CC BY
0УДК 616.831-006.484:612.017.1
АНАЛИЗ ЭФФЕКТИВНОСТИ МИТОКСАНТРОНА И ТЕТРА(АРИЛ)ТЕТРАЦИАНОПОРФИРАЗИНА В КАЧЕСТВЕ ИНДУКТОРОВ ИММУНОГЕННОЙ КЛЕТОЧНОЙ СМЕРТИ ДЛЯ ПЕРВИЧНОЙ КУЛЬТУРЫ ГЛИОМЫ ЧЕЛОВЕКА
DOI 10.24412/CL-37228-2024-142-144
Е. Е. Слепцова, А. Р. Хузина, Т. С. Редькин, М. О. Савюк, В. Д. Турубанова
Национальный исследовательский Нижегородский государственный
университет им. Н.И. Лобачевского, Нижний Новгород, Россия E-mail: ees222@list.ru
Аннотация. В работе рассматривались два классических индуктора иммуногенной клеточной смерти в отношении первичных культур глиомы человека. Было показано, что химиопрепарат митоксантрон не является универсальным индуктором ICD в отличии от фотодинамической терапии с тетраарилтетрацианопорфиразином.
Ключевые слова: иммуногенная клеточная смерть, глиома, фотодинамическая терапия, митоксантрон.
Существующие клинические протоколы лечения глиом низкоэффективны и разработка терапевтических стратегий лечения глиом является актуальной задачей. Иммунотерапия представляет собой перспективный подход к лечению рака, который может обеспечить широкий противоопухолевый ответ против гетерогенной клеточной популяции. Включение иммунотерапии при других опухолевых заболеваниях значительно увеличивает медианные значения выживаемости. Некоторые методы иммунотерапии основаны на иммуногенной клеточной смерти (ICD), в результате которой происходит высвобождение адъювантного сигнала DAMPs (damage-associated molecular patterns). На сегодняшний день потенциал активации ICD на первичных культурах глиом не исследовался
В качестве объекта исследования выступала клеточная культура первичной глиомы человека. Донором была пациентка 40 лет с первичной опухолью и диагнозом астроцитома Grade III. Паци-
ентка прошла курс лучевой терапии, однако после хирургической резекции опухоли выживаемость составила 5 месяцев. Клетки, полученные от пациентки, были со статусом IDH mutant. Морфология клеток была близка к морфологии клеточных культур астроцитов человека. Культура отличалась высокой скоростью пролиферации.
В качестве тестируемых индукторов ICD использовались хими-опрепарат митоксантрон (МТХ) и фотодинамическое воздействие с использованием оригинального фотосенсибилизатора тетра(а-рил)тетрацианопорфиразина (pz III). Иммуногенность выбранных индукторов была подтверждена в предыдущих работах для клеточной линии мышинной глиомы GL261 [1; 2].
На первом этапе исследований оценивали цитотоксичность МТХ и процесс накопления МТХ в клетках глиомы с использованием конфокальной микроскопии. Клетки демонстрировали значительное повышение уровня препарата, преимущественно в ядре, что являлось многообещающим фактором эффективной апоптоти-ческой клеточной смерти.
Для более детального описания клеточной гибели опухолевых клеток проводился анализ методом проточной цитофлуориметрии с окраской Annexin V (окраска фосфатидилсерина на поверхности мембраны) и Sytox (интеркалирующий краситель). Результаты анализа показали, что значительное количество клеток погибало путем нерегулируемой клеточной смерти. Из-за низкой эффективности МТХ в качестве индуктора регулируемой клеточной смерти дальнейшие исследования были сосредоточены на применении pz III для индукции ICD.
Было исследовано время поглощения pz III клетками первичной глиомы, оценивалась скорость накопления фотоагента, подобрана концентрация для индукции смерти и цитофлуорометрией была выявлена клеточная популяция, вносящая наибольших вклад в ICD. Был оценен паттерн высвобождения АТФ, одного из ключевых DAMPs при ICD. Результаты свидетельствуют о том, что изучаемый фотоагент может стать кандидатом в индукторы ICD на первичных глиомах человека, но требуется дополнительные эксперименты, расширяющие паттерн высвобождающихся DAMPs и детализация механизма клеточной смерти.
Исследование выполнено при поддержке министерства науки и высшего образования РФ (грант № FSWR-2023-0029).
Список литературы
1. Redkin T. S.; Sleptsova E. E., et al. Dendritic Cells Pulsed with Tumor Lysates Induced by Tetracyanotetra(aryl)porphyrazines-Based Photodynamic Therapy Effectively Trigger Anti-Tumor Immunity in an Orthotopic Mouse Glioma Model // Pharmaceutics. — 2023. — V. 15. — P. 2430. — doi: 10.3390/pharmaceutics15102430
2. Efimova I., Catanzaro E., et al. Vaccination with early ferroptotic cancer cells induces efficient antitumor immunity // J Immunother Cancer. — 2020. — T. 8. — V. 2. — doi: 10.1136/jitc-2020-001369.
ANALYSIS OF THE EFFECTIVENESS OF MITOXANTRONE AND TETRA(ARYL) TETRACYANOPORPHYRAZINE AS INDUCERS OF IMMUNOGENIC CELL DEATH FOR PRIMARY HUMAN GLIOMA CULTURE
Abstract. The paper considered two classical inducers of immunogenic cell death (ICD) in relation to primary human glioma cultures. It has been shown that the chemotherapy drug mitoxantrone is not a universal inducer of ICD, unlike photodynamic therapy with tetra(aryl)tetracyanoporphyrazine.
Key words: immunogenic cell death, glioma, photodynamic therapy, mitoxantrone.
