CC BY
42
АГРЕГАЦИЯ НЕЙТРОФИЛОВ У БОЛЬНЫХ АРТЕРИАЛЬНОЙ ГИПЕРТОНИЕЙ С ДИСЛИПИДЕМИЕЙ, ПОЛУЧАЮЩИХ РОЗУВАСТАТИН
И. А. Скорятина
Областной клинический противотуберкулезный диспансер г. Курска ул. Мичурина, 89, Курск, Россия, 305003
И.Н. Медведев
Кафедра адаптивной физической культуры и медико-биологических наук Курский институт социального образования (филиал Российского государственного социального университета) ул. Пирогова, 12б, Курск, Россия, 305035
Цель работы: установить динамику способности нейтрофилов к агрегации у лиц с артериальной гипертонией и дислипидемией на фоне приема розувастатина.
Обследовано 30 больных артериальной гипертонией 1—2-й степени с дислипидемией 11б типа, риск 4, среднего возраста. Контроль представлен 26 здоровыми людьми аналогичного возраста. Больные получали розувастатин — 5 мг на ночь.
В условиях артериальной гипертонии с дислипидемией выявлено усиление агрегации нейтрофилов. В результате применения розувастатина у больных артериальной гипертонией с дислипидемией уже через 16 недель отмечена нормализация липидного состава, процессов перекисного окисления липидов и агрегации нейтрофилов.
Ключевые слова: нейтрофилы, перекисное окисление липидов, артериальная гипертония, дислипидемия, розувастатин.
В настоящее время в России по-прежнему сохраняется среди населения широкая распространенность артериальной гипертонии (АГ), все чаще сочетающейся с метаболическими нарушениями, видное место среди которых занимает дисли-пидемия (Д) [4]. Данное сочетание часто ведет к повышению агрегации форменных элементов крови [5, 8], в том числе лейкоцитов, и наиболее многочисленной их популяции — нейтрофилов, способствуя повышению тромбогенной опасности [1]. Не вызывает сомнений, что больным АГ с Д абсолютно показаны статины, использование которых способно снижать смертность от сердечно-сосудистых причин, значимо повышая качество жизни и улучшая общий прогноз [4, 5]. Вместе с тем динамика выраженности агрегационной способности нейтрофилов у больных АГ с Д, получающих статины, изучена весьма недостаточно. При этом остается не оценено влияние современного и все чаще применяемого в России розува-статина на выраженность агрегации нейтрофилов. В этой связи в настоящей работе сформулирована цель — установить динамику способности нейтрофилов к агрегации у лиц с АГ и Д на фоне приема ими розувастатина.
Материалы и методы. Проведенная работа выполнена на 30 пациентах с АГ 1—2-й степени и Д Пб типа, риск 4 [4], среднего возраста. Группу контроля составили 26 здоровых людей аналогичного возраста. Количество общего холестерина (ХС) и триглицеридов (ТГ) в плазме оценивали энзиматическим колориметрическим методом набором фирмы «Витал Диагностикум». ХС липопротеидов высокой плотности (ЛПВП) определяли набором фирмы «Ольвекс Диагностикум» эн-
зиматическим колориметрическим методом. Уровень ХС липопротеидов низкой плотности (ЛИНИ) определяли расчетным путем [5]. Содержание ХС (липопротеидов очень низкой плотности (ЛИОНИ)) устанавливали по формуле (содержание ТГ/2,2). Полученные показатели общего ХС и ХС ЛИНИ рассматривали как нормальные, пограничные или высокие в соответствии с V пересмотром Российских рекомендаций по диагностике и коррекции нарушений липидного обмена с целью профилактики и лечения атеросклероза [5].
У всех обследованных определяли активность перекисного окисления липи-дов (ИОЛ) в плазме по содержанию тиобарбитуровой кислоты (ТБК)-активных продуктов набором фирмы «Агат-Мед» и ацилгидроперекисей (АГИ) [3]. Антиокислительный потенциал жидкой части крови определяли по И.А. Волчегорскому и соавт. (2000) [2].
Иосле отмытия и ресуспендирования нейтрофилов в них количественно определены уровни ХС энзиматическим колориметрическим методом набором «Витал Диагностикум» и общих фосфолипидов (ОФЛ) по содержанию в них фосфора [7]. Внутри отмытых и ресуспендированных нейтрофилов устанавливали перекисное окисление липидов по концентрации малонового диальдегида (МДА) и по содержанию АГИ [3] с оценкой активности в них каталазы и суперак-сиддисмутазы (СОД) [10].
