CC BY
16
ВЕСТНИК ГЕМАТОЛОГИИ, том XV, № 2, 2019
М. А. Кислицына, Т. Н. Обухова, Г. А. Алимова, Л. А. Шишигина, Т. В. Абрамова, Л. А. Гребенюк, Т. Ю. Новикова, С. Р. Горячева, Т. Н. Моисеева, В. Г. Савченко
Федеральное государственное бюджетное учреждение «Научно-исследовательский медицинский центр гематологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Москва
АНАЛИЗ КАРИОТИПА ИММУНОСТИМУЛИРОВАННЫ ВЛИМФОЦИТОВ БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ЛИМФОЛЕЙКОЗОМ
Введение. Хронический лимфолейкоз (ХЛЛ) — злокачественное лимфопролифера-тивное заболевание, субстратом которого являются зрелые В-лимфоциты. Хромосомные аберрации имеют важное прогностическое значение при ХЛЛ. Наиболее часто встречающиеся хромосомные нарушения, такие как делеция 11q22, 13q14, 17p13 и трисомия 12 определяются методом FISH у 80% больных. Выполнение стандартного цитогенетиче-ского исследования (СЦИ) с использованием В-клеточных митогенов (LPS+TPA) затруднено в связи с низкой митотической активностью опухолевых В-лимфоцитов. Применение при культивировании олигонуклеотида DSP30 в сочетании интерлейкином-2 (DSP30+IL2) увеличивает пролиферативную активность опухолевых клеток ХЛЛ. Комплексный кариотип (три и более хромосомных нарушений) является независимым неблагоприятным прогностическим фактором, однако, по литературным данным, для ХЛЛ прогностически значимым является выявление 5 и более аберраций. В ряде исследований описана высокая ассоциация комплексного кариотипа с делецией 17р13. Показано, что выявленные при кариотипи-ровании несбалансированные транслокации и транслокации с вовлечением локуса генов IGH как в составе комплексного кариотипа, так и изолированно ассоциируются с более низкой общей выживаемостью, укорочением времени до начала терапии и плохим ответом на лечение. Таким образом, прогностическое значение имеют как количественные, так и качественные нарушения, выявляемые в карио-типе у больных ХЛЛ.
Цель. Анализ результатов СЦИ с применением DSP30+IL2 у больных ХЛЛ.
Материалы и методы. В исследование включен 71 больной ХЛЛ, из них 51 мужчина и 20 женщин в возрасте от 35 до 86 лет (медиана возраста — 57 лет), которые наблюдались в Федеральном государственном бюджетном учреждении «Научно-исследовательский медицинский центр гематологии» в период с марта 2016
по январь 2019 года. Всем больным выполнено СЦИ с использованием при культивировании DSP30+IL2 (из них 50 больным проведено СЦИ с LPS+TPA) и FISH с ДНК-зондами для выявления трисомии 12, делеций 13q14, 11q22, 17p13. Исследования выполнены 42 пациентам до начала терапии и 29 пациентам, получавшим лечение, с резистентным и рецидивирующим течением заболевания.
Результаты. Анализ результатов кариотипи-рования 50 больных показал высокую эффективность выявления аберрантного и комплексного кариотипа в культуре с DSP30+IL2 — у 36 (72 %) и у 13 (26 %) больных по сравнению с LPS+TPA — у 15 (33 %) и 5 (11 %). Выявлено достоверное различие между количеством метафаз с хромосомными аномалиями, полученными при культивировании с DSP30+IL2 и LPS+TPA (v=490.5, p<0,05). По результатам СЦИ 71 больного с использованием DSP30+IL2 аберрантный кариотип выявлен в 52 (73 %) случаях. При сравнении данных СЦИ и FISH показано, что частота выявления делеций 13q14, 11q22 и 17p13 выше при FISH-исследовании, однако кариотипирование позволяло детализировать структурные нарушения в этих локусах. В кариотипе были выявлены делеции хромосомы 13 с потерей различных регионов (q11q14, q12q14, q14q21, q14q22, q14q34) и у 8 больных транслокации с вовлечением локусов 13q14, 11q22 и 17p13, сопровождающиеся де-лециями в данных локусах и подтвержденные методом FISH. Частота выявления трисомии 12 при СЦИ, напротив, превышала таковую при FISH-исследовании за счет выявления частичной трисомии 12 и дупликации региона q13q22 у 2 больных. Методом СЦИ комплексный кариотип был определен у 22 (31 %) пациентов, из них у 11 из 22 (50%) выявлены 5 и более хромосомных нарушений. В группе больных до начала терапии комплексные нарушения в количестве 5 и более выявлены у 3 из 42 (7 %), из них только у одного выявлена делеция 17р13 методом FISH. В группе больных с резистентным и рецидивирующим течением 5 и более аберраций
VВсероссийская научно-практическая конференция с международным участием «ГЕНЕТИКА ОПУХОЛЕЙ КРОВЕТВОРНОЙ СИСТЕМЫ -ОТ ДИАГНОСТИКИ К ТЕРАПИИ»
определены у 8 из 29 (28 %), при этом деле-ция 17р13 при Р^Н-исследовании выявлена только у 4 из 8 (50 %). Различные структурные аберрации, не входящие в стандартную диагностическую панель при Р15Н-исследовании, были детектированы методом СЦИ у 38 (54 %) пациентов. Несбалансированные и сбалансированные транслокации выявлялись в 28 (39 %) и 18 (25 %) случаях соответственно. Отмечены повторяющиеся точки разрыва хромосом: 2^ 3р, 6^ 7р, 8р, 17р. Несбалансированные транслокации вне комплексного кариотипа определялись у 10 из 28 (36 %) больных. У 6 из 18 (33 %) пациентов были выявлены сбаланси-
Санкт-Петербург 26-27 апреля 2019 г.
