CC BY
80
Перейти в содержание Вестника РНЦРР МЗ РФ N13
Текущий раздел: Молекулярная медицина
Анализ экспрессии генов в фиброаденоме молочной железы.
Боженко В.К.1, Харченко Н.В.2, Кудинова Е.А.1, Пасько М. А.1, Фролов И. С.1, Ооржак А.В.1, ТроценкоИ.Д.2
1 ФГБУ «Российский научный центррентгенорадиологии» Минздрава РФ, г. Москва 2Кафедра онкологии и рентгенорадиологии РУДН, г. Москва
Адрес документа для ссылки: http://vestnik.rncrr.ru/vestnik/v13/papers/oorzhak_v13.htm Статья опубликована 30 ноября 2013 года.
Контактная информация:
Рабочий адрес: 117997, Москва, ГСП-7, ул.Профсоюзная, д.86, ФГБУ «РНЦРР» МЗ РФ Боженко Владимир Константинович - д.м.н., профессор, руководитель отдела патоморфологии и лабораторной диагностики ФГБУ РНЦРР Минздравсоцразвития Vboienko@mail.ru
Харченко Н.В. - член-корр. РАЕН, профессор, заведующая кафедры онкологии и рентгенорадиологии РУДН
Кудинова Елена Александровна - к.м.н., заведующая клинико-диагностической лабораторией ФГБУ РНЦРР Минздравсоцразвития, раб.тел.:+7(499)120-11-14 Троценко Иван Дмитриевич - к.м.н., ассистент кафедры онкологии и рентгенорадиологии РУДН
Пасько Максим Андреевич - аспирант ФГБУ «РНЦРР» Минздравсоцразвития России Фролов Иван Сергеевич - аспирант ФГБУ «РНЦРР» Минздравсоцразвития России Ооржак Айлан Владимировна - аспирант ФГБУ «РНЦРР» Минздравсоцразвития России, aylan08@mail.ru Контактное лицо:
Ооржак Айлан Владимировна, 8(926)6506966, e-mail: aylan08@mail.ru
Резюме
Введение: Фиброаденома (ФА) является одним из самых распространенных доброкачественных заболеваний молочной железы у молодых женщин, факторы риска, а также механизмы развития которого остаются малоизученными. Понимание механизмов контроля пролиферации, апоптоза и
межклеточных взаимодействий в доброкачественных образованиях может позволить более дифференцированно анализировать процессы малигнизации.
Материалы и методы: В 36 образцах ткани молочной железы (18 ФА и 18 образцов морфологически неизмененной ткани (МНТ) молочной железы) методом ПЦР в реальном времени (RT-ПЦР) был проведен сравнительный анализ экспрессии мРНК KI67, BIRC5, ESR1, PRG и MMP11.
Результаты: В ткани ФА по сравнению с МНТ был статистически значимо выше уровень экспрессии KI67 (p=0,0112), BIRC5 (p=0,0018), MMP11 (p=0,007), а также тенденция в отношении PGR (р=0,077). Уровень экспрессии ESR1 не отличался (р=0,32). Кроме того, для ФА обнаружена положительная корреляция экспрессии PGR и MMP11 (r=0,47; p=0,042), чего не наблюдалось в МНТ (r=0,11; p=0,65).
Заключение: Отличие уровней экспрессии генов в ФА и МНТ может свидетельствовать о
существовании различных механизмов контроля метаболической активности. Анализ механизмов взаимодействия PGR и матриксных металлопротеиназ требует дальнейшего изучения.
Ключевые слова: экспрессия генов, фиброаденома, прогестерон, MMP
Gene expression analysis in breast fibroademoma
Bojenko V.K.1, Kharchenko N.V.2, Kudinova E.A., Pas'ko M.A.1, Frolov I.S.1, Oorzhak A.V.1, Trotsenko I.D.2
1 Federal State Budget Establishment "Russian Scientific Center of Roentgen Radiology" (RNCRR) Russian Ministry of Health, Moscow.
2 RPFU Oncology and Radiology Department, Moscow.
Contact information:
Address: 117997, Moscow, Profsoyuznaya str., 86, "RNCRR"
Bojenko V.K. - prof. Federal State Budget Establishment "Russian Scientific Center of Roentgen Radiology" (RNCRR) Russian Ministry of Health.
Kharchenko N.V. - prof. RPFU Oncology and Radiology department.
