CC BY
24
DOI: https://doi.org/10.23670/IRJ.2020.102.12.044
АДАПТАЦИОНННЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ АКТИВНОСТИ КАТАЛАЗЫ В ТКАНЯХ СЕРДЦА И СЫВОРОТКЕ КРОВИ КРЫС ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ НА СЕКРЕТОРНЫЕ КАРДИОМИОЦИТЫ
Научная статья
Борискин П.В.1, Гуленко О.Н.2' *, Павлова О.Н.3
2 ORCID: 0000-0001-6338-7095;
3 ORCID: 0000-0002-8055-1958;
1 ООО «ТестГен», Ульяновск, Россия;
2 3 Самарский государственный университет путей сообщения, Самара, Россия
* Корреспондирующий автор (gulenko_ol[at]mail.ru)
Аннотация
Невозможно преувеличить значение сердечно -сосудистых заболеваний для современного общества. Постоянное увеличение количества больных практически во всех возрастных группах приводит к ухудшению в многочисленных сферах от социально психического климата до ухудшения экономических показателей развития общества. Соответственно, изучение процессов, предшествующих данным патологиям, не теряет своей актуальности. Цель исследования состояла в изучении динамики активности каталазы в тканях сердца и сыворотке крови крыс, при оксидативном стрессе, вызванном криодеструкцией миокарда правого предсердия. Материалы и методы: эксперимент проводили на здоровых беспородных белых половозрелых крысах мужского пола десятимесячного возраста массой 240-260 г в количестве 60 штук, которые содержались в виварии при свободном доступе к воде и пище. Животные были поделены на 2 группы поровну: 1 - интактные крысы; 2 - опытная группа. Животным опытной группы проводили криодеструкцию предсердий. Активность каталазы в тканях сердца и сыворотке крови крыс исследовали до начала опыта, а также на 1, 3, 5, 7 и 14 сутки эксперимента по стандартной методике Королюка М.А. Полученный цифровой материал подвергали статистической обработке путем непараметрического статистического анализа с целью установления достоверности различий в изучаемых группах с использованием критериев Вальда-Вольфовица, Колмогорова-Смирнова и Манна-Уитни. Выводы: активность каталазы в тканях сердца и сыворотке крови крыс при воздействии на секреторные кардиомиоциты путем криодеструкции предсердий и возникновении на этом фоне оксидативного стресса снижается по сравнению с интактными животными в течение 7 суток после повреждающего воздействия, а к 14 стукам отмечается тенденция к нормализации уровня фермента.
Ключевые слова: оксидативный стресс, крысы, каталаза, ткани сердца, сыворотка крови.
ADAPTIVE CHANGES IN CATALASE ACTIVITY IN THE RAT HEART TISSUE AND BLOOD SERUM DURING SECRETORY CARDIOMYOCYTE STIMULATION
Research article
Boriskin P.V.1, Gulenko O.N.2' *, Pavlova O.N.3
2 ORCID: 0000-0001-6338-7095;
3 ORCID: 0000-0002-8055-1958;
1 "Testgen" LLC, Ulyanovsk, Russia;
2, 3 Samara State University of Railway Transport, Samara, Russia
* Corresponding author (gulenko_ol[at]mail.ru)
Abstract
It is impossible to overestimate the significant implications of cardiovascular diseases in modern society. The constant increase in the number of patients in almost all age groups leads to a decline in numerous areas from the social and psychological climate to the deterioration of economic indicators of societal development. This is the reason why the study of the processes preceding these pathologies does not lose its relevance. The aim of the research is to examine the dynamics of catalase activity in the heart tissues and blood serum of rats under oxidative stress caused by cryodestruction of the right atrial myocardium. Materials and methods: the experiment was performed on 60 healthy outbred mature male albino rats of ten months of age and weighing 240-260 g, which were kept in a vivarium with free access to water and food. The animals were equally divided into 2 groups: intact and experimental. Animals of the experimental group underwent the cryoablation of the atria. A study of the activity of catalase in the heart tissues and blood serum of rats was performed before the experiment and on the 1st, 3rd, 5th, 7th and 14th days of the experiment using the standard M. A. Korolyuk's method. The resulting digital material was subjected to statistical processing by way of nonparametric statistical analysis in order to establish the accuracy of differences in the studied groups using the Wald-Wolfowitz, Kolmogorov-Smirnov, and Mann-Whitney criteria. Conclusions: when exposed to secretory cardiomyocytes by atrial cryodestruction and the consequent occurrence of oxidative stress, the activity of catalase in the heart tissues and blood serum of rats decreases within 7 days after the damaging effect in comparison with the intact group, while by the day 14 there is a tendency of the normalization of enzyme levels.