Агрегацию нейтрофилов регистрировали на фотоэлектроколориметре [6], используя их суспензию в физрастворе после отмытия от плазмы. В качестве индукторов агрегации применялись лектин зародышей пшеницы в дозе 32 мкг/мл, конканавалин А — 32 мкг/мл и фитогемагглютинин — 32 мкг/мл.
Всем пациентам назначался препарат розувастатин 5 мг на ночь в сочетании с метаболически нейтральным эналаприлом по 10 мг два раза в сутки. Оценка всех учитываемых клинических и лабораторных показателей проводилась в начале лечения, через 4,16, 52 и 104 недели терапии. Статистическая обработка полученных результатов проведена ¿-критерием Стьюдента.
Результаты исследований. У включенных в исследование больных в исходном состоянии отмечена дислипидемия, сопровождающаяся активацией ИОЛ плазмы — содержание в ней АГИ в 2,2 раза, а уровень ТБК-активных продуктов в 1,4 раза превышали контрольные значения. Ири этом антиоксидантный потенциал плазмы составлял у них всего 23,7 □ 0,09%, уступая контролю в 1,4 раза (табл.).
Количественное содержание холестерина в нейтрофилах наблюдаемых пациентов превышало контроль на 33,9% при снижении ОФЛ до 0,35 □ 0,004 мкмоль/ 109 ней. Активности каталазы и СОД в нейтрофилах у наблюдаемых больных значимо уступали контролю, что создавало условия для образования в них большого количества АГИ (повышен в 1,5 раза) и МДА (повышен в 2 раза) (табл.).
Таблица
Учитываемые показатели плазмы и нейтрофилов больных, принимающих розувастатин
Иараметры
Розувастатин, п = 30, М □ т
Контроль,
исход 4 нед. 16 нед. 52 нед. 104 нед. n = 26, М □ m
ОХС, ммоль/л 6,5 □ 0,05 5,4 □ 0,04 р1 < 0,01 4,5 □ 0,08 р1 < 0,01 4,4 □ 0,06 4,4 □ 0,05 4,8 □ 0,05 р < 0,01
ХС ЛПВП, ммоль/л 1,03 □ 0,004 1,21 □ 0,005 р1 < 0,01 1,64 □ 0,007 р1 < 0,01 1,65 □ 0,005 1,66 □ 0,002 1,60 □ 0,006 р < 0,01
ХС ЛПНП, ммоль/л 4,18 □ 0,05 3,05 □ 0,06 р1 < 0,01 2,10 □ 0,06 р1 < 0,01 1,99 □ 0,05 1,98 □ 0,08 2,43 □ 0,04 р < 0,01
ХС ЛПОНП, ммоль/л 1,29 □ 0,005 1,14 □ 0,005 р1 < 0,01 0,76 □ 0,006 р1 < 0,01 0,76 □ 0,007 0,76 □ 0,003 0,77 □ 0,005 р < 0,01
ТГ, ммоль/л 2,83 □ 0,06 2,50 □ 0,04 р1 < 0,01 1,68 □ 0,07 р1 < 0,01 1,68 □ 0,05 1,67 □ 0,08 1,70 □ 0,02 р < 0,01
АГП плазмы, Д233/1 мл 3,20 □ 0,08 2,60 □ 0,05 р1 < 0,01 1,42 □ 0,06 р1 < 0,01 1,42 □ 0,04 1,41 □ 0,05 1,42 □ 0,09 р < 0,01
ТБК плазмы, мкмоль/л. 5,15 □ 0,13 4,68 □ 0,04 р1 < 0,01 3,56 □ 0,05 р1 < 0,01 3,55 □ 0,06 3,54 □ 0,08 3,56 □ 0,07 р < 0,01
Антиокислительный потенциал плазмы, % 23,7 □ 0,09 26,9 □ 0,05 р1 < 0,01 32,9 □ 0,10 р1 < 0,01 32,9 □ 0,07 33,0 □ 0,05 32,9 □ 0,12 р < 0,01
ХС нейтрофилов, мкмоль/ 109 ней. 0,83 □ 0,006 0,70 □ 0,008 р1 < 0,01 0,61 □ 0,006 р1 < 0,01 0,61 □ 0,005 0,60 □ 0,004 0,62 □ 0,004 р < 0,01
ОФЛ нейтрофилов, мкмоль / 109 ней. 0,35 □ 0,004 0,47 □ 0,007 р1 < 0,01 0,53 □ 0,005 р1 < 0,01 0,52 □ 0,004 0,53 □ 0,007 0,51 □ 0,003 р < 0,01
АГП нейтрофилов, Д233/ 109 ней. 3,52 □ 0,03 3,12 □ 0,04 р1 < 0,01 2,35 □ 0,05 р1 < 0,01 2,36 □ 0,03 2,35 □ 0,05 2,36 □ 0,05 р < 0,01