Kudinova E.A. - PhD Federal State Budget Establishment "Russian Scientific Center of Roentgen Radiology" (RNCRR) Russian Ministry of Health.
Trotsenko I.D. - PhD RPFU Oncology and Radiology department.
Pas'ko M.A. - postgraduate stud. Federal State Budget Establishment "Russian Scientific Center of Roentgen Radiology" (RNCRR) Russian Ministry of Health.
Frolov I.S. - postgraduate stud. Federal State Budget Establishment "Russian Scientific Center of Roentgen Radiology" (RNCRR) Russian Ministry of Health.
Oorzhak A.V. - postgraduate stud. Federal State Budget Establishment "Russian Scientific Center of Roentgen Radiology" (RNCRR) Russian Ministry of Health.
Summary
Introduction: Breast fibroadenoma (FA) is one of the most common benign breast diseases in young women. However, we don’ t know exact mechanisms of its growth and development. Detailed analysis of proliferation, apoptosis, and cellular interactions in benign breast diseases may help in deeper understanding of neoplastic diseases.
Materials and methods: We assessed expression level of KI67, BIRC5, ESR1, PGR andMMP11 mRNA in 36 breast tissue samples (18 FA and 18 surrounding breast tissue (SBT)) by real-time PCR.
Results: KI67 (p=0,0112), BIRC5 (p=0,0018), MMP11 (p=0,007) and PGR expression level in fibroadenomas was higher in comparison with SBT. There was no statistically significant difference between FA and SBT ESR1 expression level (p=0,32). Besides, we found positive correlation between PGR and MMP11 expression level in FA (r=0,47; p=0,042), but not in SBT (r=0,11; p=0,65).
Conclusion: The difference in gene expression levels in FA and SBT could indicate that different mechanisms of metabolic control were activated in normal and neoplastic breast tissue. Mechanisms of interaction between PGR and matrix metalloproteinases requires further study.
Keywords: gene expression, fibroadenoma, progesterone, MMP
Оглавление:
Введение
Материалы и методы Результаты Обсуждение Список литературы
Введение
Фиброаденома является одним из самых распространенных доброкачественных заболеваний молочной железы, которое, как правило, диагностируется у молодых женщин. Факторы риска появления фиброаденомы, а также динамика изменения размера остаются мало изученными. Эпителиальные клетки в составе фиброаденомы экспрессируют рецептор стероидных гормонов (эстрогена, прогестерона), кроме того, такие факторы как возраст, паритет и стероидные гормоны влияют на скорость роста фиброаденомы. Изучение отличий экспрессии генов в ФА при сравнении с неизмененной тканью молочной железы может помочь в описании патогенеза развития
доброкачественных образований. В ряде исследований продемонстрировано, что фиброаденома является поликлональным образованием, что может свидетельствовать о гиперпластическом, а не неопластическом характере ее роста (Noguchi et al., 1992). С другой стороны, пролиферативная активность фиброаденомы остается постоянной в различные фазы менструального цикла (Rego et al., 2009), что указывает на некоторую независимость контроля пролиферации от внешних стимулов.
Механизмы контроля пролиферативной активности фиброаденомы описаны недостаточно. Во многих исследованиях ткань фиброаденомы используется в качестве «контрольной группы» при сравнительном анализе с образцами рака молочной железы, которые являются основной мишенью для исследователей (Corleta et al., 1996; La Rosa et al., 2001). Важность анализа механизмов контроля пролиферации, апоптоза и инвазии в клетках фиброаденомы, сочетающей черты гиперпластического и неопластического процессов, незаслуженно, на наш взгляд, недооценивается. Возможно, это связано с благоприятным клиническим течением и низкой вероятностью малигнизации (Харченко, Рожкова, 2009).
Результаты исследований свидетельствуют о роли стероидных гормонов, в частности прогестерона, и факторов роста в контроле процессов пролиферации и апоптоза (Corleta et al., 1996; La Rosa et al., 2001). В данном исследовании с помощью метода полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР) был проведен сравнительный анализ уровней экспрессии мРНК маркера пролиферации KI67, ингибитора апоптоза BIRC5, рецепторов стероидных гормонов (эстрогена-а и прогестерона-А), а также матриксной металлопротеиназы ММР11 в образцах неизмененной ткани молочной железы и фиброаденомы.
