CC BY
126
DOI: 10.31146/1682-8658-ecg -162-2-151-158
Анализ штамм-специфичных эффектов лактобацилл L. casei DG (L. paracasei CNCMI-1572) и возможность их применения в клинической практике
Торшин И. Ю.1-2 4, Громова О. А.1 2, Максимов В. А.3, Захарова И. Н.3, Малявская С. И.4
1 ФИЦ ИУ РАН, Институт фармакоинформатики, 119333, г. Москва, ул. Вавилова, д. 42, Россия
2 Центр хранения и анализа больших данных (ЦХАБД), МГУ, Москва, Россия
3 ФГБОУ ДПО Российская медицинская академия непрерывного профессионального образования», Москва, Россия
4 ФГБОУ ВО Северный Государственный Медицинский Университет МЗ РФ, г. Архангельск, Россия
Analysis of the strain-specifi c effects of lactobacilli L. casei DG (L. paracasei CNCM 1-1572) and the possibility of their use in clinical practice
I. Yu. Torshin1' 2- 4, O. A. Gromova1' 2, V. A. Maksimov 3, I. N. Zacharova3, S. I. Malavskaiya4
1 FRC CSC RAS, Institute of Pharmacoinformatics, 119333, Moscow, Vavilova, 42, Russia
2 Big Data Storage and Analysis Center (CCHD), Moscow State University, Moscow, Russia
3 Federal State Budgetary Educational Institution of Further Professional Education "Russian Medical Academy of Continuous Professional Education" of the Ministry of Healthcare of the Russian Federation, Moscow, Russia
4 Federal State Budget Educational Institution of Higher Education "Northern State Medical University" of the Ministry of Healthcare of the Russian Federation, 163000, Arkhangelsk, Troitskiy Ave., 51
Для цитирования: Торшин И. Ю.,Громова О. А., Максимов В. А., Захарова И. Н., Малявская С. И. Анализ штамм-специфичных эффектов лактобацилл L. casei DG (L. paracasei CNCM I-1572) и возможность их применения в клинической практике. Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология. 2019;162(2): 151-158. DOI: 10.31146/1682-8658-ecg-162-2-151-158
For citation: Torshin I. Yu., Gromova O. A., Maksimov V. A., Zacharova I. N., Malavskaiya S. I. Analysis of the strain-specific effects of lactobacilli L. casei DG (L. paracasei CNCM I-1572) and the possibility of their use in clinical practice. Experimental and Clinical Gastroenterology. 2019;162(2): 151-158. (In Russ.) DOI: 10.31146/1682-8658-ecg-162-2-151-158
Торшин Иван Юрьевич, к.х.н., с.н.с. Институт Фармакоинформатики; ScopusAuthorlD: 7003300274, РИНЦЗРШ-код: 1375-1114, AuthorlD: 54104, ORC1DiD0000-0002-2659-7998, WOSID C-7683-2018
Громова Ольга Алексеевна, д.м.н., проф., в.н.с., научный руководитель Института Фармакоинформатики; РИНЦ SPIN-код: 6317-9833, AuthorlD: 94901, Scopus Author ID: 7003589812, ORCID iD https://orcid.org/0000-0002-7663-710X, WOS ID J-4946-2017 Максимов Валерий Алексеевич, д.м.н., проф., заслуженный деятель науки Российской Федерации, заслуженный врач Российской Федерации, вице-президент научного общества гастроэнтерологов России, профессор кафедры диетологии и нутрициологии
Захарова Ирина Николаевна, д.м.н., профессор, заслуженный врач России , заведующая кафедрой педиатрии; РИНЦ SPIN-код: 4357-3897, AuthorlD: 94901, Scopus Author ID: 6333259, ORCID iD https://orcid.org/0000-0003-4200-4598 Малявская Светлана Ивановна, д.м.н., проф., проректор по научной работе; ORCID: http://orcid.org/0000-0003-2521-0824 eLibrary SPIN: 6257-4400
Ivan Yu. Torshin, PhD in Applied Mathematics, leading researcher of the Department of Intellectual Systems; Scopus Author ID: 7003300274, SPIN-code: 1375-1114 AuthorID: 54104, ORCID iD0000-0002-2659-7998, WOS ID C-7683-2018 Olga A. Gromova, PhD, Doctor of Medical Sciences, Science Head of the Institute of Pharmacoinformatics, leading researchei of the Department of Intellectual Systems; SPIN-код: 6317-9833, AuthorID: 94901, Scopus Author ID: 7003589812 ORCID iD https://orcid.org/0000-0002-7663-710X, WOS ID J-4946-2017
Irina N. Zakcharova, PhD, Doctor of Medical Sciences, Head of the Department of Pediatrics, Honored Doctor of Russia; AuthorID: 94901, Scopus Author ID: 6333259, ORCID iD https://orcid.org/0000-0003-4200-4598
