CC BY
492018, т. 8, № 1
ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ
УДК 618.333+618.39+576.316.7+616-07
АНАЛИЗ КАРИОТИПА АБОРТНОГО МАТЕРИАЛА НЕРАЗВИВАЮЩЕЙСЯ БЕРЕМЕННОСТИ
Миклин О. П., Камилова И. К, Зинченко А. А., Зоркин Е. К.
Кафедра акушерства и гинекологии № 1, Медицинская академия имени С. И. Георгиевского ФГАОУ ВО «КФУ им. В. И. Вернадского», 295051, бульвар Ленина, 5/7, Симферополь, Россия
Для корреспонденции: Миклин Олег Петрович, кандидат медицинских наук, доцент кафедры акушерства и гинекологии № 1 первого медицинского факультета, Медицинская академия имени С. И. Георгиевского ФГАОУ ВО «КФУ им. В. И. Вернадского», е-mail [email protected]
For correspondence: Miklin Oleg Petrovich, PhD, Associate Professor, Department of Obstetrics and Gynecology No.1, Medical Academy named after S. I. Georgievsky of Vernadsky CFU, e-mail: [email protected]
Information about authors:
Miklin O. P., orcid.org/0000-0002-4863-602X Kamilova I. К., orcid.org/0000-0002-1857-2977 Zinchenko A. A., orcid.org/0000-0001-8168-6048 Zorkin E. K., orcid.org/0000-0001-8203-4981
РЕЗЮМЕ
В статье выявлена распространенность и структура хромосомной патологии абортного материала неразвивающейся беременности по данным лабораторий цитогенетики Республики Крым. Выявлены наиболее часто встречающиеся полиплоидии и анеуплоидии в зависимости от возраста женщин. В исследовании обнаружены достаточно редкие хромосомные патологии, в частности в одном случае беременность закончилась несостоявшимся выкидышем на 6-7 неделе, где эмбрион имел патологический кариотип - двойную анеуплоидию - 48, ХХ, +16,+18; смешанная хромосомная патология - 70, ХХХ, +1 - послужила причиной неразвивающейся беременности на сроке гестации 10 недель. Результаты исследования доказывают необходимость прегравидарной подготовки супругов для улучшения демографической ситуации путем снижения числа репродуктивных потерь за счет минимизации частоты хромосомных аномалий плодного яйца, а также профилактики остановки развития эмбриона (плода) с нормальным кариотипом.
Ключевые слова: неразвивающаяся беременность; кариотип абортного материала; несостоявшийся выкидыш; хромосомная патология; цитогенетическое исследование.
ANALISIS OF ABORTIVE MATERIAL KARIOTYPE IN NON-DEVELOPING PREGNANCY
Miklin O. P., Kamilova I. К., Zinchenko A. A., Zorkin E. K
Medical Academy named after S. I. Georgievsky of Vernadsky CFU, Simferopol, Russia
SUMMARY
The article reveals the prevalence and structure of the chromosomal pathology of abortion material of an undeveloped pregnancy according to the data obtained by the cytogenetics laboratories of the Crimea. The most frequent polyploids and aneuploidies were found as function of women's age. The study found quite rare chromosomal pathologies; in one case the pregnancy ended in an abortive miscarriage during the 6th or 7th week, where the embryo had a pathological karyotype - double aneuploidy - 48, XX, + 16, + 18; mixed chromosomal pathology - 70, XXX, + 1 caused the undeveloped pregnancy at the gestational age of 10 weeks. The results of the research prove the need for premarital preparation of spouses for improving the demographic situation by minimizing the frequency of chromosomal abnormalities of the fetal egg, as well as preventing the development of the embryo (fetus) with normal karyotype to reduce the number of reproductive losses.
Keywords: non-developing pregnancy; karyotype of abortion material; missed abortion; chromosomal pathology; cytogenetic study.
