свиноматок; средний приплод каждого животного составил 15 поросят, в то время как в среднем по краю этот показатель равен 11 живорожденным поросятам. Среднесуточный прирост массы животных более 750 граммов, в то время как средние показатели по приросту веса в животноводческих комплексах Красноярского края редко превышают полкилограмма. Вес каждого из новорожденных: не менее полутора килограммов. И самым высоким показателем считается, что одна из свиноматок разродилась 18 поросятами. Данный показатель входит в число наивысших достижений в истории краевого свиноводства [1].
Список литературы:
1. В современном свинокомплексе в Красноярском крае родились первые поросята. URL: http://newslab.ru/ news/614568 (дата обращения 4.05.2016)
2. Топигс Норсвин: самая инновационная генетическая компания в мире в области свиноводства. URL: http:// topigsnorsvin.ru (дата обращения 4.05.2016)
3. Подготовка, выбор в охоте и осеменение свиноматок. URL: http://novripka.narod.ru/Svin2/6-4.htm (дата обращения 4.05.2016)
4. Айбазов А.-М.М. Применение лапароскопии при внутриматочном осеменении и трансплантации эмбрионов у овец //Вестник ветеринарии. 1998. № 5. С. 51.
5. Айбазов М.М. Современные биотехнологические методы и приемы интесификации воспроизводства овец и коз // Овцы, козы, шерстяное дело. 2007. № 4. С. 54-56.
6. Айбазов А.М.М., Аксенова П.В., Коваленко Д.В. Биотехнологические методы и приемы интенсификации воспроизводства овец и коз// Овцы, козы, шерстяное дело. 2012. № 2. С. 35.
УДК 581.19+579.6 АНТИБАКТЕРИОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ ЭТАНОЛЬНЫХ ЭКСТРАКТОВ ИЗ ПСЕВДОБУЛЬБ ВИДОВ РОДА COELOGYNE (ORCHIDACEAE) ОТНОСИТЕЛЬНО РОСТА ЗОЛОТИСТОГО СТАФИЛОКОККА Л.И. Буюн1, доктор биол. наук, ПМ. Ткаченко2, канд. биол. наук, З. Осадовский2, доктор биол. наук А.Г Гиренко1, аспирант Национальный ботанический сад им. Н.Н.Гришко НАН Украины, Киев, Украина
2Институт биологии и охраны среды, Поморский Университет в Слупске, Польша
UDC 581.19+579.6 ANTIBACTERIOLOGICAL ACTIVITY OF ETHANOLIC EXTRACTS OBTAINED FROM THE PSEUDOBULBS OF COELOGYNE SPECIES (ORCHIDACEAE) AGAINST STAPHYLOCOCCUS AUREUS GROWTH
Buyun L.1, Tkachenko G.2, Osadovski Z.2, Girenko A.2
1M. Gryshko National Botanical Garden, National Academy of Science of Ukraine, Kyiv, Ukraine
institute of Biology and Environmental Protection, Pomeranian University in SJupsk, Poland
Целью исследования была оценка антибактериального потенциала эта-нольных экстрактов из псевдобульб восьми видов орхидей: C. cristata Lindl., C. fimbriata Lindl., С. flaccida Lindl., C. huettneriana Rchb.f., C. ovalis Lindl., C. speciosa (Blume) Lindl. и C. tomentosa Lindl., Coelogyne viscosa Lindl. - в отношении золотистого стафилококка. Экстракты из псевдобульб орхидей
Numerous orchids are traditionally used as herbal remedy for treatment of microbial infections and many other ailments, but the potential of most of the orchid species for therapeutic use is yet to be explored. The purpose of this study was to determine the in vitro antimicrobial activity of ethanolic extracts from pseudobulbs of eight Coelogyne species against the bacterial strain of
из рода Coelogyne ингибируют рост культуры золотистого стафилококка (Staphylococcus aureus АТСС 25923). Наиболее выраженную антибактериальную активность проявляют C. tomentosa, C. ovalis, C. huettneriana и C. cristata. Высокая антимикробная активность препаратов из псевдобульб видов Coelogyne представляет практический интерес для разработки на их основе антибактериальных и противовоспалительных лекарственных средств.
