CC BY
137
УДК 612.111.7 - 02: 575.174.015.3
Н.Н. Страмбовская
агрегационная Активность тромбоцитов у носителей генетического полиморфизма GPIA(C807T), GPIIIA (т1565с), GPlpa(C434T), P2RY12(H1/H2), sELP(G1087A) тромбоцитарных рецепторов
ГБОУ ВПО «Читинская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения
Российской Федерации, г. Чита
Исследованы частоты аллелей и генотипов для 5 полиморфизмов у здоровых наблюдаемых открытой Забайкальской популяции. При изучении агрегации тромбоцитов максимальные ее значения наблюдались у носителей трех и более мутантных аллелей (р < 0,05). Радиус агрегатов у этой же группы исследуемых был максимальным лишь при изучении спонтанной -1,7 ± 0,4 опт. ед. (р < 0,05) и коллаген-индуцированной агрегации - 7,6 ± 2,5 опт. ед. (р < 0,05).
Ключевые слова: тромбоциты, рецепторы тромбоцитов, агрегация тромбоцитов, полиморфизм генов, популяционная генетика
platelet FuNcTioNs iN HEALTHY persons wiTH GENETic poLYMoRpHisMs GPiA(C807T), GPiiiA(T1565C), GPipa(C434T), P2RY12(H1/H2), sELp(G1087A) platelet receptions
N.N. Strambovskaya
State Budgetary Educational Institution of Higher Professional Education «Chita State Medical
Academy», the Ministry of Healthcare, Russian Federation, Chita
Allele and genotype frequencies of 5 polymorphisms were studied in healthy population in Transbaikalian region. High percent of spontaneous and inductive aggregation were observed in subjects with three or more mutant allele (р <
0,05). These subjects developed maximum radius of aggregates only in spontaneous -1,7 ± 0,4 opt.un. (р < 0,05) and collagen-induced aggregation - 7,6 ± 2,5 opt.un. (р < 0,05).
Key words: platelets, aggregate of platelet, platelet receptions, gene polymorphism, population genetics
введение
На сегодняшний день, в связи с успехами в понимании роли тромбоцитарных рецепторов в процессах тромбообразования, атеросклероза и ангиогенеза, все более пристальное внимание исследователей стали привлекать генетические формы полиморфизма тромбоцитарных протеинов в качестве причины повышенной наклонности к артериальным тромбозам. Тем не менее, роль генетических полиморфизмов белков различных рецепторов при этом не одинаковая, а имеющиеся на сегодняшний день данные весьма противоречивы. Однако уже обнаружена некоторая взаимосвязь между теми или иными формами полиморфизма генов тромбоцитарных рецепторов и тромбозами [1-5, 7]. В соответствии с имеющимися представлениями тромбоциты циркулируют в крови в относительно неактивном состоянии и не взаимодействуют с интактным эндотелием, выстилающим кровеносные сосуды. Однако полиморфизм нуклеотида в регуляторном участке гена может нарушать стабильность протеина и модулировать уровень экспрессии рецептора на поверхности тромбоцита, изменяя его функцию даже в условиях нормы [1].
Цель работы: оценить частоту носительства генетического полиморфизма некоторых белков тромбоцитарных рецепторов ^р1аС807Т; GpШaТ1565С; GpIpaС434Т; P2RY12 Н1/Н2; SELPG1087A) у здоровых резидентов Забайкальского края, проживающих в г. Чита; выявить функциональные изменения параме-
тров сосудисто-тромбоцитарного гемостаза (спонтанная и индуцированная агрегация тромбоцитов) в группе наблюдения.