Репродуктивные потери - серьезная проблема акушерства и гинекологии. В условиях современной демографической ситуации в Российской Федерации, ежегодного возрастания количества бесплодных пар сохранение беременности является важной задачей здравоохранения. В России примерно 15-20 % беременностей прерываются на ранних сроках [1], что согласуется с данными зарубежных исследований [2; 3]. Известно, что частота возникновения спонтан-
ного выкидыша колеблется от 10 % у женщин в возрасте 20-24 лет и до 51 % у женщин в возрасте от 40 до 44 лет [4] на ранних сроках; около 4 % беременностей заканчиваются поздним выкидышем [5]. Однако на самом деле частота самопроизвольных выкидышей значительно выше, так как в ее число входит также большое количество недиагностированных естественных абортов, возникающих на ранних сроках. Так, в 30 % случаев беременность прерывается до им-
2018, т. 8, № 1
плантации и еще в 30 % - после имплантации на третьей или четвертой неделе беременности. Данные потери часто называют доклиническими [6]. Существует предположение, что спорадические потери беременности, возникающие на ранних сроках, представляют собой «физиологическое» явление, которое предотвращает появление детей с серьезными структурными пороками развития или хромосомными аберрациями. Эта концепция подтверждается клиническими исследованиями, в которых с помощью эмбриоскопии выявляли фетальные мальформации, которые наблюдались в 85 % случаев с ранним клиническим выкидышем [7].
Удельный вес неразвивающейся беременности в структуре репродуктивных потерь достаточно высок и составляет от 10-20 % до 45-88,6 % случаев [8]. Доля хромосомных аномалий эмбриона при неразвивающейся беременности варьирует в широких пределах и по данным разных авторов составляет от 18 до 55 % [9; 10]. В структуре хромосомных аномалий лидирующее место занимают трисомии, удельный вес которых может достигать 68 %, далее - моносомии и полиплоидии, частота которых, по данным разных авторов, варьирует [11; 12; 13]. Наиболее часто встречаются трисомии по 15-й, 16-й и 18-й хромосомам [14]. При этом у женщин, у которых родился ребенок с анеупло-идией, риск повторного возникновения хромосомной патологии плода выше [15]. Также установлено, что риск хромосомной патологии у плода положительно коррелирует с возрастом матери [16]. Целью данного исследования
явился анализ распространенности и структуры хромосомной патологии плодного яйца неразвивающейся беременности по данным лабораторий цитогенетики Республики Крым.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Материалом для исследования явился ретроспективный анализ 134 случаев неразвивающейся беременности, абортный материал которых подвергся кариотипированию в лаборатории цитогенетики Республики Крым. Возраст пациенток составил от 18 до 45 лет (в среднем 30,3 года). Данные обработаны с помощью статистического пакета Microsoft Ехсе1.
РЕЗУЛЬТАТЫ
Пациентки были разделены на 2 возрастные группы. Первую группу составили женщины возрастом менее 35 лет - 76,3 % (n=102), вторую - старше 35 лет - 23,7 % (n=32). В первой возрастной группе частота хромосомных аномалий составила 35,3 % (n=36), в то время как во второй группе она была значительно выше -50 % (n=16). Группа редких нежизнеспособных трисомий также встречалась чаще в группе пациентов старше 35 лет - 28 % (n=9), чем в группе женщин младше 35 лет - 13,7 % (n=14). Однако у молодых пациенток отмечено больше случаев триплоидии, чем в старшей группе (22,6 % (n=23) и 9,4 % (n=3) соответственно). Структура хромосомных аномалий абортусов в первой и второй возрастных группах представлена соответственно на 1-й и 2-й круговой диаграмме.