Ключевые слова: Coelogyne, антибактериальное действие, золотистый стафилококк
Улучшение ветеринарного обслуживания животноводства, разработка наиболее эффективных методов и средств как профилактики, так и лечения заболеваний сельскохозяйственных животных является актуальной задачей ветеринарной науки. В указанных целях широко используют различные фармакологические средства, обладающие антимикробными и антифунгицидными свойствами [1]. Однако их эффективность в последнее время значительно снизилась из-за изменения биологических свойств микроорганизмов и проявления у них множественной резистентности после многократного пассажирования через организм больных животных и повышения вирулентных свойств [2].
Одним из основных представителей условно-патогенной микрофлоры является золотистый стафилококк, который часто выделяется как самостоятельный возбудитель или в ассоциациях при различных заболеваниях животных [3]. Устойчивые к известным препаратам серотипы возбудителей, как новая биологическая популяция, циркулируют в природе и, инфицируя животных, резко усугубляют течение патологического процесса, существенно затрудняя терапию заболевших. В настоящее время наблюдается изменение характера течения стафилококковых инфекций в сторону увеличения доли их затяжных и хронических форм [3].
Все это требует поиска и разработки новых антимикробных средств с различными механизмами антимикробного действия. С рассматриваемых позиций значительный интерес представляет применение лекарственных растений, обладающих антимикробными свойствами. Кроме того, они повышают неспецифическую резистентность организма, не вызывая дисбактериоза, развивающегося при применении антибиотиков [4].
Орхидные являются одним из крупнейших семейств покрытосеменных растений, насчитывающим более 25000 видов [5]. К настоящему времени в различных отраслях медицины широко используются почти 50 видов орхидей [6]. У некоторых из них, в частности, таких как Vanda tessellata (Roxb.) Hook. ex G. Don, Dactylorhiza incarnata subsp. incarnata, Dendrobium nobile Lindl., были отмечены лечебные свойства [7]. Основные химические вещества, содержащиеся в разных органах орхидей, представлены алкалоидами, тритерпеноидами, флавоноидами, стилбеноидами и др. [7]. Фармакологические исследования подтвердили антимикробные, антиоксидантные, гепатопротекторные, противовоспалительные, антиартритные и ранозаживляющие свойства некоторых орхидей в доклинических исследованиях [6]. Орхидеи на про-
Staphylococcus aureus. ExtraCts from pseuclobulbs of orchicds (Coelogyne species) inhibit the growth of S. aureus (Staphylococcus aureus ATCC 25923) culture. The most pronounced antibacterial activity show C. tomentosa, C. ovalis, C. huettneriana and C. cristata. High antimicrobic activity of preparations from pseudobulbs of Coelogyne species represents practical interest for working out on their basis of antibacterial and antiinflammatory medical products.
Key words: Coelogyne, antibacterial effect, Staphylococcus aureus
тяжении тысячелетий использовали в качестве лекарственных средств для лечения различных заболеваний, включая туберкулез, паралич, расстройства желудка, боли в груди, артрит, сифилис, желтуху, холеру, экзему, опухоли, геморрой, метеоризм, воспаления, дизентерию, гепатит, диспепсию, нарушение менструального цикла, сперматорею, мышечную боль, переломы костей, ревматизм, астму, малярию, боль в ухе, а также болезни, передающиеся половым путем [7].
В связи с этим настоящее исследование было проведено с целью определить антибактериальный потенциал этанольных экстрактов из псевдобульб восьми видов орхидей: C. cristata Lindl., C. fimbriata Lindl., С. flaccida Lindl., C. huettneriana Rchb.f., C. ovalis Lindl., C. speciosa (Blume) Lindl., C. tomentosa Lindl. и Coelogyne viscosa Lindl. - в отношении золотистого стафилококка.
Материалы и методы исследований. Псевдобульбы (видоизмененные утолщенные стебли орхидных) были собраны в Национальном ботаническом саду имени Н.Н. Гришко (Киев, Украина). Коллекция тропических орхидей зарегистрирована в Административном органе CITES в Украине (Минприроды, рег. № 6939/19/1-10 от 23.06 2004 г.). Свежие псевдобульбы промывали, взвешивали, измельчали и гомогенизировали в 96%-ном этаноле при комнатной температуре для получения 5%-ных экстрактов.