Svetlana I. Malyvskaya, Professor, Doctor of Medicine, Head of Sciences; ORCID: http://orcid.org/0000-0003-2521-0824; eLibrary SPIN: 6257-4400
И Corresponding author: Громова Ольга Алексеевна
Olga A. Gromova
Резюме
Эффективность действия пробиотиков штамм-специфична. В настоящей работе представлены результаты систематического анализа перспективного лактобактериального штамма Lactobacillusparacasei CNCMI-1572 (L. caseiDG; L. paracasei DG). L. casei DG хорошо выживает в условиях желудка и кишечника, поддерживает полезную микробиоту и тормозит рост патогенных бактерий, проявляет терапевтическое действие при язвенном колите и эрадикации H. pylori, дивертикулярной болезни кишечника, синдроме раздраженного кишечника.
Ключевые слова: лактобактерии, пробиотики, пребиотики, L. caseiI-1572, Энтеролактис
Summary
The effectiveness of probiotics is strain-specific. This paper presents the results of a systematic analysis of the promising lac-tobacterial strain Lactobacillus paracasei CNCM I-1572 (L. casei DG; L. paracasei DG). L. casei DG well survives in the conditions of the stomach and intestines, supports the beneficial microbiota and inhibits the growth of pathogenic bacteria, exhibits a therapeutic effect in ulcerative colitis, eradication of H. pylori, diverticular bowel disease, and irritable bowel syndrome.
Keywords: lactobacilli, probiotics, prebiotics, L. casei I-1572, Enterolactis
Введение
Микробиота (микробиом) представляет собой совокупность всех микроорганизмов, заселяющих организм человека. По разным данным, микробиом человека включает от 3х1012 до 1013 микроорганизмов [1]. Состояние микробиома, описываемое профилем количественной оценки содержания каждой разновидности бактерий, ассоциировано с состоянием здоровья всего организма. В частности, нарушения профиля микробиоты желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) взаимосвязаны с различными расстройствами кишечника: диареей, вызванной антибиотиками, запорами, синдромом разрдраженного кишечника (СРК) и др.
Для нормализации состояния микробиома необходимо использовать пробиотики - живые и полезные для ЖКТ микроорганизмы, способные достигать все отделы кишечника в активном состоянии. Пробиотики способствуют детоксика-ции организма, снижению системного воспаления, нормализации консистенции стула, лечению СРК [1], а также профилактике и терапии урогени-тальных инфекций, ОРЗ и других инфекционных заболеваний [2], подавлению роста патогенной и условно патогенной флоры (Clostridium difficile [3], H. pylori [4, 5] и др.), нормализации углеводного метаболизма и липидного профиля [6].
Эффективность различных пробиотиков в существенной мере зависит от штамма микроорганизма. В работе [7] были представлены результаты систематического анализа клинической эффективности штамм-специфичных эффектов различных пробиотиков. Выделены штаммы пробиотиков, которые характеризуются наибольшей эффективностью и представительной доказательной базой (Bifidobacterium animalis spp lactis BB-12 (B. lactis BB-12) и др).
Одним из перспективных лактобактериальных штаммов является Lactobacillus paracasei CNCM I-1572 (L. casei DG; L. paracasei DG), доступный в виде линейки пробиотических продуктов «Энтеролактис» (пр-во СОФАР С.п.А., Италия). Данный штамм интересен тем, что демонстрирует высокую выживаемость при приёме внутрь [8-10], поддерживает положительную микробиоту ЖКТ [11, 12], иммунный ответ организма-хозяина [13], проявляет терапевтическое действие при язвенном колите и способствует эрадикации H. pylori [14, 15], поддерживает ремиссию пациентов с дивертикулярной болезнью кишечника [8], полезен при синдроме раздраженной кишки [9]. В настоящей работе представлены результаты систематического анализа эффектов штамма лактобацилл L. casei DG.
