CC BY
24особенностями крыс/ Н.В. Власова, И.В. Виглин-ская// Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1987. Т. 103. № 5. С. 579.
5. Дмитриева С.О., Исследование химического состава листьев лопуха большого (arctium lappa ^/Дмитриева С.О., Бирюкова H.B.//The Scientific Heritage. 2021. № 67-2 (67). С. 22-25.
6. Заводчиков П. А., Курбатов В. В., Мазовер А. П., Назаров В.П. «Пособие по собаководству». -Ленинград, издательство "Колос", 1973 г.
7. Зубко В.Н. «Клуб служебного собаководства». - Москва, ДОСААФ СССР, 1986 г.
8. Куприянова В.А., Исторический опыт и перспективы использования графита в медицине и фармации/ В.А.Куприянова, Н.В. Бирюкова//В сборнике: Современное образование: актуальные вопросы, достижения и инновации. Сборник статей XXXV Международной научно-практической конференции. 2020. С. 122-126.
9. Крушинский Л. В., Меркурьева Е.К., Израи-левич И.Е. «Служебная собака». - Москва, Государственное издательство сельскохозяйственной литературы, 1952 г.
10. Кононова Е. В. «Как правильно кормить вашу собаку». - Ростов-На-Дону, Феникс, 2001 г.
11. Мазовер А. П. «Собаководство в сельском хозяйстве». - Москва, Сельхозгиз, 1957 г.
12. Марухина Е.М., Исторический опыт и перспективы использования сырья лилии в медицине/ Е.М.Марухина, О.В.Нестерова, Н.В. Бирюкова//В
сборнике: Современные научные исследования: актуальные вопросы, достижения и инновации. сборник статей XVI Международной научно-практической конференции. Пенза, 2021. С. 293-296.
13. Нестерова Н.В., Анализ уровня содержания нитратов в продовольственной продукции растительного происхождения /Нестерова Н.В., Нестерова О.В., Грубыч У.Ю., Бирюкова Н.В.// В сборнике: Фундаментальные основы инновационного развития науки и образования. Сборник статей VII Международной научно-практической конференции. Пенза, 2020. С. 49-52.
14. Палика Лиз «Питание и здоровье собаки». - Москва, Центрполиграф, 1998 г.
15. Покровский А. А. «Беседы о питании». -Москва, Экономика, 1968 г.
16. Пономарев В. Т. «Краткая энциклопедия собаководства». - Москва, издательство АСТ, 2005г.
17. Таран А.А., Современное качество жизни в мегаполисе и методы борьбы с ухудшением экологии/ Таран А.А., Бирюкова Н.В.//В сборнике: Научная дискуссия современной молодёжи: актуальные вопросы, достижения и инновации. Сборник статей XI Международной научно-практической конференции. Отв. ред. Гуляев Герман Юрьевич. 2020. С. 97-102.
18. Хохрин С. Н. «Кормление собак». - Санкт -Петербург, издательство "Лань", 2001 г.
19. ГОСТ Р 55453-2013 «Корма для непродуктивных животных. Общие технические условия».
АНАЛИЗ ОСОБЕННОСТЕЙ МЕТАБОЛИЧЕСКИХ И ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ ИЗМЕНЕНИЙ В ОРГАНИЗМЕ ПРИ ИНТОКСИКАЦИОННОМ СИНДРОМЕ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ
Дзугкоев С.Г.,
Доктор медицинских наук, заведующий отделом патобиохимии, Институт биомедицинских исследований - филиал Федерального государственного бюджетного учреждения науки Федерального научного центра «Владикавказский научный центр Российской академии наук», (ИБМИ ВНЦ РАН), Россия, г.
Владикавказ Дзугкоева Ф.С.,
Доктор медицинских наук, профессор, ведущий научный сотрудник отдела патобиохимии, ИБМИ
ВНЦ РАН, Маргиева О.И.,
Младший научный сотрудник отдела патобиохимии, ИБМИ ВНЦ РАН
Можаева И.В.
