CC BY-ND
13
октябрь №10 (223) ЗНиСО
37
АКТИВАЦИОННЫЕ КЛЕТОЧНЫЕ МАРКЕРЫ У АППАРАТЧИКОВ ПРОИЗВОДСТВА АКТИВИРОВАННЫХ УГЛЕЙ
О.В. Долгих, Д.Г. Дианова, А.В. Кривцов, Т.С. Лыхина, Д.В. Ланин
ACTIVATION CELL MARKERS HAVE APPARATCHIKS ACTIVATED CARBON PRODUCTION
O.V. Dolgikh, D.G. Dianova, A.V. Krivtsov, T.S. Lykhina, D.V. Lanin
ФБУН «Федеральный научный центр медико-профилактических технологий управления рисками здоровью населения» Роспотребнадзора, г. Пермь
Выявлено, что с увеличением в биосредах лиц, работающих в условиях производства активированный углей, содержания фенолсодержащих соединений пропорционально возрастает количество лимфоцитов, экспрессирующих на мембране CD25+ и CD95+. Явление отражает формирование повышенной чувствительности иммунокомпетентных клеток к антигенной перестройке в условиях контаминации фенолами.
Ключевые слова: лимфоциты, активационно-индуцированная гибель клетки, фенолы.
It was revealed that an increase of the fenol-compounds content in biological media of persons working in the production of activated carbon, proportionally increases the number of lymphocytes expressing the membrane CD25 + and CD95 +. The phenomenon reflects of the growing sensitivity of immune cells to the antigen restructuring under contamination by phenols.
Keywords: lymphocytes, activation-induced cell death, phenols.
Для рабочей зоны промышленных предприятий типичным является интенсивное воздействие на организм многокомпонентных гаптенных комбинаций [1]. Длительность воздействия техногенных химических факторов, определяемая стажем работы, отражается на степени дисрегуляции иммунной системы [2]. Запрограммированная гибель клетки — апоп-тоз — играет важную роль в реализации механизмов адаптации организма к воздействию фактов производственной среды. Это генетически регулируемый процесс, участвующий в дифференцировке, морфогенезе, а также в поддержании клеточного гомеостаза. Многочисленные работы демонстрируют нарушения процесса клеточной гибели при стрессовых состояниях как в сторону активации, так и в сторону ингибирования. Вместе с тем не получен ответ на вопрос, как условия производственной среды модифицируют запрограммированную клеточную гибель, используя CD25+ и CD95+(FAS) факторы клеточной активации.
Цель данной работы — оценка особенностей состояния активационных клеточных маркеров у аппаратчиков производства активированных углей.
Материалы и методы. Всего было обследовано 111 человек в возрасте от 20 до 60 лет (средний возраст 40,63 ± 2,40 года), мужчин — 58 человека (52,25 %), женщин — 53 человек (47,75 %). В основную группу вошли 72 человека, по профессиональному составу аппаратчики, занятые на производстве активированных
углей. Возраст обследуемых основной группы от 20 до 60 лет (средний возраст 43,65 ± 2,14 года), мужчин — 38 человек (52,78 %), женщин — 34 человека (47,22 %). Контрольную группу составили 39 человек в возрасте от 20 до 54 лет (средний возраст 39,83 ± 2,90 года), мужчин - 20 (51,30 %), женщин - 19 (48,70 %), не имеющих контакта с производственными вредностями. Основная и контрольная группы были сопоставимы по возрасту, половому составу и соматической заболеваемости. Выборка обследуемых была достаточна для достоверного определения межгрупповых различий.
Фенотипирование лимфоцитов проводилось на проточном цитометре FACSCalibur фирмы «Becton Dickinson» («BD», USA) с использованием универсальной программы CellQuestPrO с помощью компьютера Macintosh. Определение CD25+-, CD95+-лимфоцитов проводилось методом мембранной иммунофлюоресценции с использованием панели меченых моноклональных антител к мембранным CD-рецепторам («BD», USA), при этом регистрировалось суммарно не менее 10 тыс. событий.
Определение органических соединений выполнялось в соответствии с МУК 4.1.2102— 4.1.2116—06 на жидкостном и газовом хроматографах [3].