Оценки жизнеспособности штамма L. casei DG
Для любого пробиотика принципиально важно выживание и активное размножение при попадании в достаточно агрессивную среду ЖКТ. Клинические исследования показали, что штамм L. casei DG, при условии приёма внутрь в виде раствора в смеси с пребиотиками, хорошо выживает в ЖКТ, проявляя устойчивость к действию желудочного сока, гидролитических ферментов, желчных кислот и сохраняется в кишечнике до 10 суток. Например, в клиническом исследовании группы детей 3-12 лет (п=20), получавших L. casei DG в виде питьевого раствора (109 КОЕ/
сут, Энтеролактис, 1 нед.), максимум содержания Ь. са$гг DG в кишечном транзите достигался к 5-му дню терапии [10] (Рис. 1).
Методом полимерзано-цепной реакции (ПЦР) были проведены оценки содержания Ь. са$гг DG в кишечном транзите после приёма препарата Энтеролактис здоровыми взрослыми добровольцами (п=20). Оценки показали, что данный штамм может выживать в кишечном транзите при 37 °С не менее 48 ч без значимого снижения числа жизнеспособных лактобактерий [8]. Жизнеспособные лактобактерии Ь. casei DG (Энтеролактис)
А
Рисунок 1.
Содержание Ь. сазег БО в кишечном транзите при приёме внутрь (109 КОЕ/ сут, 1 нед.) детьми 3-12 лет. А) Динамика содержания в среднем по группе детей (п=20). Б) Эмпирические функции распределения на дни 1-е, 4-е, и 8-е сутки. Различия между днём 1 и днями 4 и 8 были статистически достоверны по тесту Колмогорова-Смирнова (Р=0.0077)
определялись в образцах кала добровольцев на протяжении 5 суток после прекращения приема Ь. са$г1 ВО (Рис. 2).
Помимо выживания в условиях ЖКТ, важным требованием к пробиотику является его резистентность к антибиотикам, т.к. курсовой приём антибиотиков является наиболее типичной причиной
нарушений микробиоты. Штамм Ь. са$гг ВО более устойчив к воздействию ряда антибиотиков (ка-намицина, стрептомицина, тетрациклина), чем, например, эталонный штамм Ь. рагаса$г1 ЬМО 12586, использующийся в исследованиях устойчивости лактобактерий к антибиотикам [8] (Рис. 3 -на цветной вклейке в журнал).
Нормализация профиля микробиоты посредством приёма L.casei DG
В эксперименте у мышей, антибиотики широкого спектра действия (ампициллин, стрептомицин, клиндамицин) нарушали профиль микробиоты. Последующий приём Ь. са$гг ВО приводил к нормализации профиля микробиоты и поведенческих реакций у животных [11]. При воспроизведении модели дисбактериоза, вызванного антибиотиками, снижались количества бактерий, расщепляющих пищевые волокна (В.о$еЪиг1а, Ьаскпсчрпа, ЬасНпоЬа^егшт, Ьаскпос1о$Шйшт, Вогеа, Лсг1а1-ifactor, Яиттососсасеае, 0$сШо$р1та, ЕиЬа^гпит, р<0.05, см. Рис. 4 - на цветной вклейке в журнал). Приём Ь.casei ВО, наоборот, повышал количество
Lachnospiraceae, причем их количество достигало уровня, сравнимого с интактным контролем. Приём L. casei ВО также снижал количество Enterococ-caceae и Bacillaceae (p<0.05) [11].
Важно отметить, что L. casei ВО проявляет антибактериальный эффект по отношению к патогенным бактериям. Например, в экспериментальном исследовании было продемонстрировано антимикробное действие пробиотика L. casei ВО на бактерии зубного налета. Биоптаты, включавшие бактерии Staphylococcus, Streptococcus, Pasteurella и Neisseria, были взяты от собак с различными заболеваниями зубов. При инкубации в течение
Рисунок 2.