Keywords: oxidative stress, rats, catalase, heart tissue, blood serum.
Заболевания сердечно-сосудистой системы уже длительное время занимают лидирующие позиции среди причин смертности трудоспособного населения. Ученые самых различных специальностей ведут активный поиск меркёров сердечно-сосудистой патологии для улучшения диагностики и терапии данной группы заболеваний. В последние годы большое внимание уделяется роли окислительно -восстановительных механизмов в патогенезе хронических сердечнососудистых заболеваний [1], [2]. В норме примерно 10-15 % потребляемого организмом кислорода расходуется на производство свободных радикалов, которые отчасти представляют собой активные формы кислорода (АФК) и
некоторые другие соединения, обладающие высокой окислительной активностью. При различных патологических процессах до 30 % потребляемого кислорода вовлекаются в производство свободных радикалов. В целом в организме сохраняется окислительно-восстановительное равновесие благодаря деятельности антиоксидантных систем, но, если их работа недостаточно эффективна развивается оксидативный стресс [3], [4].
В литературных источниках имеются данные, доказывающие роль оксидативного стресса в патогенезе сердечнососудистых заболеваний, в частности высокая концентрация АФК способствует артериальной гипертензии, дислипидемии, атеросклерозу, тромбозу, ишемической болезни сердца и другим патологиям [5], [6]. Одним из маркеров оксидативного стресса является активность каталазы в органах и тканях. Ее функция заключается не в тотальном удалении окислителей, а в поддержании их концентрации на уровне, при котором они не будут вызывать воспалительный каскад внутриядерных сигнальных путей [7], [8].
В связи с этим цель нашего исследования состояла в изучении динамики активности каталазы в тканях сердца и сыворотке крови крыс, при оксидативном стрессе, вызванном криодеструкцией миокарда правого предсердия.
Для реализации поставленной цели нам предстояло решить следующие задачи: определить активность каталазы в динамике в тканях сердца и сыворотке крови интактных животных и животных с экспериментальным оксидативным стрессом, вызванным криодеструкцией миокарда предсердий.
Материалы и методы
Эксперимент проводили на здоровых беспородных белых половозрелых крысах мужского пола десятимесячного возраста, массой 240-260 г в количестве 60 штук, которые содержались в виварии при свободном доступе к воде и пище. Животные были поделены на 2 группы поровну: 1 - интактные крысы; 2 - опытная группа.
Животным опытной группы проводили криодеструкцию предсердий. В миокарде предсердий (особенно правого предсердия) сосредоточены секреторные кардиомиоциты и их особенностью является наличие в саркоплазме вблизи полюсов ядра, плотных гранул, окруженных мембраной. В этих гранулах содержится гормон - предсердный натриуритический фактор (ПНФ). Этот гормон инициирует в организме диурез, расширение сосудов, снижение артериального давления и многие другие процессы. Криодеструкция миокарда правого предсердия крыс осуществлялась аппаратом Криоиней КИ-401 с использованием криоаппликатора № 4 с диаметром рабочей части наконечника 4 мм, с экспозицией 10 секунд. (КриоИней® имеет: Регистрационное удостоверение Росздравнадзора N° ФСР 2009 / 04738.). Работа с животными проводилась под эфирным наркозом на спонтанном дыхании с наложением 2-х провизорных швов с доступом (в области 3-4 межреберья) к предсердиям крыс. Разрез 7 мм позволял вводить свободно криоаппликатор, не подвергая холодовому воздействию окружающие ткани, тем самым не травмируя их. Криодеструкция производилась аппликатором № 4 с диаметром рабочей поверхности 4 мм с экспозицией 10 секунд. После криодеструкции аппликатором грудную полость ушивали герметично, удалив из неё воздух шприцем.
