УДК 616-092.18+613.81+612.33
Случанко Е.И.
АДАПТАЦИОННЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ ТОНКОЙ КИШКИ ПОД ВЛИЯНИЕМ НАДВЕННОГО ЛАЗЕРНОГО ОБЛУЧЕНИЯ КРОВИ В КОМПЛЕКСНОМ ЛЕЧЕНИИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ЭТАНОЛОВОЙ ИНТОКСИКАЦИИ
Кафедра фундаментальной медицины и биохимии Псковского государственного университета, Псков, Россия, [email protected]
Резюме.
Работа посвящена фундаментальным медико-биологическим исследованиям, позволяющем понять значение лазерной стимуляции в комплексном лечении этаноловой интоксикации. Экспериментальное патогенетически обоснованное применение лазерной стимуляции инициирует активацию адаптационных процессов, что выражается в восстановлении моторной функции тонкой кишки на 3 сутки после лечения этаноловой интоксикации.
Ключевые слова: лечение экспериментальной этаноловой интоксикации, лазерные технологии, нейромедиация, моторная функция тонкой кишки, адаптационные процессы.
Summary.
Sluchanko E.I. Adaptive changes of the small intestine under the influence of laser irradiation of the blood plasma in the complex treatment of experimental ethanol intoxication
The work is devoted to fundamental medical and biological research, which allows to understanding the importance of laser stimulation in the complex treatment of ethanol intoxication.Experimental pathogenetic reasonable application of laser stimulation initiates the activation of adaptive processes, which is expressed by the motor function of the small intestine on day 3 after treatment with ethanol intoxication. Key words: treatment of experimental ethanol intoxication, laser technology, newromediation, motor function of the small intestine, adaptation processes.
Введение. Алкоголизм в Российской Федерации - одна из важнейших медико-социальных проблем. Широкая распространенность этаноловой интоксикации (ЭИ) определяет её медико-социальную значимость, как
важнейшего фактора высокой инвалидизации и смертности в мире [1-4,15,16]. Медико-демографические исследования показывают, что значительная часть проблем здоровья населения, связанная с употреблением алкоголя, приводят к физической и нравственной деградации человека [6-9, 20, 21].Установлено, что этаноловая интоксикация сопровождается значительными изменениями основных видов обмена, развитием метаболической дисфункции, гипоксии, нарушением процессов биологического окисления и активации процессов перекисного окисления липидов, т.е. общей дизрегуляцией систем гомеостаза [14, 18, 19].
Значимость рассматриваемой патологии определяет актуальность и необходимость проведения исследований, предмет которых - разработка инновационных методов патогенетического воздействия в комплексном лечении ЭИ.
Разработка новых патогенетически обоснованных методов лечения ЭИ остаётся одним из актуальных вопросов клинической медицины. В настоящее время наиболее перспективным направлением в комплексном лечении ЭИ является применение инновационных лазерных технологий. Цель работы: Изучить влияние надвенного лазерного облучения крови (НЛОК) на моторику и функциональную активность нейромедиаторных систем тонкой кишки в комплексном лечении экспериментальной ЭИ. Материал и методы: Модель ЭИ у крыс линии Вистар (90) создавали по методике Шелыгина К.В. и соавт [5]. Модель ЭИ создавали введением ежедневно интрагастрально 40% р-ра этанола из расчета 4г/кг/сут массы в течение 5 сут. В качестве экспериментальных животных были выбраны половозрелые крысы обоего пола массой тела 220-250 г.
Выбор данного вида лабораторных животных обусловлен сравнимостью алкогольобусловленных изменений у крыс с таковыми у человека, морфофизиологическими особенностями этих животных (отсутствием отвращения к этанолу и рвотного рефлекса на его действие, постоянной заполненностью желудка пищей), простотой содержания и легкостью выполнения с ними различных процедур (фиксации, введения этанола с помощью зонда и т.д.) Условия содержания и кормления экспериментальных животных соответствовали ''санитарным правилам по устройству, оборудованию и содержанию экспериментально-биологических клиник'', утвержденным Приказом МЗ СССР N 1179. от 10.10.83 г. Эксперименты над животными были проведены в соответствии с Европейской конвенцией о
1032
защите животных, используемых в эксперименте (Директива 86/609EEC). Распределение экспериментального материала по сериям опытов и срокам наблюдений представлено в таблице 1.