Количество жизнеспособных клеток (черные линии и круги) и общее количество клеток (синие линии и квадраты) Lactobacillus paracasei DG в образцах кала здоровых взрослых добровольцев после приема внутрь препарата Энтеро-лактис в питьевых флаконах один раз в день. (A) Данные индивидуальных участников; (Б) Усреднение по всей выборке участников (n=20).
О
3£
Жизнеспособные L. casei DG Общее количество L. casei DG
5 1 0
Время, сут
А
Время, сут
24 часов in vitro штамм L. casei DG оказывал бактерицидное действие на все анализируемые виды патогенных бактерий [12]. Антимикробный эффект оценивали посредством измерения радиуса зоны подавления роста при помещении пробиотика на культуру бактерий в агар-агаре (Рис. 5). Наиболее выраженный бактерицидный эффект отмечен по отношению к бактериям S. medius, S. epidermidis, S. suis, которые известны как высокопатогенные бактерии полости рта.
В исследовании здоровых добровольцев было установлено, что приём L. casei DG (24х 109 КОЕ/сут, 4 нед.) увеличивал пропорцию бактериальных Coprococcus: Blautia, что соответствует улучшению функционального профиля микробиоты кишечника [13]. Таким образом, штамм L. casei DG не только выживает в условиях ЖКТ и проявляет резистентность к определенным антибиотикам, но и может оказывать антибактериальное действие против патогенных бактерий. Эти свойства важны для проявления клинических эффектов штамма.
Клинические исследования штамма L. casei DG
Дополнение стандартной терапии пробиотиком L. casei DG (16х109 КОЕ/сут) обеспечивает высокий уровень эрадикации H. pylori, причем L. casei DG способствует снижению выраженности побочных эффектов. Например, низкая эффективность эрадикации H. pylori на основе комбинации «лево-флоксацин+доксициклин» может быть повышена при использовании штамм L. casei DG. В группе пациентов, не ответивших на два и более курсов эрадикации H. pylori (n=142, 30% мужчин, возраст 53±12 лет), применение L. casei DG достоверно повышало частоту успешной эрадикации H. pylori (55%, контроль - 43%) [14].
Пробиотики и, в том числе Lactobacillus casei, ранее не использовались для терапии пациентов устойчивых к антихеликобактерной терапии. При этом, сама по себе эрадикационная терапия не всегда успешна и может приводить к побочным эффектам, обусловленным нарушением экологического равновесия микросреды кишечника. Кроме того, пациенты, устойчивые к стандартной антихеликобактерной терапии представляют особую группу риска не только в возникновении хронического активного гастрита и тяжелого течения язвенной болезни, но и группу повышенного риска возникновения низкодифференцированной опухоли лимфоид-
ной ткани слизистых оболочек ЖКТ (лимфомы MALT) и риска рака желудка.
В исследовании [15] показаны преимущества включения Lactobacillus casei, подвид casei DG в дозе 16 миллиардов бактерий в 1 капс. в сутки курсом 10 дней к медикаментозной схеме для терапии персистирующей инфекциии, вызванной H. pylori. Группа из 70 последовательно отобранных пациентов была разделена на 2 подгруппы по 35 человек. Пациенты первой подгруппы получали 10 дней (1) ранитидин висмута цитрат в дозировке 400 мг 2 раза в сутки, (2) эзомепразол или пантопразол 40 мг в сутки, (3) амоксициллин
1 г 3 раза в сутки, тинидазол 500 мг 2 раза в сутки), и дополнительно 16 миллиардов бактерий Lactobacillus casei, подвид casei DG. Пациенты второй подгруппы получали 10 дней только 3 препарата (1) ранитидин висмута цитрат в дозировке 400 мг
2 раза в сутки, (2) эзомепразол или пантопразол 40 мг в сутки, (3) амоксициллин 1 г 3 раза в сутки, тинидазол 500 мг 2 раза в сутки. До включения в исследования все пациенты с персистирующей инфекцией H. pylori, безуспешно лечились по схеме (ранитидин висмут цитрат 800 мг/сут, эзомепразол или пантопразол 40 мг/сут, амоксициллин
3 г/сут, тинидазол 1000 мг/сут). 33 из 35 пациентов принимавших дополнительно L. casei DG были
Б
К статье
Анализ штамм-специфичных эффектов лактобацилл L. casei DG (L. paracasei CNCMI-1572) и возможность их применения в клинической практике (стр. 151-158)
To article
Analysis of the strain-specific effects of lactobacilli L. casei DG (L. paracasei CNCM I-1572) and the possibility of their use in clinical practice (p. 151-158)
Рисунок 3.