Азотный криодеструктор с аппликатором диаметром 4 мм вызывал формирование зоны оледенения диаметром 4 -5 мм и глубиной 0,2 мм (200 мкм), приводя к формированию некроза миокарда этой области. Воздействие на миокард криодеструктором вызывает разрушение тканей, провоцирует воспаление и, как следствие, усиливает окислительные процессы в организме, к тому же высвобождая предсердный натриуритический фактор из разрушенных гранул, что, на наш взгляд, должно отражаться в динамике активности и концентраций ферментов системы перекисного окисления липидов - антиоксидантов (ПОЛ-АО) в тканях организма, в частности каталазы.
Активность каталазы в тканях сердца и сыворотке крови крыс исследовали до начала опыта, а также на 1, 3, 5, 7 и 14 сутки эксперимента по стандартной методике Королюка М.А. [9]. Животных декапитировали и путем механического измельчения тканей сердца массой 1 г с 9 мл трис-буфера (рН 7,4) готовили гомогенаты в автоматическом гомогенизаторе [10].
Исследование выполнено в соответствии с правилами лабораторной практики в Российской Федерации: приказ Минздрава СССР № 755 от 12.08.1977 г.; приказ МЗ РФ № 267 от 19.06.2003 г.; закон «О защите животных от жестокого обращения» гл. V, ст. 104679-ГД от 01.12.1999 г. На проведение эксперимента получено заключение Комитета по биоэтике при «Медицинском университете «Реавиз» № 167 от 18 сентября 2019 г.
Полученный цифровой материал подвергали статистической обработке путем непараметрического статистического анализа с целью установления достоверности различий в изучаемых группах с использованием критериев Вальда-Вольфовица, Колмогорова-Смирнова и Манна-Уитни.
Результаты исследования
Динамика активности каталазы в тканях сердца крыс представлена на рисунке 1.
I-
П!
(И
и О X
35 30 25 20 15 10 5 0
1 группа • 2 группа
0
29,25 29,01
1
29,2 26,16
3 29,1 21,58
5
29,1 18,43
7 28,1 15,18
14 27,75 19,24
Сутки эксперимента
Рис. 1 - Динамика активности каталазы в тканях сердца крыс в норме и при оксидативном стрессе, вызванном криодеструкцией миокарда предсердий
Из рисунка видно, что на фоне криодеструкции миокарда предсердий наблюдается интенсивное снижение активности каталазы в тканях сердца крыс до 7 суток эксперимента, а затем определяется тенденция к нормализации активности фермента.
Распределение значений активности каталазы в тканях сердца крыс, которым проводили криодеструкцию предсердий для инициирования оксидативного стресса, представлено в таблице 1.
Таблица 1 - Распределение значений активности каталазы в тканях сердца крыс
Сутки N м Ме Мш Мах 25 Рег 75 Рег 10 Рег 90 Рег
0 30 29,01 29,10 27,90 30,00 28,60 29,40 28,15 29,75
1 30 26,16 25,85 23,60 28,90 25,10 27,40 24,30 28,10
3 30 21,58 21,55 20,40 23,10 20,80 22,30 20,55 22,70
5 30 18,43 18,40 17,60 19,40 18,20 18,70 17,95 18,95
7 30 15,18 15,20 14,50 15,90 14,90 15,40 14,65 15,65
14 30 19,24 19,35 18,40 19,80 18,80 19,60 18,50 19,80
По данным, представленным в таблице, можно сделать вывод, что криодеструкция предсердий провоцирует усиление окислительных процессов в организме и снижение активности каталазы.
Полученные результаты эксперимента были обработаны путем непараметрического статистического анализа с целью установления достоверности различий в изучаемых группах с использованием критериев Вальда -Вольфовица, Колмогорова-Смирнова и Манна-Уитни (табл.2).
