОТИЧЕСКОЕ И ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНОЕ ДЕЙСТВИЕ ФИТОГЕЛЯ «ВИНОГРАДНЫЙ» НА СЛИЗИСТУЮ ПОЛОСТИ РТА КРЫС С ГЕНЕРАЛИЗОВАННЫМ ДИСБИОЗОМ
В эксперименте на крысах, у которых вызвали генерализованный дисбиоз введением с питьевой водой линкомицина, показано лечебно-профилактическое действие фитогеля, содержащего экстракт из листьев винограда. Антидис-биотическое действие оценивали по активности ферментов уреазы и лизоцима, а противовоспалительное — по уровню МДА и активности эластазы.
Ключевые слова: дисбиоз, слизистая полости рта, фито-гели, виноградные листья, воспаление, ферменты
€. М. Куштр, I. В. Ходаков
Одеський нацюнальний медичний утверситет ДУ «1нститут стоматологИ НАМН Украши»
АНТИДИСБ1ОТИЧНА I ПРОТИЗАПАЛЬНА
Д1Я Ф1ТОГЕЛЮ „ВИНОГРАДНИЙ" НА СЛИЗОВУ ПОРОЖНИНИ РОТА ЩУР1В З ГЕНЕРАЛ1ЗОВАНИМ ДИСБ1ОЗОМ
В експериментi на щурах, у яких вiдтворювали генералiзо-ваний дисбiоз шляхом введення з питною водою лткомщи-на, показали л^вально-профтактичну дю фтогелю, який мiстить екстракт з листя винограду. Антидисбiотичную дю оцтювали за рiвнем активностi ферментiв уреази i л^ зоцима, протизапальну — за рiвнем МДА та активностi еластази.
Ключовi слова: дисбюз, слизова порожнини рота, фiтогелi, виноградт листя, запалення, ферменти
E. N. Kushnir, I. V. Khodakov
Odessa State Medical University SE "The Institute of Dentistry of the NAMS of Ukraine"
THE ANTIDISBIOTIC AND ANTIINFLAMMATORY INFLUENCE OF PHYTOGEL "VINOGRADNYJ" ON THE ORAL MUCOUS MEMBRANE OF RATS WITH GENERALIZED DISBIOSIS
At the experiment with rats, in which the generalized disbiosis was caused by the introduction of lincomycin with table water, the treatment and preventive effect of phytogel, containing the extract of vine leaves, was shown. The antidisbiotic influence
was estimated by the activity of enzymes of urease and lysozyme, the anti-inflammatory one — by the level of MDA and elastase activity. Key words: disbiosis, oral cavity, phytogels, vine leaves, inflammation, enzymes.
Генерализованный дисбиоз, развивающийся в результате нарушения видового и количественного состава микрофлоры основных биотопов организма (толстая кишка, полость рта, кожа и др.), сопровождается системной эндотоксинемией, при которой микробный эндотоксин липополисахарид поступает в больших количествах в системный кровоток, оказывая провоспалительное действие на многие органы и ткани [1—2].
Целью настоящего исследования стало изучение влияния фитогеля «Виноградный» на состояние слизистой оболочки полости рта крыс при моделировании генерализованного дисбиоза с использованием антибиотика путём определения уровня биологических маркеров воспаления и дисбиоза.
Материалы и методы исследования. Эксперименты были проведены на 28 крысах линии Вистар (самки, 11 месяцев, массой 306 ± 15 г), которые были разделены на 4 группы: 1-ая - контроль (интактные); 2-ая - дисбиоз (Д); 3-я - дисбиоз + фитогель «Виноградный»; 4-ая - дисбиоз + фитогель «Инулин». Фи-тогели готовили в соответствии с ТУ У 20.413903778-032:2012 на КМЦ-Na. Для фитогеля «Виноградный» использовали водно-спиртовый экстракт из листьев винограда (концентрация спирта 50 %, концентрация экстрактивных веществ 4-5 %), из расчёта 300 мг экстрактивных веществ на 1 крысу. Инулин (препарат "Fibruline Instant", Бельгия) использовали в дозе 75 мг на крысу также в составе геля КМЦ-Na.