МДА нейтрофилов, нмоль/ 109 ней. 1,43 □ 0,05 1,23 □ 0,05 р1 < 0,01 0,73 □ 0,04 р1 < 0,01 0,73 □ 0,04 0,72 □ 0,06 0,73 □ 0,03 р < 0,01
Каталаза нейтрофилов, МЕ/109 ней. 5234,0 □ □ 20,21 5798,0 □ □ 15,90 р1 < 0,05 9952,1 □ □ 16,95 р1 < 0,01 9950,3 □ □ 18,12 9951,5 □ □ 17,65 9950,0 □ □ 19,77 р < 0,01
СОД нейтрофилов, МЕ/109 ней. 1236,1 □ □ 3,85 1453,2 □ □ 4,72 р1 < 0,01 1783,0 □ □ 5,18 р1 < 0,01 1784,2 □ □ 4,24 1781,0 □ □ 4,58 1780,0 □ □ 4,21 р < 0,01
Агрегация с лектином, % 24,6 □ 0,06 19,1 □ 0,05 р1 < 0,01 15,6 □ 0,04 р1 < 0,01 15,5 □ 0,06 15,4 □ 0,08 15,6 □ 0,07 р < 0,01
Агрегация с конканавалином А, % 19,6 □ 0,04 16,2 □ 0,05 р1 < 0,01 14,8 □ 0,04 р1 < 0,01 14,7 □ 0,07 14,6 □ 0,08 14,8 □ 0,04 р < 0,01
Агрегация с фито-гемагглю-тинин, % 42,2 □ 0,06 38,0 □ 0,05 р1 < 0,01 30,6 □ 0,07 р1 < 0,01 30,5 □ 0,03 30,5 □ 0,08 30,6 □ 0,09 р < 0,01
Примечание: Условные обозначения: р — достоверность различий исходных значений и контроля, р1 — достоверность динамики показателей на фоне лечения.
Агрегация нейтрофилов у больных была активирована со всеми испытанными индукторами (с лектином — на 57,7%, с конканавалином А — на 32,4%, с фитогемагглютинином — на 37,9%).
Уже в результате 4-недельного приема препарата у больных достигнуто снижение выраженности Д, сочетающееся с повышением АОА и снижением первич-
ных и вторичных продуктов ИОЛ в плазме. Иолученные позитивные изменения углублялись к 16-й неделе лечения, обеспечив нормализацию липидного состава плазмы с его стойким закреплением в течение последующего наблюдения. Это сопровождалось достижением в эти сроки полной нормализацией антиокислительного потенциала плазмы (32,9 □ 0,10%) и количества продуктов пероксидации липидов в ней. Так, концентрация АГИ плазмы больных в эти сроки применения розувастатина составила 1,42 □ 0,06 Д233/1 мл, а ТБК-активных продуктов — 3,56 □ □ 0,05 мкмоль/л, закрепляясь на достигнутом уровне при продолжении терапии.
Уже через 4 недели терапии выявлено снижение в них уровня ХС на 18,6% и повышение ОФЛ — на 34,3%. В результате 16-недельного лечения произошла полная нормализация исследуемых показателей, сохраняющаяся при продолжении терапии до конца наблюдения.
Спустя месяц терапии содержание АГИ в нейтрофилах снизилось на 12,8%, МДА — на 16,3% при достоверном усилении их антиоксидантной системы. Дальнейшее наблюдение за больными, принимавшими розувастатин, позволило отменить дополнительную положительную динамику ИОЛ в нейтрофилах и их антиок-сидантной защищенности с достижением их нормализации к 16-й неделе приема препарата.
Через 4 недели терапии активность агрегации нейтрофилов с лектином сократилась на 28,8%, с конканавалином А — на 20,9%, с фитогемагглютинином — на 11,0% (таблица). Контроль эффективности 16-недельной терапии позволил выявить нормализацию агрегационной способности нейтрофилов с лектином, с конканавалином А и фитогемагглютинином. Дальнейший прием розувастатина в течение 104 недель обеспечил у пациентов поддержание достигнутого уровня агрегации нейтрофильных лейкоцитов со всеми использованными индукторами на уровне нормы.