Младший научный сотрудник отдела патобиохимии, ИБМИ ВНЦ РАН
ANALYSIS OF THE FEATURES OF METABOLIC AND FUNCTIONAL CHANGES IN THE BODY WITH INTOXICATION SYNDROME IN EXPERIMENT
Dzugkoev S.,
Doctor of Medical Sciences, Head of the Department of Pathobiochemistry, Institute of Biomedical Research - a branch of the Federal State Budgetary Institution of Science of the Federal Scientific Center "Vladikavkaz Scientific Center of the Russian Academy of Sciences", Russia, Vladikavkaz
Dzugkoeva F.,
Doctor of Medical Sciences, Professor, Leading Researcher of the Department of Pathobiochemistry, IMBI
Vladikavkaz Scientific Center of RAS Margieva O.,
Junior Researcher, Department of Pathobiochemistry, IMBI Vladikavkaz Scientific Center of RAS
Mozhaeva I.
Junior Researcher, Department of Pathobiochemistry, IMBI Vladikavkaz Scientific Center of RAS
Аннотация
Изучение механизмов негативного влияния на человека соединений свинца, остается актуальной медико-биологической проблемой, ввиду повышенного содержания в окружающей среде его соединений, опасных для здоровья человека даже в незначительных количествах. Проникая в организм человека, свинец оказывает мультисистемное влияние, проявляя нейротоксичность, сердечно-сосудистую патологию и болезни почек.
В связи с изложенным целью исследования было изучение влияния ацетата свинца на водо- и электровыделительную функции почек, состояние про и антиоксидантной системы на фоне хронической интоксикации в эксперименте. Анализ данных показал, что ионы свинца довольно быстро попадают в кровеносную систему, ингибируют синтез гема гемоглобина и вызывают анемию и гипоксию тканей. При этом индуцируется процесс ПОЛ, повышается концентрация МДА как в эритроцитах, так и клетках почечной ткани. Угнетается активность СОД, хотя каталазы и концентрация церулоплазмина компенсаторно повышаются. Поражение почек характеризуется увеличением объёма спонтанного диуреза и натрийуреза, вследствие снижения уровня канальцевой реабсорбции воды и натрия (№). Еще более значительно выявляется нарушение функции почек в условиях нагрузочной пробы, почасовые изменения диуреза и экскреция № характеризуются повышением и снижением к 3-му часу, при этом сокращается процент выводимой водной нагрузки за 3 часа. Эти данные свидетельствуют о нарушении фильтрационно-реабсорбционной деятельности нефрона при окислительном стрессе, вызванном интоксикацией ацетатом свинца.
Abstract
The study of the mechanisms of the negative influence of lead compounds on humans remains an urgent medical and biological problem, due to the increased content of its compounds in the environment, which are hazardous to human health even in insignificant quantities. Penetrating into the human body, lead has a multisystem effect, exhibiting neurotoxicity, on cardiovascular pathology and kidney disease. In connection with the above, the aim of the study was to study the effect of lead acetate on the water and electrowinning functions of the kidneys, the state of the pro and antioxidant system against the background of chronic intoxication in the experiment. Analysis of the data showed that lead ions quickly enter the circulatory system, affect the synthesis of hemoglobin and cause anemia and tissue hypoxia. This induces the LPO process, increases the concentration of MDA both in erythrocytes and in the cells of the renal tissue. SOD activity is inhibited, although catalase and ceruloplasmin concentration increase compensatory. Kidney damage is characterized by an increase in the volume of spontaneous diuresis and natriuresis, due to a decrease in the level of tubular reabsorption of water and Na. Even more significantly impaired renal function is detected under stress test conditions, hourly changes in diuresis and Na excretion are characterized by an increase and decrease by the 3rd hour, while the percentage of the withdrawn water load in 3 hours decreases. These data indicate a violation of the filtration and reabsorption activity of the nephron during oxidative stress caused by intoxication with lead acetate.
Ключевые слова: интоксикационный синдром, ацетат свинца, перекисное окисление липидов, антиокислительная система, водо- и электролито-выделительная функции почек.
Keywords: intoxication syndrome, lead acetate, lipid peroxidation, antioxidant system, water and electrolyte-excretory functions of the kidneys.
Введение.
Свинец является одним из наиболее токсичных металлов, включенных в список приоритетных загрязнителей рядом международных организаций, в том числе ВОЗ. Важность изучения особенностей влияния на человека соединений свинца, поступающих из объектов производственной и окружающей среды, на сегодняшний день определяется значительным загрязнением экологии. Для них характерна стойкость, способность к высокой степени кумуляции в объектах биосферы и высоким риском накопления в организме человека [1,2]. Особенно важно, что свинец может вызывать токсические эффекты даже при относительно низких уровнях воздействия, которые раньше считались безопасными. Начиная с 1995г. в Российской Федерации проводятся мероприятия по координации правового, нормативного и экономического регулирования влияния свинца на здоровье населения.