Диаграмма 1
ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ Диаграмма 2
Несостоявшийся выкидыш в 95,5 % 4,5 % (п=5). Большинство случаев приходи-(п=129) случаев диагностирован в I триме- лось на 7-8 неделю (подробнее на таблице 1) стре, в то время как на II триместр пришлось
Таблица 1
Структура хромосомной патологии абортусов во второй
возрастной группе ■ Триплоидия
6% 6% в% ■ Трисомия 13
12% ■ Трисомия 16 ■ Трисомия 18
Л я 19% ■ Трисомия 21
13% ■ Трисомия 14 ■ Трисомия с маркерной
6% хромосомой
13% ■ Тетраилоидия
13% 6% Моногамия X ■ Двойная анеуплоидия +16, +18
Срок гестации (нед.)
35 30 25 20 15 10 5 0
■■ L L L L ь L l
5-6
6-7
7-8
8-9
9-10
10-11
11-12
12
I Выкидыши
28
30
24
11
12
I Патологии
11
12
При цитогенетическом исследовании ка-риотипа абортного материала выявлено, что эмбрионы с патологическим кариотипом в I триместре составляли 41,1 % (п=53), в то время как прерывание беременности во II триместре в данном исследовании не было связано с хромосомной патологией плода. Женский кариотип регистрировался чаще мужского - 58 % (п=78) случаев, однако хромосомная патология чаще наблюдалась у эмбрионов мужского пола - 43,9 % (п=24), чем женского - 38,4 % (п=30). Анеуплоидия и полиплоидия встречались практически с равной частотой -50,9 % (п=27) и 49,1 % (п=26) соответственно.
В исследовании триплоидия оказалась наиболее распространенной патологией и составила
22,6 % (п=18), из них: в 50 % (п=9) случаях дис-генического (ХХХ) и в 50 % случаях (п=9) диан-дрического (ХХУ) происхождения, тетрасомии встречались в 9,4 % (п=5). Среди анеуплоидии чаще встречались трисомии с маркерной хромосомой - 13,6 %(п=7) случаев, трисомии 16 хромосомы - у 9,4 % (п=5) абортусов, 21 хромосомы - 7,5 % (п=4) и 18 хромосомы - 5,6 % (п=3), моносомия Х выявлена только в 1 случае - 1,9 %.
Во второй группе пациенток выявлена двойная анеуплоидия 16 и 18 хромосомы - 48, ХХ, +16, +18, прерывание данной беременности произошло на 6-7 неделе. Механизм, лежащий в основе возникновения двойной анеуплоидии, неясен. Предполагается, что двойная анеуплоидия возникает при нерасхождении двух пар
хромосом в периоде гаметогенеза, либо при нерасхождении одной пары в трисомной зиготе [18]. Согласно данным доступной нам литературы [19], в образовании двойной анеуплоидии нет специфической ассоциации хромосом; однако наиболее часто встречающимися хромосомами являются половые и акроцентрические хромосомы. Хромосомы из групп А (1-3 хромосомы) и В (4-5 хромосомы) редко наблюдаются при образовании двойной анеуплоидии [19].
Смешанная хромосомная патология - сочетание полиплоидии с трисомией 1 хромосомы -70, ХХХ, +1 - выявлена в первой группе пациенток, данная беременность перестала развиваться в 10-недельном гестационном возрасте.
ОБСУЖДЕНИЕ
В данном исследовании видим, что несостоявшийся выкидыш чаще встречается на ранних сроках, только 4,5 % потерь пришлось на 13-20 недели гестации. Это связано с различием причин, приводящих к самопроизвольному аборту на ранних и поздних сроках беременности. Так, на 5-6 неделе гестации преобладают генетические аномалии, а также иммунологические факторы; на сроке 7-9 недель к выкидышу чаще приводят гормональные нарушения; в 10-16 недель доминирующими этиологическими факторами являются аутоиммунные нарушения и тромбофилии; после 16 недель основными причинами репродуктивных потерь являются инфекции, тромбофилии, истмико-цервикальная недостаточность, что в целом согласуется с данными литературы [20].
