CC BY
12
| ГЕМАТОЛОГИЯ И ТРАНСФУЗИОЛОГИЯ | RUSSIAN JOURNAL OF HEMATOLOGY AND TRANSFUSIOLOGY (GEMATOLOGIYA I TRANSFUSIOLOGIYA) | 2022; ТОМ 67; №2 |
НК=2,79, 95% ДИ=1,18-6,59). У больных с делецией 17р13 ОВ значительно ниже по сравнению с лицами без данной аномалии: 12,5 и 76,1% соответственно (р<0,001; НК=4,639; 95% ДИ=1,895-11,355). Пятилетняя БПВ пациентов с высокой экспрессией р53 в опухолевых клетках значимо ниже, чем в группе с подпороговым значением маркера: 45,5% против 66,7% (р=0,022; р=0,027, НК=2,20,
95% ДИ=1,09—4,43). Различий в БПВ пациентов в зависимости от наличия/отсутствия исследуемой цитогенетической аберрации не выявлено.
Заключение. Таким образом, высокая экспрессия р53 ассоциирована с наличием делеции 17р13/ТР53 и низкой пятилетней выживаемостью больных ДВККЛ.
Свитина С. П., Сидорова Ж. Ю., Дрижун Ю. С., Грицаев С. В., Капустин С. И.
ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНОВ ЦИТОКИИОВ У БОЛЬНЫХ МНОЖЕСТВЕННОЙ МИЕЛОМОЙ ПРИ РАЗЛИЧНЫХ РЕЖИМАХ
МОБИЛИЗАЦИИ ПЕРЕД ПРОВЕДЕНИЕМ АУТО-ТГСК
ФГБУ «Российский НИИ гематологии и трансфузиологии ФМБА России»
Введение. Предтрансплантационная подготовка является одним из ключевых факторов эффективности аутологичной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток (ауто-ТГСК), которая с успехом используется в лечении пациентов с множественной миеломой (ММ). Участие некоторых цитокинов в регуляции кроветворения и иммунного ответа у больных ММ позволяет предположить их возможную связь с результатами терапии. Исследование генетических особенностей пациентов при различных подходах к мобилизации гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) позволит индивидуализировать предтрансплантационную подготовку и снизить вероятный риск неудачи заготовки оптимального количества клеток, достаточного для проведения ауто-ТГСК.
Цель работы. Изучить особенности аллельного полиморфизма генов иммунной системы 1Ь-6, TNF-a, 1Ь-1В, 1Ь-10 у больных ММ при различных режимах мобилизации перед проведением ауто-ТГСК.
Материалы и методы. Обследовано 65 пациентов с ММ, из них 36 женщин и 29 мужчин. Средний возраст составил 54,4 ± 7,7 года (диапазон 26—69 лет), всем пациентам выполнена ауто-ТГСК. Мобилизация ГСК с использованием монорежима Г-КСФ (гранулоцитарный колониестимулирующий фактор) была проведена 12 пациентам, химиотерапии в комбинации с Г-КСФ — 50 пациентам (19 — циклофосфан + Г-КСФ; 31 — винорелбин + Г-КСФ). Плериксафор в комбинации с Г-КСФ использовался у 3 больных. По количеству клеток С034+, заготовленных в день первого сеанса лейкоцитафереза, были сформированы две группы. В первую включен 41 (63,1%) пациент с количеством клеток выше
субоптимального для ауто-ТГСК уровня 2,5х10б/кг. Во вторую группувошли24 (36,9%) больных, у которых число заготовленных клеток было ниже данного показателя. Полиморфизм генов 1Ь-6
(С-174С), 1Ь-1В (Т-31С), 1Ь-10 (С-592А) и ТОТ-а (0-308А) определяли методом ПЦР с последующим рестрикционным анализом. Статистическая обработка результатов проведена с использованием программы ОгарКРж! Рпэтб.О. Различия в распределении аллелей и генотипов оценивались с помощью точного критерия Фишера.
Результаты и обсуждение. Анализ распределения аллелей и генотипов TNF-a, 1Ь-6, 1Ь-1В и 1Ь-10 не выявил статистически значимых различий между группами больных с различными режимами мобилизации. При разделении пациентов на группы с разным количеством заготовленных С034+ клеток, в первой группе больных частота встречаемости генотипа 1Ь-6 (-17400) практически в 2 раза превышала таковую во второй группе: 37,5% против 20,5% соответственно, ОК=2,3 (0,7—7,2), р=0,16. В первой группе также зафиксировано двукратное увеличение доли носителей аллеля -308А гена ТКР-а: 26,0% против 12,5%, ОК=2,5 (0,7-9,3), р=0,19.
Заключение. Полученные результаты свидетельствуют о возможном влиянии полиморфизма генов 1Ь-6 и TNF-a на эффективность процедуры заготовки ау то трансплантата при различных режимах мобилизации. Дляуточнения значенияуказанных генов в прогнозировании результатов предтрансплантационной подготовки необходимы дальнейшие исследования с расширением группы пациентов.
