CC BY
44
УДК 615.216.2 Кубанский научный медицинский вестник № 2 (107) 2009
П. А. ГАЛЕНКО-ЯРОШЕВСКИЙ1, Н. П. ЛИСИЦЫНА2, Х. П. ТАХЧИДИ3
АКТИВНОСТЬ СОЧЕТАНИЙ ИНОКАИНА С ВИЗИТОНОМ-ПЭГ В УСЛОВИЯХ АНЕСТЕЗИИ ПОВЕРХНОСТНЫМ МЕТОДОМ
кафедра фармакологии Кубанского государственного медицинского университета,
г. Краснодар, ул. Седина, 4;
2Краснодарский филиал ФГУ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С. Н. Федорова Росздрава»,
г. Краснодар, ул. Красных Партизан, 6;
3ФГУ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С. Н. Федорова Росздрава», г. Москва, Бескудниковский бульвар, 59а. E-mail: [email protected]
При поверхностной анестезии роговицы глаза кролика сочетания инокаина с визитоном-ПЭГ по обезболивающей активности, глубине и длительности анестезии значительно превосходят инокаин, приготовленный на физиологическом растворе; не оказывают раздражающего действия на конъюнктиву и роговицу.
Сочетания инокаина с визитоном-ПЭГ при содержании в них инокаина в концентрациях 0,001562-0,05% вызывают дозозависимое местно-анестезирующее действие и сохраняют стабильность растворов.
Ключевые слова: поверхностная анестезия, композиция инокаин + визитон-ПЭГ.
P. A. GALENKO-YAROSHEVSKY1, N. P. LISITSINA2, CH. P. TAHCHIDI3
ACTIVITY OF COMBINATIONS OF INOCAINE IN CONJUNCTION WITH VIZITON-PEG IN A METHOD OF TOPICAL ANESTHESIA
1Department of Pharmacology of Kuban State Medical University,
Krasnodar, st. Sedina, 4;
2Krasnodar branch of FGU «ISTC» Eye Microsurgery «named after Acad. S. Fedorov of Roszdrav»,
Krasnodar, st. Krasnykh Partizan, 6;
3FGU «ISTC» Eye Microsurgery «named after Acad. S. Fedorov of Roszdrav»,
Moscow, Beskudnikovsky Boulevard, 59а. E-mail: [email protected]
In the topical anesthesia of rabbits eye cornea a combination of inocaine with Viziton-PEG gives significant pain control activity as well as, the depth and duration of anesthesia compared to inocaine dissolved in physiologic salt solution, do not cause an irritating effect on the conjunctiva and cornea.
Combinations of inocaine with Viziton-PEG containing inocaine in concentrations of 0,001562-0,05% cause dose dependent local anesthetic effect and maintain a stable solution.
Keywords: topical anesthesia, composition of inocaine + Viziton-PEG.
Инокаин [оксибупрокаин; 2-(диэтиламино)этиловый эфир 4-амино-3-бутоксибензойной кислоты моногидрохлорид], являющийся местным анестетиком (МА), предназначенным для поверхностного (терминального) обезболивания, находит широкое применение в клиниках глазных болезней [1, 14].
Нередко при оперативных вмешательствах на переднем сегменте глаза имеет место одновременное использование инокаина и вискоэластика визитона-ПЭГ (протектор эпителия гелевый), содержащего в своем составе метилцеллюлозу (в виде гидроксипро-пилметилцеллюлозы) и имеющего рН = 7,2-7,4 [5, 6, 10].
Известно, что смещение рН растворов МА в щелочную сторону влечет за собой повышение их обезболивающей активности. Сочетания (композиции) МА с ме-тилцеллюлозой могут приводить к пролонгированию их действия [2, 8, 12, 13].
Цель исследования - выявить возможные изменения местно-анестезирующей активности инокаина при сочетании его с визитоном-ПЭГ в условиях обезболивания поверхностным методом.
