CC BY
34
17. Kliegman R. M., Behrman R. E., Jenson H. B., Stanton B. F., Zitelli B. J. Nelson Textbook of Pediatrics. Saunders Published, 2007, 3200 p.
18. Matiegka, J. The testing of physical efficiency. Am. J. Phys. Anthropology, 1921, vol. 4, no. 3, pp. 223-230.
19. WHO child growth standards: length/height-for-age, weight-for-age, weight-for-length, weight-for-height and body mass index-for-age: methods and development, Geneva: World Health Organization Press, 2006, 336 p.
20. Waterlow J. C. Classification and definition of protein-calorie malnutrition. BMJ, 1972, vol. 3, no. 5826, pp. 566-569.
УДК 611.438:612.65 03.03.00 - Физиология
© И.С. Рожкова, Д.Л. Теплый, Б.В. Фельдман, 2015
АНАЛИЗ МОРФОФИЗИОЛОГИЧЕСКИХ ИЗМЕНЕНИЙ ТИМУСА ПРИ ХРОНИЧЕСКОЙ ИНТОКСИКАЦИИ И ВВЕДЕНИИ АНТИОКСИДАНТОВ
Рожкова Ирина Семеновна, кандидат медицинских наук, доцент кафедры биологии и ботаники, ГБОУ ВПО «Астраханский государственный медицинский университет» Минздрава России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел.: (8512) 52-41-43, e-mail: polyris@list.ru.
Теплый Давид Львович, доктор биологических наук, профессор, заведующий кафедрой физиологии, морфологии, генетики и биомедицины, ФГБОУ ВПО «Астраханский государственный университет», Россия, 414000, г. Астрахань, пл. Шаумяна, д. 1, тел.: 8 (8512) 52-49-94, e-mail: dima.tepliy@yandex.ru.
Фельдман Бронислав Владимирович, доктор биологических наук, доцент, заведующий кафедрой биологии и ботаники, ГБОУ ВПО «Астраханский государственный медицинский университет» Минздрава России, Россия, 414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, д. 121, тел.: (8512) 52-41-43, e-mail: agma@astranet.ru.
Раскрыты закономерности морфофункцнональных изменений в тканях тимуса крыс на различных этапах онтогенеза в норме, при хронической интоксикации и на фоне применения комплекса антиоксидантов. Проведено сравнение динамики уровня свободно-радикальных процессов в гомогенатах тканей тимуса крыс на различных этапах онтогенеза при хроническом воздействии серосодержащего природного газа и действии комплекса антиоксидантов. Эксперименты показали, что введение комплекса антиоксидантов восстанавливает ослабленную функцию, приводя к снижению уровня свободно-радикальных процессов и апоптоза во всех возрастных группах, но с более выраженным эффектом у старых животных.
Ключевые слова: интоксикация, свободно-радикальные процессы, тимус, перекисное окисление липидое, окислительная модификация белков, альфа-токоферола ацетат, витамин Е, тималин.
THE ANALYSIS OF MORFOPHYSIOLOGICAL CHANGES OF TIMUS AT CHRONIC INTOXICATION AND ADMINISTRATION OF ANTIOXIDANTS
Rozhkova Irina S., Cand. Sci. (Med.), Associate Professor, Astrakhan State Medical University, 121 Bakinskaya St., Astrakhan, 414000, Russia, tel.: (8512) 52-41-43, e-mail: polyris@list.ru.
Teplyi David L., Dr. Sci. (Biology), Professor, Head of Department, Astrakhan State University, 1 Shaumyan Sq., Astrakhan, 414000, Russia, tel. : 8 (8512) 52-49-94, e-mail: dima.tepliy@yandex.ru.
Fel'dman Bronislav K, Dr. Sci. (Biology), Associate Professor, Head of Department, Astrakhan State Medical University, 121 Bakinskaya St., Astrakhan, 414000, Russia, tel.: (8512) 52-41-43,e-mail: agma@astranet. ru.
We have revealed regularities of morphological and functional changes in thymus tissues of rats at different stages of ontogenesis in norm, at chronic intoxication and on the background of application of a complex of antioxidants. We have compared the dynamics of the level of free radical processes in rat thymus tissue homogenates at different stages of ontogenesis at a chronic exposure to sulfur-containing natural gas and the action of a complex of antioxidants. Experiments have shown that the administration of a complex of antioxidants restores the weakened function, leads to lower levels of free-radical processes and apoptosis in all age groups, the effect being more pronounced in older animals.
