CC BY
73
Заключение
Проведено исследование возможностей применения метода NARMAX для построения модели с несколькими входами. На основе метода NARMAX создана статистическая динамическая модель, описывающая как процессы дыхания и сердцебиения в отдельности и во взаимосвязи. Метод NARMAX адекватно описывает исследуемые процессы и может быть применен для построения моделей разной природы.
Метод NARMAX также позволяет использовать фильтрацию совместной модели дыхания и сердцебиения для разложения ее на независимые исходные модели, т.е. данный метод может быть применен в качестве цифрового фильтра. Это позволяет его применять как для сжатого общего описания особенностей функционирования человеческого организма, так и для описания особенностей данного конкретного человека, вне зависимости от местонахождения респондента.
Литература
1. Лукьянов Г.Н., Воронин А. А. Экспериментальные исследования взаимодействия процессов дыхания и сердцебиения // Биотехносфера. - 2011. - № 5-6. - С. 18-22.
2. Billings S.A. Orthogonal least squares methods and their application to non-linear system identification // Int. J. Control. - 1989. - V. 50. - № 5. - P. 1873-1896.
3. Лукьянов Г.Н., Рассадина А.А., Дранишникова О.А., Скирмандт Е.В., Усачев В.И. Исследование тепло- и массообменных характеристик человеческого дыхания // Изв. вузов. Приборостроение. -2005. - Т. 48. - № 5. - С. 63-66.
4. Воронин А.А., Дмитриев И.А., Рыбина Л. А. Измерительный комплекс для исследования колебательных процессов в человеческом организме // Изв. вузов. Приборостроение. - 2010. - Т. 53. - № 4. - С. 18-22.
5. Колюбин С.А., Ефимов Д.В., Никифоров В.О., Бобцов А.А. Управление нелинейными системами на основе гибридных моделей с адаптацией // Научно-технический вестник информационных технологий, механики и оптики. - 2012. - № 3 (79). - С. 64-68.
6. Быстров С.В., Григорьев В.В., Рабыш Е.Ю., Черевко Н.А. Экспоненциальная устойчивость непрерывных динамических систем // Научно-технический вестник СПбГУ ИТМО. - 2011. - № 3 (73). - С. 44-47.
7. Миронов В.И., Миронов Ю.В., Юсупов Р.М. Регуляризация вариационных оценок параметров состояния нелинейных динамических систем // Изв. вузов. Приборостроение. - 2012. - Т. 55. - № 1. -С. 5-9.
8. Никитин Ю.А. Математическая модель формирования колебаний с использованием методов пассивного цифрового синтеза // Изв. вузов. Приборостроение. - 2011. - Т. 54. - № 9. - С. 52-58.
Лукьянов Геннадий Николаевич - Санкт-Петербургский национальный исследовательский университет информационных технологий, механики и оптики, доктор технических наук, профессор, зав. кафедрой, [email protected] Полищук Сергей Александрович - Санкт-Петербургский национальный исследовательский университет информационных технологий, механики и оптики, аспирант, [email protected]
УДК 535.14, 57.043
АНАЛИЗ ВЛИЯНИЯ НИЗКОИНТЕНСИВНОГО ТЕРАГЕРЦОВОГО ИЗЛУЧЕНИЯ НА МАРКЕРЫ РАННЕЙ АКТИВАЦИИ ЛИМФОЦИТОВ М.В. Цуркан, И.В. Кудрявцев, М.К. Серебрякова, А.С. Трулёв, А. М. Снегова, О.А. Смолянская, А.В. Полевщиков, Н.С. Балбекин
В литературе имеются данные, свидетельствующие о влиянии терагерцового (ТГц) излучения на элементы крови. Данное исследование посвящено определению уровня поверхностных маркеров клеточной активации лимфоцитов при воздействии широкополосного ТГц излучения диапазона 0,05-1,2 ТГц. В ходе проведенного исследования нами были выбраны два антигена - CD38 и CD69 - увеличение уровня экспрессии таких маркеров позволяет оценить функциональное состояние клеток в условиях культивирования in vitro. Полученные данные свидетельствуют, что излучение с плотностью мощности 9,55; 0,63 и 0,03 мкВт/см2 в течение 1 минуты не приводит к изменению функциональной активности лимфоцитов.
Ключевые слова: терагерцовое излучение, медицина, кровь, лимфоциты, маркеры активации.
