Научная статья на тему 'АНТИБАКТЕРИАЛЬНЫЙ ЭФФЕКТ НАНОЧАСТИЦ МЕТАЛЛОВ НА АНТИБИОТИКОРЕЗИСТЕНТНЫЕ ШТАММЫ БАКТЕРИЙ'

АНТИБАКТЕРИАЛЬНЫЙ ЭФФЕКТ НАНОЧАСТИЦ МЕТАЛЛОВ НА АНТИБИОТИКОРЕЗИСТЕНТНЫЕ ШТАММЫ БАКТЕРИЙ Текст научной статьи по специальности «Биотехнологии в медицине»

CC BY
214
34
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Журнал
Инфекция и иммунитет
Scopus
ВАК
RSCI
ESCI
Ключевые слова
АНТИБИОТИКОРЕЗИСТЕНТНОСТЬ / ПОЛИРЕЗИСТЕНТНОСТЬ / АНТИБАКТЕРИАЛЬНЫЙ ЭФФЕКТ / НАНОЧАСТИЦЫ МЕТАЛЛОВ / ЗЕЛЕНЫЙ СИНТЕЗ / СЕРЕБРО / МЕДЬ / ЗОЛОТО

Аннотация научной статьи по биотехнологиям в медицине, автор научной работы — Удегова Е. С., Гильдеева К. А., Рукосуева Т. В., Сьед Б.

Быстрое формирование устойчивости микроорганизмов к современным антибактериальным препаратам требует поиска все новых, альтернативных методов терапии. Известно, что некоторые организмы, например растения, водоросли, грибы, способны превращать ионы неорганических металлов в металлические наночастицы за счет процесса восстановления, осуществляемого белками, сахарами и метаболитами, содержащимися в тканях и клетках этих организмов. Вместе с тем многие растения (подорожник, тысячелистник, полынь, куркума длинная, календула, багульник болотный и т. д.) и металлы (медь, серебро, золото, цинк и т. д.) сами по себе обладают антибактериальными свойствами. Таким образом наночастицы металлов, полученные биологическим методом, или методом «зеленого» синтеза, из экстрактов таких растений, могут стать альтернативой существующим на данным момент многим современным антибактериальным препаратам. Антибактериальный механизм действия наночастиц зависит как от вида микроорганизмов, на которые оказывается воздействие, так и от типа наночастиц, их концентрации, размера, а также от способа их получения. В работе изучен антибактериальный эффект наночастиц серебра, меди и золота, полученных биологическим методом из солей металлов AgNO3, CuSO4, H[AuCl4] соответственно и экстракта растения - куркумы длинной (лат. Curcuma longa), - в отношении коллекционных штаммов следующих бактерий: Е. coli (АТСС 25922), S. aureus (АТСС 25923), MRSA (АТСС 38591) и полирезистентных клинических штаммов, выделенных от пациентов КГБУЗ ККБ (г. Красноярск) - К. рneumoniae, штамм 104, P. аeruginosa, штамм 40, P. аeruginosa, штамм 215, А. baumannii, штамм 210, А. baumannii, штамм 211. В ходе исследования определена минимальная подавляющая концентрация наночастиц методом серийных разведений (МУК 4.2.1890-04) с красителем азурином. Доказано, что наночастицы металлов проявляют разную антибактериальную эффективность в зависимости от вида используемых нанометаллов и культур бактерий. Наибольшей антибактериальной активностью обладают наночастицы меди, наименьшей - наночастицы золота. Наиболее выраженный антибактериальный эффект наблюдается в отношении клинических полирезистентных штаммов. Наночастицы металлов могут стать альтернативой известным на сегодняшний день антибактериальным препаратам, но несмотря на высокую эффективность наночастиц в отношении полирезистентных к антибактериальным препаратам микроорганизмов in vitro, следует учитывать их возможное токсическое действие, оказываемое на живые ткани, что требует дальнейшего изучения в экспериментах in vivo.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по биотехнологиям в медицине , автор научной работы — Удегова Е. С., Гильдеева К. А., Рукосуева Т. В., Сьед Б.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