Key words: intoxication, free radical processes, thymus gland, lipid peroxidation, albumen oxidation modification, alfa-tocopherol acetate, vitamin E, timalin.
Введение. Исследования последних лет показали, что при развитии целого ряда заболеваний, связанных с воздействием токсических антропогенных факторов, большое значение имеет нарушение регуляции апоптоза, являющееся одной из причин преждевременного старения [5]. В результате происходит снижение эффективности антиоксидантной защиты [7, 8], снижение содержания витаминов-антиоксидантов [9, 16], что, в конечном итоге, способствует свободно-радикальному повреждению компонентов клеток [1, 3, 14] и развитию различных возрастных патологий [12, 15, 17, 19].
Согласно свободно-радикальной теории старения, выдвинутой в середине 50-х гг. XX в. Д. Харманом [11], в процессе возрастной инволюции усиливается перекисное окисление липидов, которое индуцирует апоптоз. Свободные радикалы содержат неспаренный электрон, в результате они могут окислять, то есть повреждать ДНК, белки, липиды и другие молекулы организма [2], способствуя появлению деструктивных процессов, в том числе и апоптотических изменений в тканях [10, 20, 21].
Доказано, что главной детерминантой клеточного механизма, приводящего к программированной смерти, является белок р53 [4]. При отсутствии повреждений генетического аппарата белок р53 находится в неактивном состоянии, однако при появлении повреждений ДНК, реактогенных метаболитов кислорода, накапливающихся в клетках, например, под воздействием природного газа, содержащего сероводород, он активируется, результатом чего является запуск процессов апоптоза [13, 18].
Механизм, регулирующий численность клеток в ткани тимуса, а также вопрос о возрастных и тканеспецифических особенностях этого органа при хроническом воздействии серосодержащего газа, остается малоизученным.
Цель: изучить закономерности морфофункциональных и апоптотических изменений в тканях тимуса крыс-самцов на различных этапах онтогенеза при хроническом воздействии серосодержащего природного газа Астраханского газоконденсатного месторождения (АГКМ) и на фоне применения комплекса антиоксидантов.
Материалы и методы исследования. Объектом исследования послужили 90 самцов беспородных белых крыс, которых содержали в условиях вивария при свободном доступе к пище и воде. Интактные (контрольные) и экспериментальные животные были разделены на три группы по 10 особей в каждой по возрастному признаку: молодые - от 15 дней до 1 месяца, половозрелые -6-месячного возраста, старые - 1-2 года жизни.
Экспериментальные животные подвергались воздействию природного газа АГКМ, содержащего сероводород в концентрации 90 ± 4 мг/м3 в течение 6 недель по 4 часа в день. Интактные животные находились также по 4 часа в герметически закрытой затравочной камере, что и опытные, но без присутствия серосодержащего газа. Все возрастные группы экспериментальных животных в течение 6 недель опыта через 1 день получали внутримышечно тималин (ООО «Самсон-Мед», Россия) из расчета 0,01 мг на 100 г массы тела. Введение альфа-токоферола ацетата (10 % масляный раствор, «Фармацевтическая фабрика Санкт-Петербурга ОАО», Россия) осуществлялось per os в дозе 0,5 мг на 100 г массы тела каждого животного в течение 14 дней до опыта и во время всего периода затравки.
После наркотизации животных этаминалом натрия (внутрибрюшинно в дозе 5 мг на 100 г массы тела) производили декапитацию, выделяли тимус, который фиксировали и заливали в парафин. Срезы толщиной до 5 мкм окрашивали 0,1 % водным раствором крезилвиолета по Нисслю. Диаметр ядер тимоцитов измеряли в плоскости оптического среза, проходящего через ядрышко. В каждом случае изучалось не менее 100 клеток. Определение клеток с конденсированным хроматином проводили с помощью окраски этидием бромидом. С использованием люминесцентного микроскопа при увеличении х 40 и длине волны 546 нм визуально подсчитывали количество апоптотических клеток с конденсированным хроматином. Микроскопический анализ, морфометрию и фотографирование препаратов проводили с помощью микроскопа системы «Биолам».