материалы и методы
Группу наблюдения составили 198 неродственных резидентов открытой популяции Забайкальского края (129 женщин, 69 мужчин) в возрасте 28,5 ± 14,1 лет. Методом исследования послужила полимеразная цепная реакция с детекцией продукта амплификации в агарозном геле, либо в режиме реального времени (амплификатор «MAXYGENE», Германия; «ДТ-96», Россия) на геномной ДНК лейкоцитов периферической крови (ДНК-экспресс кровь, НПФ «Литех», Москва) с использованием комплекта реагентов «Генетика тромбофилии» (ООО «ДНК-Технология», Москва) и отдельных SNP-наборов, соответствующих заявленному полиморфизму (НПФ «Литех», Москва).
Первичный гемостаз (спонтанная и индуцированная агрегатометрия) изучался по турбидиметриче-скому методу Борна с помощью лазерного анализатора агрегации BЮLA (НПФ «Биола», Россия). В качестве индукторов агрегации использовались растворы АДФ разных концентраций, коллагена - 1 мг/мл, адреналина - 1,25 мкг/мл, ристомицина - 0,8 мг/мл (ООО «Технология стандарт», Барнаул).
Изучаемые показатели представлены в виде относительных величин, средних величин со стандартным отклонением (М ± 5). Для оценки соответствия
распределений генотипов ожидаемым значениям при равновесии Харди-Вайнберга и для сравнения распределений частот генотипов и аллелей в двух субпопуляциях использовался критерий х2 с поправкой Йетеса. Для сравнения средних величин применялся критерий Манна - Уитни (и-тест). Значения уровня р < 0,05 рассматривались как статистически значимые. Статистическая обработка данных проводилась с использованием программного пакета Statistica 6.1 (Б^йой, ША).
Проведение исследования одобрено локальным этическим комитетом ГОУ ВПО ЧГМА, протокол № 2 от 06.11.2009 г.
результаты и обсуждение
Выбор генетического полиморфизма продиктован нам многочисленными работами по его фенотипическому проявлению в разных популяциях. В работах Е.Е. Гергесовой (2011) отражена частота полиморфизма интегринов ^рШа ^еи33-Рго), GpIa (С807-Т)) в Забайкалье и влияние носительства последних на функцию тромбоцитов, однако с учетом появления новых данных на большем количестве наблюдений настоящий вопрос вновь был поднят для обсуждения.
В результате исследования обнаружены все искомые мутации в гомо- и гетерозиготном состоянии с частотным подчинением закону Харби - Вайнбер-га. В таблице 1 представлен анализ распределения аллелей (доли) и генотипов (%) изучаемых SNP-полиморфизмов в наблюдаемой популяции.
Комплекс GPIa/IIa играет основную роль при адгезии тромбоцитов к коллагену, а также участвует в активации и стабильной адгезии тромбоцитов к экспонированному субэндотелию сосудов. Помимо тромбоцитов а2^1 интегриновый рецептор присутствует на фибробластах, активированных Т-лимфоцитах, эпителиальных и эндотелиальных клетках [1, 7, 13]. Выявлено несколько полиморфных вариантов этого комплекса, обусловленных вариабельностью гена
GPIa. Нуклеотидная замена С на Т в позиции 807, не приводящая к замене аминокислоты, ассоциирована с повышением плотности рецептора на тромбоците и увеличением индуцируемой коллагеном агрегации тромбоцитов. Аллель 807Т встречается у 35 % представителей кавказской расы, чуть реже - среди афроамериканцев и более характерен для коренного населения Америки. В нашем исследовании частота носительства 807Т-аллеля находится в пределах
0,37, с незначительным различием по половому признаку: у женщин - 0,29, у мужчин - 0,41 (р > 0,05) [1, 4]. В Забайкальской популяции выявлено следующее распределение генотипов: GpIa807СС - 44,8 %, GpIa807СТ - 36,9 %, GpIa807ТТ - 18,3 %, что сопоставимо с данными в других российских субпопуляциях. Однако отмечено, что большая частота мутантного аллеля в гомозиготном варианте встречается среди мужчин, нежели среди женщин: 23,3 % против 15,5 % соответственно (р > 0,05 %) (табл. 1).