METAL NANOPARTICLE ANTIBACTERIAL EFFECT ON ANTIBIOTIC-RESISTANT STRAINS OF BACTERIA

The rapid formation of microbial resistance to modern antibacterial drugs requires to search for new, alternative therapies. It is known that some organisms, such as plants, algae, fungi, are able to convert inorganic metal ions into metal nanoparticles due to the recovery process carried out by proteins, sugars and metabolites contained in the tissues and cells of these organisms. At the same time, many plants (e.g., plantain, yarrow, wormwood, turmeric long, calendula, marsh bagulnik, etc.) and metals (copper, silver, gold, zinc, etc.) themselves have antibacterial properties, so that metal nanoparticles obtained by biological method, or via “Green” synthesis method, from extracts of such plants can become a current alternative to many modern antibacterial drugs. The antibacterial mechanism of action of nanoparticles depends on the type of microorganisms affected, as well as on the type of nanoparticles, their concentration, size, and how they are obtained. Based on this, the study of the antibacterial effect of nanoparticles is one of the promising directions of solving the problem of microbial antibiotic resistance. There was examined antibacterial effect of metal nanoparticles containing silver, copper and gold obtained by biological method from the salts of AgNO3, CuSO4, H[AuCl4] metals, respectively, and the extract of the plant - turmeric long (lat. Curcuma longa) - related to the following bacteria strain collection: E. coli (ATCC 25922), S. aureus (ATCC 25923), MRSA (ATCC 38591) and polyresistant clinical strains isolated from patients of the Regional clinical hospital (Krasnoyarsk) - K. pneumoniae, strain 104, P. aeruginosa, strain 40, P. aeruginosa, strain 215, A. baumannii, strain 210, A. baumannii, strain 211. Study allowed to identify the minimum suppressive concentration of nanoparticles by the method of serial dilutions (MUK 4.2.1890-04) with azurin dye. It was proved that metal nanoparticles exhibit different antibacterial efficacy depending on the type of nanometals used and bacterial cultures. Copper nanoparticles have the highest antibacterial activity, and gold nanoparticles have the lowest. The most marked antibacterial effect was observed against clinical polyresistant strains. Metal nanoparticles can become an alternative to the currently known antibacterial drugs, but despite the high efficiency of nanoparticles against polyresistant to antibacterial drugs microorganisms in vitro, it is necessary to take into account their possible toxic effect on live tissues, which requires further study in experiments in vivo.

Текст научной работы на тему «АНТИБАКТЕРИАЛЬНЫЙ ЭФФЕКТ НАНОЧАСТИЦ МЕТАЛЛОВ НА АНТИБИОТИКОРЕЗИСТЕНТНЫЕ ШТАММЫ БАКТЕРИЙ»

Short communications

Краткие сообщения

Russian Journal of Infection and Immunity = Infektsiya i immunitet 2021, vol. 11, no. 4, pp. 771-776

Инфекция и иммунитет 2021, Т. 11, № 4, с. 771-776

АНТИБАКТЕРИАЛЬНЫЙ ЭФФЕКТ НАНОЧАСТИЦ МЕТАЛЛОВ НА АНТИБИОТИКОРЕЗИСТЕНТНЫЕ ШТАММЫ БАКТЕРИЙ

Е.С. Гудкова, Е.С. Удегова, К.А. Гильдеева, Т.В. Рукосуева, Б. Сьед

ФГБОУ ВО Красноярский государственный медицинский университет им. профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого, г. Красноярск, Россия

Резюме. Быстрое формирование устойчивости микроорганизмов к современным антибактериальным препаратам требует поиска все новых, альтернативных методов терапии. Известно, что некоторые организмы, например растения, водоросли, грибы, способны превращать ионы неорганических металлов в металлические наночастицы за счет процесса восстановления, осуществляемого белками, сахарами и метаболитами, содержащимися в тканях и клетках этих организмов. Вместе с тем многие растения (подорожник, тысячелистник, полынь, куркума длинная, календула, багульник болотный и т. д.) и металлы (медь, серебро, золото, цинк и т. д.) сами по себе обладают антибактериальными свойствами. Таким образом наночастицы металлов, полученные биологическим методом, или методом «зеленого» синтеза, из экстрактов таких растений, могут стать альтернативой существующим на данным момент многим современным антибактериальным препаратам. Антибактериальный механизм действия наночастиц зависит как от вида микроорганизмов, на которые оказывается воздействие, так и от типа наночастиц, их концентрации, размера, а также от способа их получения. В работе изучен антибактериальный эффект наночастиц серебра, меди и золота, полученных биологическим методом из солей металлов AgNO3, CuSO4, H[AuCl4] соответственно и экстракта растения — куркумы длинной (лат. Curcuma longa), — в отношении коллекционных штаммов следующих бактерий: Е. coli (АТСС 25922), S. aureus (АТСС 25923), MRSA (АТСС 38591) и полирезистентных клинических штаммов, выделенных от пациентов КГБУЗ ККБ (г. Красноярск) — К. рneumoniae, штамм 104, P. аeruginosa, штамм 40, P. аeruginosa, штамм 215, А. baumannii, штамм 210, А. baumannii, штамм 211. В ходе исследования определена минимальная подавляющая концентрация наночастиц методом серийных разведений (МУК 4.2.1890-04) с красителем азурином. Доказано, что наночастицы металлов проявляют разную антибактериальную эффективность в зависимости от вида используемых нанометаллов и культур бактерий. Наибольшей антибактериальной активностью обладают наночастицы меди, наименьшей — наночастицы золота. Наиболее выраженный антибактериальный эффект наблюдается в отношении клинических полирезистентных штаммов. Наночастицы металлов могут стать альтернативой известным на сегодняшний день антибактериальным препаратам, но несмотря на высокую эффективность наночастиц в отношении полирезистентных к антибактериальным препаратам микроорганизмов in vitro, следует учитывать их возможное токсическое действие, оказываемое на живые ткани, что требует дальнейшего изучения в экспериментах in vivo.