Бактериальный изолят (Staphylococcus aureus АТСС 25923) выращивали на чашках с TSA. Клеточные суспензии готовили в стерильной деионизированной воде; мутность регулировали по стандарту McFarland. Клеточные суспензии использовали для инокуляции по всей поверхности чашки с Mueller-Hinton (MH) - агаром с последующей аппликацией на равномерном расстоянии друг от друга стерильных дисков с соответствующими 5%-ными этанольными экстрактами целогин. Посевы инкубировали 24 ч при 370С. По окончании инкубации регистрировали задержку роста в среде за счет бактери-остатического действия экстрактов. По диаметру зон задержки роста культуры S. aureus делали вывод о ее чувствительности к соответствующим экстрактам [8]. При диаметре зоны задержки роста до 10 мм культуру расценивали как малочувствительную, 11-14 мм - как среднечувствительную и более 15 мм - как высокочувствительную [9].
Результаты исследований. Полученные данные свидетельствуют о том, что исследуемые образцы проявляют высокую антибактериальную активность (Рис. 1).
Рис. 1. - Диаметры зон задержки роста культуры Staphylococcus аureus за счет бакте-риостатического действия этанольных экстрактов из псевдобульб целогин.
Диа метры зон задержки роста культуры Staphylococcus aureus
Растения C. tomentosa, C. ovalis, C. huettneriana, C. cristata проявляют наиболее выраженную антибактериальную активность в отношении тест-культуры S. аureus (зона задержки роста 30, 22, 21 и 20 мм соответственно); высокая активность показана также для C. speciosa, С. flaccida, C. fimbriata и C. viscosa (зона задержки роста 19, 18, 17 и 17 мм соответственно) (Рис. 1 и 2).
J u>
P»
А
Б
В Г
Рис. 2. - Рост тест-культуры Staphylococcus aureus на плотной питательной среде с экстрактом из псевдобульб C. tomentosa (А), C. ovalis (Б), C. huettneriana (В), C. speciosa (Г).
В предыдущих наших исследованиях мы также определили антибактериальный потенциал этанольных экстрактов одиннадцати видов орхидей: Coelogyne viscosa Lindl., C. cristata Lindl., C. lawrenceana Rolfe, C. pandurata Lindl., C. assamica Linden & Rchb.f., C. fimbriata Lindl., C. ovalis Lindl., C. asperata Lindl., C. speciosa (Blume) Lindl., C. tomentosa Lindl. и C. brachyptera Rchb.f. - в отношении S. aureus. Наши исследования показали, что этанольные экстракты из листьев разных видов рода Coelogyne в значительной степени подавляли рост золотистого стафилококка. Значительное противомикробное действие наблюдали у C. cristata (средний диаметр зоны ингибирования роста составлял 27.5 мм), C. tomentosa (26 мм), С. lawrenceana (26 мм), С. brachyptera (26 мм), С. viscosa (25,5 мм), С. pandurata (24,5 мм) и C. fimbriata (24 мм) [10].
В результате проведенных нами исследований в отношении грамположитель-ных (золотистый стафилококк) и грамотрицательных бактериальных штаммов (синегнойная и кишечная палочки), а также против грибков Candida albicans были установлены высокие антибактериальные и противогрибковые свойства спиртового экстракта из листьев C. cristata [11].
Кроме того, ранее в аналогичных исследованиях антимикробная активность была выявлена и у других видов орхидных. Например, Acanthophippium bicolor Lindl. проявлял высокие бактериостатические свойства в отношении S. aureus, Streptococcus foecalis, Bacillus cereus, Proteus vulgaris, Proteus mirabilis,
Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pneumonia, Shigella dysenteriae, Escherichia coli, Microsporum audouinii, Microsporum fulvum, Candida albicans и Trichophyton rubrum [12]. В скрининговом исследовании экстракта из листьев и стеблей Pseudovanilla foliata (F. Muell.) Garay (syn. Galeola foliata (F. Muell.) F. Muell.) показан широкий спектр антибактериальной активности в отношении 24 грамположи-тельных и грамотрицательных бактерий [13]. Метанольный экстракт из листьев Bletilla striata (Thunb.) Rchb. f. проявил антибактериальную активность в отношении грамположительных микроорганизмов. Исследования экстрактов листьев Aerides odorata Lour., Acampe praemorsa (Roxb.) Blatt. & McCann и A. ochracea (Lindl.) Hochr. выявили их антибактериальную активность в разных растворителях (вода, ацетон) [14]. К тому же разные виды орхидных оказывают противовоспалительное и антиоксидантное действие [15, 16].