Оценки минимальных ин-гибирующих концентраций (MIC) для штамма L. casei DG и эталонного штамма L. paracasei LMG 12586.
Рисунок 4.
Изменения количественного состава микробиоты при воспроизведении модели дисбиоза, вызванного антибиотиками, и после применения L. casei DG. Приведён состав микробиоты на уровне семейств.
Рисунок 5.
Антимикробные эффекты Ь. сазег БО, оцененные как радиусы зоны подавления роста патогенных бактерий.
хеликобактер-негативными; у 5 из 34 пациентов наблюдались умеренные побочные эффекты, не приводившие к прекращению терапии.
В контроле побочные эффекты наблюдались у 13 из 32 пациентов (40.6%), причём у 2 пациентов (5.7%) наблюдались тяжелые побочные эффекты, требовавшие прекращения эрадикационной терапии [15]. У пациентов 1 и 2 подгрупп было выполнено эндоскопическое обследование, при котором были взяты четыре образца биопсии слизистой оболочки антрального отдела желудка, 2 из которых были использованы для проведения быстрого уреазно-го теста и два для окраски по Гимзе. Эрадикация H. pylori у пациентов в 1 подгруппе получавших дополнительно штамм Lactobacillus casei, подвид casei ВО, составила 97% (2 подгруппе - только 90%). При этом, в группе пациентов получавших пробио-тик побочные эффекты применения фармакотерапии «эзомепразол (пантопразол) + амоксициллин + тинидазол» развивались существенно реже (14%), тогда как в 2 подгруппе к концу терапии (после исключения из группы 2 пациентов с тяжелыми побочными эффектами) побочные эффекты развились у У пациентов (35%) [15].
L. casei ВО может успешно использоваться в профилактике и терапии дивертикулярной болезни кишечника. Дивертикулы толстого кишечника представляют собой мешочкообразные выпячивания ободочной кишки в наиболее слабых участках циркулярного мышечного слоя, в толще которых проходят кровеносные сосуды, снабжающие кровью слизистую оболочку.
Анализ биоптатов слизистой оболочки ободочной кишки от пациентов с дивертикулярной болезнью показал, что слизистая таких пациентов характеризуется разной степенью реактивности в отношении бактериальных патогенов. L. casei ВО играет важную роль в нейтрализации провоспа-лительных эффектов энтероинвазивных штаммов
E. coli. Энтероинвазивные E. coli способствовуют значительному повышению высвобождения NO, в то время как добавление L. casei ВО к биопсий-ному материалу ингибирует избыточную секрецию NO [16].
Терапия L. casei ВО (16х109 КОЕ/сут, 10 дней/ месяц, 2 года) эффективна для поддержания долгосрочной ремиссии дивертикулярной болезни толстой кишки (n=75). После терапии L. casei ВО 87% пациентов характеризовались стойкой ремиссией без каких-либо симптомов. У четырех пациентов (5.33%), которые приостановили лечение, отмечались рецидивы симптомов (100%), а у 2 из них развился дивертикулит (50%) [17].
Приём пробиотика на основе L. casei ВО способствует более успешному поддержанию ремиссии у пациентов с неосложненной дивертикулярной болезнью кишечника (n=210) [18] (Рис. 6). Комбинация месалазина (800 мг/сут) и L. casei ВО более эффективна для предотвращения рецидивов дивертикулярной болезни толстой кишки (96%), чем использование только месалазина (76%) [19].
L. casei ВО может использоваться в терапии синдрома раздраженного кишечника. СРК является наиболее распространенным функциональным расстройством ЖКТ, встречающимся у 10-20% населения. Желудочно-кишечные расстройства, висцеральная гиперчувствительность, дисфункция кишечника и нарушения психосоматики вовлечены в патофизиологию СРК. Исследования in vitro показали, что штамм L. casei ВО ослабляет воспалительный ответ слизистой оболочки кишечника биоптатов, взятых от пациентов с инфекционным СРК (n=10). Обработка штаммом L. casei ВО культур слизистой подвздошной кишки и толстой кишки значительно снижала уровни мРНК провоспалительных цитокинов и толл-рецептора TLR-4, в то время как экспрессия мРНК противовоспалительного ИЛ-10 увеличивалась [20].