Ключевые слова: антибиотикорезистентность, полирезистентность, антибактериальный эффект, наночастицы металлов, зеленый синтез, серебро, медь, золото.

Адрес для переписки: Contacts:

Гудкова Елизавета Сергеевна Elizaveta S. Gudkova

660022, Россия, г. Красноярск, ул. Партизана Железняка, 1, 660022, Russian Federation, Krasnoyarsk, Partizan Zheleznyak str., 1,

ФГБОУ ВО Красноярский государственный медицинский Krasnoyarsk State Medical University named after Professor

университет имени профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого. V.F. Voino-Yasenetsky.

Тел.: 8 913 563-48-13 (моб.). Phone: +7 913 563-48-13 (mobile).

E-mail: miss.gudcova@mail.ru E-mail: miss.gudcova@mail.ru

Для цитирования: Citation:

Гудкова Е.С., Удегова Е.С., Гильдеева К.А., Рукосуева Т.В., Gudkova E.S., Udegova E.S., Gildeeva K.A., Rukosueva T.V., Syed B. Metal

Сьед Б. Антибактериальный эффект наночастиц металлов nanoparticle antibacterial effect on antibiotic-resistant strains of bacteria //

на антибиотикорезистентные штаммы бактерий // Инфекция Russian Journal of Infection and Immunity = Infektsiya i immunitet, 2021,

и иммунитет. 2021. Т. 11, № 4. C. 771-776. doi: 10.15789/2220-7619- vol. 11, no. 4, pp. 771-776. doi: 10.15789/2220-7619-MNA-1359

MNA-1359

© Гудкова Е.С. и соавт., 2021

DOI: http://dx.doi.org/10.15789/2220-7619-MNA-1359

METAL NANOPARTICLE ANTIBACTERIAL EFFECT ON ANTIBIOTIC-RESISTANT STRAINS OF BACTERIA

Gudkova E.S., Udegova E.S., Gildeeva K.A., Rukosueva T.V., Syed B.

Krasnoyarsk State Medical University named after Professor V.F. Voino-Yasenetsky, Krasnoyarsk, Russian Federation

Abstract. The rapid formation of microbial resistance to modern antibacterial drugs requires to search for new, alternative therapies. It is known that some organisms, such as plants, algae, fungi, are able to convert inorganic metal ions into metal nanoparticles due to the recovery process carried out by proteins, sugars and metabolites contained in the tissues and cells of these organisms. At the same time, many plants (e.g., plantain, yarrow, wormwood, turmeric long, calendula, marsh bagulnik, etc.) and metals (copper, silver, gold, zinc, etc.) themselves have antibacterial properties, so that metal nanoparticles obtained by biological method, or via "Green" synthesis method, from extracts of such plants can become a current alternative to many modern antibacterial drugs. The antibacterial mechanism of action of nanoparticles depends on the type of microorganisms affected, as well as on the type of nanoparticles, their concentration, size, and how they are obtained. Based on this, the study of the antibacterial effect of nanoparticles is one of the promising directions of solving the problem of microbial antibiotic resistance. There was examined antibacterial effect of metal nanoparticles containing silver, copper and gold obtained by biological method from the salts of AgNO3, CuSO4, H[AuCl4] metals, respectively, and the extract of the plant — turmeric long (lat. Curcuma longa) — related to the following bacteria strain collection: E. coli (ATCC 25922), S. aureus (ATCC 25923), MRSA (ATCC 38591) and polyresistant clinical strains isolated from patients of the Regional clinical hospital (Krasnoyarsk) — К. рneumoniae, strain 104, P. аeruginosa, strain 40, P. аeruginosa, strain 215, А. baumannii, strain 210, А. baumannii, strain 211. Study allowed to identify the minimum suppressive concentration of nanoparticles by the method of serial dilutions (MUK 4.2.1890-04) with azurin dye. It was proved that metal nanoparticles exhibit different antibacterial efficacy depending on the type of nanometals used and bacterial cultures. Copper nanoparticles have the highest antibacterial activity, and gold nanoparticles have the lowest. The most marked antibacterial effect was observed against clinical polyresistant strains. Metal nanoparticles can become an alternative to the currently known antibacterial drugs, but despite the high efficiency of nanoparticles against polyresistant to antibacterial drugs microorganisms in vitro, it is necessary to take into account their possible toxic effect on live tissues, which requires further study in experiments in vivo.

Key words: antibiotic resistance, polyresistance, antibacterial effect, metal nanoparticles, green synthesis, silver, copper, gold.

Введение

Быстрое формирование устойчивости микроорганизмов к современным антибактериальным препаратам требует поиска все новых, альтернативных методов терапии [5, 9, 13], одним из которых может стать использование наночастиц металлов. Наночастицы экологически не опасны, обладают бактерицидной активностью [6, 10, 15], а также имеют низкую себестоимость, что играет немаловажную роль при решении вопроса их выбора.