Гетеродимер GPIIb/Шa является наиболее многочисленным поверхностным рецептором тромбоцитов, который активируется в результате передачи сигнала от рецепторов адгезии GPVI и GpIb/IX/V, рецепторов, связанных с G-белком (например, рецепторы тромбина PAR-1 и PAR-4), и рецепторов АДФ (P2Y1и P2Y12). В процессе Ca2+-зависимой активации комплекс претерпевает ряд конформационных изменений, которые обеспечивают возможность связывания тромбоцита с фибриногеном [1, 4, 5, 8]. Гены, кодирующие GPIIb/IIIa, локализованы на длинном плече хромосомы 17. К настоящему времени описан ряд мутаций, приводящих к полиморфизму гетеродимера GPIIb/IIIa [7, 15]. Наибольший интерес представляет только точковая мутация, приводящая к замене лейцина на пролин в 33-м положении белка GPIIIa. Данная замена приводит к конформационному изменению ^терминальной дисульфидной петли GPIIIa, относящейся к сайту связывания фибриногена. Замещение лейцина пролином обусловлено заменой Т на С в экзоне 2 гена GPIIIa в положении 1565. Аллель
Таблица 1
Частота встречаемости аллелей и генотипов изучаемых полиморфизмов у резидентов Забайкальской популяции в гендерном аспекте (п = 198)
Полиморфизм Аллель Частота аллеля, р Генотип Частота генотипа, %
в группе жен муж в группе жен муж
вріа (ІТвА2) РИе224РІіе -807С -807Т 0,63 0,37 0,71 0,29 0,59 0,41 -807СС -807СТ -807ТТ 44.8 36.9 18,3 48,1 36.4 15.5 40,6 36,1 23,3
врШа (ІТСВЗ) 1_еи33Рго -1565Т -1565С 0,82 0,18 0,81 0,19 0,82 0,18 -1565ТТ -1565ТС -1565СС 73,6 16,4 10,0 72,9 17.0 10.1 74,1 15,9 10,0
вріра (врір-ІХ-У) Тгр145МеІ -434С -434Т 0,89 0,11 0,89 0,11 0,89 0,11 -434СС -434СТ -434ТТ 78,1 21,4 0,5 79,0 20,2 0,8 78,3 21,7 0
Р2РУ12 Н1 Н2 0,85 0,15 0,84 0,16 0,86 0,14 Н1/Н1 Н1/Н2 Н2/Н2 74,1 21,9 4,0 72,9 22,5 4,6 75,4 21,7 2,9
ЭЕ1_Р ТИг715Рго -1087в -1087А 0,89 0,11 0,89 0,11 0,87 0,13 -1087СС -1087вА -1087АА 79,6 17,9 2,5 81.4 15.5 3,1 75.4 23,2 1.4
Примечание: с2-тест, статистически значимых различий между гендерными группами не выявлено, р > 0,05; жирным шрифтом помечена вариабельность носительства в группах.
Leu33 является более распространенным в европейской популяции, тогда как аллель Pro33 встречается с частотой 10-15 %, также как и в кавказской популяции [15]. В африканской группе частота встречаемости данного аллеля снижается до 5-8 % и, наконец, он практически отсутствует в азиатской популяции [1]. У резидентов Забайкальского края выявлено следующее распределение генотипов: GpIIIa1565TT -73,6 %, GpIIIa1565TC - 15,9 %, GpIIIa1565CC - 10 % с частотой 1565С-аллеля 0,18, межполовых различий в носительстве данного полиморфизма не выявлено.