Перейти в оглавление статьи >>>
Материалы и методы
Всего было исследовано 36 образцов ткани молочной железы, из них 18 образцов фиброаденомы и 18 образцов неизмененной ткани молочной железы, локализованной вне опухоли в качестве контрольной группы. Средний возраст больных составил 34,7±8,9 лет. Меструальная функция у всех участниц исследования была сохранна. По гистологическому строению в 63% случаев опухоль представляла собой смешанную фиброаденому. Более чем в 70% размер первичной опухоли не превышал 2,5 см.
После экспертного патоморфологического анализа образец ткани ФА и образец морфологически неизмененной ткани (МНТ) ипсилатеральной молочной железы, полученной на расстоянии не менее 3 см от края опухоли, помещали в РНК-
стабилизирующий раствор. Выделение РНК проводили согласно инструкции с помощью наборов реагентов для выделения РНК RNeasy Plus Mini Kit (Qiagen, USA).
В исследовании проводилась оценка экспрессии маркера пролиферации KI67, ингибитора апоптоза BIRC5, рецепторов стероидных гормонов ESR1 и PGR, а также матриксной металлопротеиназы ММР11 как маркера инвазионной активности. Реакцию обратной транскрипции ставили, используя наборы НПО «ДНК Технология» согласно инструкции. Уровень экспрессии генов определялся в относительных единицах по сравнению с уровнем экспрессии референсных генов, которыми в исследовании являлись GUSB, B2M, HPRT, TBP и ABL.
Статистическую обработку результатов исследования проводили в программе StatSoft Statistica 6.0 с использованием t-критерия Стьюдента.
Перейти в оглавление статьи >>>
Результаты
Степень функциональной активности того или иного гена может определяться на уровне транскрипции (оценка уровня экспрессии соответствующей мРНК) или на уровне трансляции путем количественной оценки белка. Как правило, результаты различных методов демонстрируют высокую корреляцию, однако анализ мРНК отличается значительно большей чувствительностью (Badve et al., 2008). Анализ экспрессии генов методом ОТ-ПЦР позволяет сравнить относительный уровень тех или иных генов в различных образцах путем полуколичественной оценки мРНК транскриптов (Bustin et al., 2005). В качестве нормировочного значения берется уровень экспрессии так называемых «референсных» генов. Особенностью этих генов является относительно постоянный уровень экспрессии в различных тканях (Radonic et al., 2004). Определение уровня экспрессии исследуемых функциональных генов относительно одних и тех же референсных в разных образцах позволяет проводить сравнительную оценку экспрессии мРНК интересующих транскриптов.
В данном исследовании проводилась сравнительная оценка уровней экспрессии мРНК KI67 как маркера пролиферации, BIRC5 - ингибитора апоптоза, рецепторов стероидных гормонов ESR1 и PGR, а также матриксной металлопротеиназы MMP11 как маркера протеолитической активности клеток. В таблице 1 представлены результаты, полученные при сравнительном анализе уровней экспрессии этих генов в ткани фиброаденомы и неизмененной ткани молочной железы.
Таблица 1. Сравнение уровней экспрессии генов в ткани фиброаденомы и морфологически неизмененной ткани молочной железы
Ген Кол- во ФА Кол- во МНТ Среднее значение Среднее значение ФА МНТ Ст.О. ФА Ст.О. МНТ p
KI67 18 18 1,727020 1,163356 0,737011 0,420209 0,011200
BIRC5 18 18 1,810640 1,177027 0,534652 0,531359 0,001875
ESR1 18 18 2,254674 2,138653 0,326757 0,383456 0,325763
PGR 18 18 3,890945 3,642149 0,393255 0,458916 0,077682
MMP11 18 18 1,377344 0,851037 0,669362 0,322490 0,007073
Уровень экспрессии мРНК KI67 был статистически значимо выше в образцах
фиброаденомы по сравнению с неизмененной тканью молочной железы (р=0,0112). E. Jensen описал более высокий уровень экспрессии белка Ki67 в эпителии фиброаденомы по сравнению с неизмененной тканью, также автор отметил сочетание высокого уровня пролиферативной активности с высоким уровнем экспрессии рецепторов эстрогена-Р (Jensen et al., 2001). В нашем исследовании проводился анализ экспрессии рецептора эстрогена-а, при этом статистически значимых отличий уровня его экспрессии в фиброаденоме и неизмененной ткани молочной железы обнаружено не было (р=0,3257). Однако нами был обнаружен более высокий уровень экспрессии мРНК рецепторов прогестерона-А в ткани ФА (р=0,0776), хотя эти отличия не достигали статистической значимости. Повышение уровня экспрессии рецепторов прогестерона в фиброаденоме описано в литературе (Branchini et al., 2009; Cericatto et al., 2009). Однако авторы оценивали экспрессию белка. Кроме того, интересным оказалось наличие положительной корреляционной связи меду уровнем экспрессии мРНК PGR и матриксной металлопротеиназы MMP11 в ткани фиброаденомы (r=0,47, р=0,042), чего не наблюдалось в неизмененной ткани молочной железы (r=0,11, p=0,65).
