Аминокислотный состав урологического растительного сбора Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

© Коллектив авторов, 2015 УДК: 615.322.074:547.466

АМИНОКИСЛОТНЫЙ СОСТАВ УРОЛОГИЧЕСКОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СБОРА

Н.Г. Селезенев1, Д.М. Попов2, Г.Н. Селезенев1

Рязанский государственный медицинский университет им. акад. И.П. Павлова, г. Рязань (1) Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова. г. Москва (2)

Изучен качественный и количественный аминокислотный состав урологического сбора «Уваур», включающего листья толокнянки, траву череды, почки березовые. В сборе установлено 19 аминокислот, из них 9 - незаменимых. Общее содержание аминокислот в сборе составляет 6,998%, среди которых преобладают глю-таминовая кислота 12,34%, аспарагиновая кислота 10,38%, лейцин 8,69%.

Ключевые слова: лекарственный растительный сбор, аминокислоты, качественный, количественный состав.

Аминокислоты, синтезируемые растениями, играют важную роль в системе жизнеобеспечения, подразделяются на две категории: протеиногенные, входящие в состав белков (20), и непротеино-генные, встречающиеся в растении в свободном виде (свыше 200). Последние выполняют функции транспортной формы азота по растению, являются основной запасной формой азота в семенах, быстро и эффективно регулируют количество доступного КН4+ для растения [8].

Фитопрепараты, к которым относятся и растительные сборы, включают в себя различные группы биологически активных веществ (БАВ), в том числе и аминокислоты. БАВ в растениях находятся в легко усваиваемых человеческим организмом комплексах в биологически доступных концентрациях [1].

Аминокислоты придают БАВ, присутствующим в фитопрепаратах, легко усваиваемую безвредную форму, потенцируя их фармакологический эффект. В сочетании с ними они обеспечивают проявление широкого спектра фармакологического действия [1, 2]. В этой связи оценка аминокислотного состава в лекар-

ственном растительном сырье и фитопрепаратах может быть актуальна для их стандартизации, что находит отражение в многочисленных публикациях [3-5].

Целью исследования являлась качественная и количественная оценка аминокислотного состава в урологическом сборе «Уваур».

Материалы и методы Объектом исследования являлся лекарственный растительный сбор «Уваур», состоящий из листьев толокнянки, травы череды, почек березовых [6, 7].

Для определения общего содержания аминокислот в лекарственном растительном сборе был проведен их кислотный гидролиз в извлечении, полученном из сбора, и определен качественный и количественный состав.

Аналитическую пробу сбора измельчали до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм. Пробу массой 1,0 г (точная навеска) помещали в круглодонную колбу со шлифом, прибавляли 20 мл 70% спирта этилового, взвешивали с точностью ±0,01 г и нагревали на водяной бане с обратным холодильником в течение 1 часа. Излече-

ние затем охлаждали до комнатной температуры, взвешивали и при необходимости доводили 70% спиртом этиловым до первоначальной массы. Полученное извлечение фильтровали через бумажный фильтр. Первые 10 мл фильтрата отбрасывали. Из последующей порции фильтрата отбирали 50 мкл и упаривали досуха в вакуумном испарителе фирмы «Serv-anta» (США). Сухой остаток растворяли в 200 мкл 0,1М раствора кислоты хлористоводородной, нагревали на водяной бане в течение 15 мин при температуре 60°С, перемешивали и центрифугировали в течение 3 мин при скорости 4000 оборотов в минуту. Для анализа использовали 50 мкл полученного гидролизата.

Аминокислотный анализ водорастворимых фракций проводили на аминокислотном анализаторе фирмы «Хитачи» модель 835 на стальной колонке (0,4 x 15 см), заполненной катионообменной смолой марки 2619 (Hitachi Customlon Exchange Resin). Разделение аминокислот проводилось в трех системах натрий - цитратных

буферных растворов: 0,18 ^ pH 3,25; 0,3 H -pH 3,9; 1,6 ^ pH 4,75. Нингидриновый реактив готовили с использованием метилового эфира этиленгликоля. Цитратные буферные растворы подавали в колонку по стандартной программе со скоростью 32 мл/час. Нингидриновый реактив подавали со скоростью 20 мл/час. После выхода из аналитической колонки разделенные аминокислоты смешивались с нингидриновым реактивом в смесительном блоке в соотношении 2:1. Реакция аминокислот с нин-гидриновым реактивом проходила за 4 мин при 100°С в реакционной бане. Колориметрическое измерение окрашенных комплексов, образующихся в результате реакции с нингидрином, проводилось непрерывно и одновременно при двух длинах волн. Первичные амины давали пурпурную окраску, оптическую плотность которых измеряли при длине волны 570 нм, а вторичные (пролин и оксипро-лин) образовывали соединения желтой окраски (измерение проводили при длине волны 440 нм).