Комплекс GPIb/IX/V является основным тромбо-цитарным рецептором для фактора Виллебранда и тромбина, а его плотность составляет около 25 тысяч молекул на тромбоцит. Данный рецептор обеспечивает прикрепление тромбоцитов к субэндотелию за счет взаимодействия фактора Виллебранда с N-концевым доменом (1-282) GPIba [2, 14]. К настоящему времени описаны полиморфные варианты гена в двух локусах, имеющие разные аминокислотные последовательности в «тяжелой» цепи комплекса (GPIba). Замена С на Т в положении 3550 гена GPIba приводит к замене треонина на метионин в позиции 145 (Thr145Met) [14]. Следует заметить, что диморфизм треонин/метионин обусловливает и антигенные различия тромбоцитов по системе НРА-2а/2Ь. Замена Thr145Met приводит к конформационным изменениям в области, примыкающей к месту связывания фактора фон Виллебранда с GPIba, хотя in vitro до настоящего времени каких-либо изменений в связывании лиганда с рецептором не было обнаружено. Аллель Met145 встречается приблизительно у 10 % всего белого населения, у 14 % японцев и 18 % афроамериканцев [1, 15]. В популяции Забайкальского края Met145 или GpI^a434T зарегистрирован в 11 % случаев с распределением генотипов полиморфизма: GpI^a434CC - 78,1 %, GpIpa434CT - 21,4 %, GpIpa434TT - 0,5 %, причем мутантные гомозиготы в нашем исследовании встречались лишь среди женщин, однако носительство минорного аллеля было равнозначным в обоих половых группах.
Большую роль в регуляции агрегации играют тромбоцитарные рецепторы АДФ - P2Y1 и P2Y12. Последний спарен с Gi-рецептором и при активации под действием АДФ ингибирует аденилатциклазу и обеспечивает снижение уровня цАМФ. Это приводит к экспрессии GPIIb/IIIa на поверхности тромбоцитов и активации агрегации. P. Fontana и соавторы (2003) выявили в гене P2Y12 4 мутации: 3 аминокислотные замены С139Т, Т744С, G52T и одну вставку ins801A. Все 4 варианта полиморфизма наследуются сцепленно и обуславливают формирование двух гаплотипов Н1 (С139, T744, G52 и отсутствие вставки) и Н2-гаплотип (139Т, 744С, 52Т, ins801A). Частота гаплотипов Н1 и Н2 в популяции составляет 0,86/0,14. Гаплотип Н2 ассоциируется с гиперактивностью тромбоцитов и снижением внутриклеточной концентрацией цАМФ [15]. В исследуемой нами популяции доли аллелей не отличались от общепопуляционных 0,85/0,15, а распределение генотипов: было следующим P2RY12 Н1/Н1 - 74,1 %, P2RY12 Н1/Н2 - 21,9 %, P2RY12 Н2/ Н2 - 4 %. Как оказалось, носительство мутантного
гомозиготного гаплотипа чаще встречалось у женщин, чем у мужчин: 4,6 и 2,9 соответственно (р > 0,05).
Р-селектин тромбоцитов важнейшая адгезивная молекула, необходимая для взаимодействия с несущими PSGL-I иммунными клетками, так как опосредует адгезию пластинок к моноцитам, нейтрофилам и лимфоцитам, приводя к формированию тромбо-цитарно-лейкоцитарных комплексов. Повышенная экспрессия P-селектина отмечается в атеросклеротических бляшках, и это позволяет предполагать роль P-селектина в развитии атеросклероза и коронарных заболеваний сердца. В гене P-селектина идентифицировано 13 полиморфизмов: пять в 5’-фланкирующей области гена и восемь в экзонах, четыре из которых определяют замену аминокислот (ser290asn, asn562asp, leu599val, thr715pro, T741T (A/G)). Полиморфизм P-селектина (ser290asn), как и полиморфизм Е-селектина (ser128arg; G98T) ассоциированы с увеличенным риском преждевременных коронарных заболеваний сердца. Группа французских исследователей (Herrmann S.M. et al., 1998) полагают, что полиморфный вариант Pro715 P-селектина играет защитную роль от возникновения инфаркта миокарда [5, 6, 11, 12]. К сожалению, материалы частотного распределения аллелей в популяциях мира в литературе нам не встретились, но в нашей популяции доля SELP1087A составила 0,11, а распределение генотипов было следующее: SELP1087GG - 79,6 %, SELP1087GA - 17,9 %, SELP1087AA - 2,5 %. Отмечалось некоторое преобладание носительства мутантного генотипа среди женщин, нежели чем среди мужчин: 3,1 % и 1,4 % соответственно (р > 0,05).