Таблица №1
Серия Характер опытов Сроки наблюдений (сут) Количество животных
1 2 3
Контроль 10
I Этаноловая интоксикация 7 7 6 20
II Этаноловая интоксикация +лечение 10 10 10 30
III Этаноловая интоксикация +лечение+НЛОК 10 10 10 30
Итого: 90
Во второй серии экспериментов изучался характер изменений показателей двигательной функции тонкой кишки у животных с ЭИ (п=30) под влиянием традиционных методов лечения. Сразу после постановки модели ЭИ и в течение 5 сут животным II серии опытов проводили адекватную компенсацию обменных, водно-электролитных, гемодинамических нарушений, включающих в себя достаточную инфузионно-детоксикационную терапию (водно-электролитные растворы, гемодез из расчета 7г/кг в течение суток внутривенно через хвостовую вену).
С целью биоэнергической активации в комплексном лечении ЭИ проводили курс НЛОК с помощью гелий-неонового лазера ЛГ-79-1 с длиной волны 633 нм при мощности на выходе световода 2мВт, экспозицией 20 мин на область проекции бедренной вены и наружной яремной вены. Для изучения моторики тонкой кишки применяли электрофизиологический метод компьютерной периферической электроэнтерографии [10]. Из регистрируемых биопотенциалов в качестве исследуемых критериев взяты следующие показатели гармонической составляющей: величина электрического потенциала ВЭП (мКВ), количество максимумов КМ (мак/ мин), степень аритмии СА(усл.ед.). Для выявления адренергических волокон применяли метод инкубации с глиоксиловой кислотой [13] в модификации Случанко Е.И. [11], а холинергических волокон - метод Карновского-Рутс
1033
[17]. Плотность адрен- и холинергических сплетений определяли методом Стропуса Р.А. [12]. Активность катехоламинов в адренергических и ацетилхолинэстеразы (АХЭ) в холинергических нервных сплетениях тонкой кишки оценивали цитофлюориметрическим методом на микроскопе ЛЮМАМ И-2 с фотометрической насадкой ФМЭЛ-1А. Весь полученных цифровой материал был подвергнут статистической компьютерной обработке с использованием программ statgraph.
Результаты: Установлено, что в механизме развития кишечной энтеропатии при экспериментальной ЭИ одним из ведущих факторов является дисфункция вегетативной нервной системы. Анализ полученных в результате исследований данных свидетельствует, что под влиянием НЛОК, применяемом в комплексном лечении экспериментальной ЭИ, достаточный уровень двигательной активности тонкой кишки восстанавливался в среднем через 3 суток после окончания лечения (рис.1).
Рисунок 1. Влияние надвенного лазерного облучения крови на динамику показателей ЭЭнГ у животных с этаноловой интоксикацией
ЭИ приводит к развитию прогрессирующей функциональной парасимпатической денервации межмышечного нервного сплетения тонкой кишки. В течение 3 суток после эксперимента плотность холинергических нервных сплетений в мышечной оболочке кишки снижалась с 5,02±0,0 4% до3,94±0,10% (р<0,05) и уменьшалась активность АХЭ в них с 3,17±0,02 у.е. до 1,40±0,02 у.е. (р<0,05), по сравнению с контролем. В адренергических нервных сплетениях мышечной оболочки тонкой кишки происходили изменения, функционально проявляющиеся повышением в них интенсивности флюоресценции катехоламинов и увеличением показателей плотности сплетений названных волокон.