Механизм действия наночастиц на микроорганизмы мало изучен. Известно, что они могут оказывать как бактериостатический, так и бактерицидный эффект, действовать как интрацеллю-лярно, так и экстрацеллюлярно. Согласно некоторым теориям, наночастицы могут способствовать ингибированию ферментов дыхательной цепи, тем самым разобщая процессы окисления и окислительного фосфорилирования; взаимодействовать с нуклеотидами, нарушая стабильность ДНК; взаимодействовать с пептидоглика-нами клеточной стенки, блокируя способность передавать кислород; или выступать в роли катализатора, способствуя окислению протоплазмы растворенным в воде кислородом [6, 13]. Механизм действия зависит как от вида микроорганизмов, на который оказывается воздействие, так и от типа наночастиц, их концентрации, размера, а также от способа их получения.

Некоторые растения, водоросли, грибы, способны превращать ионы неорганических ме-

таллов в металлические наночастицы за счет процесса восстановления, осуществляемого биологически активными веществами, содержащимися в тканях и клетках этих организмов. «Зеленый» синтез — биологический метод получения металлических наночастиц различной морфологии из солей металлов с использованием в качестве восстанавливающих и стабилизирующих агентов экстракты растений [4, 10, 14, 15]. Выделенные экстракты содержат весь необходимый спектр веществ, необходимых для производства металлических наночастиц, а именно полисахариды, ферменты, аминокислоты, витамины, белки, органические кислоты, а также широкий комплекс вторичных метаболитов, например алкалоиды, флавоноиды, стероиды, дубильные вещества, сапонины и фенольные кислоты [10, 12]. Растительные экстракты могут выступать в роли восстанавливающих и стабилизирующих агентов, ингибируя возможную агрегацию и агломерацию синтезированных наночастиц с образованием на их поверхности продуктов взаимодействия [12]. Например, химическими модификаторами являются серосодержащие кислоты — метионин или цистеин, при действии которых гидрофильная карбоно-вая группа обеспечивает растворимость в воде, а сера связывается с поверхностью наночасти-цы. Таким образом, синтезируясь, наночастицы принимают наиболее энергетически выгодную конформацию за счет способности растительных экстрактов не только к восстановлению, но и к стабилизации.

Известно, что серебро восстанавливает из нитрата серебра (AgNO3) люцерна посевная, аза-дирахта индийская, базилик душистый, ревень пальчатый, медь — из сульфата меди (CuSO4) ирис псевдоаировый, герань пахучая, лимонник, золото — из золотохлористоводородной кислоты (H[AuCl4]) люцерна посевная и т. п. [7, 10]. Поскольку многие растения (например, подорожник, тысячелистник, полынь, куркума длинная [3, 14], календула, багульник болотный и т. д.) и металлы (медь, серебро, золото, цинк и т. д.) сами по себе обладают антибактериальными свойствами [2, 8], наночастицы металлов, полученные биологическим методом из экстрактов таких растений, могут стать альтернативой существующим на данным момент многим современным антибактериальным препаратам.

Цель исследования — изучение антибактериального эффекта наночастиц металлов, полученных биологическим методом, в отношении антибиотикорезистентных штаммов бактерий.

Материалы и методы

Изучение биологической активности на-ночастиц в отношении бактерий проводилось с помощью метода серийных разведений (МУК 4.2.1890-04) с красителем азурин. Для культур бактерий определена минимальная подавляющая концентрация (МПК) наночастиц металлов — серебра, меди, золота, полученных биологическим методом из экстракта куркумы длинной (лат. Curcuma longa) и солей металлов: AgNO3, CuSO4, H[AuCl4] соответственно.

Для получения наночастиц металлов использовался метод химического осаждения. Полученные наночастицы — полидисперсные со средним размером от 20 до 50 нм [11]. В качестве восстановителя и стабилизатора использовался экстракт куркумы длинной, полученный в результате экстрагирования методом мацерации водно-спиртовым раствором с последующим разбавлением дистиллированной водой и центрифугированием в течении 10 мин на скорости 10 000 об/мин. Основные химические группы куркумы длинной, участвующие в восстановлении солей металлов за счет электростатического взаимодействия — карбонильные, гидроксильные, аминогруппы, меток-сигруппы. Входящий в состав Curcuma longa кур-кумин (до 0,6%) известен своим противовоспалительными и антиоксидантным действием за счет ингибирования циклооксигеназы и задержки образования активных форм кислорода, а также ранозаживляющими, противомикробными свойствами [12, 14].

Используемые культуры бактерий — Escheri-chia coli (АТСС 25922), Staphylococcus aureus (АТСС 25923), Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (АТСС 38591) и полирезистентные клинические штаммы, выделенные от пациентов с тяжелыми гнойно-воспалительными процессами КГБУЗ

ККБ (г. Красноярск) — Klebsiella рneumoniae штамм 104, Pseudomonas aeruginosa штамм 40, Pseudomonas aeruginosa штамм 215, Acinetobacter baumannii штамм 210, Acinetobacter baumannii штамм 211 (табл.).