Введение
В настоящее время в литературе можно найти некоторое количество работ, посвященных изучению влияния терагерцового (ТГц) излучения на функциональную активность клеток крови человека. В разное время объектами исследования выступали эритроциты или тромбоциты [1], лейкоциты [2], равно
как и лимфоциты. В последнем случае основное внимание уделялось роли ТГц излучения различной мощности в регуляции продвижения клеток по клеточному циклу [3, 4], нарушению целостности генетического материала клеток и стабильности ДНК [4, 5]. Вместе с тем, для корректной оценки функционального состояния клеток можно предложить использование несколько другого подхода, основанного на определении уровня поверхностных антигенов, характеризующих функциональное состояние клеток, т.е. маркеров клеточной активации. Спектр активационных маркеров лимфоцитов крайне широк. Их традиционно разделяют на несколько групп в зависимости от времени появления на поверхности лимфоцита после его активации. В ходе проведенного исследования нами были выбраны два антигена - CD38 и CD69, увеличение уровня поверхностной экспрессии которых позволяет оценить функциональное состояние клеток в условиях культивирования in vitro.
Молекула CD38 - это трансмембранный белок, который является ферментом, регулирующим концентрацию цитоплазматического кальция - основного посредника в передаче сигнала от поверхностных рецепторов в ядро клетки. Кроме того, данный фермент обладает целым рядом других свойств и может проявлять активность аденозиндифосфатрибозил-циклазы, циклический аденозиндифосфат-рибозил-гидролазы и NAD-гликогидролазы [6]. CD38 играет роль рецептора, модулируя межклеточные взаимодействия, и может участвовать в передаче сигнала из межклеточного пространства в цитоплазму клеток. Данная молекула широко представлена на активированных клетках крови, к числу которых относятся Т-, В-, NK-клетки и некоторые другие типы клеток, причем определение уровня экспрессии данной молекулы имеет важнейшее прогностическое значение при ведении пациентов с различными патологиями [7]. Что же касается второго маркера активации, выбранного для наших исследований, то молекула CD69 относится к интегральным мембраноассоциированным белкам. Считается, что CD69 принимает участие в пролиферации лейкоцитов, так как уровень его экспрессии коррелирует с увеличением уровня проли-феративной активности клеток, вместе с тем, на «покоящихся», т.е. не активированных лимфоцитах (обычно Т- и В-клетках), уровень экспрессии данной молекулы крайне низок [8].
Экспериментальная установка
Эффект генерации ТГц излучения заключается в том, что лазерное излучение фемтосекундной длительности создает свободные носители заряда в поверхности полупроводника, движение которых в магнитном поле генерирует ТГц излучение. Такой принцип называется генерацией на фотопроводящей антенне.
Рисунок. Блок-схема ТГц фотометра: вид сверху (а); элементы 8, 9, вид сбоку (б).
1 - фемтосекундный лазер; 2, 4 - зеркала; 3 - механический модулятор; 5 - магнит с размещенным внутри кристаллом !пАб (угол падения излучения 45°); 6, 8 - параболические зеркала;
7 - светоделительная кремниевая пластина; 9 - объект, помещенный в ячейку планшета; 10 - линза;
11 - оптико-акустический приемник; 12 - синхронный усилитель; 13 - персональный компьютер
Оптическая схема экспериментальной установки ТГц фотометра с использованием фемтосекунд-ного лазера БЬ-1 с активной средой Yb:KYW (РешоБ, Россия; длина волны 1040 нм, длительность импульса 120 фс, частота следования импульсов 75 МГц, средняя мощность 1 Вт) представлена на рисунке. Излучение лазера 1 проходило систему зеркал 2, 4; перед тем, как попасть на полупроводниковый кристалл, оно стробировалось механическим модулятором 3 с частотой 13 Гц, затем наводилось на кристалл
InAs, помещенный в сильное магнитное поле 5. Фемтосекундное излучение, отраженное от кристалла, обрезалось с помощью фильтра из фторопласта. Расходящееся ТГц излучение коллимировалось внеосевым параболическим зеркалом 6 и направлялось на светоделительную кремниевую пластину 7. Далее часть излучения, прошедшая через светоделительную пластину, фокусировалась линзой 10 на оптико-акустический приемник 11 для оперативного слежения за выходной мощностью (ТГц) без прерывания облучения объектов. Другая часть излучения, отраженная от кремниевой пластины, попадала на второе параболическое зеркало 8, которое направляло излучение (сходящийся пучок) вверх на объект 9. Потери ТГц излучения на планшете, в котором находились клетки, составили 20%. Генерируемое ТГц излучение имело полосу частот от 0,05 до 1,2 ТГц. Длительность импульса 2,5 пс. Облучение происходило в течение 1 мин. Площадь облучения составляла 3,14 см2. Плотность мощности варьировалась и составляла 9,55; 0,63 и 0,03 мкВт/см2. Эксперименты проводились при температуре 20 °С. При каждом уровне мощности облучалось по 1 образцу от каждого донора (18 доноров). 18 контрольных лунок не подвергались облучению.