В результате анализа ассоциации полиморфизма нами отмечено мультигенное носительство минорных аллелей 3-х и более изучаемых полиморфизмов у 25 исследуемых, в гомо- и гетерозиготном состоянии. Наиболее часто встречались ассоциации (п = 13) GpIa807T||GpIIIa1565С||SELP1087А аллелей.
При оценке агрегационной способности тромбоцитов во всей популяции наблюдаемых максимальная агрегация тромбоцитов наблюдалась на индукцию малыми дозами АДФ с формированием наиболее крупных агрегатов, однако процент агрегированных тромбоцитов был максимален при внесении коллагена и ристомицина, что, вероятно, вызвано максимально быстрой экспрессией многочисленных GpIa807T и GpIIIa1565C рецепторов (табл. 2). Минимальная скорость индуцированной агрегации зафиксирована при внесении слабых агонистов: адреналина и минимально возможных доз АДФ, что связано с косвенной активацией молекул адгезии через, например, адренорецепторы.
Для оценки влияния носительства мутантных аллелей на агрегацию тромбоцитов все исследуемые согласно генотипу были распределены в 4 группы:
1) пациенты - носители «дикого» аллеля изучаемых полиморфизмов в гомозиготном состоянии, п = 34
2) носители ITGA2(Phe224Phe) в гомо- и гетерозиготном состоянии, п = 31
3) носители ITGB3(Leu33Pro) в гомо- и гетерозиготном состоянии, п = 11
Таблица 2
спонтанная и индуцированная агрегационная активность тромбоцитов периферической крови у резидентов забайкальского края, п = 192 (М ± 5)
Агрегация
спонтанная АДФ 2,5 мг/мл АДФ 1,25 мг/мл адреналин коллаген ристомицин
Степень, ОЕ 1,32 ± 0,7 7,7 ± 2,9 6,88 ± 2,8 6,4 ± 2,3 6,6 ± 3,3 6,4 ± 2,4
Степень, % 2,4 ± 2,2 60,1 ± 17,2 26,2 ± 15,4 65,9 ± 25,8 74,2 ± 32,1 73,1 ± 38,7
Скорость, ОЕ 0,3 ± 0,15 21,6 ± 10,9 16,2 ± 10,4 7,3 ± 3,3 13,9 ± 8,6 13,1 ± 4,4
Скорость, % 1,92 ± 0,63 64,6 ± 20,3 40,6 ± 17,4 53,9 ± 25,3 95 ± 33,9 73,5 ± 29,4
Таблица 3
Спонтанная и индуцированная агрегационная активность тромбоцитов периферической крови у носителей генетического полиморфизма GPIA(С807Т), GPШA (Т1565С), GPlpa(С434Т), P2RY12(Н1/Н2),
SELP(G1087A), п = 192 (M ± 5)
Группа Спонтанная Адф 2,5 мг/мл Адф 1,25 мг/мл Адреналин Коллаген Ристомицин
1 ОЕ 1,19 ± 0,33 8,3 ± 2,8 6,6 ± 3,1 6,1 ± 2,1 5,6 ± 2,6 6,7 ± 2,4
% 1,2 ± 0,7 55,4 ± 23,9 38,3 ± 16,2 64,7 ± 26,8 61,3 ± 23,9 57,5 ± 26,9
2 ОЕ 1,29 ± 0,5 8,6 ± 3,0 6,4 ± 3,2 6,9 ± 2,4 6,4 ± 3,3 6,5 ± 2,4
% 1,6 ± 0,74 63,7 ± 28,9* 44 ± 16,0 75,2 ± 34,1 75,1 ± 20,9 60,1 ± 24,7
3 ОЕ 1,3 ± 0,23 6,2 ± 2,4 7,6 ± 2,4 6,1 ± 1,9 6,6 ± 2,5 6,1 ± 2,2
% 2,2 ± 1,1 57,1 ± 21,1 45,1 ± 18,2 65,8 ± 28,2! 84,9 ± 38,9* 65,9 ± 18,6
4 ОЕ 1,7 ± 0,4* 7,6 ± 3,5 6,9 ± 3,4 6,5 ± 3,0 7,6 ± 2,5* 6,7 ± 2,7
% 1,82 ± 0,9* 75,8 ± 15,2* 38,9 ± 22,1 83,0 ± 38,5* 112,1 ± 51,0* 117,2 ± 52,7*
Примечание: и-тест, * - статистическая значимость различий по сравнению с первой группой наблюдения, р < 0,05; и-тест. ! - статистическая значимость различий по сравнению с четвертой группой наблюдения, р < 0,05.