Продолжение Рисунка 1
* -достоверны по отношению к контролю ф < 0,05);
** - достоверны по отношению к показателям животных первой серии ф<0,05); *** - достоверны по отношению к показателям животных второй серии ф<0,05).
Продолжение Рисунка 1
*-достоверны по отношению к контролю ф < 0,05);
** - достоверны по отношению к показателям животных первой серии ф < 0,05); *** - достоверны по отношению к показателям животных второй серии ф < 0,05).
Обсуждение и выводы: Возникающий функциональный десинхроноз между адрен-и холинергической системой, можно рассматривать как один из механизмов нарушения нейрорегуляции кишечной моторики при ЭИ. Как показали исследования, усиление стимулирующих парасимпатических и устранение тормозных синаптических влияний на гладкую мускулатуру тонкой кишки может быть достигнуто путем воздействия на медиаторные системы, через которые передается возбуждение с нерва на мышцу. Необходимо подчеркнуть, что важным звеном в механизме развития кишечной энтеропатии являются нарушения нейромедиаторных процессов, а именно изменение активности адрен- и холинергической нейромедиации в интрамуральной нервной системе тонкой кишки. При этом большое значение имеет ослабление активности АХЭ - фермента с нейротрансмиттерными функциями, участвующего в катаболизме ацетилхолина. Вероятно, холинергический обмен в мышечной оболочке тонкой кишки животных при ЭИ - это не просто итог денервационных изменений, а результат сложной, во многом специфической тканевой перестройки. Анализ полученных результатов экспериментальных исследований позволил установить об относительно направленном влиянии НЛОК на вегетативную нервную систему, а именно на состояние нейромедиаторных отношений в мышечной оболочке тонкой кишки животных в комплексном лечении ЭИ.
Таким образом, применение НЛОК в комплексном лечении ЭИ способствует более раннему проявлению адаптационных процессов в адрен-и холинергических нервных структурах тонкой кишки животных. Названные изменения являются следствием инициированных под влиянием НЛОК адаптационных механизмов, что выражается в восстановлении моторной функции тонкой кишки на 3 сутки после лечения экспериментальной ЭИ.
Список литературы
1.Аблиева Ю.А. Характеристики тревожно-депрессивных расстройств у больных алкоголизмом в условиях наркологического стационара ГБОУ ВПО/ М.А. Акимова, С.И. Богданов // Материалы VI Национального конгресса по социальной психиатрии и наркологии, 18-20 мая 2016 г. -М., 2016. С. 38.
2.Акимова М.А.Динамика первичной заболеваемости алкогольной патологией на среднем Урале ГБОУ ВПО/ С.И. Богданов, Ю.А. Аблиева // Материалы VI Национального конгресса по социальной психиатрии и наркологии, 18 -20 мая
1036
2016 г. -М., 2016. С.40
3. Альтшулер В. Б. Алкоголизм / В. Б. Альтшулер. - М. : ГЭОТАР-Медиа, 2010. - 260 с., [2] л. цв. ил. : ил., табл.
4.Гофман А.Г, Меликсетян А.С. Ремиссии у больных алкоголизмом // Душевное здоровье населения на границе Европы и Азии: материалы VI международной научной конференции,- Оренбург, 2016. С. 191.
5.Использование животных в токсикологическом эксперименте : методические рекомендации / К. В. Шелыгин, И. А. Кирпич, В. Е. Леонтьев, А. Г. Соловьев ; под ред. П. И. Сидорова. - Архангельск : Изд-во Северного гос. мед. ун-та, 2002. - 19 с.
6.Кузнер А. В.Клинико-динамические особенности больных алкоголизмом с органической патологией / Т.В.Клименко, А.С.Дмитриев // Материалы VI Национального конгресса по социальной психиатрии и наркологии, 18-20 мая 2016 г. -М., 2016. С.52
7.Меликсетян А.С. Причины рецидивов при алкоголизме: //Актуальные проблемы психиатрии и психотерапии : материалы научной конференции,-Тула, 13-15 октября 2016 г.- Изд-во ТулГУ, 2016. С. 2.