Для изучения динамики свободно-радикальных процессов использовали методику И.Д. Стальной, Т.Т. Гаришвили [6]. Гомогенаты из тканей тимуса готовили на фосфатном буферном растворе (рН 7,45). Исследование проводили на спектрофотометре Baekman (США) при длине волны 270 нм [6]. Определяли следующие показатели свободнорадикальных процессов: исходное перекисное окисление липидов (ПОЛ) по уровню содержания малонового диальдегида (МДА) в нмоль/0,05 г сырого веса ткани, а скорость спонтанного (Сп. ПОЛ) и аскорбатзависимого (Аск. ПОЛ) в нмоль образовавшегося МДА в пробе за 1 час инкубации. Окислительную модификацию белков (ОМБ) определяли на основании реакции взаимодействия окисленных аминокислотных остатков белков с 2,4-динитрофенилгидразином (2,4-ДФГ) с образованием окрашенных производных динитрофенил-гидразона при длине волны 270 нм [1] на спектрофотометре Baekman (США). Результаты исследования были обработаны статистически посредством пакета программ Microsoft Office 2007,
Statistica (StatSoft Inc., США). Статистическую значимость различий показателей в группах определяли с помощью t-критерия Стьюдента с поправкой Бонферрони для множественных сравнений. Принимали во внимание различия между параметрами при р < 0,05.
Результаты исследования и их обсуждение. Исследования показали, что размеры долек тимуса достигают максимума у молодых крыс и уменьшаются к периоду наступления половой зрелости. Дольки железы разделяются прослойками соединительной ткани, пучки которой ответвляются от тонкой капсулы органа и проникают на разную глубину внутрь органа. Они имеют поперечный размер от 0,2 до 5 мкм, нередко сливаются друг с другом, образуя древовидные ветвления. В них отчетливо различаются наружное более темное корковое вещество и центральное более светлое мозговое вещество. В зависимости от соотношения эпителиальных и лимфоидных клеток и их функционального состояния тимоцитов в дольке тимуса выделяют 4 зоны.
Первая зона - это наружный подкапсулярный слой. В ней в 1-3 слоя располагаются большие лимфоциты и бластные клетки, для которых характерны высокая митотическая активность. Эпителиальные клетки имеют типичную звездчатую или веретенообразную форму, образуя широко петлистую сеть, вокруг кровеносных сосудов, где обнаруживаются и макрофаги.
Вторая зона - внутренний кортикальный слой, или собственно корковое вещество тимуса, представлено несколькими слоями средних и малых лимфоцитов, содержание которых колеблется от 60 до 85 %. Лимфоидные клетки наружной части корковой зоны расположены в 3-4 слоя, диаметр клеток - около 7 мкм. В более глубоких отделах этой зоны встречаются макрофаги. Ддро тимоцитов овальное, площадь ядра в среднем у молодых крыс составляет 930,0 ± 0,86 мкм2, у половозрелых -770,0 ± 1,22 мкм2, у старых животных 550,0 ± 1,01 мкм2.
Третья зона - мозговое вещество. У группы молодых крыс площадь мозгового слоя преобладает над площадью коркового. Эпителиально-ретикулярные клетки составляют 5-20 %. Количество лимфоидных клеток в мозговом слое меньше, чем в корковом веществе и составляет 30-40 %. Тими-ческие тельца представлены концентрическими скоплениями продолговатых и веретенообразных клеток с большим ядром. Размер телец колеблется: у молодых крыс он составляет в среднем около 60 мкм, у половозрелых - 300-320 мкм. У старых животных на фоне возрастной инволюции тимуса тельца отличаются большой вариабельностью размера от 80 до 250 мкм. Соединительнотканная строма тимуса у молодых крыс представлена как соединительнотканными, так и эпителиальными элементами. На этом этапе онтогенеза дольки тимуса имеют вид многоугольников. У половозрелых животных плотность стромы увеличивается. Этот процесс происходит на фоне увеличения ширины междольковых перегородок и удельной длины коллагеновых волокон в паренхиме, что объясняется расширением междольковых соединительнотканных структур и началом интенсивного жирового перерождения органа.
Четвертая зона тимуса образована периваскулярной соединительной тканью, окружающей сосуды мозгового вещества. Эпителиальные клетки стромы тимуса примыкают к кровеносным капиллярам, окружая их с помощью своих отростков, формируя тем самым узкие канальцы для прохождения капилляров. Степень изменения параметров тимуса, а также изменение его клеточного состава коррелируют с возрастом животных.