4) носители трех мутаций в гомо- и гетерозиготном состоянии, п = 25
Группы, включающие носителей минорного аллеля GpIpa(Trp145Met), P2RY12(Н1/Н2), SELP(G1087А) выделены не были в силу малого количества наблюдений.
Спонтанная агрегация тромбоцитов (табл. 3) была минимальна в первой группе наблюдения -
1,19 ± 0,33 опт. ед., максимальные значения радиуса агрегатов наблюдались у резидентов с мультиген-ным наследованием полиморфизма - 1,7 ± 0,4 опт. ед. (р < 0,05), что безусловно связано с генетически зависимой экспрессией мембранных рецепторов пластинки и субактивацией тромбоцита даже без присутствия предикторов этого процесса (напряжение сдвига, обнаженный субэндотелий и т.д.). Однако максимальный процент агрегированных тромбоцитов (2,2 ± 1,1) все же отмечался у носителей GpШа1565С-аллеля, кодирующего конформационно измененную субъединицу обильно присутствующего на мембране GPПb/Шa рецептора. Также известно, что спонтанная агрегация осуществляется главным образом при участии фибриногена, вступающего во взаимодействие с GPПb/Шa рецептором, благодаря чему между отдельными кровяными пластинками образуются мосты. При анализе индуцированной агрегации в процентном отношении предсказуемо максимальное ее выражение при внесении всех используемых индукторов наблюдалось у носителей трех и более минорных аллелей. Однако радиус агрегатов
у этой же группы наблюдаемых максимальным был при внесении раствора коллагена - 7,6 ± 2,5 опт. ед. и ристомицина - 6,7 ± 2,7 опт. ед. При индукции АДФ и адреналином наибольший радиус агрегатов был получен у носителей полиморфизма ITGB3(33Pro). Усиление агрегации в данном случае может быть связано с тем, что активация а-адренорецепторов приводит к ингибированию аденилатциклазы и индуцированию доступности фибриногеновых мест связи в GPПb/Шa с последующей агрегацией [3].
заключение
В результате исследования обнаружен весь изучаемый генетический полиморфизм с распределением аллелей и генотипов согласно закону Харди-Вайнберга для открытой популяции с некоторыми гендерными особенностями в носи-тельстве, но равноценными общепопуляционным показателями. Изучение адгезивно-агрегационной активности тромбоцитов у здоровых резидентов-носителей различного генетического полиморфизма при отсутствии проагрегантных условий показало сравнительное изменение функции кровяных пластинок в зависимости от наличия или отсутствия генетического дефекта, что прогностически может иметь большое значение в условиях провокации (атеросклероз, изменение артериального давления и скорости тока крови и т.д.). Полученные результаты генотипирования по основным протромбогенным мутациям/полиморфизму в будущем помогут избе-
жать или снизить риск тромботического эпизода, а также помочь при необходимости подбора терапии с учетом фармакогенетической резистентности или чувствительности к препаратам.
литература
1. Воронина Е.Н. Филипенко М.Л., Сергевичев Д.С. Мембранные рецепторы: функции и полиморфизм // Вестник ВОГиС. - 2006. - Т. 10, № 3. - С. 553-564.