Взвесь наночастиц (меди, золота или серебра) в дистиллированной воде предварительно развели в лунках плоскодонного планшета с бульоном Мюллера—Хинтон: таким образом, максимальная концентрация наночастиц металлов составила 5 г/л, а минимальная концентрация — 0,0097 г/л. Затем в лунки были внесены суспензии тест-штаммов суточных культур (0,5 ед. по МакФарланду) с дальнейшим культивированием при температуре 37°С на протяжении 24 ч.

На следующие сутки в лунки был добавлен краситель азурин с дальнейшим культивированием культур при 37°С в течение двух часов. Критерием учета являлся цвет содержимого лунки, указывающий на наличие или отсутствие роста бактерий при эмпирическом сравнении с контрольными образцами роста культуры.

При добавлении азурина к среде с культурой бактерий он выступает в роли донора электронов для нитритредуктазы при экспрессии в азотфик-сирующих организмах. При денитрификации или нитратном дыхании факультативных анаэробных бактерий происходит уменьшение окисленных форм азота в ответ на окисление донора электронов, такого как органическое вещество, в связи с чем цвет среды меняется при условии роста бактерий [1].

Статистическая обработка полученных результатов проводилась в IBM SPSS Statistics, для оценки нормальности распределения полученных данных использовался критерий Шапиро— Уилка, для оценки различий между количественными данными — критерий Манна—Уитни на уровне значимости 0,05, n = 72 (каждый опыт проводился в трех повторностях).

Результаты и обсуждение

В результате проведенного эксперимента определена минимальная подавляющая концентрация (МПК), а также доказана антибактериальная активность наночастиц металлов в отношении антибиотикочувствительных и анти-биотикорезистентных штаммов бактерий (рис. 1). Эффективность действия наночастиц зависит не только от принадлежности бактерий к грампо-ложительной или грамотрицательной группе (отсутствие различий на уровне значимости 0.05, n = 72), иначе из-за различий в строении клеточной стенки бактерий ожидаемым результатом был бы более выраженный антибактериальный эффект, направленный на одну определенную группу микроорганизмов, чего в данном исследовании не наблюдалось. В связи с чем можно предположить, что механизм антибактериального эффекта нано-частиц металлов не ограничивается воздействием лишь на клеточную стенку микроорганизмов.

Таблица. Антибиотикограмма клинических штаммов, выделенных от пациентов КГБУЗ ККБ (г. Красноярск)

Table. Antibioticogram of clinical strains isolated from patients of the Regional Clinical Hospital (Krasnoyarsk)

N. Бактерии N. Bacteria К. pneumoniae, штамм 104 P. aeruginosa, штамм 40 P. aeruginosa, штамм 215 А. baumannii, штамм 210 А. baumannii, штамм 211

К. pneumoniae, strain 104 P. aeruginosa, strain 40 P. aeruginosa, strain 215 А. baumannii, strain 210 А. baumannii, strain 211

N. Отделение реанимации и интенсивной терапии (ОРИТ) № 1

\ Department of reanimation and intensive therapy No. 1

N. Диагноз: термический ожог III А | Diagnosis: thermal burn III A

Антибиотик Antibiotic ^ч Смыв с бронхов Отделяемое дренажа Смыв с бронхов Смыв с бронхов Отделяемое дренажа

Flushing from the bronchi Detachable drainage Flushing from the bronchi Flushing from the bronchi Detachable drainage

Цефоперазон/Cefoperazone - R S R R

Цефтазидим/Ceftazidime R R S R R

Цефипим/Cefepime R R S R R

Имипенем/Imipenem S S S R S

Меропенем/Мегорепет R R R R R

Тикарциллин/Клавуланат R R R R

Ticarcillin/Clavulanate

Гентамицин/Gentamycin R R S R R

Тобрамицин/Tobramycin - R S S S

Лмикацин/Amikacin R R S R R

Котримоксазол/Co-trimoxazole - R R R R

Хлорамфеникол/Chloramphenicol - R R R R

Ципрофлоксацин/Ciprofloxacin S R R R R

Примечание. R — антибиотикорезистентность штамма бактерий к антибактериальному препарату, S — антибиотикочувствительность штамма. Note. R— antibiotic resistance of the bacterial strain to the antibacterial drug, S — antibiotic sensitivity of the strain.

Антибактериальная активность достигается в результате использования наночастиц металлов в разных концентрациях (рис. 2)

Эффективность действия наночастиц металлов во многом зависит от принадлежности микроорганизмов к клиническим полирезистентным или антибиотикочувствительным музейным культурам — наночастицы меди, а также серебра и золота наиболее активны в отношении полирезистентных клинических штаммов бактерий (наличие различий на уровне значимости 0,05, п = 72). Полученный результат подтверждают аналогичные исследования на других микроорганизмах,

5

CM 4,5

II с 4

3,5

О)

О

? '¿,ь

— 2

"t 1,5

V

ь 0,5

0

авторы которых отмечают, что максимальный антибактериальный эффект наночастиц металлов достигается при воздействии на клинические штаммы бактерий с множественной лекарственной устойчивостью [6, 10, 11, 13, 14].