Материалы и методы
Забор венозной крови клинически здоровых доноров осуществлялся в пробирки с добавлением гепарина (10 ЕД/мл). Кровь смешивалась со стерильным забуференным фосфатами физиологическим раствором (ЗФР) в соотношении 1:2 и наслаивании на градиент плотности 1,077 г/мл Histopaque-1077 (Sigma-Aldrich, США), после чего центрифугировалась в течение 30 мин при ускорении 400g и температуре 18-22°С. По завершении центрифугирования собирали слой мононуклеарных клеток, образовавшихся на границе раздела фаз. Полученную суспензию клеток дважды отмывали полной культуральной средой (ПКС), приготовленной на основе RPMI-1640 («Биолот», Санкт-Петербург) с добавлением 10% инактивированной эмбриональной телячьей сыворотки (ЭТС, «Биолот», Санкт-Петербург), 50 мкг/мл гентамицина («Биолот», Санкт-Петербург) и 2 мМ L-глутамина («Биолот», Санкт-Петербург), в течение 7 мин при ускорении 300g. После этого определяли количество полученных клеток при помощи гемоци-тометра. Для постановки экспериментов в лунки 24-луночных планшетов («Sarstedt», Германия) вносили по 200 мкл клеточной суспензии (5*106 клеток/мл) в ПКС. После облучения к культурам лимфоцитов добавляли по 250 мкл ПКС и инкубировали при 37°С в атмосфере 5% СО2 в течение 24 ч. По завершении инкубации клетки смешивали с охлажденным ЗФР, содержащим 2% ЭТС, переносили в пробирки для центрифугирования и дважды отмывали избытком ЗФР (300g в течение 8 мин). Полученную суспензию клеток использовали для постановки экспериментов, описанных ниже.
По завершении инкубации суспензию лимфоцитов дважды отмывали избытком ЗФР при описанных выше условиях, после чего смешивали с 100 мкл свежего ЗФР. Для выявления основных популяций клеток использовали следующие антитела: для выявления популяции Т-лимфоцитов - CD3-PC7 (Кат. №737657), для выявления В-лимфоцитов - CD19-ECD (A07770), для выявления популяции натуральных киллеров - CD56-PC5.5 (A79388). В качестве маркеров активации были использованы антитела против CD69 (IM1934U) и CD38 (A07778), меченые РЕ (фикоэритрин) и ФИТЦ (флуоресцеин изотио-цианат-декстран) соответственно. Для корректного выявления популяции лимфоцитов использовали панлейкоцитарный маркер CD45 (IM2473), меченый АРС (алофикоцианин). Окраску антителами против поверхностных антигенов проводили в соответствие с рекомендациями производителя, для оценки уровня экспрессии маркеров активации использовали изотипические контроли. Для каждого из образцов анализировали не менее 20000 лимфоцитов на проточном цитофлуориметре Navios™ («Beckman Coulter», США). Анализ полученных результатов проводили при помощи программного обеспечения Kaluza™ («Beckman Coulter», США).
Результаты и обсуждение
Результат выражали в виде процента клеток, несущих либо один из маркеров активации (CD38+CD69- и CD38-CD69+), либо оба одновременно (CD38+CD69+), либо не несущих ни одного из них (CD38-CD69-). Данные маркеры исследовались на популяциях Т-лимфоцитов (отвечающих за реализации клеточных реакций приобретенного иммунитета), В-лимфоцитов (главной функцией которых является участие в гуморальных реакциях приобретенного иммунитета), а также натуральных киллерах (NK) и NKT-клетках - популяциях лимфоцитов периферической крови, участвующих в противовирусном и противоопухолевом ответах организма. Обработку полученных результатов проводили с использованием пакета программ PASW Statistics 18 (IBM, США). Результаты сведены в таблицу.
