CC BY
28
УДК 616.921.5; 578.7
АНАЛИЗ ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКОЙ СИТУАЦИИ ПО ГРИППУ НА ЮГЕ ЗАПАДНОЙ СИБИРИ В 2012-2013 гг.
Ольга Григорьевна КУРСКАЯ17, Александр Гаврилович ДУРЫМАНОВ27, Иван Андреевич СОБОЛЕВ17, Евгения Викторовна ИВАНОВА3, Светлана Николаевна ГРЕЧКО4, Наталья Валерьевна ЛОГИНОВСКИХ4, Людмила Михайловна ГОРБАТОВСКАЯ5, Владимир Сергеевич БЕСПАЛОВ6, Татьяна Николаевна ИЛЬИЧЕВА27, Валерий Николаевич МИХЕЕВ2, Александр Борисович РЫЖИКОВ2
1 ФГБУ Научный центр клинической и экспериментальной медицины СО РАМН 630117, г. Новосибирск, ул. Тимакова, 2
2 ФБУН ГНЦ ВБ Вектор Роспотребнадзора 630559, Новосибирская обл., р.п. Кольцово
3 ФБУЗ Центр гигиены и эпидемиологии в Новосибирской области Роспотребнадзора 630099, г. Новосибирск, ул. Фрунзе, 84
4 ФБУЗ Центр гигиены и эпидемиологии в Омской области Роспотребнадзора 644116, г. Омск, ул. 27-я Северная, 42А
5 ГБУЗ НСО Доволенская ЦРБ
632451, Новосибирская обл., Доволенскийр-н, с. Довольное, ул. Ленина, 123
6 ГБУЗ НСО Кольцовская РБ № 1 630559, Новосибирская обл., р.п. Кольцово
7 ФГБОУ ВПО Новосибирский национальный исследовательский государственный университет 630090, г. Новосибирск, ул. Пирогова, 2
В ходе мониторинга гриппа в Западной Сибири в течение сезона 2012-2013 гг. выделено 196 штаммов вируса гриппа на культуре клеток МОСК, в том числе 85 штаммов вируса гриппа А(Н3№), 100 штаммов вируса гриппа В (в подавляющем большинстве представители линии Ямагата) и 11 штаммов вируса гриппа A(H1N1)pdm09. Анализ антигенных свойств выделенных штаммов показал, что все изоляты были вариантами штаммов, входящих в состав поливалентной гриппозной вакцины.
Ключевые слова: вирус гриппа, гемагглютинин, нейраминидаза, молекулярно-генетический анализ, эпидемический сезон 2012-2013 гг.
Курская О.Г. - к.м.н., научный сотрудник, e-mail: kurskaya_og@mail.ru Дурыманов А.Г. - старший научный сотрудник, e-mail: gavrilych51@mail.ru Соболев И.А. - младший научный сотрудник, e-mail: sobolev_i@hotmail.com Иванова Е.В. - зав. вирусологической лабораторией, e-mail: cgnso@cn.ru Гречко С.Н. - врач-вирусолог, e-mail: polioom@mail.ru
Логиновских Н.В. - зав. вирусологичeской лабораторий, e-mail: polioom@mail.ru Горбатовская Л.М. - зам. главного врача по лeчeбной части, e-mail: dvl_crb@online.sinor.ru Беспалов В.С. - главный врач, e-mail: nrb-kolcovo@online.nsk.su
Ильичева Т.Н. - к.б.н., доцeнт кафeдры молeкулярной биологии, зав. лабораторий отдeла зоонозных инфeкций и гриппа, e-mail: ilyichev@mail.ru
Михеев В.Н. - к.м.н., зам. гeнeрального дирeктора по научной и эпидeмиологичeской работe, e-mail: vector@vector.nsc.ru
Рыжиков А.Б. - к.б.н., зав. отдeлом зоонозных инфeкций и гриппа, e-mail: ryzhik@vector.nsc.ru
Вирусы гриппа представляют собой постоянную проблему глобального общественного здравоохранения [7]. Из трех типов вируса гриппа, циркулирующих в человеческой популяции, вирус гриппа А представляет наибольшую эпидемиологическую значимость вследствие его более быстрой антигенной изменчивости по сравнению с вирусами гриппа В и С и способности вызывать пандемии. Однако в последние десятилетия резко усилилась активность вирусов гриппа В: эпидемии в нашей стране стали отмечаться значительно чаще, через 1-2 года, а с 1993 г. - практически ежегодно [3]. С этого времени эпидемические сезоны в России характеризовались сочетанной циркуляцией вирусов гриппа А и В [1]. Известно, что линии вируса гриппа В (В/У^ойа/2/87 и B/Yamagata/16/88) различаются генетически и по антигенным свойствам, и антитела к вирусам одной линии не являются протективными в отношении вирусов другой линии [8].