Подтверждено и наличие различий во влиянии на антибактериальную активность используемых солей металлов. Как и предполагалось наночасти-цы серебра и меди оказали наибольшую подавляющую активность: минимальная МПК наночастиц меди составила 0,078 г/л (для К. рneumoniae 104), а максимальная МПК для остальных штаммов не превысила 2,5 г/л. Наночастицы серебра также

S. aureus MRSA P. aeruginosa P. aeruginosa A. baumannii А. baumannii £ coli К. pneumoniae

(АТСС 25923) (АТСС38591) 40 215 210 211 (АТСС25922) 104

| Серебро □ Медь Q Золото

Silver Copper Gold

Рисунок 1. Минимальная подавляющая концентрация (МПК) наночастиц металлов в отношении антибиотикочувствительных и антибиотикорезистентных штаммов бактерий

Figure 1. Minimum suppressive concentration (MPC) of metal nanoparticles against antibiotic-sensitive and antibiotic-resistant bacterial strains

оказали видимый эффект, максимальная МПК, как и для наночастиц меди, не превысила 2,5 г/л, минимальная МПК составила 1,25 г/л (P. aeruginosa 215). По некоторым источникам, наночастицы серебра менее токсичны по сравнению с ионной формой, что расширяет спектр их применения в медицине, например, в составе перевязочного материала или покрытия поверхностей имплан-татов, связанной с их способностью вызывать деструкцию биопленок, сформированных полирезистентными штаммами [11].

Наименьшая антибактериальная эффективность была выявлена при использовании нано-частиц золота: в отношении 50% экспериментальных культур МПК > 5 г/л (S. aureus (ATCC 25923), E. coli (ATCC 25922), MRSA (АТСС 38591), P. aeruginosa штамм 215), а минимальная МПК при этом составила 1,25 г/л в отношении трех штаммов (К. pneumoniae штамм 104, А. baumannii штамм 210, А. baumannii штамм 211). Одним из предположений, объясняющих низкую антибактериальную эффективность наночастиц золота, может быть то, что золото по сравнению с другими используемыми металлами за счет своих элементных свойств наименее токсично [13].

Таким образом, наночастицы меди и серебра в отличие от наночастиц золота при использовании в низких концентрациях обладают выраженным антибактериальным действием.

Заключение

Наночастицы серебра, меди и золота оказывают видимый антибактериальный эффект, однако чувствительность штаммов бактерий к разным нанометаллам не одинакова: среди используемых в эксперименте металлов нано-частицы меди демонстрируют наиболее выраженные антибактериальные свойства. Несмотря на высокую эффективность наночастиц меди в отношении микроорганизмов in vitro, следует учитывать их возможное токсическое действие, оказываемое на живые ткани, что требует

Список литературы/References

8-

счГ 7-h-

£ 6-

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

У 5* 4-с=

2 21 -

Золото Медь Серебро

Gold Copper Silver

1 2 3 4 5 6 7 8

МПК, г/л MIC, g/l 0,078 0,156 0,312 0,625 1,250 2,500 5,000 > 10,000

Рисунок 2. Сводная минимальная подавляющая концентрация (МПК) наночастиц металлов в отношении используемых в исследовании штаммов микроорганизмов

Figure 2. A summary of the minimum overwhelming concentration (MPC) of metal nanoparticles against strains of microorganisms

дальнейшего изучения в экспериментах in vivo. Антибактериальное действие наночастиц металлов в большей степени выражено в отношении клинических полирезистентных штаммов бактерий. Таким образом, наночастицы могут стать альтернативой известным на сегодняшний день антибактериальным препаратам.

Благодарности

Выражаем признательность заведующей кафедрой микробиологии им. доц. Б.М. Зельма-новича КрасГМУ им. проф. В.Ф. Войно-Ясе-нецкого Перьяновой Ольге Владимировне, консультировавшей авторов в процессе выполнения и написания работы, а также сотрудникам технического персонала кафедры Поткиной Надежде Константиновне и Школьной Вере Григорьевне за помощь в проведении исследований.

1. Авдеенков П.П., Чистяков Н.Е. Механизм денитрификации // Наука, техника и образование. 2019. № 4 (57). С. 19—22. [Avdeenkov P.P., Chistyakov N.E. Denitrification mechanism. Nauka, tekhnika i obrazovanie = Science, Technology and Education, 2019, no. 4 (57), pp. 19-22. (In Russ.)]