Обсуждение результатов. Ведущую роль в формировании реологических дисфункций при АГ с Д играют форменные элементы крови, в том числе нейт-рофилы, которые являются наиболее многочисленной популяцией лейкоцитов. Известно, что Д неизбежно нарушает многие биологические процессы, ослабляя АОА, приводя к активации ИОЛ в жидкой части крови [9]. Интенсификация процесса пероксидации липидов плазмы у этих пациентов вызывает перестройку мембран лейкоцитов, способствуя изменению работы их рецепторного аппарата, а в результате интенсификации ИОЛ внутри них — их вторичных месенджеров. В условиях АГ и Д нейтрофилы начинают активироваться, усиливают выработку медиаторов воспаления и кислородных радикалов, что ведет к экспрессии на их поверхности молекул адгезии — интегринов и селектинов.
Найденная при АГ с Д активация агрегации нейтрофилов была во многом вызвана повышением активности различных углеводных детерминант их глико-протеиновых рецепторов мембраны с лектинами. Ввиду того что фитогемагглюти-нин способен специфически взаимодействовать с участками ЬО-галактозы гли-копротеинов, лектин зародыша пшеницы — с К-ацетил-О-глюкозамином и КТ-аце-
тил-нейраминовой (сиаловой) кислотой, а конканавалин А — с содержащими ман-нозу К-гликанами [1], то по активности данного процесса можно оценивать состояние определенных вариантов рецепторов нейтрофилов, участвующих в их агрегационном процессе. В этой связи можно считать, что при АГ с Д повышение лектин-индуцированной агрегации нейтрофилов связано с экспрессией рецепторов адгезии и увеличением в их составе участков, содержащих К-ацетил-О-глюкозамин, К-ацетил-нейраминовую кислоту, маннозу и ЬО-галактозу.
Выявленное усиление агрегации нейтрофилов у больных АГ с Д нуждалось в адекватной коррекции. В работе была испытана возможность влияния на агрегацию нейтрофилов одного из показанных им гиполипидемических средств — ста-тинов, ранее показавших свою высокую эффективность в плане оптимизации реологических свойств эритроцитов [8, 9]. В ходе проведенных в настоящей работе исследований было установлено, что применение розувастатина приводит не только к улучшению липидного профиля плазмы, но и к оптимизации липидно-го состава мембран нейтрофилов, сопровождаясь ростом антиоксидантной защиты плазмы крови и данной популяции лейкоцитов с ослаблением в них ИОЛ. Терапия розувастатином способствовала быстрой полной нормализации агрега-ционной способности нейтрофилов, что указывает на восстановление у больных углеводной структуры гликопротеиновых рецепторов мембраны нейтрофильных лейкоцитов. Можно считать, что в результате терапии у пациентов с АГ и Д имела место оптимизация количества К-ацетил-О-глюкозамина, №ацетил-нейраминовой (сиаловой) ЬО-галактозы и маннозы в составе их рецепторов на поверхности нейтрофилов. Выводы
1. Для больных АГ с Д свойственно повышение агрегации нейтрофилов, которое обусловливается липидным дисбалансом их мембраны, усилением в них ИОЛ и изменениями в углеводной структуре их гликопротеиновых рецепторов.
2. Уже через 16 недель применения розувастатина у пациентов с АГ и Д достигается нормализация липидного состава, интенсивность ИОЛ в плазме и нейт-рофилах и агрегационной способности нейтрофильных лейкоцитов.
ЛИТЕРАТУРА
[1] Белова Л.А. Биохимия процессов воспаления и поражения сосудов. Роль нейтрофилов // Биохимия. — 1997. — 62 (6). — С. 659—668.
[2] Волчегорский И.А., Долгушин И.И., Колесников О.Л. Экспериментальное моделирование и лабораторная оценка адаптивных реакций организма. — Челябинск, 2000.
[3] Гаврилов В.Б., Мишкорудная М.И. Спектрофотометрическое определение содержания гидроперекисей липидов в плазме крови // Лабораторное дело. — 1983. — № 3. — С. 33—36.
[4] Диагностика и лечение артериальной гипертензии. Российские рекомендации (третий пересмотр) // Кардиоваскулярная терапия и профилактика. — 2008. — № 6 (приложение 2).