2. Гайфуллина Р.Ф., Катина М.Н., Ризванова Ф.Ф., Кравцова О.А. и др. Роль генетического полиморфизма в патогенезе цереброваскулярных заболеваний // Казанский медицинский журнал. - 2012. - Т. 93, № 4. - С. 663-677.
3. Гергесова Е.Е. Генетический полиморфизм GpIIIa (Leu33-Pro), GpIa (C807-T) и функции тромбоцитов у лиц с разными группами крови АВО в норме и при гриппе А(Н1М)2009: автореф. дис. ... канд. мед. наук. - Чита, 2011. - 24 с.
4. Капустин С.И., Салтыкова Н.Б., Кобилян-ская В.А., Дрижун Ю.С. Особенности генетического полиморфизма компонентов системы гемостаза при различных клинических проявлениях венозного тромбоэмболизма // Вестник гематологии. - 2009. -Т. V, № 1. - С. 16-24.
5. Кузник Б.И. Клеточные и молекулярные механизмы регуляции системы гемостаза в норме и патологии. - Чита: «Экспресс-издательство», 2010. - 827 с.
6. Кузник Б.И. Физиология и патология системы крови - 4-е изд., доп. и перераб. - Чита: Типография газеты «Ваша реклама», 2004. - 336 с.
7. Сироткина О.В. Молекулярно-генетические механизмы активации тромбоцитов и чувствительности к антиагрегантным препаратам : автореф. дис. ... докт. биол. наук. - СПб., 2011. - 48 с.
8. Шестаков А.М. Комплексный молекулярно-генетический анализ полиморфизма генов-кандидатов гипертонической болезни в популяции русских жителей центрального Черноземья: автореф. дис. . канд. мед. наук. - М., 2010. - 20 с.
9. CadroyY., Sakariassen K.S., Charlet J.P. et al. Role of 4 platelet membrane glycoprotein polymorphisms on experimental arterial thrombus formation in men // Blood. - 2001. - Vol. 98. - P. 3159-3161.
10. Carter A.M., Cato A.J., Bamford J.M., Grant P.J. Association of the platelet glycoprotein Ibis HPA-3 polymorphism with survival after ischemic stroke // Stroke. -1999. - Vol. 30. - P. 2606-2611.
11. Herrmann S.M., Ricard S., Nicaud V., Mallet C. et al. The P-selectin gene is highly polymorphic: reduced frequency of the Pro715 allele carriers in patients with myocardial infarction // Hum. Mol. Genet. - 1998. -Vol. 7. - Р. 1277-1284.
12. Kelly A. SELP and SELPLG Genetic Variation Is Associated with Cell Surface Measures of SELP and SELPLG: The Atherosclerosis Risk in Communities (ARIC) // Carotid MRI Study Clin Chem. - 2009 June. - Vol. 55(6). - P. 1076-1082. doi:10.1373/ clinchem.2008.119487.
13. Kunicki T.J., Orchekowski R., Annis D., Honda Y. Variability of integrin alpha 2 beta 1 activity on human platelets // Blood. - 1993. - Vol. 82. - P. 2693-2703.
14. Ruggeri Z.M., Zimmerman T.S. et al. Von Wille-brand factor binding to platele glycoprotein Ib complex // Methods Enzymol. - 1992. - Vol. 215. - P. 263-275.
15. Информационная система по медицински-значимым полиморфизмам генома человека. - Режим доступа: http: // www.genepassport.ru. - загл. с экрана (6 сентября 2013).
references
1. Voronina E.N., Filipenko M.L., Sergeyevichev D.S., Pikalov I.P. Platelet membrane glycoprotein receptors: function and polymorphism // Russian Journal of Genetics: Applied Research. - 2006. - Vol. 10, N 3. -P. 553-564.