Материалы и методы исследования
Опыты проведены на 60 белых нелинейных мышах-самцах и 51 кролике (102 глаза) обоего пола массой 0,018-0,032 и 2,6-3,5 кг соответственно.
Работа выполнена в соответствии с Методическими указаниями по изучению местно-анестезирующей активности фармакологических веществ [4, 11].
При проведении экспериментов руководствовались статьей 11-й Хельсинкской декларации Всемирной медицинской ассоциации (1964), «Международными рекомендациями по проведению медико-биологических исследований с использованием животных» (1985) и Правилами лабораторной практики в Российской Федерации (приказ МЗ РФ от 19.06.2003 г. № 267).
Поверхностную анестезию с использованием сочетаний инокаин + визитон-ПЭГ (В-ПЭГ) и инокаин + физиологический раствор (ФР) изучали в опытах на роговице глаза кролика по методу Ренье-Валета [4, 8], при этом определяли пороговые (ПАК) и эквивалентные анестетические концентрации (ЭАК), индексы
Сравнительная активность (по индексам Ренье и Валета) сочетаний инокаин + В-ПЭГ и инокаин + ФР при поверхностной анестезии в опытах на роговице глаза кролика
Концентрация Индексы Ренье2 Индексы Валета
инокаина1,% Инокаин + В-ПЭГ Инокаин + ФР относительно инокаин + ФР
0,001562 20,5±6,0 (6,1-34,9) - -
0,003125 191,0±49,1 (75,0-307,0) - -
0,00625 420,5±25,2 (361,0-480,1) - -
0,0125 549,0±17,9 89,5±7,56 4,2
(506,7-621,3) (71,6-107,4) [0,0030]
0,025 601,0±26,5 329,0±15,7 1,8
(538,3-663,7) (292,3-365,7) [0,0140]
0,05 1300,0 431,5±22,5 (378,2-484,8) 2,9 [0,0171]
0,1 850,6±15,2 550,0±21,2 1,5
(814,5-886,7) (499,8-600,2) [0,0643]
0,4 НИ 1193,2±31,8 (1117,9-1268,5)
1 Приготовлен на В-ПЭГ и ФР.
2 Представлены средние арифметические, вычисленные из 8 опытов, со стандартной ошибкой средней.
Примечание: в скобках: круглых - доверительные границы при р = 0,05;
квадратных - ЭАК для инокаина при сочетании его с В-ПЭГ. НИ - не исследовалось.
Таблица 2
Сравнительная активность [по ЭК50 и терапевтическому индексу (широте терапевтического действия)] сочетаний инокаин + В-ПЭГ и инокаин + ФР при поверхностной анестезии в опытах на роговице глаза кролика
Сочетание Местно-анестезирующая активность Токсичность 0,1%-ного раствора при подкожном введении мышам Терапевтический индекс
-О о Э Относительная ЛД50, мг/кг Относительная Абсолютный Относительный
Инокаин + В-ПЭГ 0,013 (0,009-0,020) 7,0 60,4 (53,6-68,2) 0,93 4646,1 7,5
Инокаин + ФР 0,091 (0,069-0,118) 1,0 56,5 (50,7-62,9) 1,0 620,9 1,0
1 При расчете ЭК50 сочетания инокаин + В-ПЭГ взяты индексы Ренье при концентрациях инокаина, соответствующих 0,001562, 0,003125, 0,00625, 0,0125, 0,025 и 0,05%, а при расчете ЭК50 инокаин + ФР - 0,0125, 0,025, 0,05, 0,1 и 0,4%.
Примечание: в скобках - доверительные границы при р = 0,05.
Ренье и Валета; параллельно исследовали возможное раздражающее действие по Бе^юаг [15]. Кроме того, при изучении активности инокаина в принятых условиях эксперимента учитывали следующие временные
(в мин) интервалы обезболивания: наступление анестезии (НА), начало (НПА) и окончание полной анестезии (ОПА), общую продолжительность обезболивания (ОПО).