Проникая в организм человека, свинец поражает практически все внутренние органы, особенно почки - как основной экскреторный орган. Почки способны удалять из организма токсины, включая в частности элементы, имеющие массу более 5 г/см3.
Клетки проксимальных канальцев почек особенно уязвимы для действия свинца. Свинцово-белковые комплексы могут быть обнаружены в качестве основных ядер включения с помощью микроскопии. Существует ряд механизмов элиминации нефро-токсинов почками: мембранный транспорт, каналь-цевая секреция, связывание с белками, пиноцитоз и метаболическая инактивация. Поэтому в механизме развития свинцовой нефропатии участвуют эндоте-лиальные и мезангиальные клетки, тубулярный эпителий, базальные мембраны, как гломерул, так и канальцев. Эти воздействия могут вызывать функциональные и морфологические изменения, приводящие к нефропатии. В зависимости от длительности контакта со свинцом и количества куму-лированного вещества развиваются нарушения функционального состояния почек, которые могут закончиться хронической необратимой нефропа-тией [3,4].
При контакте человека с ионами свинца, происходит ингибирование синтеза гема гемоглобина в эритроцитах, вызывая свинцовую анемию при нормальном уровне железа с последующей гипо-
ксией тканевых клеток. Гипоксия и переменная валентность свинца способствуют образованию свободных радикалов кислорода и развитию оксида-тивного стресса. Образуются такие активные радикалы кислорода как перекись водорода (Н2О2), супероксид анион-радикал (О2"), радикал гидрок-сила (ОН--) и др.[5,6]. Существуют данные литературы, свидетельствующие о способности свинца активировать свободно-радикальное окисление (СРО) в крови, гомогенатах ткани печени, миокарда и мозга [7-10]. Перекисное окисление липидов (ПОЛ) - широко распространенное явление, свободно-радикальный процесс, протекающий в клеточных мембранах и приводящий к их структурной перестройке и изменению клеточного метаболизма. Играя важную роль в нормальной жизнедеятельности клеток, ПОЛ является, тем не менее, патогенетическим звеном ряда патологических синдромов при различных заболеваниях. Данный процесс можно рассматривать как универсальную неспецифическую реакцию организма на экстремальные воздействия. Процессы ПОЛ вызывают дезинтеграцию липопротеиновых комплексов, усиливают их гидрофильность, приводят к повышенной проницаемости биологических мембран.
Процесс пероксидации сопровождается деформацией мембранного липопротеинового комплекса, повышением проницаемости для протонов и воды, ингибированием мембраносвязанных ферментов. Действительно, единичные данные литературы свидетельствуют о снижении активности №+,К+-АТФ-азы мембран эритроцитов на фоне воздействия свинца на организм человека [11]. Однако, комплексные исследования, посвященные изучению функционального состояния почек, состояния ПОЛ - АОС при хронической интоксикации ацетатом свинца в доступной литературе представлены недостаточно.
Цель работы - изучение механизмов нарушения водо- и электролито-выделительной функции почек, состояния про- и антиоксидантной системы на фоне хронической свинцовой интоксикации в эксперименте.
Материалы и методы исследования.
Исследования проводились на крысах-самцах линии Wistar одной возрастной группы (10-14 мес), массой 200-280 грамм. Во время экспериментов крысы находились на стандартном пищевом рационе со свободным доступом к воде, световой режим - естественный. Серии и варианты опытов: 1 -ая контрольная группа (п=30) - исследования на ин-тактных крысах и 2-ая опытная группа (п=60) при систематической интоксикации путем ежедневного перорального и подкожного введения раствора ацетата свинца в дозе 5 мг/кг веса животного в течение 30 дней. Экспериментальные исследования соответствовали требованиям проведения работ с использованием экспериментальных животных и условиям Хельсинкской декларации.