В 2009-2010 гг. зарегистрирована первая пандемия гриппа XXI в., она была вызвана вирусом A(H1N1)pdm09. В пандемический период грипп носил моноэтиологический характер с преимущественным вовлечением в эпидемический процесс лиц молодого возраста.
Эпидемический сезон 2010-2011 гг., в отличие от пандемического периода, носил полиэтиологический характер: помимо вируса гриппа A(H1N1)pdm09, являвшегося доминирующим в том сезоне, выделялись вирусы гриппа A(H3N2) и В. Однако возрастное распределение заболевания, вызванного вирусом A(H1N1)pdm09, было более характерным для пандемии: тяжелые случаи с развитием осложнений и летальных исходов чаще наблюдались у лиц моложе 65 лет. Перечень фоновых состояний, связанный с развитием тяжелых форм инфекции, также был аналогичен сезону 2009-2010 гг.: ожирение, хронические болезни сердца и органов дыхания, диабет, иммунодефицитные состояния и беременность. В связи с этим некоторые эксперты считают, что в эпидемическом сезоне 2010-2011 гг. наблюдалась третья волна пандемии гриппа А(НШ1) pdm09 [2, 6].
В сравнении с предыдущим эпидемический сезон 2011-2012 гг. полностью отвечал всем критериям сезона постпандемического периода. Вирус A(H1N1)pdm09 не был доминирующим в эпидемическом процессе, заболевание вызывали в основном вирусы гриппа А(Н3№) и В двух генетических линий (Ямагата и Виктория).
Целью данной работы явился анализ эпидемиологической ситуации по гриппу в Западной Сибири в 2012-2013 гг.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Работа выполнена в ФБУН ГНЦ ВБ Вектор, в ФБУЗ Центр гигиены и эпидемиологии в Новосибирской области, ФБУЗ Центр гигиены и эпидемиологии в Омской области. Проведение работ с клиническими образцами одобрено решением комитета по биомедицинской этике при ФГБУ Научный центр клинической и экспериментальной медицины СО РАМН (решение № 25 от 19.11.2012).
В ФБУН ГНЦ ВБ Вектор клинический материал (мазки из носа и зева) от пациентов с диагнозом «острая респираторная вирусная инфекция» получены из Новосибирской районной больницы № 1 (р. п. Кольцово) и центральной районной больницы Доволенского района Новосибирской области. Образцы, предварительно тестированные методом ПЦР как положительные на присутствие РНК вируса гриппа, получены из ФБУЗ Центр гигиены и эпидемиологии городов Барнаул, Ханты-Мансийск, Тюмень. В ФБУЗ Центр гигиены и эпидемиологии в Новосибирской области и в ФБУЗ Центр гигиены и эпидемиологии в Омской области образцы поступали из лечебно-профилактических учреждений соответственно городов Новосибирска и Омска. Все образцы поступали в пробирках с транспортной средой, помещенные в термоконтейнер с хладо-элементами или в сосуд Дьюара с жидким азотом.