Дисбиоз воспроизводили в помощью антибиотика линкомицина путём введения с питьевой водой в течение 5 дней в дозе 70 мг/кг [4]. Аппликации гелей на слизистую полости рта осуществляли ежедневно с первого и до последнего дня опыта (15 дней). Эвтаназию животных проводили под тиопенталовым наркозом (20 мг/кг) путём тотального кровопускания из сердца. Иссекали слизистую щеки и языка, в гомоге-натах которых определяли активность уреазы (маркер микробной обсеменённости) [5], лизоцима (показатель неспецифического иммунитета) [6] и степень дисбиоза по соотношению относительных активностей уреазы и лизоцима [7]. Кроме того, в гомогена-тах слизистых определяли уровень маркеров воспаления [8]: концентрацию малонового диальдегида (МДА) и активность эластазы.
Результаты исследования и их обсуждение. В табл. 1 представлены результаты определения активности уреазы и лизоцима, а также степень дисбиоза в слизистой щеки и языка крыс с генерализованным дисбиозом и влияния на эти показатели аппликаций фитогеля, содержащего экстракт из листьев винограда. Как видно из представленных данных, при дис-биозе увеличивается активность уреазы (p < 0,05) и резко снижается активность лизоцима (p < 0,001). Применение аппликаций фитогеля достоверно снижа-
© Кушнир Е. Н, Ходаков И. В.,2012.
26
"Вiсник стоматологИ", № 2, 2012
ет активность уреазы и достоверно увеличивает ак- жается степень дисбиоза, практически не отличаясь от тивность лизоцима. При этом более чем в 2 раза сни- нормального показателя в слизистой языка.
Таблица 1
Влияние фитогеля «Виноградный» на развитие дисбиоза в слизистой оболочке полости рта крыс
Ткани и показатели 1 группа контроль 2 группа дисбиоз (Д) 3 группа Д + «Виноградный» 4 группа Д + инулин
Слизистая щеки
Активность уреазы, мк-кат/кг 4,32 ± 0,31 5,48 ± 0,28 р < 0,05 4,35 ± 0,28 р > 0,8 р1 < 0,05 4,67 ± 0,24 р > 0,3 р1 > 0,1
Активность лизоцима, ед/кг 527 ± 12 182 ± 21 р < 0,001 341 ± 19 р < 0,001 р! < 0,001 350 ± 23 р < 0,001 р! < 0,001
Степень дисбиоза 1,00 ± 0,10 3,43 ± 0,41 р < 0,001 1,55 ± 0,16 р < 0,05 р1 < 0,001 1,64 ± 0,20 р < 0,05 р1 < 0,001
Слизистая языка
Активность уреазы, мк-кат/кг 1,07 ± 0,09 1,51 ± 0,10 р < 0,01 1,09 ± 0,18 р > 0,6 р! < 0,01 1,15 ± 0,07 р > 0,3 р! < 0,01
Активность лизоцима, ед/кг 134 ± 6 60 ± 5 р < 0,001 104 ± 7 р < 0,01 р! < 0,001 101 ± 5 р < 0,01 р! < 0,001
Степень дисбиоза 1,00 ± 0,10 3,14 ± 0,38 р < 0,001 1,31 ± 0,14 р > 0,05 р! < 0,001 1,43 ± 0,16 р > 0,05 р1 < 0,01
Примечание . р - показатель достоверности различий с группой 1; р1 - показатель достоверности различий с группой 2 (дисбиоз).
В табл. 2 представлены результаты определения уровня маркеров воспаления в слизистой полости рта крыс с генерализованным дисбиозом, получавших аппликации фитогелей. Из представленных данных видно, что развитие дисбиоза сопровождается вспышкой воспалительно-дистрофических процессов в слизистой оболочке полости рта, о чём свидетельст-
вует достоверное увеличение уровня маркеров воспаления - содержания МДА и активности эластазы. Применение аппликаций фитогелей достоверно снижает уровень одного из маркеров (МДА) и проявляет тенденцию к снижению второго маркера - активности эластазы.