рованные транслокации, затрагивающие локус генов IGH (14q32) — t(2;14)(p14-15; q31-32), t(6;14)(p21; q32), t(8;14)(q24; q32), t(9;14)(p13; q31-32), t(14;19)(q32; q13).
Выводы. Выполнение СЦИ с использованием при культивировании DSP30 и IL2 наряду с методом FISH позволяет выявлять дополнительные хромосомные аберрации, в том числе комплексные нарушения кариотипа, несбалансированные транслокации и транслокации с вовлечением генов IGH, определяющие неблагоприятный прогноз ХЛЛ, и выделять группу больных высокого риска для дальнейшей разработки терапевтического подхода.
В. С. Климов1, Е. В. Сокурова2, О. В. Тюрина3, А. В. Никифорова4, Т. В. Савоцкая5, В. А. Сабыныч6
1 Государственное бюджетное учреждение здравоохранения краевая клиническая больница № 2, г. Владивосток
2 Краевое государственное бюджетное учреждение здравоохранения «Владивостокская поликлиника № 4»
3 Государственное автономное учреждение здравоохранения «Краевой клинический центр специализированных видов медицинской помощи», г. Владивосток
4 Краевое государственное бюджетное учреждение здравоохранения «Уссурийская центральная городская больница», г. Уссурийск
5 Краевое государственное бюджетное учреждение здравоохранения «Находкинская городская больница», г. Находка
6 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Тихоокеанский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации
ДИАГНОСТИКА И МОНИТОРИНГ ХРОНИЧЕСКОГО МИЕЛОИДНОГО ЛЕЙКОЗА В ПОВСЕДНЕВНОЙ КЛИНИЧЕСКОЙ ПРАКТИКЕ
Введение. С 2009 г. в Приморском крае выполняется цитогенетическое исследование у больных хроническим миелолейкозом (ХМЛ). С 2011 г. проводится мониторинг молекулярных результатов лечения, регистрация большого молекулярного ответа (БМО) по снижению уровня экспрессии БСЯ-АБЬ в пределах менее 0,1 % и более 0,01 % по международной шкале а также полного молекулярного ответа (ПМО), когда БСЯ-АБЬ транскрипт не выявляется (0,000 %). Исследование выполнялось в лаборатории молекулярной генетики ФГБУ Российского НИИ гематологии и трансфузио-логии г. Санкт-Петербурга.
Цель. Анализ результатов терапии пациентов с ХМЛ, получающих терапию ингибиторами тирозинкиназ (ИТК).
Материалы и методы. В 2009-2017 гг. диагностировано 111 случаев ХМЛ. Еще 50 пациентов с ХМЛ состояло под наблюдением к началу 2009 г. За этот период умерло от бластного криза ХМЛ 25 пациентов. Другие заболевания стали причиной смерти 15 больных, 5 пациентов выехали на постоянное
место проживания за пределы края (на момент отъезда имели БМО — 4 и ПМО — 1). На конец 2017 г. под наблюдением находилось 116 больных, и в этой группе проведен анализ результатов лечения. На момент диагностики в хронической фазе ХМЛ находились 112, в фазе акселерации — 3, в фазе бластного криза — 1 пациент. Распределение групп прогностического риска по критериям Sokal: низкий риск — 57 (49 %); промежуточный риск — 40 (34 %); высокий риск — 19 (17 %) пациентов. До назначения ИТК от 1 до 9 лет получали терапию гидроксикарабмидом, интерфероном, цитарабином 39 (34%) больных. Низкая приверженность к терапии отмечена у 20 (17 %) пациентов, допускавших снижение дозы и необоснованные, длительные перерывы в приеме ИТК. У 10 больных это привело к потере гематологического ответа (ГО). В одном случае потерян полный цитоге-нетический ответ (ЦО), и еще в одном случае утерян БМО. К концу 2017 г. 99 больных принимали иматиниб и 17 пациентов получали терапию ИТК второго поколения.