Выделение изолятов проводили в культуре клеток MDCK линии Лондон путем заражения монослоя клеток. Для этого пробирку с транспортной средой, содержащей образец, центрифугировали при 5000 об/мин в течение 5 мин, после чего 200 мкл образца вносили во флакон с суточным монослоем клеток MDCK. Инфицированные культуры инкубировали при температуре 37 оС. Репродукцию вируса контролировали визуально по цитопатическому действию и в реакции гемаг-глютинации (РГА) с эритроцитами петуха, гуся, морской свинки и человека группы 0(I)Rh-.
Типирование/субтипирование выделенных изолятов вируса гриппа и изучение их антигенных свойств выполняли в реакции торможения гемагглютинации (РТГА) по рекомендованной ВОЗ методике [9], используя постинфекционные хорьковые референс-сыворотки, любезно предоставленные Сотрудничающим Центром ВОЗ по гриппу (Атланта, США). Данные РТГА подтверждали методом ПЦР с детекцией результатов в режиме реального времени. Для этого использовали набор реагентов для выявления РНК вирусов гриппа А (InfluenzavirusA) и вируса гриппа В (InfluenzavirusВ) методом ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией
«АмплиСенсInfluenzavirusA/B-FL» и набор для типирования (идентификации субтипов НШ1 и №N2) вирусов гриппа А (InfluenzavirusA) «АмплиСенсInfluenzavirusA-тип-FL» производства ФГУН Центральный НИИ эпидемиологии Роспотребнадзора (Москва).
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Клинический материал, представляющий собой мазки из носа и зева, собирался медицинским персоналом лечебно-профилактических учреждений у лиц с симптомами острой респираторной вирусной инфекции (ОРВИ) в первые трое суток от начала клинических проявлений. Сбор проб производился в период с декабря 2012 г. по июнь 2013 г. Всего в течение сезона проанализировано 1287 образцов. Половозрастная структура выборки представлена в табл. 1.
Всего из полученных образцов при заражении культуры клеток MDCK выделено 196 штаммов вируса гриппа, из них 100 штаммов относились к вирусу гриппа В, 85 - к вирусу гриппа А(Н3№) и 11 штаммов были вариантами вируса А(НШ1) pdm09. Первые штаммы вируса гриппа выделены в г. Новосибирске в декабре 2012 г. и относились к вирусу гриппа А(Н3№). Наибольший процент выделения вируса гриппа пришелся на 7-8-ю недели (11-24 февраля 2013 г.) (см. рисунок). Около 70 % образцов собрано от детей, в то время как наибольший процент выделения вируса гриппа был отмечен в возрастной группе 18-35 лет (24,8 %).
Индикацию наличия вируса в культуральной жидкости проводили с помощью реакции гемаг-глютинации с разными видами эритроцитов: петуха, гуся и морской свинки. При этом для изо-лятов вируса гриппа A(H1N1)pdm09 и А(Н3№) наибольшие титры в РГА наблюдались при использовании эритроцитов морской свинки, в то время как изоляты вируса гриппа В агглютинировали весь спектр эритроцитов в близких титрах
\ I I 11111111111111
50 51 52 53 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 Недели
|А(НЗ№) | |А(НМ1)р<1т09 ^^ В
Рис. Динамика выделения вируса гриппа в эпидемическом сезоне 2012-2013 гг.
(титры в РГА с разными видами эритроцитов различались не более чем в 4 раза).
Штаммы вируса гриппа В в эпидемическом сезоне 2012-2013 гг. составили 51 % от всех выделенных штаммов, при этом 73 % штаммов получено от детей. Подавляющее большинство штаммов вируса гриппа В, выделенных в 20122013 гг. в Западной Сибири, принадлежали к линии Ямагата и по антигенным свойствам были подобны B/Wisconsin/01/2010. Следует отметить, что в 2008-2011 гг. в Западной Сибири выделялись штаммы вируса гриппа В только Викторианской линии. В сезоне 2011-2012 гг. впервые за несколько последних лет была зафиксирована совместная циркуляция штаммов обеих генетических линий (Ямагата и Виктория), причем отмечалось преобладание линии Ямагата [5].