Таблица 2
Влияние фитогеля «Виноградный» на уровень маркеров воспаления в слизистой оболочке полости рта крыс с экспериментальным дисбиозом
Ткани и показатели 1 группа 2 группа 3 группа 4 группа
контроль дисбиоз (Д) Д + «Виноградный» Д + инулин
Слизистая щеки
Содержание МДА, ммоль/кг 32,1 ± 1,8 63,3 ± 3,1 35,8 ± 1,9 41,1 ± 2,1
р < 0,001 р > 0,1 р < 0,05
р! < 0,001 р1 < 0,05
Активность эластазы, 38 ± 4 54 ± 5 47 ± 3 48 ± 3
мк-кат/кг р < 0,05 р > 0,05 р > 0,05
р1 > 0,1 р1 > 0,3
Слизистая языка
Содержание МДА, ммоль/кг 5,23 ± 0,18 8,64 ± 0,31 5,35 ± 0,20 5,90 ± 0,18
р < 0,001 р > 0,4 р < 0,05
р! < 0,05 р! < 0,001
Активность эластазы, 51 ± 2 60 ± 3 56 ± 2 56 ± 2
мк-кат/кг р < 0,05 р > 0,05 р > 0,05
р! > 0,05 р: > 0,1
Примечание . р - показатель достоверности различий с группой 1; р1 - показатель достоверности различий с группой 2 (дисбиоз).
"Вiсник стоматологИ", № 2, 2012
27
Полученные данные свидетельствуют о том, что дисбиоз провоцирует развитие системной воспалительной реакции в организме. Биологически активные вещества из листьев винограда способны предотвращать развитие патологических процессов в организме, причём это действие виноградных листьев подобно действию пребиотика инулина. На основании полученных данных можно полагать, что биологически активные вещества виноградных листьев (а это, главным образом, полифенолы) оказывают своё лечебно-профилактическое действие за счёт устранения явлений дисбиоза в слизистой полости рта.
Таким образом, фитогель «Виноградный» может в существенной степени повысить эффективность профилактики и лечения стоматологических осложнений, которые могут развиться у пациентов, нуждающихся в протезировании, особенно на фоне гипо-саливации и ксеростомии.
Выводы 1. Экспериментальный дисбиоз приводит к развитию воспалительных реакций в слизистых оболочках ротовой полости.
2. Профилактическое применение фитогеля с биологически активными веществами из листьев винограда эффективно предотвращает вспышку воспалительных реакций и развитие дисбиоза в полости рта крыс.
Список литературы
1. Циммерман Я. С. Дисбиоз (дисбактериоз) кишечника и / или „синдром избыточного бактериального роста" // Клин. мед. -2005. - № 4. - С. 14-22.
2. Янковский Д. С. Микрофлора и здоровье. / Д. Янковский, Г. Дымент - К.: Червона Рута-Турс, 2008. - 552 с.
3. Дисбюз порожнини рота та методи його дослщження / Н.С. 1саева, 1.1. Якубова, О.В. Кружалко, Г.1. Овчиншкова // Ф™терашя. Часопис. - 2010. - № 2. - с. 47 -51.
4. Левицкий А. П. Влияние антибиотика линкомицина на слизистую оболочку полости рта крыс / Анатолий Левицкий, Сергей Демьяненко // Вкник стоматологи. - 2009. - № 3. - С. 6-10.
5. Гаврикова Л. М. Уреазная активность ротовой жидкости у больных с острой и одонтогенной инфекцией челюстно-лицевой области / Л. Гаврикова, И. Сегень // Стоматология. - 1996. - Спец. выпуск. - С. 49 -50.
6. Левицкий А. П. Лизоцим вместо антибиотиоков. / Анатолий Левицкий - Одесса «КП ОГТ», 2005. - С. 55 - 56.
7. Споаб оцшки дисбактерюзу порожнини рота. Деклар. Патент на корисну модель № 16048 МПК А 61 В 5/00. / А.П. Левиць-кий, О. А. Макаренко, 1.О. Селiванська и др. - 2006. - Бюл. № 7.
8. Биохимические маркеры воспаления тканей ротовой полости. Методические рекомендации / А.П. Левицкий, О.В. Деньга, О.А. Макаренко и др. - Одесса: КП «Одеська мкька друкарня», 2010. - 16 с.
Поступила 05.03.12