Рисунок 6.
Кривые динамики клинической ремиссии неослож-ненной дивертикулярной болезни при терапии с использованием L. casei ВО. Под клинической ремиссией понимали отсутствие рецидивирующей боли в животе с индексом >5 на протяжении не менее 24 последовательных часов; данные регистрировали в любой момент времени на протяжении последующего наблюдения.
Другие возможности применения I. саве1
В цитируемом ранее экспериментальном исследовании дисбактериоз, вызванный антибиотиками ампициллином, стрептомицином или клиндами-цином у мышей, приводил к нарушениям в системе эндоканнабиноидов в кишечнике, реорганизации нейронов и глии в гиппокампе и, как следствие, к развитию депрессии. Наблюдались поведенческие изменения, в том числе ухудшение социальной памяти, нарушением сигнализации BDNF/ ТгкБ, фосфорилирования TRPV1 и электрической активности нейронов в гиппокампе [11].
L. саввХ DG приводил к нормализации профиля микробиоты и поведенческих реакций. В частности, приём Ь. еазег DG повышал количество
эв
ЬаскптрХтасеае, причём более высокие уровни Ьаскпо$р1тасеае соответствовали улучшению исследовательской активности и более короткой продолжительности периода неподвижности (апатии) у животных (р<0.05). Приём Ь. са$г1 DG также предотвращал избыточную активацию микро-глии и астроцитов, вызванную антибиотиками. Дисбиоз, вызванный антибиотиками, приводил к увеличению числа активированных клеток ми-кроглии в сегменте гиппокампа СА1 по сравнению с контролем, увеличению количества гипертрофированных астроцитов с, маркированных посредством GFAP. Приём Ь. са$е1 DG приводил к снижению выраженности этих изменений [11].
Заключение
Использование эффективных пробиотических препаратов является важным направлением в терапии и профилактике патологий ЖКТ. Разнообразие штаммов, различия в дозировках и жизнеспособности пробиотических бактерий существенно затрудняют выбор врача, не обладающего обширной экспертизой в области микробиологии. Выбор малоэффективных пробиотических штаммов, которые, к тому же, нестойки в условиях ЖКТ, и используются в малых дозах (менее 1 млрд КОЕ/сут) не приводит к клинически значимым результатам, что существенно дискредитирует саму идею пробиотиче-ской терапии.
В настоящей работе представлены результаты систематического анализа перспективного штамма L. casei DG (L. paracasei CNCMI-1572, L. paracasei DG), который хорошо выживает в условиях ЖКТ, поддерживает положительную микробиоту, тормозит рост патогенных бактерий, проявляет терапевтическое действие при язвенном колите и эрадикации H. pylori, дивертикулярной болезни кишечника, при синдроме раздраженной кишки и при лечении дисбиотических состояний различ-
ной этиологии (в т.ч. возникающих в результате антибиотикотерапии).
Подчеркнём, что такая разносторонняя клиническая эффективность Ь. са$г1 DG обусловлена, во многом, высокой выживаемостью штамма в ЖКТ. Поэтому, при выборе того или иного пробиотика не следует оценивать их эффективность именно количеством штаммов в пробиотике. Гораздо более важными критериями качества пробиотиков является время его выживания в ЖКТ (Ь. са$е1 DG - не менее 48 ч при 37 °С) и используемая доза пробиотика (не менее 1 млрд КОЕ/сут).
Примером удачного синбиотика (пробиоти-ка+пребиотика) на основе Ь. са$г1 DG является Эн-теролактис Фибра (пр-во СОФАР, Италия). Данный препарат характеризуется высоким содержанием живых бактерий (не менее 5 млрд. КОЕ в суточной дозе). В процессе употребления препарата пациентом бактерии перемещаются из герметичной алюминиевой капсулы в пребиотический водный раствор, содержащий пребиотики - фруктоолиго-сахариды и фруктозу, после чего осуществляется приём препарата внутрь. Поступление Ь.оа$г1 DG в составе пребиотического раствора существенно
поддержке гранта № 16-29-12936 РФФИ.