Таблица 2 - Статистический анализ динамики активности каталазы в тканях сердца крыс на фоне оксидативного стресса, индуцированного криодеструкцией предсердий
Сутки Группы Статистический тест Критерий Значение р
0 сутки 1 и 2 Манна - Уитни и = 449,0000 0,994102
Ъ = -0,007392
Колмогорова-Смирнова Мах БШегпс = -0,133333 >0,10
Мах Роб БШегпс =0,100000
Вальда-Вольфовица Ъ = 1,302076 0,192891
Ъ афга = 1,171869 0,241251
1 сутки 1 и 2 Манна - Уитни И = 32,00000 0,000000
Ъ = 6,172498
Колмогорова-Смирнова Мах БШегпс = 0,00 <0,001
Мах Роб БШегпс = 0,866667
Вальда-Вольфовица Ъ = -5,46872 0,000000
Ъ афга = 5,338512 0,000000
3 сутки 1 и 2 Манна - Уитни И = 0,00 0,000000
Ъ = 6,645599
Колмогорова-Смирнова Мах БШегпс = 0,00 <0,001
Мах Роб БШегпс = 1,000000
Вальда-Вольфовица Ъ = -7,55204 0,000000
Ъ афга = 7,421834 0,000000
Окончание таблицы 2 - Статистический анализ динамики активности каталазы в тканях сердца крыс _на фоне оксидативного стресса, индуцированного криодеструкцией предсердий_
Сутки Группы Статистический тест Критерий Значение р
5 сутки 1 и 2 Манна - Уитни U = 0,00 0,000000
Z = 6,645599
Колмогорова-Смирнова Max Neg Diffemc = 0,00 <0,001
Max Pos Diffemc = 1,000000
Вальда-Вольфовица Z = -7,55204 0,000000
Z adjstd = 7,421834 0,000000
7 сутки 1 и 2 Манна - Уитни U = 0,000 0,000000
Z = 6,645599
Колмогорова-Смирнова Max Neg Diffemc = 0,0000 <0,001
Max Pos Diffemc = 1,000000
Вальда-Вольфовица Z = -7,55204 0,000000
Z adjstd = 7,421834 0,000000
14 сутки 1 и 2 Манна - Уитни U = 0,000 0,000000
Z = 6,645599
Колмогорова-Смирнова Max Neg Diffemc = 0,0000 <0,001
Max Pos Diffemc = 1,000000
Вальда-Вольфовица Z = -7,55204 0,000000
Z adjstd = 7,421834 0,000000
По данным, представленным в таблице 1, выявлено что активность каталазы в тканях сердца крыс, которым была проведена криодеструкция предсердий начиная с 1 суток эксперимента и до конца опыта отличается от активности фермента у интактных животных.
Динамика окислительно-восстановительных процессов, протекающих в организме, отражается в первую очередь на гематологических показателях, так как кровь обеспечивает взаимосвязь всех систем и является одним из центральных звеньев в поддержании гомеостатического равновесия, при этом обеспечивая адаптацию к меняющимся факторам среды.
Динамика активности каталазы в сыворотке крови крыс представлена на рисунке 2.
(И
и О X
25
20
15
10
0
1 группа
2 группа
0 19,4 18,8
1
19,5 17,35
3
19,85 15,85
5
19,15 14,2
Сутки эксперимента
7
19,55 11,15
14 19,35 16,55
5
группа группа
Рис. 2 - Динамика активности каталазы в сыворотке крови крыс в норме и при оксидативном стрессе, вызванном криодеструкцией миокарда предсердий
В отношении активности каталазы в сыворотке крови наблюдается аналогичная тенденция, что и тканях сердца, до 7 суток опыта наблюдается снижение активности, а затем определяется тенденция к нормализации.
Распределение значений активности каталазы в сыворотке крови животных, которым проводили криодеструкцию предсердий для инициирования оксидативного стресса, представлено в таблице 3.
Сутки N м Ме Мш Мах 25 Рег 75 Рег 10 Рег 90 Рег
0 30 18,91 18,80 18,40 19,70 18,60 19,30 18,40 19,55
1 30 17,24 17,35 16,50 17,80 16,90 17,60 16,70 17,70
3 30 16,00 15,85 15,30 16,90 15,50 16,50 15,40 16,75
5 30 14,08 14,20 12,30 15,70 13,50 14,60 12,85 15,45
7 30 11,25 11,15 10,40 12,80 10,60 11,40 10,50 12,45
14 30 16,58 16,55 16,10 16,90 16,40 16,80 16,30 16,90
Используя полученные данные, мы провели сравнение активности каталазы в сыворотке крови у животных опытной и контрольной групп (табл.4).