Среди вирусов гриппа А доминирующим во время сезона 2012-2013 гг. в Западной Сибири являлся вирус гриппа А(Н3№). Он составил 88,5 % от всех выделенных штаммов вируса гриппа А. Серологический анализ антигенных свойств штаммов вируса гриппа А(Н3№) показал, что большинство штаммов сезона 20122013 гг. проявляло максимальное сродство к сыворотке, полученной на вакцинный штамм
Таблица 1
Половозрастная структура выборки
Группа Количество собранных образцов Количество выделенных штаммов
НШ1рёт09 Н3Ш В Всего
Мужчины 605 3 27 52 82
Женщины 682 8 58 48 114
< 18 лет 899 3 40 73 116
18-35 лет 222 4 37 14 55
36-59 лет 137 4 5 10 19
> 60 лет 29 - 3 3 6
Всего 1287 11 85 100 196
А/\1Сю11а/361/2011: ни у одного проанализированного штамма не наблюдалось снижения титра в РТГА с данной сывороткой более чем в 4 раза по сравнению с гомологичным штаммом (табл. 2).
Штаммы вируса гриппа A(H1N1)pdm09 во время эпидемического сезона 2012-2013 гг.
выделены в Омской, Тюменской областях и Ханты-Мансийском автономном округе от детей и лиц молодого и среднего возраста. По антигенным свойствам все они были подобны А/СаШгша/07/2009 (табл. 3).
Таблица 2
Антигенные свойства штаммов вируса гриппа А(H3N2), выделенных в эпидемическом сезоне 2012-2013 гг. (РТГА с хорьковыми референс-сыворотками и эритроцитами морской свинки)
Штамм вируса гриппа Референс-сыворотка
A/Brisbane/10/2007 A/Perth/16/2009 A/Victoria/361/2011
А/БпзЬапе/10/2007 640 80 —
А/РегШ/16/2009 20 640 640
А/У1е1опа/361/2011 80 80 640
A/Novosibirsk/76/2012 40 40 160
A/Novosibirsk/77/2012 40 40 160
A/Novosibirsk/04/2013 40 40 160
A/Novosibirsk/02/2013 80 40 160
A/Novosibirsk/46/2013 80 40 160
A/Novosibirsk/58/2013 80 40 160
A/Novosibirsk/08/2013 80 40 320
A/Novosibirsk/12/2013 80 40 320
A/Novosibirsk/31/2013 80 40 320
A/Novosibirsk/55/2013 80 40 320
A/Novosibirsk/66/2013 80 40 320
A/Novosibirsk/27/2013 160 40 320
A/Omsk/25/2013 80 40 320
A/Omsk/39/2013 160 40 320
A/Omsk/44/2013 160 40 320
A/Omsk/63/2013 160 40 320
A/Novosibirsk/79/2012 40 40 640
A/Novosibirsk/17/2013 160 80 640
A/Omsk/23/2013 160 80 640
A/Omsk/54/2013 160 80 640
Таблица 3
Антигенные свойства штаммов вируса гриппа А(H1N1)pdm09, выделенных в эпидемическом сезоне 2012-2013 гг. (РТГА с хорьковыми референс-сыворотками и эритроцитами гуся)
Штамм вируса гриппа Референс-сыворотка
A/California/07/2009 A/Mexico/254/2012 A/Maryland/13/2012 A/Florida/27/2011
А/СаШогша/07/2009 (НШ1)раш09 1280 1280 1280 1280
А/Мех1ео/254/2012 (НШ1)раш09 2560 2560 2560 1280
А/Магу1апМ13/2012 (НШ1)раш09 1280 2560 2560 1280
АШопаа/27/2011 (НШ1)раш09 2560 2560 2560 2560
A/KMAO/81/2013 2560 2560 2560 1280
A/KMAO/91/2013 2560 2560 2560 1280
A/KMAO/113/2013 5120 5120 5120 5120
A/KMAO/115/2013 5120 5120 5120 5120
A/KMAO/243/2013 2560 2560 2560 2560
В эпидемическом сезоне 2012-2013 гг. для большинства стран, по данным ВОЗ, было характерно более раннее начало эпидемического сезона по гриппу и ОРВИ по сравнению с предыдущим сезоном. В странах Западной Европы эпидемический подъем заболеваемости зарегистрирован с конца декабря. В разных странах Северного полушария доминировали разные типы/субтипы вируса гриппа. Так, в европейских странах доминирующим являлся вирус гриппа Л(НШ1^т09 [9], в то время как в США, Китае и Японии преимущественно циркулировал вирус гриппа Л(Н3Ш) [4].