Помимо автономности пролиферации, ремоделирования процессов межклеточного взаимодействия еще одним признаком неопластического процесса является нарушение контроля апоптоза (Боженко и др., 2003; Кудинова и др., 2003). Одним из ингибиторов апоптоза является белок сурвайвин, кодируемый геном BIRC5, инактивирующий каспазы (Sah et al., 2006). Согласно результатам нашего исследования, уровень экспрессии мРНК BIRC5 в ткани фиброаденомы статистически значимо выше по сравнению с неизмененной тканью молочной железы. Насколько нам известно, мы впервые описали более высокий
уровень экспрессии мРНК BIRC5 в фиброаденоме по сравнению с неизмененной тканью молочной железы.
Перейти в оглавление статьи >>>
Обсуждение
Изучение молекулярных механизмов клеточного метаболизма клеток фиброаденомы представляется весьма интересной задачей, т.к. в формировании образования участвуют как гиперпластические, так и неопластические процессы: с одной стороны,
поликлональная природа опухоли и циклические изменения экспрессии рецепторов стероидных гормонов свидетельствуют о гиперпластическом характере образования, с другой стороны, независимость уровня пролиферативной активности от циклических изменений и активация механизмов, присущих раку молочной железы являются неопластической составляющей (Kastner et al., 1990; Haroon et al., 2013). Повышение уровня экспрессии KI67, наблюдаемое нами, описано также и другими авторами (Jensen et al., 2001). В ряде исследований авторы указывают на сочетание повышенной пролиферативной активности с высоким уровнем экспрессии рецепторов эстрогена. Cericatto R установил, что уровень экспрессии мРНК ESR1 в фиброаденоме выше по сравнению с неизмененной тканью молочной железы в фолликулярную фазу менструального цикла (Cericatto et al., 2005). С другой стороны, Anna Sapino описала повышение экспрессии рецепторов эстрогена за счет Р фракции (Sapino et al., 2006), а Gisele Branchini не обнаружил статистически значимых отличий экспрессии (Branchini et al., 2009). В нашем исследовании не проводился анализ уровня экспрессии различных фракций рецепторов эстрогена, а также не проводилось сравнительной оценки в различные фазы менструального цикла, данный вопрос требует дальнейшего изучения. Высокий уровень экспрессии рецепторов прогестерона в фиброаденоме описан и в других исследованиях (Branchini et al., 2009), в которых анализировалась экспрессия на уровне белка. С другой стороны, при анализе на уровне мРНК R. Cericatto не обнаружил статистически значимых отличий (Cericatto et al., 2005). Не исключено, что отличия результатов, полученных нами, связано с использованием иных методологических подходов: в отличие от R. Cericatto на этапе обратной транскрипции и ПЦР мы использовали наборы специфических праймеров и зондов, а не олиго^Т) праймеры и интеркалирующие красители. Уровень экспрессии мРНК PGR в ФА в нашем исследовании был положительно связан с уровнем экспрессии мРНК матриксной металлопротеиназы ММР11. Белки семейства матриксных металлопротеиназ, в частности MMP11 или стромелизин-3, участвуют в процессах ремоделирования межклеточного
матрикса, например в эндометрии, а также при имплантации эмбриона (Luo et al., 2002), и в данном случае прогестерон подавляет их действие путем активации ингибиторов металлопротеиназ (Zhang et al., 2000; Goldman et al., 2009). То есть, прогестерон опосредовано ингибирует протеолитическую активность фермента. Но при патологических состояниях, в частности при раке молочной железы, существует положительная корреляция между уровнем экспрессии ММР и их ингибиторов и это динамическое равновесие, вероятно, контролируется единым механизмом (Nakopoulou et al., 1999; Figueira et al., 2009). Кроме того, существуют данные о том, что прогестерон повышает активность металлопротеиназ в остеокластах, но точный механизм неизвестен (Luo, Liao, 2001). Насколько нам известно, нами впервые описана положительная корреляция экспрессии матриксной металлопротеиназы ММР 11 и рецептора прогестерона на уровне мРНК.