Установлено, что количество апоптозных клеток в контроле неодинаково: у молодых животных составляет 4,05 ± 0,028, половозрелых - 6,89 ± 0,318, у старых - 10,18 ± 0,433. В условиях хронической интоксикации более чувствительными к развитию апоптоза оказались клетки ткани тимуса молодых и старых животных. В результате их количество увеличивается и составляет 7,64 ± 0,645 у молодых, 8,13 ± 0,216 - у половозрелых и 13,18 ± 0,615 - у старых животных (табл. 1). Следует отметить, что апоптотические изменения тимоцитов протекают на фоне возрастания количества жировых клеток у всех возрастных групп не только в субкапсулярных участках, но и в междольковых прослойках соединительной ткани.
Таблица 1
Количество апоптозных клеток в тимусе крыс разного возраста (М ± т)_
Группа Молодые животные Половозрелые животные Старые животные
К 4,05 ± 0,028 6,89 ±0,318 10,18 ±0,433
ССГ 7,64 ± 0,645* 8,13 ±0,216* 13,18 ±0,615*
ССГ + АО 3,19 ±0,581** 5,95 ±0,746** 8,24 ±0,234**
Примечание: К - контрольная группа; ССГ- воздействие серосодержащего газа; ССГ + АО - воздействие серосодержащего газа на фоне введения антиоксидантов; *р < 0,05 по сравнению с контрольными значениями; **р < 0,05 по сравнению с группой ССГ
Таким образом, при хроническом воздействии серосодержащего природного газа у экспериментальных животных происходит активация апоптотических изменений клеточного звена иммунной защиты. Введение комплекса антиоксидантов при хроническом воздействии серосодержащего природного газа оказало выраженное антиапоптотическое действие (табл. 1).
Уровень свободно-радикального окисления в тканях тимуса свидетельствует о возрастных особенностях функционирования иммунной системы в различные периоды онтогенеза (табл. 2, 3).
Таблица 2
Уровень свободно-радикальных процессов в тимусе крыс разного возраста (М ± т)_
Группа Молодые животные Половозрелые животные Старые животные
Исх. Сп. Аск. Исх. Сп. Аск. Исх. Сп. Аск.
ПОЛ, ПОЛ ПОЛ ПОЛ, ПОЛ ПОЛ ПОЛ, ПОЛ ПОЛ
нмоль/ нмоль/ч нмоль/ч нмоль/ нмоль/ч нмоль/ч нмоль/ нмоль/ч нмоль/ч
0,05 г 0,05 г 0,05 г
К 7,32 ± 55,57± 66,17± 3,22± 32,05± 38,32± 3,96± 20,30± 18,76±
0,357 0,932 0,553 0,346 0,722 0,584 0,457 0,634 0,316
ССГ 4,44 ± 40,11± 52,70± 4,69± 30,00± 48,32± 18,90± 120,00± 195,97±
0,349* 0,448* 0,810* 0,822° 0,598*** 0,595** 0,712* 0,693* 0,694*
ССГ+ 1,77 ± 3,73± 9,30± 1,14± 15,11± 11,77± 1,0± 4,87± 17,21±
АО 0,697*" 0,971*° 0,359*° 0,544**" 0,431*° 0,416*° 0,351*° 0,459*° 0,319°°
Примечание: К - контрольная группа; ССГ- воздействие серосодержащего газа; ССГ + АО - воздействие серосодержащего газа на фоне введения антиоксидантов; *р < О,001 по сравнению с контрольными значениями; **р < 0,01 по сравнению с контрольными значениями; ***р > 0,05 по сравнению с контрольными значениями; Пр > 0,5 по сравнению с контрольными значениями; яр < 0,01 при сравнении группы, получавшей ССГ с группой ССГ + АО; р < 0,001 при сравнении группы, получавшей ССГ с группой ССГ + АО
Хроническое действие серосодержащего газа проявляется увеличением количества продуктов свободно-радикального окисления. О развитии стресс-реакции свидетельствует повышение интенсивности ПОЛ и показателей ОМБ. Усиление Аск. ПОЛ в гомогенатах ткани старых животных на фоне хронического воздействия серосодержащим газом может свидетельствовать о снижении устойчивости тимуса с возрастом и об истощении антиоксидантной системы. Изменение уровня показателей пероксидации липидов в гомогенатах ткани у молодых животных, очевидно, связано с тем, что адаптивные процессы в их организме еще окончательно не сформированы, в связи с этим они отвечают разнонаправленными реакциями на токсическое воздействие.