Таблица 4 - Статистический анализ динамики активности каталазы в сыворотке крови крыс на фоне оксидативного
стресса, индуцированного криодеструкцией предсердий
Сутки Группы Статистический тест | Критерий Значение р
0 сутки 1 и 2 Манна - Уитни и = 401,5000 0,477920
Ъ = -0,709652
Колмогорова-Смирнова Мах БШегпс = -0,266667 >0,10
Мах Роб БШегпс =0,066667
Вальда-Вольфовица Ъ = -3,38540 0,000711
Ъ афга = 3,255190 0,001133
1 сутки 1 и 2 Манна - Уитни И = 0,00 0,000000
Ъ = 6,645599
Колмогорова-Смирнова Мах БШегпс = 0,00 <0,001
Мах Роб БШегпс = 1,000000
Вальда-Вольфовица Ъ = -7,55204 0,000000
Ъ афга = 7,421834 0,000000
3 сутки 1 и 2 Манна - Уитни И = 0,00 0,000000
Ъ = 6,645599
Колмогорова-Смирнова Мах БШегпс = 0,00 <0,001
Мах Роб БШегпс = 1,000000
Вальда-Вольфовица Ъ = -7,55204 0,000000
Ъ афга = 7,421834 0,000000
5 сутки 1 и 2 Манна - Уитни И = 0,00 0,000000
Ъ = 6,645599
Колмогорова-Смирнова Мах БШегпс = 0,00 <0,001
Мах Роб БШегпс = 1,000000
Вальда-Вольфовица Ъ = -7,55204 0,000000
Ъ афга = 7,421834 0,000000
7 сутки 1 и 2 Манна - Уитни И = 0,000 0,000000
Ъ = 6,645599
Колмогорова-Смирнова Мах БШегпс = 0,0000 <0,001
Мах Роб БШегпс = 1,000000
Вальда-Вольфовица Ъ = -7,55204 0,000000
Ъ афга = 7,421834 0,000000
14 сутки 1 и 2 Манна - Уитни И = 0,00 0,000000
Ъ = 6,645599
Колмогорова-Смирнова Мах БШегпс = 0,0000 <0,001
Мах Роб БШегпс = 1,000000
Вальда-Вольфовица Ъ = -7,55204 0,000000
Ъ афга = 7,421834 0,000000
Табличные данные позволяют сделать вывод, что активность каталазы в сыворотке крови крыс контрольной и опытной групп достоверно отличалась, начиная с первого дня эксперимента.
Обсуждение
В результате криодеструкции миокарда предсердий и повреждения секреторных кардиомиоцитов как основной популяции клеток этой области возникает воспалительный процесс и, как следствие, оксидативный стресс, которые провоцируют ишемию миокарда, так как потребность сердца в кислороде превышает его поступление. Стремительное падение концентрации кислорода в ишемических тканях провоцирует переход окислительного метаболизма в анаэробный и становится пусковым моментом в цепочке физиологических процессов: увеличивается концентрация лактата и ионов водорода, изменяются кислотно-щелочное, мембранные ионные градиенты и ионное равновесие. Вследствие «анаэробной деполяризации» клетки теряют ионы К+ и приобретают ионы №+, С1- и Са2+, что создает
условия для развития цитотоксического отека. Избыточное содержание ионов Ca2+ провоцирует интенсификацию образования АФК, активирует протеазы, которые в свою очередь способствуют трансформации ксантин дегидрогиназы, использующую в виде акцептора электронов кислород и образующую супероксид -анион, перекись водорода, лежащие в основе производства гидроксильных радикалов, повреждающих ткани организма при ишемии [11]. Немаловажным является тот факт, что свободнорадикальные реакции интенсифицируются высвобождением ионов железа из поврежденных тканей миокарда [12], [13]. С пониженной антиоксидантной активностью тканей миокарда связано увеличение концентрации АФК после гипоксии вследствие ишемии, и при этом в миоцитах, эндотелиальных клетках, в крови и других тканях организма наблюдается чрезвычайно низкое содержание каталазы [13], [14]. Проведенное нами исследование также доказывает взаимосвязь динамики окислительно -восстановительного равновесия в организме с патологическими процессами в тканях сердца и подтверждает, что ферменты системы ПОЛ-АО, одним из которых является каталаза, могут выступать в роли маркеров патологии сердечно-сосудистой системы.
