CC BY
109
УДК 579:615.33:615.37 С.С. Тармакова, Л.А. Цыбикова, Э.С. Николаева
АНТАГОНИСТИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ БИФИДОБАКТЕРИЙ И ФИТОБАКТЕРИАЛЬНЫХ СРЕДСТВ
В статье представлены результаты изучения антагонистической активности бифидобактерий и фитобактериальных средств по отношению к тест-культурам условно-патогенных и патогенных микроорганизмов.
Ключевые слова: антагонистическая активность, бифидобактерии, дисбактериоз.
S.S. Tarmakova, L.A. Tsybikova, E.S. Nikolaeva ANTAGONISTIC ACTIVITY OF BIFIDUS BACTERIA AND PHITOBACTERIAL DRUGS
The results of studying of antagonistic activity of bifidus bacteria and phitobacterial drugs in relation to the test-cultures of conditional-pathogenic and pathogenic microorganisms are presented.
Key words: antagonistic activity, bifidus bacteria, dysbacteriosis.
Начальной точкой развития дисбиотических состояний различных биотопов организма является подавление индигенного микробного компонента, прежде всего бифидо- и лактобактерий, которые в норме оказывают сдерживающее влияние на размер популяций эндогенных условно-патогенных микроорганизмов и в значительной степени ответственны за поддержание резистентности биотопа к колонизации экзогенными патогенными микроорганизмами, так называемой «колонизационной резистентности»
[1, 2, 5].
В последние годы особый интерес для исследователей и клиницистов представляет микробиоценоз кишечника, нарушение которого сказывается на состоянии органов и систем всего организма. В результате развившегося дисбактериоза кишечника бактериальные метаболиты могут переносится в кровеносное русло. Это создает дополнительную нагрузку на функциональные возможности детоксицирующих систем организма, в свою очередь, различные повреждения этих систем ведут к нарушению микробиоценоза того или иного биотопа.
При многих патологических состояниях человека и животных микрофлора кишечника претерпевает существенные изменения в результате прямого воздействия токсического соединения на микроорганизмы или опосредованно за счет тех или иных эндогенных продуктов.
Снижение колонизационной резистентности и барьерной функции кишечника способствует контаминации микрофлорой толстого отдела кишечника верхних отделов желудочнокишечного тракта и транслокации факультативных микроорганизмов из просвета кишечника во внутренние органы.
Таким образом, контроль за составом нормальной микрофлоры кишечника и разработка
методов коррекции нарушений микробной экологии являются важным этапом профилактики и лечения различных болезней. В профилактике и лечении дисбактериозов различных биотопов в настоящее время делается упор на применение биологических препаратов из нормальной микрофлоры кишечника, в частности бифидобактерий [2,7].
Бифидобактерии играют весьма существенную роль в нормализации белкового, углеводного, липидного и минерального обмена организма хозяина за счет продукции большого количества ферментов и других биологически активных веществ благодаря антагонистической активности повышают резистентность организма к ряду патогенных микроорганизмов, а также оказывают позитивное регулирующее воздействие на общий иммунологический статус макроорганизма [4].
Все эти положительные свойства бифидобактерий позволили использовать их как основу при создании фитобактериальных средств, обладающих выраженным комплексным стимулирующим действием на макроорганизм в целом или на его отдельные системы и органы.
Терапевтическая эффективность фитобактериальных средств заключается в содержании в них большого количества жизнеспособных клеток бифидобактерий, способных приживаться в кишечнике и обладающих антибактериальной активностью по отношению к посторонней условно-патогенной и патогенной микрофлоре.
Целью настоящего исследования явилось изучение антагонистической активности бифидобактерий шт. B.bifidum 1 и шт. B.longum B 379 M , сухих водорастворимых экстрактов корней солодки голой Glycyrrhiza Glabra L. (ГФХ, ст.260, Extractum Glycyrrhizae siccum) и плодов шиповника Rosa (ГФ XI, ст.38), а также фито-
С.С. Тармакова, Л.А. Цыбикова, Э.С. Николаева. Антагонистическая активность бифидобактерий и фитобактериальных средств
бактериальных средств с использованием данных штаммов бифидобактерий и водорастворимых растительных экстрактов по отношению к тест-культурам условно-патогенных и патогенных микроорганизмов (Е.соИ 408 Новгордская, S.aureus 209 p, Pr.vulgaris 50, Ps.aeruginosa ATCC 10145).
В сухом экстракте корней солодки содержание глицирризиновой кислоты не менее 17%, в экстракте из плодов шиповника аскорбиновой кислоты не менее 0,2%.
Антагонистическую активность бифидобактерий, водных растворов растительных экстрактов и фитобактериальных средств определяли методом серийных разведений [3,6]. Для этого тест-культуры культивировали совместно с
фильтратами бифидобактерий, 1%-ными вод-
ными растворами растительных экстрактов и фитобактериальными средствами в разных разведениях.
При изучении антагонистической активности бифидобактерий шт. B. Ыfidum 1 и B. longum B 379 M по отношению к S.aureus 209 p, Pr.vulgaris 50, Ps.aeruginosa ATCC 10145 и Е.соН 408 Новгордская установлен антагонизм микрофлоры фитобактериальных средств и водорастворимых экстрактов из корней солодки голой и плодов шиповника, который носил как бактерицидный (подавление роста), так и бактериоста-тический характер (угнетение роста) тест-культур (табл. 1).