[5] Диагностика и коррекция нарушений липидного обмена с целью профилактики и лечения атеросклероза. Российские рекомендации (V пересмотр) // Российский кардиологический журнал. — 2012. — № 4 (приложение 1).
[6] Захария Е.А., Кинах М.В. Упрощенный способ определения агрегации и дезагрегации тромбоцитов // Лабораторное дело. — 1989. — № 1. — С. 36—38.
[7] Колб В.Г., Камышников В.С. Справочник по клинической химии. — Минск: Беларусь, 1982.
[8] Медведев И.Н., Скорятина И.В. Реологические свойства эритроцитов у больных артериальной гипертонией с дислипидемией на фоне ловастатина // Медицинский альманах. — 2011. — № 3(16). — С. 67—70.
[9] Медведев И.Н., Скорятина И.А. Сравнительная характеристика влияния отдельных статинов на реологические свойства эритроцитов у больных артериальной гипертонией с дислипидемией // Вестник РУДН. Серия «Медицина». — 2012. — № 1. — С. 58—65.
[10] Чевари С., Андял Т., Штренгер Я. Определение антиоксидантных параметров крови и их диагностическое значение в пожилом возрасте // Лабораторное дело. — 1991. — № 10. — С. 9—13.
REFERENCES
[1] Belova L.A. Biochemistry of inflammation and vascular lesions. The role of neutrophils // Biochemistry. — 1997. — 62 (6). — P. 659—668.
[2] Volchegorsky I.A., Dolgushin I.I., Kolesnikov O.L. Experimental simulations and laboratory evaluation of adaptive reactions. — Chelyabinsk, 2000.
[3] Gavrilov V.B., Mishkorudnaya M.I. Spectrophotometric determination of the lipid hydroperoxide in plasma // Laboratory practice. — 1983. — № 3. — P. 33—36.
[4] Diagnosis and treatment of hypertension. Russian recommendation (3rd revision) // Cardiovascular therapy and prevention. — 2008. — № 6 (Annex 2).
[5] Diagnosis and correction of lipid metabolism disorders in the prevention and treatment of atherosclerosis. Russian recommendations (V revision) // Russian Cardiology J. — 2012. — № 4 (Appendix 1).
[6] Zachariya E.A., Kinakh M.B. Simplified method for determining aggregation and disaggregation platelet // Laboratory practice. — 1989. — № 1. — P. 36—38.
[7] Kolb V.G, Kamyshnikov V.S. Handbook of Clinical Chemistry. — Minsk: Belarus, 1982.
[8] Medvedev I.N., Skoryatina I.A. Rheological properties of erythrocytes in patients with arterial hypertension and dyslipidemia on the background of lovastatin // Medical almanac. — 2011. — № 3 (16). — P. 67—70.
[9] Medvedev I.N., Skoryatina I.A. Comparative characteristics of the effect of some statins on the rheological properties of red blood cells in patients with arterial hypertension and dyslipid-emia // Bulletin of Peoples' Friendship University of Russua. "Medicine". — 2012. — № 1. — P. 58—65.
[10] Chevary S., Andyal T., Shtrenger Ya. Determination of antioxidant properties of blood and its diagnostic value in the elderly // Laboratory practice. — 1991. — № 10. — P. 9—13.
AGGREGATION OF NEUTROPHILS IN PATIENTS WITH ARTERIAL HYPERTENSION DYSLIPIDEMIC PATIENTS RECEIVING ROSUVASTATIN
I.A. Skoryatina
Regional clinical TB dispensary Michurin str., 89, Kursk, Russia, 305003
I.N. Medvedev
Department of adaptive physical education, department of biomedical sciences Kursk institute of social education (branch of the Russian State Social University) Pirogov str., 12b, Kursk, Russia, 305035
Purpose: To establish the dynamics of tneutrophils ability to aggregation in patients with arterial hypertension (AH) and dyslipidemia receiving rosuvastatin.
Examined 30 patients with AH of 1—2 grade and dyslipidemia type lib, risk of 4, middle age. Control submitted on 26 healthy people of similar age. Patients received rosuvastatin 5 mg per night.
in patients with AH and dyslipidemia increased neutrophil aggregation was revealed. As a result the use of rosuvastatin in patients with AH and dyslipidemia during 16 weeks led to normalization of lipids, lipid peroxidation and aggregation of neutrophils.
Key words: neutrophils, lipid peroxidation, arterial hypertension, dyslipidemia, rosuvastatin.