Северина Н. А., Сидорова Ю. В., Рисинская Н. В., Бидерман Б. В., Пшеничный А. С., Рыжикова Н. В., Лукьянова И. А.,
Кашлакова А. И., Судариков А. Б.
АНАЛИЗ МУТАЦИЙ ГЕНА ОТМ1 ПРИ ОСТРОМ МИЕЛОИДНОМ ЛЕЙКОЗЕ
ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России
Введение. Мутации гена NPM1 в 30% случаев выявляются при остром миелоидном лейкозе (ОМЛ). Это надежный маркер для оценки динамики редукции опухолевого клона, минимальной остаточной болезни (МОБ) и мониторинга рецидива. Мутация обусловлена вставкой 4 нуклеотидов (нп), что приводит к потере 2 функционально важных аминокислотных остатков триптофана ("^288 и "^290) в С-концевой области нуклеофосмина и сдвигу рамки считывания. В результате образуется лейцин-богатый мотив (Ь-ххх-У-хх-У-х-Ь), представляющий собой сигнальную последовательность для экспорта белка из ядра в цитоплазму. «Золотой стандарт» исследования мутаций гена NPM1 — метод фрагментного анализа (ФА). С помощью аллель-специфичной полимеразной цепной реакции (АС-ПЦР) выявляются стандартные вставки А, В или О типа, составляющие 90—95% всех вставок, характеризующиеся определенным местом и последовательностью. Вставки типа А, В и О не ассоциированы с изменением частоты полной ремиссии, общей и безрецидивной выживаемости. В 5—10% встречаются нестандартные вставки и интронные полиморфизмы, вызывающие затруднение при интерпретации данных ФА, АС-ПЦР и оценке МОБ.
Цель работы. Разработка подходов для более эффективного определения типа и характера мутаций в гене NPM1 для исключения ошибок в диагностике.
Материалы и методы. В исследование включено 80 образцов ДНК пациентов с ОМЛ, наблюдающихся в ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России в 2019—2021 гг., у которых при первичном исследовании методом ФА на генетическом анализаторе «Нанофор05» (ИАП РАН, Россия) была выявлена мутация гена NPM1. Наличие или отсутствие стандартной вставки подтверждали методом АС-ПЦР В случае низкой эффективности амплификации cA,B,D специфичными праймерами или ее отсутствия образцы исследовали методом NGS на высокопроизводительном секвенаторе MySeq (Illumina, США).
Результаты и обсуждение. В 62 из 80 образцов тип вставки (А, В или D) был установлен методом АС-ПЦР, в 18 из 80 — нет. Эти 18 образцов были исследованы методом NGS. В 2 образцах из 18 была выявлена интронная делеция, приводящая к появлению дополнительного пика на фореграмме. В 16 из 18 образцов выявлены нестандартные вставки: в 12 образцах из 16 вставка была представлена включением 4 дополнительных нуклеотидов. В 4 образцах из 16 произошла «делеция+инсерция», но вставка осталась равной +4 пн. Стандартные вставки составили 78,5% (62 из 78): А типа 61,5% (48 из 78), В - 4,5% (2 из 78), D — 12% (15,5 из 78). Нестандартные вставки составили 20,5% (16 из 78), что больше, чем по литературным данным. 14 из 16 нестандартных вставок приводят к образованию
ПРИЛОЖЕНИЕ l
лейцин-богатого мотива, как и стандартные. В 4 из 16 случаев один остаток триптофана был сохранен (W280)) что, по данным литературы, приводит к частичному сохранению ядрыш-ковой локализации нуклеофосмина, влияние на прогноз при ОМЛ не изучено.
Заключение. Применение АС-ПЦР и N08 при анализе мутаций в гене ЫРМ1 в дополнение к ФА позволяет эффективно выявить нестандартные вставки, подобрать аллель-специфичные праймеры в случае необходимости исследования МОБ и избежать ложно положительных результатов.
Семенова А. А., Исинова Г. А., Троицкая В. В., Фидарова З. Т., Соколов А. Н., Ковригина А. М., Яцык Г. А., Паровичникова Е. Н.
ОПЫТ ПРИМЕНЕНИЯ ТРИОКСИДА МЫШЬЯКА (ATO) И ПОЛНОСТЬЮ-ТРАНСРЕТИНОЕВОЙ КИСЛОТЫ (ATRA) В ТЕРАПИИ ЭКСТРАМЕДУЛЛЯРНЫХ РЕЦИДИВОВ ОСТРОГО ПРОМИЕЛОЦИТАРНОГО ЛЕЙКОЗА (ОПЛ)
ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России
Введение. Около 10% рецидивов острого миелоидного лейкоза являются экстрамедуллярными. Чаще всего такие рецидивы развиваются при М4 и М5 вариантах ОМЛ. Однако в последнее время в литературе все чаще сообщается об экстрамедуллярных рецидивах ОПЛ, но единый подход к их терапии пока не разработан.
Цель работы. Представить опыт применения ATRA и ATO у больных с экстрамедуллярным рецидивом ОПЛ.