В Российской Федерации, как и в большинстве стран Европы, эпидемический подъем заболеваемости гриппом и ОРВИ был зарегистрирован с начала 2013 года. Пик подъема заболеваемости наблюдался на 9-й неделе года, когда было зарегистрировано наиболее широкое географическое распространение эпидемии. В начале эпидсезона с одинаковой частотой циркулировали вирусы гриппа А(Н1N1)pdm09 и А(Н3№), в то время как на пике заболеваемости вирус гриппа А(НШ1) pdm09 стал доминирующим. На последних неделях эпидсезона преобладали вирусы гриппа А(Н3Ш) и вируса гриппа В [9].
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Таким образом, эпидемический сезон по гриппу 2012-2013 гг. в Западной Сибири носил полиэтиологический характер с преимущественной циркуляцией вируса гриппа A(H3N2) и гриппа В линии Ямагата. Всего в течение эпидемического сезона 2012-2013 гг. выделено 196 штаммов вируса гриппа (11 штаммов вируса гриппа Л(H1N1)pdm09, 85 - гриппа Л(H3N2) и 100 - вируса гриппа В). По антигенным свойствам проанализированные штаммы были подобны штаммам, входящим в состав трехвалентной гриппозной вакцины, рекомендованной на сезон 2012-2013 гг.
Исследование выполнено при поддержке Министерства образования и науки Российской Федерации (Соглашение № 14.В37.21.1927).
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Грипп: эпидемиология, диагностика, лечение, профилактика / Ред. О.И. Киселев, Л.М. Цыбалова, В.И. Покровский. М.: Медицинское информационное агентство, 2012. 496 с.
2. Карпова Л.С. Сравнение эпидемий гриппа в России 2009 и 2011 годов, вызванных пандемическим вирусом гриппа A(H1N1) // Эпидемиология и вакцинопрофилактика. 2011. (5). 6-15.
3. Литвинова О.М., Смородинцева Е.А., Дее-ва Э.Г. и др. Этиология современного гриппа // Эпидемиология и вакцинопрофилактика. 2001. (1). 5-9.
4. Об итогах распространения гриппа и ОРВИ в мире и Российской Федерации в эпидсезон 20122013 гг. и прогнозе на эпидсезон 2013-2014 гг. // Письмо от 24.06.2013 № 01/7080-13-32. http:// rospotrebnadzor.ru/documen/letters/-/asset_publisher/ lJ7j/content
5. Соболев И.А., Курская О.Г., Иванова Е.В. и др. Эпидемиологическая ситуация по гриппу на юге Западной Сибири в 2011-2012 гг. // Бюл. ВСНЦ СО РАМН. 2012. (5, ч. 1). 122-126.
6. Galiano M., Agapow P.M., Thompson C. et al. Evolutionary pathways of the pandemic influenza A (H1N1) 2009 in the UK // PLoS One. 2011. 6. (8). e23779.
7. Katz J.M, Hancock K., Xu X. Serologic assays for influenza surveillance, diagnoses and vaccine evaluation // Expert Rev. Anti Infect. Ther. 2011. 9(6). P. 669-683.