Хромосомные аномалии абортусов неразвивающейся беременности были выявлены в 41,1 % случаев, что несколько ниже по сравнению с результатами некоторых исследований, которые указывали на частоту хромосомных аномалий абортусов, достигающей 50 % [10]. Известно, что степень риска хромосомной патологии абортусов растет прямо пропорционально возрасту женщины, это подтвердилось результатами данного исследования [16; 21]. В структуре аномального кариотипа преобладают триплоидии в отличие от данных других авторов, что связано с широкой вариабельностью распространенности различных типов хромосомных патологий, а также многообразием патофизиологических механизмов, лежащих в основе формирования аномального кариотипа.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
В данном исследовании доказана высокая распространенность хромосомной патологии среди материала несостоявшегося выкидыша в I триместре. Несомненно, у пациенток старше 35 лет
выше риск возникновения генетически неполноценного плодного яйца, также в данной группе чаще встречались летальные трисомии. Однако триплоидии чаще возникали у молодых пациенток. При позднем выкидыше в данном исследовании абортусы имели нормальный кариотип.
Внедрение системы преконцепционной подготовки может способствовать снижению частоты хромосомных аномалий плодного яйца, а также профилактике остановки развития эмбриона (плода) с нормальным кариотипом.
ЛИТЕРАТУРА
1. Сидельникова В. М. Привычная потеря беременности. М.: Триада-Х; 2002.
2. Zini A. [et al.] Sperm DNA damage is associated with an increased risk of pregnancy loss after IVF and ICSI: systematic reviewand meta-analysis. Human reproduction. 2008;23(12):2663-2668. doi: 10.1093/humrep/den321
3. Larysa Y. Pylyp & Lyudmyla O. Spynenko & Nataliya V. Verhoglyad & Anna O. Mishenko & Dmytro O. Mykytenko & Valery D. Zukin. J Assist Reprod Genet. Chromosomal abnormalities in products of conception of first-trimester miscarriages detected by conventional cytogenetic analysis: a review of 1000 cases. Journal of Assisted Reproduction and Genetics. doi: 10.1007/ s10815-017-1069-1
4. Macklon N. S., Geraedts J. P., Fauser B. C. Conception to ongoing pregnancy: the 'black box' of early pregnancy loss. Human reproduction Update. 2002;8:333-43. doi: 10.1093/humupd/8.4.333
5. Nybo Andersen A. M., Wohlfahrt J., Christens P., Olsen J., Melbye M. Maternal age and fetal loss: population based register linkage study. BMJ. 2000;320:1708712. doi: 10.1136/bmj.320.7251.1708
6. Ugwumadu Ak, Manyonda I., Reid F., Hay P. Effect of early oral clindamycin on late miscarriage and preterm delivery in asymptomatic women with abnormal vaginal flora and bacterial vaginosis: a randomised controlled trial. Lancet. 2003;361:983-88. doi: 10.1016/S0140-6736(03)12823-1
7. Philipp T., Philipp K., Reiner A., Beer F., Kalousek D. K. Embryoscopic and cytogenetic analysis of 233 missed abortions: factors involved in the pathogenesis of developmental defects of early failed pregnancies. Human reproduction. 2003;18:1724-32. doi:10.1093/humrep/deg9
8. Спиридонова Н. В., Калинкина О. Б., Гильмияро-ва Ф. Н., Мелешкина О. И. Взаимосвязь неразвивающейся беременности с хромосомной патологией плода. Казанский медицинский журнал. 2013;94(5):748-51.
9. Schieve L. A., Tatham L., Peterson H. B. [et al.] Spontaneous abortion among pregnancies conceived using assisted reproductive technology in the United States. Obstet. Gynecol. 2003;101(5):959-67. doi: 10.1097/00006250-200305000-00024
10. Pflueger S. M. V. Cytogenetics of spontaneous abortions. The principles of clinical cytogenetics. New
2018, т. 8, № 1
ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ
Jersey: Humana Press. 2005;323-45. doi: 10.1385/159259-833-1:323
11. McKinlay Gardner R. J. Chromosome abnormalities and genetic counseling. New York: Oxford University Press. 2012;377-402. doi: 10.1093/ med/9780195375336.003.0021
12. Сидельникова В. М. Невынашивание беременности - современный взгляд на проблему. Российский вестник акушера-гинеколога. 2007;(2):62-64.