повышает выживаемость лактобактерий в условиях ЖКТ.
Работа выполнена при
Литература | References
1. Sender, R; Fuchs, S; Milo, R. Revisiting the Ratio of Bacterial to Host Cells in Humans. Cell. 2016, 164 (3): 337-40. doi:10.1016/j.cell.2016.01.013. PMID26824647.
2. de VreseM, Schrezenmeir J. Probiotics, prebiotics, and synbiotics.Adv Biochem Eng Biotechnol. 2008;111:1-66. doi: 10.1007/10_2008_097. PMID:18461293
3. Folkers BL, Schuring C, Essmann M, Larsen B. Quantitative real time PCR detection of Clostridium difficile growth inhibition by probiotic organisms.N Am J Med Sci. 2010 Jan;2(1):5-10. doi: 10.4297/najms.2010.15. PMID:22624106
4. Garcia C A, Henriquez A P, Retamal R C, Pineda C S, Delgado Sen C, Gonzalez C C. [Probiotic properties of Lactobacillus spp isolated from gastric biopsies of Helicobacter pylori infected and non-infected individuals].Rev Med Chil. 2009 Mar;137(3):369-76. doi: /S0034-98872009000300007. Epub 2009 Jun 15. PMID:19621178
5. Jungersen M, Wind A, Johansen E, Christensen JE, Stuer-Lauridsen B, Eskesen D. The Science behind the Probiotic Strain Bifidobacterium animalis subsp. lactis BB-12((R)).Microorganisms. 2014 Mar 28;2(2):92-110. doi: 10.3390/microorganisms2020092. PMID:27682233
6. Dolatkhah N, Hajifaraji M, Abbasalizadeh F, Aghamo-hammadzadeh N, Mehrabi Y, Abbasi MM. Is there a value for probiotic supplements in gestational diabetes mellitus? A randomized clinical trial.J Health Popul Nutr. 2015 Nov 25;33:25. doi: 10.1186/s41043-015-0034-9. PMID:26825666
7. О. А. Громова, И. Ю. Торшин, Н. К. Тетруашвили, В. Н. Серов. Систематический анализ клинической эффективности штамм-специфичных эффектов пробиотиков с докозогексаеновой кислотой для использования во время беременности и в период кормления, Вопросы гинекологии, акушерства и перинатологии, № 3, 2019.
8. Arioli S, Koirala R, Taverniti V, Fiore W, Guglielmetti S. Quantitative Recovery of Viable Lactobacillus paracas-ei CNCM I-1572 (L.casei DG(R)) After Gastrointestinal Passage in Healthy Adults.Front Microbiol. 2018 Aug 2;9:1720. doi: 10.3389/fmicb.2018.01720. eCollection 2018. PubMed ID:30116228
9. Cremon C, Guglielmetti S, Gargari G, Taverniti V, Cas-tellazzi AM, Valsecchi C, Tagliacarne C, Fiore W, Bellini M, Bertani L, Gambaccini D, Cicala M, Germana B, Vecchi M, Pagano I, Barbaro MR, Bellacosa L, Stang-hellini V, Barbara G. Effect of Lactobacillus paracasei CNCM I-1572 on symptoms, gut microbiota, short chain fatty acids, and immune activation in patients with irritable bowel syndrome: A pilot randomized clinical trial.United European Gastroenterol J. 2018 May;6(4):604-613. doi: 10.1177/2050640617736478. Epub 2017 Oct 8. PubMed ID:29881616
10. Radicioni M, Koirala R, Fiore W, Leuratti C, Guglielmetti S, Arioli S. Survival of L.casei DG((R)) (Lactobacillus paracasei CNCMI1572) in the gastrointestinal tract of a healthy paediatric population.Eur J Nutr. 2018 Nov 29. pii: 10.1007/s00394-018-1860-5. doi: 10.1007/ s00394-018-1860-5. PubMed ID:30498868
11. Guida F, Turco F, Iannotta M, De Gregorio D, Palumbo I, Sarnelli G, Furiano A, Napolitano F, Boccella S, Luon-go L, Mazzitelli M, Usiello A, De Filippis F, Iannotti FA, Piscitelli F, Ercolini D, de Novellis V, Di Marzo V, Cuomo R, Maione S. Antibiotic-induced microbiota perturbation causes gut endocannabinoidome changes, hippocampal neuroglial reorganization and depression in mice.Brain Behav Immun. 2018 Jan;67:230-245. doi: 10.1016/j.bbi.2017.09.001.