2. Gayfullina R.F., Katina M.N., Rizvanova F.F., Kravtsova O.A. et al. Role of genetic polymorphism in the pathogenesis of cerebrovascular disease // Kazanskiy medicinskiy zhurnal. - 2012. - Vol. 93, N 4. - P. 663-677.
3. Gergesova E.E. Genetic polymorphisms GpIIIa (Leu33-Pro), GpIa (C807-T) and function platelets of the АВО histo-blood group system in healthy and in influence А(ШМ)2009 : abstract of dissertation of candidate of medical sciences. - Chita, 2011. - 24 p.
4. Kapustin S.I., Saltykova N.B., Kobilyanskaya V.A., Drizhun Yu.S. Hemostatic genes polymorphisms in patients with distinct clinical manifestations of venous thromboembolism // Vestnik gematologii. - 2009. - Vol. V, N 1. - P. 16-24.
5. Kuznik B.I. Cellular and molecular mechanisms regulation of hemostasis in healthy and pathology. - Chita: Express-izdatelstvo, 2010. - 827 p.
6. Kuznik B.I. Physiology and pathology of blood system - 4th ed., supplemented and revised. - Chita: Vasha reklama, 2004. - 336 p.
7. Sirotkina O.V. Molecular-genetic mechanisms of platelets activation and sensitivity for antiaggregation drugs: abstract of dissertation of candidate of biological sciences. - Saint-Petersburg, 2011. - 48 p.
8. Shestakov A.M. A comprehensive molecular genetic analysis of polymorphisms of candidate genes responsible for essential hypertension in Russian inhabitants of Central Chernozem region of Russia: abstract of dissertation of candidate of medical sciences. - Moskva, 2010. - 20 p.
9. Cadroy Y., Sakariassen K.S., Charlet J.P. et al. Role of 4 platelet membrane glycoprotein polymorphisms on experimental arterial thrombus formation in men // Blood. - 2001. - Vol. 98. - P. 3159-3161.
10. Carter A.M., Cato A.J., Bamford J.M., Grant P.J. Association of the platelet glycoprotein Ibis HPA-3 polymorphism with survival after ischemic stroke // Stroke. -1999. - Vol. 30. - P. 2606-2611.
11. Herrmann S.M., Ricard S., Nicaud V., Mallet C. et al. The P-selectin gene is highly polymorphic: reduced frequency of the Pro715 allele carriers in patients with myocardial infarction // Hum. Mol. Genet. - 1998. -Vol. 7. - Р. 1277-1284.
12. Kelly A. SELP and SELPLG Genetic Variation Is Associated with Cell Surface Measures of SELP and SELPLG: The Atherosclerosis Risk in Communities (ARIC) // Carotid MRI Study Clin Chem. - 2009 June. - Vol. 55 (6). - P. 1076-1082. doi:10.1373/clinchem.2008.119487.
13. Kunicki T.J., Orchekowski R., Annis D., Honda Y. Variability of integrin alpha 2 beta 1 activity on human platelets // Blood. - 1993. - Vol. 82. - P. 2693-2703.
14. Ruggeri Z.M., Zimmerman T.S. et al. Von Willebrand factor binding to platele glycoprotein Ib complex // Methods Enzymol. - 1992. - Vol. 215. -P. 263-275.
15. Information system on the medically important human genome polymorphisms to be. - Access mode: http: // www.genepassport.ru. - The title screen (6 September 2013) (in Russian).
сведения об авторах
Страмбовская Наталья Николаевна - кандидат медицинских наук, ассистент кафедры нормальной физиологии ГБОУ ВПО Читинская государственная медицинская академия МЗ РФ ( 672090, г. Чита, ул. Горького, 39а, тел. 79148440158, e-mail: strambovskaya@yandex.ru)
information about the authors
Strambovskaya Natalia Nikolaevna - candidate of medical sciences, assistant lecturer of the department of normal physiology of Chita State Medical Academy (Chita, Gorkogo str., 39a, 672090; tel. 79148440158, e-mail: strambovskaya@yandex.ru)