В ходе проведенного исследования нами не было отмечено увеличение уровня поверхностной экспрессии CD38 ни на одном из изученных типов клеток, к числу которых относили Т-, В-, NK- и NKT-клетки. Вместе с тем, анализ литературы указывает на то, что в условиях культивирования лимфоцитов in vitro достоверный прирост уровня CD38 отмечается на лимфоцитах в ответ на внесение таких стандартных иммунологических стимуляторов, как форбол-миристил-ацетат, а также IL-4 и антител против CD3 или поверхностных иммуноглобулинов класса М соответственно [9]. В случае использования ТГц облучения с плотностью мощности 9,55; 0,63; 0,03 мкВт/см2 активация ни одной из перечисленных выше
популяций клеток не имела место. Аналогичные результаты были получены и при оценке уровня экспрессии CD69 на основных популяциях лимфоцитов, изменение уровня экспрессии которого может быть связано с пролиферативной активностью лимфоцитов. Как уже отмечалось выше, на неактивированных клетках, особенно Т- и В-лимфоцитах, данная молекула практически отсутствует. Однако при переходе лимфоцитов в активированное состояние на уровне РНК - с использованием полимеразной цепной реакции - достоверное увеличение уровня экспрессии гена CD69 отмечается спустя 3-4 часа после активации клеток в условиях in vitro [10]. Именно поэтому CD69 традиционно рассматривается как маркер «ранней» активации лимфоцитов. Что же касается популяций цитотоксических клеток (NK- и NKT-клетки), то уровень экспрессии CD69 на них находится на относительно высоком уровне постоянно, тогда как дополнительная стимуляция клеток сопровождается дополнительным увеличением уровня как CD69, так и CD38 [7, 11]. Следует также упомянуть и том, что последний антиген - CD38 - в случае В-лимфоцитов и натуральных киллерных клеток рассматривается большинством исследователей как маркер «диффе-ренцировки» или созревания, которые характеризуют «степень зрелости» клеток, нежели их активацион-ный статус.
Плотность T-лимфоциты, % B-лимфоциты, %
мощности, CD69+ CD69+ CD69- CD69- CD69+ CD69+ CD69- CD69-
мкВт/см2 CD38- CD38+ CD38+ CD38- CD38- CD38+ CD38+ CD38-
контроль 5,0±0,8 8,8±1,4 52,2±2,9 34,0±2,6 9,6±1,0 27,7±1,8 49,5±2,0 13,1±2,2
0,03 5,0±0,7 9,1±1,9 52,9±2,9 33,0±2,5 9,5±1,2 29,0±2,0 49,2±2,2 12,2±1,8
0,63 5,2±0,7 9,3±1,6 52,1±2,8 33,5±2,6 9,8±1,2 29,9±1,7 48,6±2,0 11,7±1,7
9,55 5,1±0,5 9,1±1,5 52,2±2,6 33,6±2,7 9,4±1,0 29,0±1,7 49,6±1,8 12,1±1,7
Плотность NK % NKT, %
мощности, CD69+ CD69+ CD69- CD69- CD69+ CD69+ CD69- CD69-
мкВт/см2 CD38- CD38+ CD38+ CD38- CD38- CD38+ CD38+ CD38-
контроль 1,5±0,3 72,7±5,0 23,5±4,8 2,3±0,5 18,2±2,6 15,6±0,7 32,5±3,9 33,7±3,2
0,03 1,8±0,4 72,0±4,7 23,8±4,5 2,4±0,6 18,7±2,9 16,6±1,5 32,2±3,9 32,5±3,5
0,63 1,7±0,3 72,4±4,7 23,8±4,5 2,1±0,5 18,7±2,6 16,7±1,3 32,8±3,9 31,8±3,3
9,55 1,8±0,3 72,2±4,6 23,8±4,3 2,2±0,5 19,6±2,7 16,7±1,5 32,2±3,5 31,4±2,9
Таблица. Процентное распределение клеток по наличию в них маркеров активации (X±s, n=18, X - среднее; s - ошибка; n - число наблюдений по одной точке)
Анализ литературы показал отсутствие влияния на кинетику клеточного цикла, образование микроядер, на индекс пролиферации и индукцию микроядер клеток с блоком цитогенеза при облучении в течение 20 мин лимфоцитов периферической крови человека лазером на свободных электронах на частотах 0,12 и 0,13 ТГц и средней мощности 1 мВт и 0,6 мВт соответственно [3].