Материалы и методы. Больной А., 22 лет, в 2014 г. был установлен диагноз ОПЛ и проведена терапия про протоколу AIDA. Ремиссия была достигнута после 1-го курса. В июле 2017 г. больную стали беспокоить боли в правом ухе, появилась клиника пареза лицевого нерва справа. По данным КТ и МРТ были выявлены объемное образование в мягких тканей на уровне правого сосцевидного отростка, правого наружного слухового хода и множественные увеличенные лимфоузлы шеи и головы справа. Выполнена биопсия образования, субстрат которого был представлен опухолевыми промиелоцитами, также при молекулярном исследовании был обнаружен химерный транскрипт PML/RARA, тип Ьсг2. Поражение костного мозга было исключено: бласты — 0,4%, химерный транскрипт PML/RARA не выявлялся. Нейролейкемия была исключена. Больной М., 60 лет, диагноз ОПЛ был установлен в декабре 2006 г., за 2 года были проведены 14 курсов программной химиотерапии с использованием различных химиопрепаратов и третино-ина. Ремиссия была достигнута в феврале 2007 г. В январе 2019 г. у больной появились боли в области крестца с иррадиацией в левую ногу. По данным КТ пояснично-крестцового отдела позвоночника
был выявлен деструктивно-склеротический опухолевый процесс в области крестца и крестцовых частей обеих подвздошных костей. Была выполнена биопсия образования: гистологическая картина соответствовала субстрату клеток ОПЛ. При FISH-исследовании биоптата выявлялась t(15;17). При исследовании костного мозга выявлялся ген PML/RARA, тип bcrl. Таким образом, был диагностирован экстрамедуллярный и молекулярный рецидив ОПЛ. Вовлечение ЦНС было исключено.
Результаты и обсуждение. Больным был проведен 1 индукционный (60 дней) и 5 консолидационных курсов ATRA+ATO. На фоне 1-го курса болевая и неврологическая симптоматика постепенно регрессировали, отмечалась значительная редукция размеров опухолевых образований, по данным МРТ. У больной А. после 1-го курса консолидации отмечалась полная редукция образования. Больной М. в связи с с отсутствием полной редукции опухоли после завершения терапии ATRA-ATO была проведена дистанционная гамма-терапия (СОД — 24 Гр). В качестве высо-кодозной консолидации больной А. было рекомендовано выполнение ауто-ТГСК, однако она отказалась от ее выполнения. Больной М. ауто-ТГСК не была выполнена в связи с возрастом, поэтому в обоих случаях в течение 1 года проводилась поддерживающая терапия по протоколу AIDA. На настоящий момент у обеих больных сохраняется ремиссия ОПЛ (длительность ремиссии 55 и 22 месяца соответственно).
Заключение. Применение ATRA и ATO у больных с экстрамедуллярным рецидивом ОПЛ позволяет достичь стойкой ремисии с регрессией опухолевого образования.
Семочкин С. В.1, Аршанская Е. Г.2, Бидерман Б. В.3, Савосина Н. А.4, Марьин Д. С.4, Судариков А. Б.3
ОТДАЛЕННЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ ТЕРАПИИ ПАЦИЕНТОВ С РЕЦИДИВИРУЮЩИМ ИЛИ РЕФРАКТЕРНЫМ ХРОНИЧЕСКИМ
ЛИМФОЛЕЙКОЗОМ ПО ПРОТОКОЛУ RSMU.CLL.2013
'ФГАОУ ВО «РНИМУ им. Н.И. Пирогова» Минздрава России, МНИОИ им. П.А. Герцена — филиал «НМИЦ радиологии» Минздрава России, 2ГБУЗ ГКБ им. С.П. Боткина
ДЗМ, 3ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России, 4ГБУЗ ГКБ № 52 ДЗМ
Введение. В отсутствии del(17p) и/или мутаций гена ТР53 им-мунохимиотерапия хронического лимфолейкоза (ХЛЛ) остается методом выбора как первой, так и последующих линий терапии. Ранее мы инициировали клиническое исследование по применению комбинации бендамустина и ритуксимаба (BR) в качестве поддерживающего лечения у пациентов с рецидивирующим или рефрактерным (Р/Р) ХЛЛ, достигших ответа на индукционной терапии по данной программе. Идея исследования заключалась в возможности пролонгирования выживаемости без про-грессирования (ВБП) по сравнению со стандартной терапией. На момент инициации исследования в 2013 году новые таргетные препараты (ибрутиниб, венетоклакс) не были доступны.
Цель работы. Оценить отдаленные результаты применения пролонгированной терапии BRy пациентов с Р/Р ХЛЛ.
Материалы и методы. В исследование RSMU-CLL-2013 (NCT03847727) включались взрослые пациенты с Р/Р ХЛЛ, получившие >1 линий терапии. Критериями исключения была предшествующая терапия бендамустином или известная рефрактерность к ритуксимабу. Планировалось, что все пациенты получат 6 стандартных циклов BR, а далее в случае достижения ответа — еще 4 цикла поддерживающей терапии BR. Индукционные циклы повторяли каждые 28 дней, поддерживающей терапии — каждые 3
мес. В работе использованы критерии оценки ответа lwCLL (2018). Первичной целью исследования был анализ ВБП.