Исследования проводили на фоне спонтанного и водного диуреза. В плазме крови и моче исследовали содержание натрия, калия, свинца. Рассчитывали величину фильтрационного заряда натрия и
его относительную реабсорбцию в почечных канальцах. Концентрацию №+ и К+ в моче и плазме крови определяли методом пламенной фотометрии. Изучали скорость клубочковой фильтрации и ка-нальцевую реабсорбцию воды. Клубочковую фильтрацию вычисляли по клиренсу эндогенного креа-тинина, т.е. по отношению креатинина мочи к концентрации его в плазме крови. Степень переокисления в мембранах эритроцитов и в почечной ткани изучали по изменению концентрации конечного продукта ПОЛ - малонового диальдегида (МДА) по методу Аsacawa ^ [12]. О состоянии ан-тиоксидантной системы организма мы судили по активности ферментов АОС - каталазы в сыворотке крови спектрофотометрически по методу М.А. Ко-ролюка (1988) [13] и супероксиддисмутазы (СОД) в эритроцитах, определяемая методом аутоокисле-ния адреналина [14], концентрации церулоплаз-мина (ЦП) методом Равина [15]. Содержание свинца в плазме крови, моче и почечной ткани определяли на масспектрофотометре ICH-VSHP 4500 «Хьюлетт-Паккард».
Для выявления достоверности показателей использовали программы статанализа «Statistika 6.0» и «MicшsofЮfficeExcel».
Результаты и обсуждения.
Изучение водовыделительной функции почек на фоне перорального и подкожного введения ацетата свинца показало, что происходит достоверное повышение объема спонтанного диуреза при перо-ральном и парентеральном путях введения данной дозировки соответственно (р<0,05; р< 0,01). При этом величина скорости клубочковой фильтрации (СКФ) сохраняется в пределах контрольных величин. Данные показали, что причиной увеличения диуреза является достоверное снижение уровня ка-нальцевой реабсорбции воды (р<0,05). Расчеты этого показателя выяснили, что уровень канальце-вой реабсорбции воды падает с 99,41±0,038% до 99,24±0,077% при пероральном введении ацетата свинца, а при парентеральном пути введения с до 99,10±0,011%, соответственно (р<0,05; р<0,01), что и определило возрастание диуреза.
Исследование функционального состояния почек на фоне 5% водной нагрузки, при обоих путях введения, показал, достоверное повышение диуреза на 1-ом часе, обусловленное снижением уровня ка-нальцевой реабсорбции воды (р<0,01) и неизменившейся величине СКФ. В последующие часы 2-ой и 3-ий после водной нагрузки величина диуреза снижается при обоих путях введения ацетата свинца (р<0,001), так как повышается уровень канальцевой реабсорбции воды (р<0,02), а при подкожном его введении отмечается и достоверное снижение СКФ (р<0,05). Совокупность изменений СКФ и уровня канальцевой реабсорбции воды приводят к падению величины диуреза. Суммарный 3-х часовой диурез понижается, т.е. процент выведения водной нагрузки достоверно падает (р<0,05), причем более значительно при подкожном введении ацетата свинца. Эти данные свидетельствуют о более выраженном нарушении функциональной способности
почек в условиях гидремии. Что касается возрастания объема спонтанного диуреза на фоне ацетата свинца, вводимого подкожно, то следует отметить снижение уровня канальцевой реабсорбции воды и СКФ при подкожной экспозиции.
Данные электролито-выделительной функции почек при свинцовой интоксикации свидетельствуют о повышенной экскреции натрия с мочой при обоих путях введения. Выясняя механизм повышенной экскреции натрия выявили увеличение фильтрационного заряда катиона (р<0,05) и снижение уровня его канальцевой реабсорбции (р<0,05) при достоверно неизмененном фильтрационном заряде катиона. Анализ данных обмена калия показал отсутствие достоверных изменений экскреции калия и его фильтрационного заряда при обоих путях введения раствора ацетата свинца.