Сурвайвин, кодируемый геном BIRC5 и функционирующий как ингибитор апоптоза, практически не экспрессируется дифференцированными клетками, но присутствует в большом количестве в злокачественных опухолях и эмбриональных тканях (Altieri, Dario, 2008). Ranade K.J. продемонстрировал, что в 53% наблюдений фиброаденомы экспрессируют сурвайвин (Ranade et al., 2009). Ryan B описал экспрессию BIRC5 на уровне белка и мРНК в номальной ткани молочной железы, в ткани фиброаденомы и рака молочной железы, при этом не обнаружил статистически значимого отличия фиброаденомы от неизмененной ткани (Ryan et al., 2005). С другой стороны, Adamkov M с использованием иммунцитохимического метода наблюдал экспрессию белка сурвайвина в 73,7% образцах фиброаденомы по сравнению с 30,7% в неизмененной ткани молочной железы (Adamkov et al., 2010). При этом он обнаружил повышение интенсивности ядерного окрашивания при фиброаденоме и раке молочной железы. Исследование экспрессии на уровне мРНК не позволяет дифференцировать ядерный и цитоплазматический компонент, однако обладает более высокой чувствительностью (Badve et al., 2008). Повышение антиапоптотической активности в клетках может свидетельствовать о неопластическом потенциале опухоли.
По результатам исследования можно сделать вывод о существовании различных механизмов контроля клеточного метаболизма в фиброаденоме и окружающей ткани. Глубокое понимание молекулярной природы фиброаденомы может внести вклад в усовершенствование методов диагностики и лечения заболевания.
Перейти в оглавление статьи >>>
Список литературы
1. Боженко В.К., Гали-Оглы Г.А., Кудинова Е.А. и др. Оценка уровня спонтанного апоптоза при доброкачественных и злокачественных новообразованиях молочной железы. // Вестник РНЦРР. 2003. Т. 4, стр. http://vestnik.rncrr.ru/vestnik/v4/papers/bozhen_v4.htm.
2. Кудинова Е.А., Боженко В.К., Галил-Оглы Г.А. и др. Определение апоптоза методом проточной цитофлуорометрии при раке молочной железы. // Вестник РНЦРР. 2003. Т. 3. стр. http://vestnik.rncrr.ru/vestnik/v3/papers/kud_v3.htm.
3. Харченко В.П., Рожкова Н.И. 2009. Национальное руководство. Маммология. Москва : Гэотар-Медиа. 2009. C. 120.
4. Adamkov M., Halasova E., Kajo K. et al. Survivin: a promising biomarker in breast carcinoma. // Neoplasma. 2010. V. 57. N 6. P. 572-577.
5. Altieri C., Dario. Survivin, cancer networks and pathway-directed drug discovery. // Nature Reviews Cancer. 2008. V. 9. P. 61-70.
6. Badve SS., Baehner FL., Gray RP. et al. Estrogen- and Progesterone-Receptor Status in ECOG 2197: Comparison of Immunohistochemistry by Local and Central Laboratories and Quantitative Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction by Central Laboratory. // Journal of Clinical Oncology. 2008. V. 26. N 15. P. 2473-2481.
7. Branchini G., Schneider L., Cericatto R et al. Progesterone receptors A and B and estrogen receptor alpha expression in normal breast tissue and fibroadenomas. // Endocrine. 2009. V. 35. N 3. P. 459-466.
8. Bustin SA., Benes V., Nolan T. et al. Quantitative real-time RT-PCR--a perspective. // J. Mol. Endocrinol. 2005. V. 34. N 3. P. 597-601.
9. Cericatto R, Pozzobon A., Morsch DM. et al. Estrogen receptor-alpha, bcl-2 and c-myc gene expression in fibroadenomas and adjacent normal breast: association with nodule size, hormonal and reproductive features. // Steroids. 2005. V. 70. N 3. P. 153-160.
10. Corleta HE., Capp E., Corleta OC. Insulin receptor tyrosine kinase activity in colon carcinoma. // Braz J Med Biol Res. 1996. V. 29. N 12. P. 1593-7.