13. Burton G. J., Fowden A. L. The placenta: a multifaceted, transient organ. Phil. Trans. R. Soc. B. 2015;370(1663):2014-66.
14. Тихомирова С. В., Диунов А. Г, Палютина Е. Ю., Мешкова А. К., Смирнова Н. А. Анализ кариотипа плода при неразвивающейся беременности, наступившей естественым путем. Вестник Ивановской медицинской академии. 2015;20(2):34-39.
15. Bianco K., Caughey A. B., Shaffer B. L., Davis R., Norton M. E. History of miscarriage and increased incidence of fetal aneuploidy in subsequent pregnancy. Obstet Gynecol. 2006;107:1098-102. doi:10.1097/01. aog.0000215560.86673.22
16. Александрова Н. В. Структура хромосомной патологии при неразвивающейся беременности, наступившей в ходе использования вспомогательных репродуктивных технологий. Проблемы репродукции. 2012;(2):51-56.
17. Лаврушина Е. Н., Мелешкина О. И., Балдина О. А., Мурский С. И., Гильмиярова Ф. Н. Характеристика кариотипа супружеских пар с бесплодием. Медицинский альманах. 2017;47(2):108-110.
18. Reddy K. S. Double trisomy in spontaneous abortions. Hum Genet. 1997;101:339-45. doi:10.1007/ s004390050638
19. Micale M., Insko J., Ebrahim S. A., Adeyinka A., Runke C., Van Dyke D. L. Double trisomy revisited - a multicenter experience. Prenat Diagn. 2010;30:173-176. doi:10.1002/pd.2429
20. Иванов И. И., Черипко М. В., Могилевская А. А., Косолапова Н. В., Прочан Е. Н. Этиологические аспекты репродуктивных потерь. Таврический медико-биологический вестник. 2013;16(2):181-187.
21. Stephenson M. D., Awartani K. A., Robinson W. P. Cytogenetic analysis of miscarriages from couples with recurrent miscarriage: a case-control study. Hum Reprod. 2002 Feb;17(2):446-451. doi:10.1093/humrep/17.2.446
REFERENSES
1. Sidel'nikova V. M. Privychnaya poterya beremennosti. M. : Triada-Kh; 2002. (In Russ)
2. Zini A. [et al.] Sperm DNA damage is associated with an increased risk of pregnancy loss after IVF and ICSI: systematic reviewand meta-analysis. Human reproduction. 2008;23(12):2663-68. doi: 10.1093/humrep/den321
3. Larysa Y. Pylyp & Lyudmyla O. Spynenko & Nataliya V. Verhoglyad & Anna O. Mishenko & Dmytro O. Mykytenko & Valery D. Zukin. J Assist Reprod Genet.