На фоне 5% водной нагрузки в группе животных с пероральным введением ацетата свинца не отмечается достоверных изменений в экскреции натрия и калия в течение всех 3 часов после водной нагрузки. При парентеральном введении ацетата свинца выявляется на 1 -ом часе после водной нагрузки повышение экскреции натрия, обусловленное снижением канальцевой реабсорбции иона (р<0,05) при неизмененном фильтрационном заряде натрия. Повышенная экскреция натрия на 2-ом и 3-ем часах водной нагрузки обусловлена снижением его канальцевой реабсорбции (р<0,05). Анализ суммарной трехчасовой экскреции натрия при подкожном введении ацетата свинца в дозе 5 мг/кг веса животного (р<0,001) показал достоверное увеличение. При подкожном введении ацетата свинца натрийурез сопровождается повышением экскреции калия на 1 и на 2 часах после введения водной нагрузки и отсутствием изменений на 3-ем часе после водной нагрузки. Суммарная трехчасовая экскреция калия в группе животных с подкожным введением ацетата свинца характеризуется возрастанием ее величины (р<0,01).
Анализ данных содержания натрия в плазме крови при парентеральном введении ацетата свинца выявил его достоверное снижение, тогда как содержание калия достоверно возрастает.
Таким образом, повышение экскреции натрия на фоне спонтанного диуреза при свинцовой интоксикации обусловлено падением уровня относительной канальцевой реабсорбции данного катиона, тогда как количество экскретируемого калия не претерпевает изменений. Экскреции натрия при парентеральном введении ацетата свинца сопровождается повышением экскреции натрия преимущественно на 2-ом и 3-ем часах водной нагрузки, а калия на 1-ом и 2-ом часах.
Анализируя причины развития свинцовой нефропатии, следует отметить, что происходит активация свободно-радикального окисления, о чем свидетельствует достоверное повышение концентрации МДА в мембранах эритроцитов при обоих путях введения, причем, подкожное введение ацетата свинца характеризуется более достоверным повышением концентрации МДА (р<0,02).
Поскольку главной задачей являлось изучение влияния свинцовой интоксикации на функциональное состояние почек, как основного экскреторного органа, то нами проводилось исследование процессов перекисного окисления липидов в гомогенатах коркового и мозгового слоев почечной ткани. Наши данные показали, что отмечается активация процессов свободно-радикального окисления в обоих слоях почечной ткани. Свинцовая интоксикация сопровождается увеличением концентрации МДА в корковом и мозговом веществе как при перораль-ном введении (р<0,001), так и при подкожном (р<0,001).
Данные активности АОС показали ингибиро-вание СОД и повышение активности каталазы и концентрации ЦП.
Для определения степени свинцовой интоксикации мы в экспериментах определяли содержание свинца в плазме крови и его экскрецию с мочой и провели анализ взаимосвязи этого показателя с активностью процессов перекисного окисления липи-дов, т.е. с концентрацией МДА в мембранах эритроцитов. Уже через несколько минут после поступления в организм свинец обнаруживается в плазме крови. По данным некоторых авторов среднее содержание свинца в крови для лиц, не имеющих с ним профессионального контакта, колеблется в пределах 10-25 мкг/100мл [11].
Наши данные свидетельствуют о том, что при парентеральном и пероральном введении ацетата свинца происходит достоверное повышение содержания свинца в плазме крови, а также его экскреция с мочой, причем, при подкожном введении данные более значительные.
Определение корреляционной связи между дозой вводимого ацетата свинца и концентрацией металла в плазме крови выявило прямую корреляционную зависимость при пероральном введении ацетата свинца (r=+0,51) и при подкожном (r=+0,95). Соответственно возрастает его содержание и в моче, и в почечной ткани на фоне систематической интоксикации.
Заключение.
Введение ацетата свинца per os и подкожно сопровождается достоверным повышением концентрации свинца в плазме крови. Выявлена прямая корреляционная связь между дозой вводимого ацетата свинца и содержанием металла в плазме крови и активностью ПОЛ в мембранах эритроцитов. У крыс со свинцовой интоксикацией отмечается активация ПОЛ в эритроцитах, а также в гомогенатах коркового и мозгового слоев почечной ткани, о чем свидетельствует повышение концентрации конечного продукта ПОЛ - МДА. В ответ на развитие ок-сидативного стресса происходит снижение активности СОД и компенсаторное повышение активности одного из основных ферментов АОС - каталазы и концентрации ЦП в сыворотке крови у подопытных животных. Между величиной вводимой дозы ацетата свинца и содержанием металла в плазме крови существует прямая корреляционная связь, а также между содержанием свинца в плазме крови и
активностью перекисного окисления липидов в мембранах эритроцитов и почечной ткани.