8.Немцов А.В., Шелыгин К.В.Самоубийства и потребление алкоголя в России в 1959-2014 годах // Материалы VI Национального конгресса по социальной психиатрии и наркологии, 18-20 мая 2016 г. -М., 2016. С.63
9.Немцов А.В. Антиалкогольная кампания 2000 года:// Наука и практика российской психотерапии и психиатрии: достижения и перспективы развития: материалы научной конференции,-Санкт-Петербург, 5-6 февраля 2016 г.-«Альта Астра», 2016. С. 60-61.
10. Попов А. И. Математические модели и комплекс программ для функциональной диагностики биомедицинских сигналов инфранизкочастотного диапазона : автореф. дисс. ... канд. тех. наук [Помор. гос. ун-т им. М. В. Ломоносова] - Петрозаводск, 2010. - 20 с.
11. Случанко Е. И. Влияние надвенного лазерного облучения крови на компенсаторные механизмы тонкой кишки в условиях экспериментальной этаноловой интоксикации.-Псков: Псковский государственный университет,2017. - 116с.
12. Стропус Р. А. Применение точечного метода для количественного изучения нервных структур / Р. А. Стропус, К. А. Тамашкаускас, Б. Б. Якубаускайте // Общие закономерности морфогенеза и регенерации : тезисы докл. 2-ой науч. конф. анатомов, гистологов и эмбриологов ЛитССР с участием морфологов
1037
Прибалт. респ., 2-3 ноября 1976 г. - Каунас, 1976. - С. 68.
13.Швалев В. Н. Возрастные изменения регуляторных механизмов сердечнососудистой системы и значение синтазы оксида азота в норме и при патологии / В. Н. Швалев // Кардиология. - 2007. - № 5. - С. 67-72.
14. Alcoholic liver disease. AASLD Practice guidelines / R. S. O' Shea, S. Dasarathy, A. J. McCullough [et al.] // Hepatology. - 2010. - Vol. 51. - № 1. - P. 307-328.
15. Evaluation of tissue metal and trace element content in a rat model of nonalcoholic fatty liver disease using ICP-DRC-MS / Gatiatulina E.R., Popova E.V., Nikonorov A.A., Tinkov A.A., Polyakova V.S., Skalnaya A.A.,Skalny A.V. // Journal of Trace Elements in Medicine and Biology. 2017. Vol. 39.- P. 91-99.
16. Jakubczyk A. Psychosocial predictors of impulsivity in alcohol-dependent patients / A. Jakubczyk, A. Klimkiewicz, K. Mika, et al. // J. Nerv. Ment. Dis. -2013. - Vol. 201(1). - P. 43 - 47.
17. Karnovsky M. A «direct-coloring» thiocholin technique for chlinesterases / M. Karnovsky, L. Roots // The journal of histochemistry and cytochemistry. - 1964. -Vol.12. - № 3. - P. 219-221.
18. Le Berre A. P. Readiness to change and brain damage in patients with chronic alcoholism / A. P. Le Berre, G. Rauchs, R. La Joie, et al. // Psychiatry Res. - 2013. -Vol. 30(3). - P. 202 - 209.
19. Lucey M. Acoholic hepatitis / M. Lucey, Ph. Mathurin, T. Morgan // The New England journal of medicine. - 2009. - Vol. 360. - № 26. - P. 2758-2769.
20. Overview of the role of alcohol dehydrogenase and aldehyde dehydrogenase and their variants in the genesis of alcohol-related pathology / D. W. Crabb, M. Matsumoto, D. Chang , M. You // The Proceedings of the Nutrition Society. - 2004. - Vol. 63. Iss. 1. - P. 49-63.
21. Rangaswamy M. Beta power in the EEG of alcoholics / M. Rangaswamy, B. Porjesz, D. B. Chorlian, et al. // Biol. Psychiatry. - 2002. - Vol. 52. P.831-842.