Вывод
Активность каталазы в тканях сердца и сыворотке крови крыс при воздействии на секреторные кардиомиоциты путем криодеструкции предсердий и возникновении на этом фоне оксидативного стресса снижается, по сравнению с интактными животными, в течение 7 суток после повреждающего воздействия, а к 14 стукам отмечается тенденция к нормализации уровня фермента.
Конфликт интересов Conflict of Interest
Не указан. None declared.
Список литературы / References
1. Droge W. Free radicals in physiological control of cell function. / W. Drage //Physiol Rev. - 2002. - Vol. 82. - P. 47-95.
2. Higashi Y. Endothelial function and oxidative stress in renovascular hypertension. / Y. Higashi, S. Sasaki, K. Nakagawa, et al. //N Engl J Med. - 2002. - Vol. 346. - P. 1954-62.
3. Зотова И.В. Синтез оксида азота и развитие атерогенеза. / И.В. Зотова, Д.А. Затейщиков, Б.А. Сидоренко // Кардиология. - 2002. - № 4. - С. 58-67.
4. Davies K.J. Oxidative stress: the paradox of aerobic life. / K.J. Davies // Biochem Soc Symp. - 1995. - Vol. 61. - P. 1-31.
5. Landmesser U. Oxidation of tetrahydrobiopterin leads to uncoupling of endothelial cell nitricoxidesynthase in hypertension. / U. Landmesser, S. Dikalov, S. Price et al. // J Clin Invest. - 2003. - Vol. 8-111. - P. 1201-9.
6. Valko M. Free radicals and antioxidants in normal physiological functions and human disease. / M. Valko, D. Leibfritz, M. Mazur // Intern J Biochem Cell Biol. - 2007/ -Vol. 1(39). - P. 44-84.
7. Луцкий М.А. Активность эндогенной системы антиоксидантной защиты в процессе жизнедеятельности организма. / М.А. Луцкий, Т.В. Куксова, М.А. Смелянец, Ю.П. Лушникова // Успехи современного естествознания. -2014. - № 12-1. - С. 20-23.
8. Безручко Н.В. Каталаза биологических сред организма человека и ее клинико-биохимическое значение в оценке эндотоксикоза. / Н.В. Безручко, Г.К. Рубцов, Н.Б. Ганяева, Г.А. Козлова, Д.Г. Садовникова // Вестник ТГПУ. - 2012. -№ 7 (122). - С. 94-98.
9. Королюк, М.А. Метод определения активности каталазы / М.А. Королюк, Л.И. Иванова, И.Т. Майорова // Лаб. дело. - 1988. - № 1. - С. 16-19.
10. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. /Под общ. ред. Р.У. Хабриева. 2-изд., перераб. и доп. - М.: Медицина. - 2005. - С. 832.
11. Lankin V.Z. Atherosclerosis as a free radical pathology and antioxidative therapy of this disease / V.Z. Lankin, A.K. Tikhaze / In: Tomasi A, Ozben T, Skulachev VP, editors. Free Radicals, Nitric Oxide, and Inflammation: Molecular, Biochemical, and Clinical Aspects. Vol. 344. IOS Press; Amsterdam: 2003. pp. 218-231. (NATO Science Series).
12. Ланкин В.З. Итоги изучения патофизиологических последствий нарушения регуляции свободнорадикальных процессов: тупик или новый импульс? / В.З. Ланкин, А.К. Тихазе // Бюллвост-сиб НЦ СО РАМН. - 2016. - № 1 (3/2). -С. 104-108.
13. Ланкин В.З. Свободнорадикальные процессы при заболеваниях сердечно-сосудистой системы / В.З. Ланкин, А.К. Тихазе, Ю.Н. Беленков // Кардиология. - 2004. - № 44 (2). - С. 72-81.
14. Lopez Farre A. Heart failure, redox alterations, and endothelial dysfunction / A. Lopez Farre, S. Casado // ^pei-tension. - 2001. - Vol. 38. - P. 1400-1405.
Список литературы на английском языке / References in English
1. Droge W. Free radicals in physiological control of cell function. / W. Droge // Physiol Rev. - 2002. - Vol. 82. - P. 47-95.
2. Higashi Y. Endothelial function and oxidative stress in renovascular hypertension. / Y. Higashi, S. Sasaki, K. Nakagawa, et al. // N Engl J Med. - 2002. - Vol. 346. - P. 1954-62.