11. Figueira RCS., Gomes LR, Neto JS. et al. Correlation between MMPs and their inhibitors in breast cancer tumor tissue specimens and in cell lines with different metastatic potential. // BMC Cancer. 2009. V. 9. N 20. URL: http://www.biomedcentral.com/1471-2407/9/20/ (дата обращения: 01.09.2013).
12. Goldman S., Lovett DH., Shalev E. Mechanisms of matrix metalloproteinase-2 (mmp-2) transcriptional repression by progesterone in jar choriocarcinoma cells. // Reproductive Biology and Endocrinology. 2009. V. 7. P. 41.
13. Haroon S., Hashmi AA., KhurshidA. et al. Ki67 index in breast cancer: correlation with other prognostic markers and potential in pakistani patients. // Asian Pac J Cancer Prev. 2013. V. 14. N
7. P. 4353-8.
14. Jensen E.V., Cheng G., Palmieri C. Estrogen receptors and proliferation markers in primary and recurrent breast cancer. // PNAS. 2001. V. 98. N 26. P. 15197-15202.
15. Kastner P., Krust A., Turcotte B. et al. Two distinct estrogen-regulated promoters generate transcripts encoding the two functionally different human progesterone receptor forms A and B.
// EMBO J. 1990. V. 9. N 5. P. 1603-1614.
16. La Rosa S., Sessa F., Colombo L. et al. Expression of acidic fibroblast growth factor (aFGF) and fibroblast growth factor receptor 4 (FGFR4) in breast fibroadenomas. // J Clin Pathol. 2001. V. 54. N 1. P. 37-41.
17. Luo D., Mari B., Stoll I. et al. Alternative splicing and promoter usage generates an intracellular stromelysin 3 isoform directly translated as an active matrix metalloproteinase. // J. Biol. Chem. 2002. V. 277. N 28. P. 25527-25536.
18. Luo XH., Liao EY. Progesterone differentially regulates the membrane-type matrix metalloproteinase-1 (MT1 -MMP) compartment of proMMP-2 activation in MG-63 cells. // Horm Metab Res. 2001. V. 33. N 7. P. 383-388.
19. Nakopoulou L., Giannopoulou I., Gakiopoulou H. et al. Matrix metalloproteinase-1 and -3 in breast cancer: correlation with progesterone receptors and other clinicopathologic features. // Hum Pathol. 1999. V. 30. N 4. P. 436-42.
20. Noguchi S., Motomura K., Inaji H. et al. Clonal analysis of human breast cancer by means of the polymerase chain reaction. // Cancer Res. 1992. V. 52. N 23. P. 6594-6597.
21. Radonic A., Thulke S., Mackay IM. et al. Guideline to reference gene selection for quantitative real-time PCR. // Biochemical and Biophysical Research Communications. 2004. V. 313. N 4. P. 856-62.
22. Ranade KJ., Nerurkar AV., Phulpagar MD. et al. Expression of survivin and p53 proteins and their correlation with hormone receptor status in Indian breast cancer patients. // Indian J Med Sci. 2009. V. 63. N 11. P. 481-490.
23. Rego MF., Navarrete MA., Facina G. et al. Analysis of human mammary fibroadenoma by Ki-67 index in the follicular and luteal phases of menstrual cycle. // Cell Prolif. 2009. V. 42. N 2. P. 241-247.
24. Ryan B., O'Donovan N., Browne B. et al. Expression of survivin and its splice variants survivin-2B and survivin-DeltaEx3 in breast cancer. // Br J Cancer. 2005. V. 92. N 1. P. 120124.
25. Sah NK., Khan Z., Khan GJ. et al. Structural, functional and therapeutic biology of survivin. // Cancer Lett. 2006. V. 244. N 2. P. 164-171.
26. Sapino A., Bosco M., Cassoni P. et al. Estrogen receptor-bold italic beta is expressed in stromal cells of fibroadenoma and phyllodes tumors of the breast. // Modern Pathology. 2006. V.
19. C. 599-606.
27. Zhang J., Hampton AL., Nie G. et al. Progesterone inhibits activation of latent matrix metalloproteinase (MMP)-2 by membrane-type 1 MMP: enzymes coordinately expressed in human endometrium. // Biol Reprod. 2000. V. 62. N 1. P. 85-94.
Перейти в оглавление статьи >>>
ІББК 1999-7264 © Вестник РНЦРР Минздрава России © Российский научный центр рентгенорадиологии Минздрава России