2. Буданова Е.В., Горленко К.Л., Киселев Г.Ю. Вторичные метаболиты растений: механизмы антибактериального действия и перспективы применения в фармакологии // Антибиотики и химиотерапия. 2019. Т. 64, № 5—6. С. 69—76. [Budanova E.V., Gorlenko K.L., Kiselev G.Yu. Secondary plant metabolites: mechanisms of antibacterial action and perspectives of application in pharmacology. Antibiotiki i khimioterapiya = Antibiotics and Chemotherapy, 2019, vol. 64, no. 5-6, pp. 69-76. (In Russ.)] doi: 10.24411/0235-2990-2019-100034

3. Гужова В.Ф., Чернова А.В., Казимирченко О.В. Исследование свойств соли, обогащенной фитокомпонентами лекарственных трав и специй // Вестник международной академии холода. 2017. № 4. С. 9—17. [Guzhova V.F., Chernova A.V., Kazimirchenko O.V. The Properties of salt enriched by phytocomponents of medicinal herbs and spices. Vestnik Mezhdunarodnoy akademii kholoda = Bulletin of the International Academy of Refrigeration, 2017, no. 4, pp. 9-17. (In Russ.)] doi: 10.21047/16064313-2017-16-4-9-17

4. Дыкман Л.А., Щеголев С.Ю. Взаимодействие растений с наночастицами благородных металлов // Сельскохозяйственная биология. 2017. Т. 52, № 1. С. 13—24. [Dykman L.A., Shchyogolev S.Yu. Interactions of plants with noble metal nano-

particles (review). Sel'skokhozyaistvennaya biologiya = Agricultural Biology, 2017, vol. 52, no. 1, pp. 13-24. (In Russ.)] doi: 10.15389/ agrobiology. 2017.1.13rus

5. Ефименко Т.А., Терехова Л.П., Ефременкова О.В. Современное состояние проблемы антибиотикорезистентности патогенных бактерий // Антибиотики и химиотерапия. 2019. № 5. С. 64—68. [Efimenko T.A., Terekhova L.P., Efremenkova O.V. Current state the problem of antibiotic resistance of pathogens. Antibiotiki i khimioterapiya = Antibiotics and Chemotherapy, 2019, no. 5, pp. 64-68. (In Buss.)] doi: 10.24411/0235-2990-2019-100033

6. Леонтьев В.К., Кузнецов Д.В., Фролов Г.А., Погорельский И.П., Латута Н.В., Карасенков Я.Н. Антибактериальные эффекты наночастиц металлов // Российский стоматологический журнал. 2017. Т. 21, № 6. С. 304—307. [Leont'ev V.K., Kuznetsov D.V., Frolov G.A., Pogorelskiy I.P., Latuta N.V., Krasenkov Ya.N. Antibacterial effects of nanoparticles of metals. Bossiiskii stomatologicheskii zhurnal = Russian Dental Journal, 2017, vol. 21, no. 6, pp. 304-307. (In Buss.)] doi: 10.18821/17282802-2017-21-6-304-307

7. Макаров В.В., Лав А., Синицына О.В., Макарова С.С., Яминский И.В., Тальянский М.Э., Калинина Н.О. «Зеленые» нанотехнологии: синтез металлических наночастиц с использованием растений // Acta Naturae (русскоязычная версия). 2014. Т. 6, № 1 (20). С. 37-47. [Makarov V.V., Lav A., Sinitsyna O.V., Makarova S.S., Yaminsky I.V., Talyansky M.E., Kalinina N.O. "Green" nanotechnologies: synthesis of metal nanoparticles using plants. Acta Naturae (Russian version), 2014, vol. 6, no. 1 (20), pp. 37-47. (In Buss.)] doi: 10.32607/20758251-2014-6-1-35-44

8. Тапальский Д.В., Тапальский Ф.Д. Антибактериальные свойства растительных экстрактов и их комбинаций с антибиотиками в отношении экстремально-антибиотикорезистентных микроорганизмов // Курский научно-практический вестник «Человек и его здоровье». 2018. № 1. С. 78-83. [Tapalsky D.V., Tapalsky F.D. Antibacterial effects of herbal extracts and their combinations with antibiotics in relation to extensively antibiotic-resistant microorganisms. Kurskii nauchno-prakticheskii vestnik "Chelovek i ego zdorov'e " = Kursk Scientific and Practical Bulletin "Man and His Health ", 2018, no. 1, pp. 78-83. (In Buss.)] doi: 10.21626/vestnik/2018-1/12

9. Хохлова О.Е., Акушева Д.Н., Перьянова О.В., Корецкая Н.М., Абарникова О.В., Королькова Е.К., Белоусова Ю.Н., Саламатина О.В., Безручкина Т.Н., Князева К.М., Шогжал И.С., Поткина Н.К., Элярт В.Ф., Ямамото Т. Молекулярно-генетические особенности метициллинрезистентных S. aureus, выделенных от лиц пенитенциарной системы, инфицированных ВИЧ // Сибирское медицинское обозрение. 2018. № 2 (110). С. 13-18. [Khokhlova O.E., Akusheva D.N., Per'yanova O.V., Koretskaya N.M., Abarnikova O.V., Korol'kova E.K., Belousova Yu.N., Salamatina O.V., Bezruchkina T.N., Knyazeva K.M., Shogzhal I.S., Potkina N.K., Elyart V.F., Yamamoto T. Molecular-genetic features of methicillin-resistant S. aureus, have got from the persons of the penitentiary system, infected with HIV. Sibirskoe meditsinskoe obozrenie = Siberian Medical Review, 2018, no. 2 (110), pp. 13-18. (In Buss.)] doi: 10.20333/2500136-2018-2-13-18