Таблица 3
Окислительная модификация белков в тимусе крыс разного возраста (М ± т), нмоль/ч_
Группа Молодые животные Половозрелые животные Старые животные
К 0,26 ±0,191 0,13 ±0,057 0,09 ± 0,044
ССГ 0,85 ±0,040** 0,86 ± 0,084* 0,73 ±0,118*
ССГ+АО 0,02 ± 0,007*" 0,01 ±0,004***" 0,07 ± 0,025°"
Примечание: К - контрольная группа; ССГ - воздействие серосодержащего газа; ССГ + АО - воздействие серосодержащего газа на фоне введения антиоксидантов; *р < 0,001 по сравнению с контрольными значениями, **р < 0,01 по сравнению с контрольными значениями; ***р < 0,05 по сравнению с контрольными значениями; Пр > 0,5 по сравнению с контрольным значением; йр < 0,001 при сравнении группы, получавшей ССГ с группой ССГ + АО
Результаты изучения уровня интенсивности окислительной модификации белков показали, что уровень скорости деструкции белков в тимусе выше у старых животных, что согласуется с литературными данными и свидетельствует о том, что старение сопровождается разнонаправленными изменениями активностей ферментов, позволяющими на новом функциональном уровне поддерживать физиологические процессы.
Выводы.
1. Полученные данные свидетельствуют о том, что при хроническом воздействии серосодержащего природного газа АГКМ интенсивность свободно-радикальных процессов в тканях тимуса характеризуется возрастными особенностями функционирования иммунной системы в ответ на действие токсиканта.
2. Комбинированное введение альфа-токоферола ацетата и тималина животным, подверженным воздействию серосодержащего природного газа, привело к снижению уровня свободно-радикальных процессов во всех возрастных группах, но с более выраженным эффектом у старых животных.
3. Введение комплекса антиоксидантов при хроническом воздействии серосодержащего природного газа оказало выраженное антиапоптотическое действие как у молодых, так и у старых животных, что свидетельствует о своевременности и целесообразности антиоксидантной коррекции на фоне хронической интоксикации.
Список литературы
1. Дубинина, Е. Е. Роль активных форм кислорода в качестве сигнальных молекул в метаболизме тканей при состояниях окислительного стресса / Е. Е. Дубинина // Вопросы медицинской химии. - 2001. - Т. 47, №6. - С. 561-581.
2. Кондратенко, Е. И. Функциональные взаимосвязи эндокринных и свободнорадикальных процессов у крыс разного пола при изменении освещенности : монография / Е. И. Кондратенко. - Астрахань : ИД «Астраханский университет», 2003. - 195 с.
3. Мажитова, М. В. Свободнорадикальные процессы и ангиоксидангная защита разных отделов центральной нервной системы на этапах постнатального онтогенеза белых крыс в норме и при действии промышленных серосодержащих поллютантов : автореф. дис. ... д-ра биол. наук / М. В. Мажитова. - Астрахань, 2012. -44 с.
4. Новиков, В. С. Программированная клеточная гибель / В. С. Новиков. - СПб. : Наука, 1996. - 276 с.
5. Потапнев, М. П. Апоптоз клеток иммунной системы и его регуляция цитокинами / М. П. Потапнев // Иммунология. - 2002. - № 4. - С. 237-243.
6. Стальная, И. Д. Метод определения малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты / И. Д. Стальная, Т. Т. Гаришвили // Современные методы в биохимии. - М. : Медицина, 1977. - С. 66-68.
7. Adachi, Н. Effects of tocotrienols on life span and protein carbonylation in Caenorhabditis elegans / H. Adachi, N. Ishii // J. Gerontol. Biol. Sci. Med. Sci. - 2000. - Vol. 55, № 6. - P. 280-285.
8. Arivazhagan, P. Effect of DL-alha-lipoic acid on mitochondrial enzymes in aged rats / P. Arivazhagan, K. Ramanathan, C. Panneerselvam // Chem. Biol. Interact. - 2001. - Vol. 36, № 2. - P. 189-198.