Для статистической обработки результатов исследования применялись методы математической статистики с помощью программы Microsoft® Office Excel 2003 и пакета приклад-
38
ЗНиСО октябрь №10 (223)
Таблица 1. Содержание низкомолекулярных химических соединений в крови обследуемых
Показатели Группа контроля Аппаратчики
(n=39), M ± m (n=57), M ± m
фенол, мг/л 0,0531+0,002 0,0634+0,005
о-крезол, мг/л 0,0 0,0015+0,0007
м-крезол, мг/л 0,0 0,0049+0,002*
п-крезол, мг/л 0,0 0,0040+0,001*
ных программ Statistica 6.0. (StatSoft, США). Статистический анализ данных проводился методами описательной статистики и сравнения выборок (с использованием t-критерия Стьюдента), корреляционного анализа (с использованием коэффициента корреляции и коэффициента детерминации). Характер статистического распределения по выборкам устанавливали по критерию согласия — х2. Качественные данные представлены в виде абсолютных или относительных (%) частот, количественные признаки представлены как M ± m (среднее арифметическое ± ошибка среднего). Достоверность отличий между группами считалась значимымой при р < 0,05.
Обсуждение результатов. Оценка уровня контаминации биосред у испытуемых основной группы позволила установить, что в организме работающих в условиях химического производства регистрируется значимое повышение концентрации м-крезола и п-крезола по сравнению с группой контроля (р < 0,05) (табл. 1). В крови обследуемых контрольной группы крезолы (о-крезол, м-крезол, п-крезол) данной методикой не идентифицировались.
Анализ результатов показал, что у всех обследуемых основной группы наблюдается статистически значимое повышение раннего активационного маркера CD25+, как в относительных, так и в абсолютных величинах по сравнению со значениями, полученными в группе контроля (р < 0,05) (табл. 2). Увеличение содержания лимфоцитов, экспрессирую-щих CD25+, свидетельствует об активации Ти В-лимфоцитов.
Повышение относительного и абсолютного числа маркера поздней клеточной активации CD95+ у обследуемых основной группы имеет выраженный характер с высокой степенью достоверности различий с аналогичными показателями группы контроля (р < 0,05). Однако FAS лишь отражает готовность клеток к рецепции апоптогенного сигнала. Вклад CD95+ в клеточную гибель зависит от специфической восприимчивости клетки к FAS-зависимому апоптозу.
Существует достоверная отрицательная зависимость содержания лимфоцитов, экс-перссирующих ранний маркер активации CD25+ (г = -0,20, р < 0,05) и клеток, экс-прессирующих поздний маркер активации CD95+ (г = -0,23, р < 0,05) от концентрации п-крезола в биосредах работающих в условиях производства.
Выявлено, что с увеличением в биосредах работающих в условиях производства уровня фенолсодержащих соединений пропорционально возрастает количество лимфоцитов, экспрессирующих на мембране CD25+ и CD95+. Повышение генетически детерминированной клеточной гибели активированных лимфоцитов является одним из механизмов, отражающих формирование повышенной чувствительности иммунокомпетентных клеток к антигенной перестройке в условиях контаминации фенолами.
Таким образом, полученные данные свидетельствуют о существовании антигенной стимуляции у аппаратчиков, занятых на производстве активированных углей, что способ-
Таблица 2. Характеристика отдельных показателей иммунного статуса обследуемых
Показатели Группа контроля (n = 39), M + m Аппаратчики (n = 72), M + m
CD25+, % 9,21 + 0,63 13,84 + 0,68*
CD25+,109/n 0,18 + 0,01 0,31 + 0,02*
CD95+, % 35,14 + 1,55 42,21 + 1,21*
CD95+,109/n 0,69 + 0,03 0,96 + 0,05*
* - разница достоверна по сравнению с группой контроля (р < 0,05)
октябрь №10 (223) ЗНиСО
39
ствует перестройке рецепторов лимфоцитов и повышает их готовность к клеточной гибели. Рекомендуется производить контроль качества воздуха рабочей зоны, включая в дополнение к фенолу его производные — п- и м-крезолы.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Зайцева Н.В., Аверьянова Н.И., Корюкина И.П. Экология и здоровье детей Пермского региона. Пермь, 1997. 146 с.
2. Тарханов А.Э. Влияние тяжелых металлов на формирование хронической перинатальной заболеваемости и задержку внутриутробного развития плода у беременных промышленного города / А.Э. Тарханов, В.Н. Прохоров, Л.А. Ковальчук
//Вестник Уральской медицинской академической науки. 2005. № 4. С. 84—91.
3. Уланова Т.С. Определение вредных веществ в биологических средах: Сборник методических указаний. М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2008. 183 с.
4. Гигиена труда: Учебник / Под ред. Н.Ф. Измерова, В.Ф. Кириллова. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2003. 592 с.
Контактная информация:
Долгих Олег Владимирович, тел.: 8 (342) 236-39-30, е-mail oleg@ice.perm.ru
Contact information:
Dolgikh Oleg Vladimirovich, phone: 8 (342) 236-39-30. e-mail oleg@ice.perm.ru