Кубанский научный медицинский вестник № 2 (107) 2009
Кубанский научный медицинский вестник № 2 (107) 2009
Сравнительная характеристика временных параметров действия сочетаний инокаин + В-ПЭГ и инокаин + ФР при поверхностной анестезии
в опытах на роговице глаза кролика
Сочетание Концентрация инокаина, % Начало анестезии, мин Начало полной анестезии, мин Окончание полной анестезии, мин Общая продолжительность обезболивания, мин
Инокаин + В-ПЭГ 0,001562 1,0 - - 5,4±0,40 (4,5-6,3)
Инокаин + ФР 0,001562 - - - -
Инокаин + В-ПЭГ 0,003125 1,0 2,0 5,9±1,59 (2,1-9,7) 11,4±0,93 (9,2-13,6)
Инокаин + ФР 0,003125 - - - -
Инокаин + В-ПЭГ 0,00625 1,0 2,0 12,5±0,66 (10,9-14,1) 18,1±1,33 (15,0-21,2)
Инокаин + ФР 0,00625 - - - -
Инокаин + В-ПЭГ 0,0125 0,75 1,5 17,5±0,66 (15,9-19,1) 24,4±1,33* (21,3-27,5)
Инокаин + ФР 0,0125 1,0 - - 10,7±0,53 (9,4-11,9)
Инокаин + В-ПЭГ 0,025 0,5 1,0 21,2±0,66* (19,6-22,8) 29,4±1,33* (26,3-32,5)
Инокаин + ФР 0,025 0,75 1,5 9,6±1,33 (6,5-12,7) 12,7±1,99 (8,0-17,4)
Инокаин + В-ПЭГ 0,05 0,5 1,0 62,5±1,33* (59,4-65,6) 72,5±1,33* (69,4-75,6)
Инокаин + ФР 0,05 0,75 1,5 16,2±0,66 (14,6-17,8) 26,2±1,33 (23,1-29,3)
Инокаин + В-ПЭГ 0,1 0,5 1,0 33,7±1,33* (30,6-36,8) 40,6±1,33* (37,5-43,7)
Инокаин + ФР 0,1 0,75 1,5 19,4±1,33 (16,3-22,5) 32,5±1,33 (29,4-35,6)
Инокаин + ФР 0,4 0,5 1,0 46,9±3,15 (39,1-54,7) 57,5±3,15 (49,7-65,3)
* р < 0,001.
Примечание: в скобках - доверительные границы при р = 0,05.
Острую токсичность избранных сочетаний исследовали [определяли среднюю летальную дозу (ЛД50) по инокаину] в опытах на мышах при подкожном введении [7].
Инокаин растворяли в В-ПЭГ [производитель ООО «Научно-экспериментальное производство МНТК «Микрохирургия глаза» (г. Москва), ТУ-9393-00829039336-2005, регистрационное удостоверение Рос-здравнадзора - ФС 01031475/1140-05] и ФР.
Статистическую обработку данных, учитываемых в градированной форме, проводили по М. Л. Беленькому [3] и с помощью таблиц Н. Н. Самойлова [9]. Учет результатов исследований, выраженных в альтерна-
тивной форме [определение ЛД50, средних эффективных концентраций (ЭК50) и терапевтических индексов (ЛД50/ЭК50), или широты терапевтического действия (ШТД)], осуществляли по методам В. Б. Прозоровского [7] и М. Л. Беленького [3].
Результаты исследования
Установлено, что ПАК инокаина, приготовленного на В-ПЭГ, является 0,001562%, тогда как инокаи-на, растворенного в ФР, - 0,0125%. Концентрацией инокаина, вызывающей полное обезболивание, при котором индекс Ренье равен 1300,0, для инокаин + В-ПЭГ оказалась 0,05%; инокаин (0,4%-ный раствор),
содержащийся в официнальных флаконах-капельницах, не индуцирует полной анестезии (индекс Ренье -1193,2).