Отсутствие влияния на кинетику клеточного цикла лимфоцитов было также подтверждено другими исследователями при использовании излучения частоты 0,13 ТГц (20 мин) в диапазоне мощностей 0,155 мВт/см2. Ими же было отмечено, что ТГц излучение не вызывает повреждения хромосом (MN-анализ) [4].
Воздействие ТГц излучением (0,1 ТГц, 31 мкВт/см2) длительностью 60, 120 и 1440 мин вызывает нестабильность генома в лимфоцитах [5]. Однако, по мнению G.J. Wilmink, эти результаты должны рассматриваться с осторожностью [12].
Во всех вышеперечисленных исследованиях использовали непрерывные источники излучения. Также в указанных работах плотности мощности ТГц излучения и длительности облучения значительно превышают применяемые нами в эксперименте (9,55; 0,63 и 0,03 мкВт/см2, 1 мин). Только работа [5] сравнима с нашей по плотности мощности (31 мкВт/см2). Однако большое количество публикаций по воздействию именно слабых полей показывает, что излучение слабой интенсивности может приводить к биологическим эффектам, которые не наблюдаются при излучении большей мощности. Так основные возможные механизмы касательно волн миллиметрового и субмиллиметрового (ТГц) диапазона рассмотрены в работе [13]. Стоит отметить также, что проведенные нами ранее эксперименты на нервных клетках [14] показали, что именно снижение плотности мощности при облучении широкополосным ТГц излучением приводит к стимуляции клеточного роста. Исходя из этого, нами были выбраны данные плотности мощности.
В связи с тем, что основной практический интерес к использованию ТГц излучения в медицине сейчас направлен на создание диагностических ТГц приборов, то продолжительность длительности облучения, на наш взгляд, целесообразно определять из длительности процедуры диагностики на данных приборах. Так как время сканирования составляет несколько минут, то нами на данном этапе работы была выбрана длительность излучения 1 мин.
В нашем исследовании ТГц излучение с плотностью мощности 9,55; 0,63 и 0,03 мкВт/см2 в течение 1 мин не привело к изменению функциональной активности лимфоцитов. Возможно, что именно
увеличение продолжительности облучения может оказать влияние на активацию клеток. Варьирование параметров облучения будет являться следующим этапом наших исследований.
Заключение
Анализ уровня экспрессии маркеров клеточной активации (CD38 и CD69) лимфоцитов (Т-лимфоцитов, В-лимфоцитов, натуральных киллеров и NKT-клеток) показал, что в ответ на воздействие импульсного ТГц излучения диапазона 0,05-1,2 ТГц с плотностью мощности 9,55; 0,63;
0.03.мкВт/см2 в течение 1 мин не происходит достоверного увеличения количества лимфоцитов, содержащих данные маркеры.
Работа выполнена в рамках реализации ФЦП «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009-2013 годы (ГК № 14.512.11.0020).
Литература
1. Киричук В.Ф., Андронов Е.В., Антипова О.Н., Иванов А.Н., Креницкий А.П., Крылова Я.А., Сухова С.В., Цымбал А.А. Влияние электромагнитных волн терагерцового диапазона на живые системы // Бюллетень медицинских Интернет-конференций. - 2012. - № 2 (6). - С. 421-425.
2. Zeni O., Gallerano G.P., Perrotta A., Romano M., Sannino A., Sarti M., D'Arienzo M., Doria A., Giovenale
E., Lai A., Messina G., Scarfi M.R. Cytogenetic observations in human peripheral blood leukocytes following in vitro exposure to THz radiation: a pilot study // Health Phys. - 2007. - V. 92 (4). - P. 349-357.
3. Scarfi M.R., Romano M., Di Pietro R., Zeni O., Doria A., Gallerano G.P., Giovenale E., Messina G., Lai A., Campurra G., Coniglio D., D'Arienzo M. THz Exposure of Whole Blood for the Study of Biological Effects on Human Lymphocytes // Journal of Biological Physics. - 2003. - V. 29. - P. 171-177.
4. Doria A., Gallerano G.P., Giovenale E., Messina G., Lai A., Ramundo-Orlando A., Sposato V., D'Arienzo M., Perrotta A., Romano M., Sarti M., Scarfi M.R, Spassovsky I., Zeni O. THz radiation studies on biological systems at the ENEA FEL facility // Infrared Physics & Technology. - 2004. - V. 45. - P. 339347.