12. Zambori C, Morvay AA, Sala C, Licker M, Gurban C, Tanasie G, Tirziu E. Antimicrobial effect of probiotics on bacterial species from dental plaque.J Infect Dev Ctries. 2016 Mar 31;10(3):214-21. doi: 10.3855/ jidc.6800.
13. Ferrario C, Taverniti V, Milani C, Fiore W, Laureati M, De Noni I, Stuknyte M, Chouaia B, Riso P, Guglielmetti S. Modulation of fecal Clostridiales bacteria and butyrate by probiotic intervention with Lactobacillus paracasei DG varies among healthy adults.J Nutr. 2014 Nov; 144(11):1787-96. doi: 10.3945/jn.114.197723.
14. Paoluzi OA, Del Vecchio Blanco G, Visconti E, Coppola M, Fontana C, Favaro M, Pallone F. Low efficacy of levofloxacin-doxycycline-based third-line triple therapy for Helicobacter pylori eradication in Italy. World J Gastroenterol. 2015 Jun 7;21(21):6698-705. doi: 10.3748/wjg.v21.i21.6698.
15. Tursi A, Brandimarte G, Giorgetti GM, Modeo ME. Effect of Lactobacillus casei supplementation on the effectiveness and tolerability of a new second-line 10-day quadruple therapy after failure of a first attempt to cure Helicobacter pylori infection. Med Sci Monit. 2004 Dec;10(12): CR662-6. PMID: 15567983.
16. Turco F, Andreozzi P, Palumbo I, Zito FP, Cargiolli M, Fiore W, Gennarelli N, De Palma GD, Sarnelli G, Cuomo R. Bacterial stimuli activate nitric oxide colonic mucosal production in diverticular disease. Protective effects of L. casei DG(R) (Lactobacillus paracasei CNCM I-1572).United European Gastroenterol J. 2017 Aug;5(5):715-724. doi: 10.1177/2050640616684398. Epub 2016 Dec 11.
17. Tursi A, Brandimarte G, Giorgetti GM, Elisei W. Me-salazine and/or Lactobacillus casei in maintaining long-term remission of symptomatic uncomplicated diverticular disease of the colon.Hepatogastroenterology. 2008 May-Jun;55(84):916-20. PubMed ID:18705297
18. Tursi A, Brandimarte G, Elisei W, Picchio M, Forti G, Pianese G, Rodino S, D'Amico T, Sacca N, Portincasa P, Capezzuto E, Lattanzio R, Spadaccini A, Fiorella S,
Polimeni F, Polimeni N, Stoppino V, Stoppino G, Gior-getti GM, Aiello F, Danese S. Randomised clinical trial: mesalazine and/or probiotics in maintaining remission of symptomatic uncomplicated diverticular disease - a double-blind, randomised, placebo-controlled study.Aliment Pharmacol Ther. 2013 Oct;38(7):741-51. doi: 10.1111/apt. 12463. Epub 2013 Aug 19. PubMed ID:23957734
19. Tursi A, Brandimarte G, Giorgetti GM, Elisei W. Mesalazine and/or Lactobacillus casei in preventing recurrence of symptomatic uncomplicated diverticular disease
of the colon: a prospective, randomized, open-label study.J Clin Gastroenterol. 2006 Apr;40(4):312-6. doi: 10.1097/01.mcg.0000210092.77296.6d. PubMed ID:16633103
20. Compare D, Rocco A, Coccoli P, Angrisani D, Sgamato C, Iovine B, Salvatore U, Nardone G. Lactobacillus casei DG and its postbiotic reduce the inflammatory mucosal response: an ex-vivo organ culture model of postinfectious irritable bowel syndrome.BMC Gastroenterol. 2017 Apr 14;17(1):53. doi: 10.1186/s12876-017-0605-x. PubMed ID:28410580