Таблица 1
Антагонистическая активность бифидобактерий, растительных экстрактов и фитобактериальных средств in vitro
Варианты опыта Разведения фильтратов
Е.соН 408 Новгордская S.aureus 209 p Pr.vulgaris 50 Ps.aeruginosa ATCC 10145
+ +- + +- + +- + +-
B.bifidum 1 1 2 1 32 1 2 1 64 1 2 1 32 1 2 1 32
Б. longum B 379 М 1 4 1 64 1 4 1 64 1 4 1 64 1 4 1 64
Экстракт корней солодки 1 2 1 16 1 4 1 32 1 2 1 16 1 4 1 16
Экстракт плодов шиповника 1 4 1 32 1 2 1 64 1 2 1 64 1 4 1 32
B.bifldum 1 с экстрактом корней солодки 1 2 1 32 1 4 1 32 1 2 1 64 1 4 1 16
B.bifldum 1 с экстрактом плодов шиповника 1 4 1 32 1 2 1 64 1 4 1 64 1 4 1 64
B.longum B 379 М с экстрактом корней солодки 1 4 1 64 1 4 1 64 1 2 1 64 1 4 1 64
B.longum B 379 М с экстрактом плодов шиповника 1:4 1:64 1:4 1:64 1:8 1:128 1:4 1:64
Примечание: + - отсутствие роста; +- - торможение роста; бифидобактерии культивированы на молочной основе;
экстракты - 1% водные растворы; фитобактериальные средства - бифидобактерии на молочной основе с экстрактами.
Рост тест-культур Ps.aeruginosa ATCC 10145 и Pr.vulgaris 50 подавлялся в разведениях фильтрата 1:2 и 1:4 соответственно, а бактерио-ститическое действие проявлялось в разведениях 1:32 и 1:16. Бифидобактерии шт. B.longum B 379 M проявляли более высокую антагонистическую активность по отношению к изучаемым условно-патогенным тест-культурам, чем бифидобактерии шт. B.Ыfidum 1.
Подавление роста тест-культур Е.coli 408 Новгордская и S.aureus 209 p наблюдали в разведениях бифидобактерий шт. B.longum B 379 M 1:4, угнетение роста в разведении 1:64.
Фитобактериальные средства с бифидобактериями шт. B.longum B 379 M с экстрактами из корней солодки голой и плодов шиповника обладают более высокой антагонистической активностью по сравнению с бифидобактериями шт. B.bifldum 1. Очевидно, это объясняется тем, что бифидобактерии B.Ыfidum 1, культивируе-
мые на молочной основе, обладают более слабой биохимической активностью, чем бифидобактерии B. longum B 379 M .
Самая высокая антибактериальная активность выявлена у фитобактериального средства с использованием бифидобактерий шт. B.longum B 379 M с экстрактом плодов шиповника и для культивирования бифидобактерий на молочной основе для конструирования фитобактериальных средств рекомендован шт. B.longum B 379 M. Наряду с определением антагонистической активности фитобактериальных средств были проведены исследования по изучению стабильности этого свойства при хранении фитобактериальных средств в течение 7 суток при температуре 2-4 оС. Полученные данные показали, что хранение указанных средств в течение этого срока не снижало их антибактериальную активность.
Таким образом, учитывая, что в лечении повреждений печени существенное место занимают средства растительного происхождения, а в терапии - нарушения микробной экологии кишечника, наиболее распространенным способом является использование эубиотиков, в частности бифидобактерий. Целесообразным представляется применение сочетания фито- и бактериоп-репаратов для профилактики и лечения заболеваний органов гепатобилиарной системы.
Литература
1. Бондаренко В.М., Грачева Н.М. Дисбиотические состояния и лечебные мероприятия при них // Вестник РАМН. - 2005. - № 12. - С.24-29.
2. Воробьев А.А., Бондаренко В.М., Лыкова Е.А. Микро-экологические нарушения при клинической патологии
и их коррекция бифидосодержащими пробиотиками // Вестник РАМН. - 2004. - №2. - С. 13-17.
3. Егоров Н.С. Основы учения об антибиотиках. - М., 1986. - 448с.
4. Иванова Е.В., Гордеева С.В., Андрющенко С.В. Антагонистическая активность бифидофлоры кишечного биотопа в норме и при дисбиозах // Медицинская наука и образование Урала. - 2009. - Т.10. - № 3. - С.12-13.
5. Цибулевский А.Ю., Соколов А.В. Микроэкология человека (часть I и часть II) // Успехи современного естествознания. - 2008. - № 7. - С. 17-26.
6. Червинец Ю.В., Червинец В.М., Самоукина А.М. Антагонистическая активность пробиотических штаммов и др. // Успехи современного естествознания. - 2009. - №
2. - С.73.
7. Folwaczny C. Probiotics for prevention of uncreative colitis recurrence: alternative medicine added to standard treatment // J.Gastroenterol. - 2000. - V.38. - №6. - P. 547550.
Тармакова Светлана Степановна - доктор биологических наук, профессор, директор испытательного лабораторного центра Бурятской государственной сельскохозяйственной академии им. В.Р. Филиппова, тел.: (83012)445035, е-mail: tarma@vandex.ru
Цыбикова Людмила Александровна - главный врач МУЗ «Городская поликлиника № 1», тел.: (83012) 213862, e-mail: TsvbikovaLudmila@vandex.ru
Николаева Эльвина Саяновна - акушер-гинеколог МУЗ «Городская поликлиника № 1», тел.: (83012) 212686.
Tarmakova Svet/ana Stepanovna - doctor of biology science, director of Experimental and Laboratory center of Buryat State Agricultural Academy, phone: (83012)445035.
Tsybikova Ludm/a A/exandrovna - the head physician of a city polyclinic №1, phone: (83012)213862. Niko/aevaE/vinaSayanovna- the gynecologist of a city policlinic №1, phone: (83012)212686.