8. Tsai H.P., Wang H.C., Kiang D. et al. Increasing appearance of reassortant influenza B virus in Taiwan from 2002 to 2005 // J. Clin. Microbiol. 2006. 44. 2705-2713.
9. WHO Influnza centre, London. Report prepared for the WHO annual consultation on the composition of influenza vaccine for the Northern Hemisphere February 2013. http://www.nimr.mrc.ac.uk/documents/ about/interim-report-feb-2013.pdf.
ANALYSIS OF THE INFLUENZA EPIDEMIOLOGY IN THE SOUTH-WESTERN SIBERIA IN 2012-2013
Olga Grigor'evna KURSKAYA17, Alexander Gavrilovich DURYMANOV27, Ivan Andreevich SOBOLEV17, Evgenia Viktorovna IVANOVA3, Svetlana Nikolaevna GRECHKO4, Natalya Valer'evna LOGINOVSKIKH4, Lyudmila Mikhailovna GORBATOVSKAYA5, Vladimir Sergeevich BESPALOV6, Tatyana Nikolaevna ILYICHEVA2,7, Valery Nikolaevich MIKHEEV2, Alexander Borisovich RYZHIKOV2
1 Research Center of Clinical and Experimental Medicine of SB RAMS Russia, 630117, Novosibirsk, Timakov str., 2
2 State Research Center of Virology and Biotechnology «Vector» Russia, 630559, Koltsovo, «Vector»
3 Federal Budgetary Health Institution «Center of hygiene and epidemiology in Novosibirsk region», Russia, 630099, Novosibirsk, Frunze str., 84
4 Federal Budgetary Health Institution «Center of hygiene and epidemiology in Omsk region», Russia, 644116, Omsk, 27-ya Severnaya str., 42A
5 Municipal Budgetary Health Institution «Dovolnoe central regional hospital» Russia, 632451, Dovolnoe, Lenin str., 123
6 State Budgetary Health Institution of Novosibirsk Region «Koltsovo regional hospital № 1», Russia, 630559, Koltsovo
7 Novosibirsk State University,
Russia, 630090, Novosibirsk, Pirogov str., 2
When monitoring influenza in Western Siberia in the season of 2012-2013 we isolated 196 influenza virus strains in MDCK cell culture, including 85 A/H3N2 strains, 100 influenza B virus strains (Yamagata lineage was predominant), and 11 influenza A/H1N1pdm09 virus strains. Antigenic features of isolated strains were analyzed. It was shown that all strains were variants of those strains that are used in the compound of polyvalent anti-influenza vaccine.
Key words: influenza virus, hemagglutinin, neuraminidase, molecular genetic analysis, epidemic season of 20122013.
Kurskaya O.G. - candidate of medical sciences, researcher, e-mail: kurskaya_og@mail.ru
Durymanov A.G. - senior researcher, e-mail: gavrilych51@mail.ru
Sobolev I.A. - junior researcher, e-mail: sobolev_i@hotmail.com
Ivanova E.V. - head of virology laboratory, e-mail: cgnso@cn.ru
Grechko S.N. - physician-virologist, e-mail: polioom@mail.ru
Loginovskikh N.V. - head of virology laboratory, e-mail: polioom@mail.ru
Gorbatovskaya L.M. - deputy chief physician of the medical part, e-mail: dvl_crb@online.sinor.ru Bespalov V.S. - chief physician, e-mail: nrb-kolcovo@online.nsk.su
Ilyicheva T.N. - candidate of biological sciences, Associate Professor of Novosibirsk State University, head of laboratory, e-mail: ilyichev@mail.ru
Mikheev V.N. - candidate of medical sciences, deputy director for research and epidemiological work, e-mail: vector@vector.nsc.ru
Ryzhikov A.B. - candidate of biological sciences, head of department of zoonotic infections and influenza, e-mail: ryzhik@vector.nsc.ru