Повышение проницаемости мембран клубоч-ково-канальцевого аппарата сопровождается увеличением спонтанного диуреза и натрийуреза, вследствие снижения уровня канальцевой реабсорбции воды и натрия. Исследования функции почек в условия водной нагрузки показали часовую динамику повышения диуреза на 1-ом часе и постепенное снижение в последующие часы - на 2-ом и 3-ем. Повышение диуреза характеризовалось и натрийурезом из-за снижения канальцевой реаб-сорбции №. Все эти изменения отразились и на содержании электролитов в плазме крови - концентрация № снижалась, а калия повышалась при парентеральном введении ацетата свинца. Возможно, что ПОЛ в эритроцитах способствовало повышению их проницаемости и выходу калия из эритроцитов в плазму крови, что и привело к повышению его уровня.
Список литературы
1. Boskabady M., Marefati N., Farkhondeh T., Farzaneh Sh., Farshbaf A., Boskabady M.H. The effect of environmental lead exposure on human health and the contribution of inflammatory mechanisms, a review, Environment International, Volume 120. 2018. P. 404-420.
2. Levin S.M., Goldberg M. Clinical evaluation and management of lead-exposed construction workers Am. J. Ind. Med., 37 (2000), pp. 23-43
3. Wronska-Nofer T., Pisarska A., Trzcinka-Ochocka M., Halatek T., Stetkiewicz J., Braziewicz J., Nofer J.R., Wasowicz W. Scintigraphic assessment of renal function in steel plant workers occupationally exposed to lead J. Occup. Health, 57 (2015), pp. 91-99
4. Alwaleedi S.A. Haemato-biochemical changes induced by lead intoxication in male and female albino mice Int. J. Recent Sci. Res., 6 (2015), pp. 3999-4004
5. Liu C.M., Ma J.Q., Sun Y.Z. Puerar in protects rat kidney from lead-induced apoptosis by modulating the PI3K/Akt/eNOS pathway Toxicol. Appl. Pharmacol., 258 (2012), pp. 330-342
6. Omobowale T.O., Oyagbemi A.A., Akinrinde A.S., Saba A.B., Daramola O.T., Ogunpolu B.S., Olo-pade J.O. Failure of recovery from lead induced hepa-toxicity and disruption of erythrocyte antioxidant defence system in Wistar rats Environ. Toxicol.Pharma-col., 37 (2014), pp. 1202-1211
7. Wang J., Zhu H., Yang Z., Liu Z. Antioxida-tive effects of hesperetin against lead acetate-induced oxidative stress in rats Indian J. Pharm., 45 (2013), pp. 395-398.
8. Can S., Bagci C., Ozaslan M., Bozkurt A., Cengiz B., Cakmak E., Kocaba§ R., Karadag E., Ta-rakgioglu M. Occupational lead exposure effect on liver functions and biochemical parameters Acta Physiol. Hung., 95 (2008), pp. 395-403.
9. Sadeghniiat-Haghighi K., Yousefian M., Aminian O., Najafi A. Association between blood lead level and sleep quality in lead-zinc factories in Zanjan: a cross-sectional study J. Sleep Sci., 1 (2015), pp. 1822.
10. Obeng-Gyasi E., Armijos R.X., Weigel M.M., Filippelli G.M., Sayegh M.A. Cardiovascular-related outcomes in U.S. adults exposed to lead Int. J. Environ. Res. PublicHealth, 15 (2018).
11. Красникова Н.В., Вельская Н.А., Журавлева Т.А. Состояние сердечнососудистой системы у лиц, занятых свинцовопаянием // Казанский медицинский журнал. 1990. - Т. LXX3, №1. - С. 44-45.
12. Asakawa T., Matsushita S. Coloring conditions of thiobarbituricacid test, for detecting lipid hydroperoxides. Lipids. 1980. №15. Р. 137-140.
13. Королюк М.А., Иванова Л.И., Майорова И.Г. Метод определения активности каталазы. Лабораторное дело.1988. - №1. - С. 16-19.
14. Сирота Т.В. Новый подход в исследовании аутоокисления адреналина и использование его для измерения активности супероксиддисмутазы. Вопросы медицинской химии. 1999. - №3. - С. 263-272.
15. Камышников В.С. Определение содержания (активности) церулоплазмина / В.С. Камышников // Справочник по кл.-биохим. лаб. диагностике. Минск. - 2003. - Т.2. - С.71-79.