При использовании композиций инокаин + В-ПЭГ, в которых МА содержится в 0,003125, 0,00625, 0,0125, 0,025 и 0,1%-ной концентрациях, индексы Ренье составляют 191,0, 420,5, 549,0, 601,0 и 850,6, тогда как в случаях применения инокаина в 0,025, 0,05 и 0,1%-ном растворах, приготовленного на ФР, - 329,0, 431,5 и 550,0 соответственно. Индексы Валета для сочетания инокаин + В-ПЭГ относительно инокаин + ФР, в котором МА использован в 0,0125, 0,025, 0,05 и 0,1%-ном растворах, равны 4,2, 1,8, 2,9 и 1,5; ЭАК составляют 0,0030, 0,0140, 0,0171 и 0,0643% соответственно (табл. 1).
Расчеты ЭК50 и ШТД показали, что для сочетания инокаин + В-ПЭГ они равны 0,013% и 4646,1, а для инокаин + ФР - 0,091% и 620,9, т. е. первое сочетание по активности и ШТД в 7,0 и 7,5 раза соответственно превосходит второе. Важно отметить, что обе композиции ни в одной из исследованных концентраций инокаина не вызывают раздражения роговицы и конъюнктивы (табл. 2).
В результате анализа этапов местно-анестезирующего действия исследованных сочетаний выявлено, что время НА при инстилляции в конъюнктивальный мешок инокаин + В-ПЭГ, в котором МА содержится в пороговой концентрации (0,001562%), равно 1,0 мин. Полной анестезии не отмечается. ОПО составляет
5.4 мин.
Повышение концентрации инокаина до 0,003125 и 0,00625% в композициях с В-ПЭГ приводит к появлению полной анестезии через 2,0 мин, которая заканчивается спустя 5,9 и 12,5 мин, время ОПО равно 114,0 и 18,1 мин соответственно. В концентрации инокаина 0,0125% в сочетаниях с В-ПЭГ и ФР время НА составляет 0,75 и 1,0 мин. НПА и ОПА для первой композиции равны 1,5 и 17,5 мин соответственно. Для второго сочетания полная анестезия отсутствует. ОПО под влиянием инокаин + В-ПЭГ и инокаин + ФР составляет 24,4 и 10,7 мин соответственно.
В случаях использования инокаина, входящего в состав композиций инокаин + В-ПЭГ и инокаин + ФР, в концентрациях 0,025, 0,05 и 0,1% время НА и НПА для первого сочетания равно 0,5 и 1,0 мин, для второго - 0,75 и
1.5 мин соответственно. ОПА и ОПО для инокаин + В-ПЭГ и инокаин + ФР составляют 21,2 и 29,4, 9,6 и 12,7, 62,5 и 72,5, 16,2 и 26,2, 33,7 и 40,6, 19,4 и 32,5 мин, т. е. по этим показателям первое сочетание в 2,2 и 2,3, 3,8 и 2,8, 1,7 и 1,2 раза соответственно превосходит второе. Примечательно, что ОПА и ОПО под влиянием официнального раствора инокаина (0,4%) равны 46,9 и 57,5 мин, а инокаина (0,05%), содержащегося в композиции с В-ПЭГ, - 62,5 и 72,5 мин, т. е. последнее сочетание по ОПА и ОПО в 1,3 и 1,3 раза превосходит первое (табл. 3).
Следует отметить, что композиция инокаин (0,05%) + В-ПЭГ по времени ОПА и ОПО в 1,8 и 1,8 раза превосходит сочетание инокаин (0,1%) + В-ПЭГ, т. е. увеличение концентрации инокаина с 0,05 до 0,1% влечет за собой снижение активности, при этом последнее сочетание становится мутным, т. е. теряет стабильность.
Таким образом, в условиях поверхностного метода анестезии роговицы глаза кролика сочетания инока-ин + В-ПЭГ по обезболивающей активности, глубине и длительности анестезии значительно превосходят инокаин + ФР; не оказывает раздражающего действия на конъюнктиву и роговицу.