Рис. Хроматограмма спиртового извлечения из урологического сбора «Уваур»

Результаты и их обсуждение

Как следует из представленных данных (см. таблицу и рисунок) в лекарственном растительном сборе аминокислотный состав представлен девятнадцатью аминокислотами, из них девять относятся к незаменимым. Наибольшее со-

Содержание аминокислот в

держание в сборе отмечается для аминокислот глутаминовой, аспарагиновой, лейцина - 12,34%; 10,38%; 8,69% соответственно. Минимальное содержание установлено для цистеина 0,46%; оксили-зина 0,53%; метионина 1,33%.

Таблица

сборе урологическом «Уваур»

Название аминокислот Общее содержание аминокислот, % Доля аминокислоты от общего содержания, %

Оксипролин 0,125 1,78

Аспарагиновая кислота 0,727 10,38

Треонин 0,342 4,89

Серин 0,362 5,18

Глутаминовая кислота 0,864 12,34

Пролин 0,488 6,97

Глицин 0,440 6,29

Алании 0,450 6,43

Цистеин 0,032 0,46

Валин 0,404 5,77

Метионин* 0,093 1,33

Изолейцин 0,335 4,79

Лейцин* 0,608 8,69

Тирозин 0,245 3,50

Фенилаланин 0,392 5,60

Оксилизин 0,037 0,54

Лизин 0,412 5,88

Гистидин* 0,172 2,47

Аргинин 0,47 6,71

Сумма 6,998 100

*

Примечание. незаменимые аминокислоты

Выводы

1. Изучен аминокислотный состав урологического сбора «Уваур», включающего листья толокнянки, траву череды, почки березовые, установлено наличие 19 аминокислот, из них 9 - незаменимых.

2. Общее содержание аминокислот урологического сбора составляет 6,998 %, в котором преобладают глутаминовая кислота 12,34 %, аспарагиновая кислота 10,38 %, лейцин 8,69 %.

Литература

1. Аминокислотный состав цветков фармакопейных и не фармакопейных видов вга1ае^ Ь / Т.Л. Киселева [и др.] // Растительные ресурсы. - 1989. - Т. 25, вып. 1. - С. 92-97.

2. Асланова М.С. Физико-химические показатели и аминокислотный состав

новых номологических сортов плодов граната / М.С. Асланова, М.А. Магер-ратов // Химия растительного сырья. -2012. - №1. - С. 165-169.

3. Бубенчикова В.Н. Лабазник шестиле-пестный: аминокислотный и минеральный состав / В.Н. Бубенчикова, Ю.А. Сухомлинов // Фармация. -2005. - №3. - С. 9-11.

4. Наумова О.А. Определение аминокислот в плодах бархата амурского / О.А. Наумова, Д.М. Попов // Современные вопросы теории и практики лекарствоведения. - Ярославль, 2007. - С. 251-253.

5. Нгуен Тхи Ким Нган. Аминокислотный

состав ариземы единокровной / Нгуен Тхи Ким Нган, В.А. Ермакова // Фармация. - 2014. - № 8. - С. 10-12.

6. Разработка и исследование лекарственно-

го растительного сбора «Уваур» / Г.Н. Селезенев [и др.] // Сеченовский вестник. - 2014. - №1 (15). - С. 139-140.

7. Селезенев Г.Н. Разработки методики определения арбутина в извлечении из сбора, содержащего листья толокнянки, траву череды, почки березовые /

Г.Н. Селезенев, Д.М. Попов, Н.Г. Селезенев // Вопросы биологической медицинской и фармацевтической химии. - 2012. - № 9. - С. 18-21.

8. Филипцова Г.Г. Основы биохимии растений: курс лекций / Г.Г. Филипцова, И.И. Смолич. - Мн.: БГУ, 2014. -136 с.

AMINO-ACID COMPOSITION OF UROLOGICAL HERBAL TEA

N.G. Selezenev, D.M. Popov, G.N. Selezenev

Qualitative & quantitative amino-acid composition of urological herbal tea "Uvaur" which includes manzanita leaves, tickseed, birch gemmae. 19 amino acids are determined in the herbal tea, 9 of which are indispensable. The total content of amino acids is 6,998%, in which 12,34% glutamic acid, 10,38% aspartic acids, 8,69% leucine.

Keywords: medical herbal tea, amino acids, qualitative, quantitative composition.

Селезенев Н.Г. - к.ф.н, доц., зав. кафедрой фармацевтической технологии ГБОУ ВПО РязГ-МУ Минздрава.

E-mail: [email protected]

Попов Д.М. - д.ф.н, проф., гл. науч. сотрудник НИИ Фармации Первого МГМУ им. И.М. Сеченова.

E-mail: [email protected]

Селезенев Г.Н. - менеджер ООО "Ватхэм Фармация", г. Рязань. E-mail: [email protected]