5. Korenstein-Ilan A., Barbul A., Hasin P., Eliran A., Gover A., Korenstein R. Terahertz radiation increases genomic instability in human lymphocytes // Radiation Research. - 2008. - V. 170. - № 2. - P. 224-234.
6. Dos Santos D.C., Neves P.C., Azeredo E.L., Pelajo-Machado M., Martinho J.M., Pacheco-Moreira L.F., Araujo C.C., Cruz O.G., de Oliveira J.M., Pinto M.A. Activated lymphocytes and high liver expression of IFN-y are associated with fulminant hepatic failure in patients // Liver Int. - 2012. - V. 32 - № 1. - P. 147157.
7. Slyker J.A., Lohman-Payne B., John-Stewart G.C., Dong T., Mbori-Ngacha D., Tapia K., Atzberger A., Taylor S., Rowland-Jones S.L., Blish C.A. The impact of HIV-1 infection and exposure on natural killer (NK) cell phenotype in Kenyan infants during the first year of life // Front Immunol. - 2012. - V. 3. - P. 399-406.
8. Caruso A., Licenziati S., Corulli M., Canaris A.D., De Francesco M.A., Fiorentini S., Peroni L., Fallacara
F., Dima F., Balsari A., Turano A. Flow cytometric analysis of activation markers on stimulated T cells and their correlation with cell proliferation // Cytometry. - 1997. - V. 27. - № 1. - P. 71-76.
9. Deterre P., Berthelier V., Bauvois B., Dalloul A., Schuber F., Lund F. CD38 in T- and B-cell functions // Chem. Immunol. - 2000. - V. 75. - P. 146-168.
10. Reddy M, Eirikis E, Davis C, Davis HM, Prabhakar U. Comparative analysis of lymphocyte activation marker expression and cytokine secretion profile in stimulated human peripheral blood mononuclear cell cultures: an in vitro model to monitor cellular immune function // J. Immunol. Meth. - 2004. - V. 293. - № 1-2. - P. 127-142.
11. Montoya C.J., Catano J.C., Ramirez Z., Rugeles M.T., Wilson S.B., Landay A.L. Invariant NKT cells from HIV-1 or Mycobacterium tuberculosis-infected patients express an activated phenotype // Clin. Immunol. -2008. - V. 127. - P. 1-6.
12. Wilmink G.J., Grundt J.E. Invited Review Article: Current State of Research on Biological Effects of Terahertz Radiation // J. Infrared Milli Terahz Waves. - 2011. - V. 32. - P.1074-1122.
13. Бецкий О. В., Лебедева Н. Н. Современные представления о механизмах воздействия низкоинтенсивных миллиметровых волн на биологические объекты // Миллиметровые волны в биологии и медицине. - 2001. - № 4. - С. 5-12.
14. Цуркан М.В., Собакинская Е.А., Смолянская О.А., Беспалов В.Г., Вакс В.Л., Балбекин Н.С. Исследование спектра молекулы ДНК в терагерцовой области частот // Научно-технический вестник информационных технологий, механики и оптики. - 2012. - № 1 (77). - С. 15-19.
Цуркан Мария Валериевна Кудрявцев Игорь Владимирович
Серебрякова Мария Константиновна Трулев Андрей Сергеевич Снегова Анастасия Михайловна
Смолянская Ольга Алексеевна
Полевщиков Александр Витальевич
Балбекин Николай Сергеевич
Санкт-Петербургский национальный исследовательский университет информационных технологий, механики и оптики, аспирант, [email protected]
ФГБУ «НИИ экспериментальной медицины» СЗО РАМН, Дальневосточный федеральный университет, Санкт-Петербургский государственный университет; кандидат биологических наук, доцент; [email protected]
Санкт-Петербургский государственный университет, студент, [email protected]
ФГБУ «НИИ экспериментальной медицины» СЗО РАМН, научный сотрудник, [email protected]
Санкт-Петербургский национальный исследовательский университет информационных технологий, механики и оптики, студент, [email protected]
Санкт-Петербургский национальный исследовательский университет информационных технологий, механики и оптики, кандидат физ.-мат. наук, доцент, [email protected]
Дальневосточный федеральный университет, зав. кафедрой; ФГБУ «НИИ экспериментальной медицины» СЗО РАМН, вед. научный сотрудник; доктор биологических наук, профессор; [email protected]
Санкт-Петербургский национальный исследовательский университет информационных технологий, механики и оптики, студент, [email protected]