9. Arockia-Rani, P. J. Carnitine as a free radical scavenger in aging / P. J. Arockia-Rani, C. Panneerselvam // Exp. Gerontol. - 2001. - Vol. 36, № 10. - P. 1713-1726.
10. Girotti, A. W. Lipid hydroperoxide generation, turnover, and effector action in biological systems / A. W. Girotti // J. Lipid Res. - 1998. - Vol. 39, № 8. - P. 1529-1542.
11. Harman, D. The aging process : major risk factor for disease and death / D. Harman // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 1991. - Vol. 88, № 12. - P. 5360-5363.
12. Ikeda, H. Massive apoptosis detected by in situ DNA nick end labeling in neuroblastoma / H. Ikeda, J. Hi-rato, M. Akami, N. Suzuki, A. Takahashi, M. Kuroiwa, S. Matsuyama // Amer. J. Surg. Pathol. - 1996. - Vol. 20. -P. 649-655.
13. Kerr, J. F. R. Apoptosis : a basic biological phenomenon with wide-ranging implication in tissue kinetics / J. F. R. Kerr, A. H. Wyllie, A. R. Currie // Brit. J. Cancer. - 1972. - Vol. 26, № 4. - P. 239-257.
14. Ozawa, T. Genetic and functional changes in mitochondria associated with aging / T. Ozawa // Physiol. Rev.
- 1997. - Vol. 77, № 2. - P. 425-464.
15. Shinohara, R. Lipid peroxidation levels in rat cardiac muscle are affected by age and thyroid status / R. Shi-nohara, T. Mano, A. Nagasaka, R. Hayashi, K. Uchimura, I. Nakano, F. Watanabe, T. Tsugawa, M. Makino, H. Kakizawa, M. Nagata, K. Iwase, Y. Ishizuki, M. Itoh // J. Endocrinol. - 2000. - Vol. 164, № 1. - P. 97-102.
16. Sodergren, E. Vitamin E reduces lipid peroxidation in experimental hepatotoxicity in rats / E. Sodergren, J. Cederberg, B. Vessby, S. Basu // Europ. J. Nutr. - 2001. - Vol. 40, № 1. - P. 10-16.
17. Vaux, D. L. An evolutionary perspective on apoptosis / D. L. Vaux, G. Haecker, A. Strasser // Cell. - 1994.
- Vol. 76, № 5. - P. 777-779.
18. Vermes, I. Apoptosis and programmed cell death in health and disease /1. Vermes, C. Haanen // Adv. Clin. Chemistry. - 1994. - Vol. 31. - P. 177-246.
19. White, M. K. Suppression of apoptosis : role in cell grown and neoplasma / M. K. White, J. A. McCubrey //Leukemia.-2001.-Vol. 15, №7.-P. 1011-1021.
20. Wyllie, A. H. Apoptosis : cell death in tissue regulation / A. H. Wyllie // J. Pathol. - 1987. - Vol. 153. -P. 313-316.
21. Yan, L. J. Oxidative damage during aging targets mitochondrial aconitase / L. J. Yan, R. L. Levine, R. S. Sohal // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 1997. - Vol. 94. - P. 11168-11172.
References
1. Dubinina, E. E. Rol' aktivnykh form kisloroda v kachestve signal'nykh molekul v metabolizme tkaney pri sostoyaniyakh okislitel'nogo stressa [The role of reactive oxygen species as signal molecules in tissue metabolism under conditions of oxidative stress].Voprosy meditsinskoy khimii [Problems of Medical Chemistry], 2001, vol. 47, no. 6, pp. 561-581.
2. Kondratenko E. I. Funktsional'nye vzaimosvyazi endokrinnykh i svobodnoradikal'nykh protsessov u krys raznogo pola pri izmenenii osveshchennosti: monografiya [Functional interrelations of endocrine and free radical processes in rats of different sex under changing light conditions. Monograph], Astrakhan, Astrakhan State University, 2003, 195 p.