Композиции инокаин + В-ПЭГ при содержании в них МА в концентрациях 0,001562-0,05% индуцируют дозозависимое местно-анестезирующее действие и сохраняют стабильность (прозрачность растворов); сочетание инокаин (0,1%) + В-ПЭГ существенно теряет обезболивающую активность, при этом нарушается его стабильность.
ЛИТЕРАТУРА
1. Астахов Ю. С., Шахназарова А. А. Сравнительное изучение действия местных анестетиков, используемых в офтальмологической практике // Клиническая офтальмология. - 2004. - Т. 5. -№ 1. - С. 24-26.
2. Бараш Пол Дж., Куллен Брюс Ф., Стэлтинг Роберт К. Клиническая анестезиология. Пер. с англ. - М.: Медицинская литература, 2004. - 592 с.
3. Беленький М. Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. - Л., 1963. - 152 с.
4. Игнатов Ю. Д., Чернякова И. В., Васильев Ю. Н., Гален-ко-Ярошевский А. П., Жуков В. Н. Методические указания по изучению местно-анестезирующей активности фармакологических веществ // Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Под ред. Р. У. Хаб-риева - 2-изд., перераб. и доп. - М.: ОАО «Издательство «Медицина», 2005. - С. 364-392.
5. Малюгин Б. Э., Галенко-Ярошевский А. П., Измайлова Р. П. Обоснование безопасности вискоанестетика для монослоя эндотелиальных клеток роговицы в эксперименте // Кубанский научный медицинский вестник. - 2006. - № 12 (93). -С. 78-82.
6. Малюгин Б. Э., Тимошкина Н. Т., Багров С. Н., Маклакова И. А, Верзин А. А. Способ обезболивания в офтальмологии // Патент РФ № 2161464 с приоритетом от 02.07.1998 г.
7. Прозоровский В. Б. Использование метода наименьших квадратов для пробит-анализа кривых летальности // Фармакол. и токсикол. - 1962. - Т. 25, № 11. - С. 115-119.
8. Прянишникова Н. Т., Шаров Н. А. Тримекаин. Фармакология и клиническое применение. - Л.: Медицина, 1967. - 239 с.
9. Самойлов Н. Н. Таблицы значений средней ошибки и доверительного интервала средней арифметической величины вариационного ряда. - Томск, 1970. - 63 с.
10. Федоров С. Н., Багров С. Н., Малюгин Б. Э., Маклакова И. А, Верзин А. А. Фармацевтическая композиция для обезболивания в офтальмологии // Патент РФ № 2174876 с приоритетом от 08.07.1999 г.
11. Хабриев Р. У. (ред.). Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. -2-изд., перераб. и доп. - М.: ОАО «Издательство «Медицина», 2005. - 832 с.
12. Шустер Я. Я., Микажане В. Д., Пурвиньи И. В. и др. Фармакологические эффекты лекарственных средств // Современные проблемы фармакологии: Материалы III съезда фармакологов СССР. - Киев, 1971. - С. 308-309.
13. Шустер Я. Я., Микажане В. Д., Скутелис А. П. и др. Действие сочетания водорастворимых полимеров и местных анестетиков // Фармакологические аспекты обезболивания: Тез. докл. Всесоюз. конф. - Л., 1983. - С. 106.
14. Rij G. van, de Lavalette J. G. Renardel, Baarsma G. S., Jansen J. T. Effect of oxybuprocaine 0,4% in preventing surgically indused miosis // British Journal of Ophtalmology. - 1984. - Vol. 68. -P.248-251.
15. Setnicar I. Tolerance indices of some phenoxyethylamino derivatives with local anaesthitic properties // Arzneim. - Forsch. -1966. - Bd. 16. - № 5. - P. 623.
Поступила 18.12.2008
Кубанский научный медицинский вестник № 2 (107) 2009