Выводы. Экстракты из псевдобульб восьми видов орхидей из рода Coelogyne ингибируют рост культуры золотистого стафилококка. Наиболее выраженную антибактериальную активность в отношении тест-культуры Staphylococcus аureus АТСС 25923 проявляют C. tomentosa, C. ovalis, C. huettneriana и C. cristata. Высокая антимикробная активность препаратов из псевдобульб видов Coelogyne в отношении золотистого стафилококка представляет практический интерес для разработки на их основе антибактериальных и противовоспалительных лекарственных средств.
Список литературы:
1. Дерябин, Д. Г. Стафилококки: экология и патогенность / Д. Г. Дерябин. - Екатеринбург: УРО РАН,
2000. - 238 с.
2. Джупина, С. И. Факторные инфекционные болезни животных / С. И. Джупина // Ветеринария. -
2001. - № 3 - С. 6-9.
3. Пастушенков, Л. В. Лекарственные растения (Использование в народной медицине и быту) / Л. В. Па-стушенков, А. Л. Пастушенков, В. Л. Пастушенков. - Л., 1990. - 382 с.
4. Сидоренко, С. В. Происхождение, эволюция и клиническое значение антибиотикорезистентности // Антибиотики и химиотерапия. - 1999. - № 12. - С. 19-22.
5. Ткаченко, Г. М. Антибактериальная эффективность некоторых видов орхидей рода Coelogyne Lindl. в отношении золотистого стафилококка/Г.М. Ткаченко, М. А. Трухан, Л. И. Буюн, Х. Н. Шон, М. Чионг // Материалы XI Международной (XX Всероссийской) Пироговской научной медицинской конференции студентов и молодых ученых/ Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н. И. Пирогова, Москва, 17 марта 2016 г. - С. 632-633.
6. Bauer A. W., Kirby W. M., Sherris J. C., Turck M. 1966. Antibiotic susceptibility testing by a standardized single disk method. Am. J. Clin. Pathol., 45(4) : 493-496.
7. Buyun L., Tkachenko H., Truchan M., Kovalska L., Gyrenko O. 2015. Antimicrobial screening of ethanolic extract of Coelogyne cristata Lindl. (Orchidaceae) leaves. Proceedings of the Conference «Modern Approaches to Formation and Management of Anthropogenic and natural Biocoenosis in the Countries of Eastern Europe», Section 1. Land resources and the efficiency of their use. - Херсонский государственный аграрный университет, Херсон, 2015. - С. 19-27.
8. Chowdhury A., Paul P., Nath D., Bhattacharjee M. K. 2013. Antimicrobial efficacy of orchid extracts as potential inhibitors of antibiotic resistant strains of Escherichia coli. Asian Journal of Pharmaceutical and Clinical Research, 6(3) : 108-111.
9. Dixon K. W., Kell S. P., Barrett R. L., Cribb P. J. (eds.) 2003. Orchid conservation: a global perspective. Natural History Publications, Kota Kinabalu, Sabah, pp. 1-24.
10. Hossain M. M. 2011. Therapeutic orchids: traditional uses and recent advances - an overview. Fitoterapia, 82(2) : 102-140.
11. Kala S., Senthilkumar S. 2010. Antimicrobial activity of Acanthephippium bicolour Lindley. Malaysian Journal of Microbiology, 6(2) : 140-148.
12. Khan M. R., Omoloso A. D. 2004. Antibacterial activity of Galeola foliata. Fitoterapia, 75: 494-486.
13. Luo H., Lin S., Ren F., Wu L., Chen L., Sun Y. 2007. Antioxidant and antimicrobial capacity of Chinese medicinal herb extracts in raw sheep meat. J. Food Protection, 70: 1440-1445.
14. Matu E. N., van Staden J. 2003. Antibacterial and anti-inflammatory activities of some plants used for medicinal purposes in Kenya. J. Ethnopharmacol., 87: 35-41.
15. Okoth D. A., Chenia H. Y., Koorbanally N. A. 2013. Antibacterial and antioxidant activities of flavonoids from Lannea alata (Engl.) Engl. (Anacardiaceae). Phytochem. Lett., 6: 476-481.
16. Pérez Gutiérrez R. M. 2010. Orchids: A review of uses in traditional medicine, its phytochemistry and pharmacology. Journal of Medicinal Plants Research, 4(8) : 592-638.