3. Mazhitova M. V. Svobodnoradikal'nye protsessy i antioksidantnaya zashchita raznykh otdelov tsentral'noy nervnoy sistemy na etapakh postnatal'nogo ontogeneza belykh krys v norme i pri deystvii promyshlennykh serosoderz-hashchikh pollyutantov. Avtoreferat dissertatsii doktora biologicheskikh nauk [Free radical processes and antioxidant protection of different parts of central nervous system at the stages of postnatal ontogenesis in white rats in norm and under the influence of industrial sulphur-containing pollutants. Abstract of thesis of Doctor of Biological Sciences]. Astrakhan, 2012, 44 p.
4. Novikov V. S. Programmirovannaya kletochnaya gibel' [The programmed cellular death]. Saint Petersburg, Nauka [Science], 1996, 276 p.
5. Potapnev M. P. Apoptoz kletok immunnoy sistemy i ego regulyatsiya tsitokinami [Apoptosis of cells of the immune system and its regulation by cytokines]. Immunologiya [Immunology], 2002, no. 4, pp. 237-243.
6. Stal'naya I. D., Garishvili T. T. Metod opredeleniya malonovogo dial'degida s pomoshch'yu tiobarbiturovoy kisloty [Method for determination of malondialdehyde using the thiobarbituric acid]. Sovremennye metody v biokhimii [Modern methods in biochemistry], Moscow, Meditsina [Medicine], 1977, pp. 66-68.
7. Adachi H., Ishii N. Effects of tocotrienols on life span and protein carbonylation in Caenorhabditis elegans. J. Gerontol. Biol. Sci. Med. Sci., 2000, vol. 55, no. 6, pp. 280-285.
8. Arivazhagan P., Ramanathan K., Panneerselvam C. Effect of DL-alha-lipoic acid on mitochondrial enzymes in aged rats. Chem. Biol. Interact., 2001, vol. 36, no. 2, pp. 189-198.
9. Arockia-Rani P. J., Panneerselvam C. Carnitine as a free radical scavenger in aging. Exp. Gerontol., 2001, vol. 36, no. 10, pp. 1713-1726.
10. Girotti A. W. Lipid hydroperoxide generation, turnover, and effector action in biological systems. J. Lipid Res., 1998, vol. 39, no. 8, pp. 1529-1542.
11. Harman, D. The aging process: major risk factor for disease and death. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1991, vol. 88, no. 12, pp. 5360-5363.
12. Ikeda H., Hirato J., Akami M., Suzuki N, Takahashi A., Kuroiwa M., Matsuyama S. Massive apoptosis detected by in situ DNA nick end labeling in neuroblastoma. Amer. J. Surg. Pathol., 1996, vol. 20, p. 649-655.
13. Kerr J.F.R., Wyllie A. H., Currie A. R. Apoptosis: a basic biological phenomenon with wide-ranging implication in tissue kinetics. Brit. J. Cancer., 1972, vol. 26, no. 4 pp. 239-257.
14. Ozawa T. Genetic and functional changes in mitochondria associated with aging // Physiol. Rev., 1997, vol. 77, no. 2, pp. 425-464.
15. Shinohara R., Mano T., Nagasaka A., Hayashi R., Uchimura K., Nakano I., Watanabe F., Tsugawa T., Makino M., Kakizawa H., Nagata M., Iwase K., Ishizuki Y., Itoh M. Lipid peroxidation levels in rat cardiac muscle are affected by age and thyroid status. J. Endocrinol., 2000, vol. 164, no. 1, pp. 97-102.
16. Sodergren E., Cederberg J., Vessby B., Basu S. Vitamin E reduces lipid peroxidation in experimental hepa-totoxicity in rats. Europ. J. Nutr., 2001, vol. 40, vol. 1, pp. 10-16.
17. Vaux D.L., Haecker G., Strasser A. An evolutionary perspective on apoptosi. Cell, 1994, vol. 76, no. 5., pp. 777-779.
18. Vermes I., Haanen C. Apoptosis and programmed cell death in health and disease. Adv. Clin. Chemistry, 1994, vol. 31., pp. 177-246.
19. White M. K., McCubrey J. A. Suppression of apoptosis: role in cell grown and neoplasma. Leukemia, 2001, vol. 15, no. 7, pp. 1011-1021.
20. Wyllie A. H. Apoptosis: cell death in tissue regulation. J. Pathol., 1987, vol. 153, pp. 313-316.
21. Yan L. J., Levine R. L., Sohal R. S. Oxidative damage during aging targets mitochondrial aconitase. Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 1997, vol. 94, p. 11168-11172.