10. Arokiyaraj S., Vincent S., Saravanan M., Lee Y., Oh Y.K., Kim K.H. Green synthesis of silver nanoparticles using Rheum pal-matum root extract and their antibacterial activity against Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa. Artif. Cells, Nanomed. Biotechnol, 2017, vol. 45, no. 2, pp. 372-379. doi: 10.3109/21691401.2016.1160403

11. Baker S., Perianova O.V., Prudnikova S.V., Kuzmin A., Potkina N.K., Khohlova O.Y., Lobova T.I. Phytogenic nanoparticles to combat multidrug resistant pathogens and photocatalytic degradation of dyes. BioNanoScience, 2020, no. 10, pp. 486-492. doi: 10.1007/s12668-020-00727-z

12. El-Seedi H.R., El-Shabasy R.M., Khalifa Sh.A.M., Saeed A., Shah A., Shah R., Iftikhar F.J., Abdel-Daim M.M., Omri A., Hajrahand N.H., Sabir J.S.M., Zou X., Halabi M.F., Sarhann W., Guo W. Metal nanoparticles fabricated by green chemistry using natural extracts: biosynthesis, mechanisms, and applications. BSC Advances, 2019, no. 9, pp. 24539-24559. doi: 10.1039/ C9BA02225B

13. Hasani A., Madhi M., Gholizadeh P., Mojarrad J.S., Rezaee M.A., Zarrini G., Kafil H.S. Metal nanoparticles and consequences on multi-drug resistant bacteria: reviving their role. SN Appl. Sci. 2019, no. 1 (4). doi: 10.1007/s42452-019-0344-4

14. Jayarambabu N., Akshaykranth A., Venkatappa Rao T., Venkateswara Rao K., Rakesh Kumar R. Green synthesis of Cu nanoparticles using Curcuma longa extract and their application in antimicrobial activity. Mater. Lett., 2019, vol. 259:126813. doi: 10.1016/ j.matlet.2019.126813

15. Nasrollahzadeh M., Sajjadi M., Dadashi J., Ghafuri H. Pd-based nanoparticles: plant-assisted biosynthesis, characterization, mechanism, stability, catalytic and antimicrobial activities. Adv. Colloid Interface Sci, 2020, vol. 276:102103. doi: 10.1016/j.cis.2020.102103

Авторы:

Гудкова Е.С., студентка 5 курса специальности «Медицинская кибернетика», ФГБОУ ВО Красноярский государственный медицинский университет им. профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого, г. Красноярск, Россия;

Удегова Е.С., студентка 5 курса специальности «Медицинская кибернетика», ФГБОУ ВО Красноярский государственный медицинский университет им. профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого, г. Красноярск, Россия; Гильдеева К.А., студентка 5 курса специальности «Медицинская кибернетика», ФГБОУ ВО Красноярский государственный медицинский университет им. профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого, г. Красноярск, Россия; Рукосуева Т.В., к.б.н., доцент кафедры микробиологии им. доц. Б.М. Зельмановича, ФГБОУ ВО Красноярский государственный медицинский университет им. профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого, г. Красноярск, Россия; Сьед Б., к.б.н., преподаватель кафедры микробиологии им. доц. Б.М. Зельмановича, ФГБОУ ВО Красноярский государственный медицинский университет им. профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого, г. Красноярск, Россия.

Поступила в редакцию 10.01.2020 Отправлена на доработку 01.04.2020 Принята к печати 29.11.2020

Authors:

Gudkova E.S., 5th year Student majoring in Medical Cybernetics, Krasnoyarsk State Medical University named after Professor V.F. Voino-Yasenetsky, Krasnoyarsk, Russian Federation; Udegova E.S., 5th year Student majoring in Medical Cybernetics, Krasnoyarsk State Medical University named after Professor V.F. Voino-Yasenetsky, Krasnoyarsk, Russian Federation; Gildeeva K.A., 5th year Student majoring in Medical Cybernetics, Krasnoyarsk State Medical University named after Professor V.F. Voino-Yasenetsky, Krasnoyarsk, Russian Federation; Rukosueva T.V., PhD (Biology), Associate Professor, Department of Microbiology named after Associate Professor B.M. Zelmanovich, Krasnoyarsk State Medical University named after Professor V.F. Voino-Yasenetsky, Krasnoyarsk, Russian Federation; Syed B., PhD (Biology), Professor, Department of Microbiology named after Associate Professor B.M. Zelmanovich, Krasnoyarsk State Medical University named after Professor V.F. Voino-Yasenetsky, Krasnoyarsk, Russian Federation.

Received 10.01.2020 Revision received 01.04.2020 Accepted 29.11.2020

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.