3. Zotova I. V. Sintez oksida azota i razvitie aterogeneza. [Nitric Oxide Synthesis and Development of Atherogenesis.] / I. V. Zotova, D. A. Zateyschikov, B. A. Sidorenko // Kardiologija. - 2002. - No. 4. - pp. 58-67 [in Russian]
4. Davies K.J. Oxidative stress: the paradox of aerobic life. / K.J. Davies // Biochem Soc Symp. - 1995. - Vol. 61. - p. 1-31
5. Landmesser U. Oxidation of tetrahydrobiopterin leads to uncoupling of endothelial cell nitricoxidesynthase in hypertension. / U. Landmesser, S. Dikalov, S. Price et al. // J Clin invest. - 2003. - Vol. 8-111 - P. 1201-9.
6. Valko M. Free radicals and antioxidants in normal physiological functions and human disease. / M. Valko, D. Leibfritz, M. Mazur // intern J Biochem Cell Biol. - 2007/ -Vol. 1(39). - P. 44-84.
7. Lutsky M. A. Aktivnost' jendogennoj sistemy antioksidantnoj zashhity v processe zhiznedejatel'nosti organizma. [Activity of Endogenous System of antioxidant Protection in the Course of Vital Activity of an organism.] / M. A. Lutsky, T.
V. Kuksova, M. A. Smelyanets et al. // Uspehi sovremennogo estestvoznanija. [Advances in Modern Natural Science.] - 2014. - No. 12-1. - pp. 20-23. [in Russian]
8. Bezruchko N. V. Katalaza biologicheskih sred organizma cheloveka i ee kliniko-biohimicheskoe znachenie v ocenke jendotoksikoza. [Catalase of Biological Media of the Human Body and Its Clinical and Biochemical Significance in the Assessment of Endotoxicosis.] / N. V. Bezruchko, G. K. Rubtsov, N. B. Ganyaeva et al. // Vestnik TGPU. - 2012. - No. 7 (122). - pp. 94-98. [in Russian]
9. Korolyuk, M. A. Metod opredelenija aktivnosti katalazy [Method for Determining the Activity of Catalase] / M. A. Korolyuk, L. I. Ivanova, I. T. Mayorova // Lab. delo. - 1988.- No. 1. - pp. 16-19 [in Russian]
10. Rukovodstvo po jeksperimental'nomu (doklinicheskomu) izucheniyu novyh farmakologicheskih veshhestv. [Guide to Experimental (Preclinical) Study of New Pharmacological Substances.] / Edited by R. U. Khabriev. 2nd edition, revised and updated - M.: Medicina. - 2005. - p. 832 [in Russian]
11. Lankin V. Z. Atherosclerosis as a free radical pathology and antioxidative therapy of this disease. in: tomasi A, Özben T, Skulachev VP, editors. Free Radicals, Nitric Oxide, and inflammation: Molecular, Biochemical, and Clinical Aspects. Vol. 344. IOS Press; Amsterdam: 2003. pp. 218-231 (NATO Science Series)
12. Lankin V. Z. Itogi izuchenija patofiziologicheskih posledstvij narushenija reguljacii svobodnoradikal'nyh processov: tupik ili novyj impul's? [the Results of the Study of the Pathophysiological Consequences of Dysregulation of Free Radical Processes: A Dead End or A New Impetus?] / V. Z. Lankin, A. K. Tihase // Byullvost-Sib NC SB RAMS. - 2016. - No. 1 (3/2). - pp. 104-108 [in Russian]
13. Lankin V. Z. Svobodnoradikal'nye processy pri zabolevanijah serdechno-sosudistoj sistemy [Free Radical Processes in Diseases of the Cardiovascular System] / V. Z. Lankin, A. K. Tihase, Yu. N. Belenkov // Kardiologija. - 2004. - No. 44 (2). -pp. 72-81 [in Russian]
14. Lopez Farre A. Heart failure, redox alterations, and endothelial dysfunction / A. Lopez Farre, S. Casado // Hypertension. - 2001. - Vol. 38. - P. 1400-1405. Korolyuk, M. A. Method for determining the activity of catalase / M. A. Korolyuk, L. I. Ivanova, I. T. Mayorova / / lab. Delo. - 1988. - no. 1. - P. 16-19.