Chromosomal abnormalities in products of conception of first-trimester miscarriages detected by conventional cytogenetic analysis: a review of 1000 cases. Journal of Assisted Reproduction and Genetics. doi: 10.1007/ s10815-017-1069-1
4. Macklon N. S., Geraedts J. P., Fauser B. C. Conception to ongoing pregnancy: the 'black box' of early pregnancy loss. Human reproduction Update. 2002;8:333-43. doi: 10.1093/humupd/8.4.333
5. Nybo Andersen A. M., Wohlfahrt J., Christens P., Olsen J., Melbye M. Maternal age and fetal loss: population based register linkage study. BMJ. 2000;320:1708-12. doi: 10.1136/bmj.320.7251.1708
6. Ugwumadu A., Manyonda I., Reid F., Hay P. Effect of early oral clindamycin on late miscarriage and preterm delivery in asymptomatic women with abnormal vaginal flora and bacterial vaginosis: a randomised controlled trial. Lancet. 2003;361:983-88. doi: 10.1016/S0140-6736(03)12823-1
7. Philipp T., Philipp K., Reiner A., Beer F., Kalousek D. K. Embryoscopic and cytogenetic analysis of 233 missed abortions: factors involved in the pathogenesis of developmental defects of early failed pregnancies. Human reproduction. 2003;18:1724-1732. doi:10.1093/humrep/ deg9
8. Spiridonova N. V., Kalinkina O. B., Gil'miyarova F. N., Meleshkina O. I. Vzaimosvyaz' nerazvivayushcheisya beremennosti s khromosomnoi patologiei ploda. Kazanskii meditsinskii zhurnal. 2013;94(5):748-51 (In Russ)
9. Schieve L. A., Tatham L., Peterson H. B. [et al.] Spontaneous abortion among pregnancies conceived using assisted reproductive technology in the United States. Obstet. Gynecol. 2003;101(5):959-67. doi: 10.1097/00006250-200305000-00024
10. Pflueger S. M. V. Cytogenetics of spontaneous abortions. The principles of clinical cytogenetics. New Jersey: Humana Press. 2005;323-345. doi: 10.1385/159259-833-1:323
11. McKinlay Gardner R. J. Chromosome abnormalities and genetic counseling. New York: Oxford University Press. 2012;377-402. doi: 10.1093/ med/9780195375336.003.0021
12. Sidel'nikova V. M. Nevynashivanie beremennosti sovremennyi vzglyad na problemu. Akush. I gin. 2007;(2):62-64. (In Russ)
13. Burton G. J., Fowden A. L. The placenta: a multifaceted, transient organ. Phil. Trans. R. Soc. B. 2015;370(1663):2014-66.
14. Tikhomirova S. V., Diunov A. G., Palyutina E. Yu., Meshkova A. K., Smirnova N. A. Analiz kariotipa ploda pri nerazvivayushcheisya beremennosti, nastupivshei estestvenym putem. Vestnik Ivanovskoi meditsinskoi akademii. 2015;20(2):34-39. (In Russ)
15. Bianco K., Caughey A. B., Shaffer B. L., Davis R., Norton M. E. History of miscarriage and increased incidence of fetal aneuploidy in subsequent pregnancy.
Obstet Gynecol. 2006;107:1098-102. doi:10.1097/01. aog.0000215560.86673.22
16. Aleksandrova N. V. Struktura khromosomnoi patologii pri nerazvivayushcheisya beremennosti, nastupivshei v khode ispol'zovaniya vspomogatel'nykh reproduktivnykh tekhnologi. Problemy reproduktsii. 2012;(2):51-56. (In Russ)
17. Lavrushina E. N., Meleshkina O. I., Baldina O. A., Murskii S. I., Gil'miyarova F. N. Kharakteristika kariotipa supruzheskikh par s besplodiem Meditsinskii al'manakh. 2017;47(2):108-110 (In Russ)
18. Reddy K. S. Double trisomy in spontaneous abortions. Hum Genet. 1997;101:339-45. doi:10.1007/ s004390050638
19. Micale M., Insko J., Ebrahim S. A., Adeyinka A., Runke C., Van Dyke D. L. Double trisomy revisited - a multicenter experience. Prenat Diagn. 2010;30:173-6. doi:10.1002/pd.2429
20. Ivanov I. I., Cheripko M. V., Mogilevskaya A. A., Kosolapova N. V., Prochan E. N. Etiologicheskie aspekty reproduktivnykh poter'. Tavricheskii mediko-biologicheskii vestnik. 2013;16(2):181-187.
21. Stephenson M. D., Awartani K. A., Robinson W. P. Cytogenetic analysis of miscarriages from couples with recurrent miscarriage: a case-control study. Hum Reprod. 2002 Feb;17(2):446-51. doi:10.1093/humrep/17.2.446
