CC BY
9УДК 615.281.011.8
Л.А.Тепикина, З.И.Жолдакова, О.О.Синицына, А.И.Мельникова, З.В.Шипулина, Р.В.Бару
ГУ НИИ экологии человека и гигиены окружающей среды им .А.Н.Сысина РАМН, Москва
1-ЦИКЛОПРОПИЛ-6-ФТОР-1,4-ДИГИДРО-4-ОКСО- 7-(4-ЭТИЛ-1-ПИПЕРАЗИНИЛ)-3-ХИНОЛИНКАРБОНОВАЯ КИСЛОТА (энрофлоксацин, Баймек, Байтрил)
C19H22FN303. CAS № 93106-60-0. М.м. 359,4. Желтый кристаллический порошок без запаха. Температура плавления: +222—226°С. Плотность: 270 кг/м3. Растворимость в воде: 0,13 г/л при +20°С. В атмосферном воздухе при 20 и 35°С — аэрозоль, в воде — взвесь. Химический класс — производные хинолона.
Используется как действующее вещество антибактериальных лекарственных препаратов для домашних и сельскохозяйственных животных [1, 2, 3].
Энрофлоксацин по химической структуре наиболее близок к ципрофлоксацину и отличается только наличием этильной группы в пипе-разинильном ядре. В организме энрофлоксацин метаболизирует с образованием ципрофлокса-цина, в действующем веществе — энрофлокса-цине также допускается содержание до 1% ци-профлоксацина.
По механизму действия фторхинолоны относятся к группе ингибиторов ферментной ДНК-гидразы, проникая в центральный участок метаболизма бактерий, лишают бактерии возможности размножаться и способствуют их разрушению. Мало связываются с белками плазмы организма, хорошо проникают в органы и ткани, проходят через гематоэнцефалический барьер. Период полувыведения из организма около 4-х ч, около 40% выделяется из организма в неизмененном виде в течение 24 ч [4].
В настоящее время накоплен достаточно обширный материал о характере биологического действия фторхинолонов. В экспериментальных исследованиях по гигиеническому нормированию пефлоксацина и ципрофлоксацина было показано, что общетоксическое их действие было выражено незначительно. Лимитирующим критерием их вредного действия был антимикробный эффект.
Биологическое действие энрофлоксаци-на изучено в острых, подострых и хронических опытах. При однократном внутрижелудочном введении DL50 (мыши и крысы — самцы и самки) установлена на уровне 5000 мг/кг, кролики — 500—800 мг/кг массы. Клиническая картина отравления: снижение двигательной активности, боковое положение, затруднение дыхания, судороги и смерть. Среднесмертельной концен-
трации (СЬ50) достичь не удалось, концентрация 2930,0 мг/м3 (мыши 4 ч) не оказывала общетоксического действия [1—4].
Обоснование ОБУВ энрофлоксацина в атмосферном воздухе проводили в соответствии с [5, 6] по DL50 и Ышас; по общетоксическому действию величины ОБУВ находились в интервале 0,03-0,01 мг/м3.
Однако, учитывая, что лимитирующим показателем вредности энрофлоксацина, как и других фторхинолонов, является антимикробное действие, был поставлен эксперимент по определению порога острого антимикробного действия ^тас) при ингаляционном поступлении препарата в организм в соответствии с [7]. Критериями антимикробного действия являлись показатели количественного состава микрофлоры толстой кишки белых крыс. Испытаны концентрации энрофлоксацина на уровне 9,2±0,7 и 0,8±0,3 мг/м3.
Однократное ингаляционное воздействие препарата в концентрации на уровне 9,2 мг/м3 приводило к изменению количественного состава микрофлоры кишечника белых крыс. Через 24 ч после воздействия у животных отмечено снижение количества кишечных палочек, эн-теробактерий и стафилококков. После недельного восстановительного периода количественные различия в составе микрофлоры кишечника опытных и контрольных животных практически полностью отсутствовали.
Воздействие энрофлоксацина в концентрации на уровне 0,8 мг/м3 не вызывало каких-либо изменений в составе микрофлоры кишечника, т. е. не оказывало повреждающего действия на нормальную микрофлору
Таким образом, изменения в составе микрофлоры кишечника животных, подвергавшихся воздействию энрофлоксацина в концентрации на уровне 9,2 мг/м3, можно квалифицировать как умеренно выраженный дисбиоз, а данную концентрацию - принять за порог острого антимикробного действия ^тас аш).
Расчет ОБУВ энрофлоксацина по порогу острого антимикробного действия позволил рекомендовать величину, равную 0,008 мг/м3.Нор-матив утверждён Роспотребнадзором (ГН 2.1.6.2309-07).
Исследования по обоснованию ОДУ энроф-локсацина в воде проводили в соответствии с [8]. Изучение влияния антибиотика на органо-лептические свойства воды включало определение запаха и привкуса воды, способности образовывать пену, пленку, придавать воде окраску, мутность. Пороговая концентрация вещества по влиянию на запах воды составила 250 мг/л, по способности повышать мутность — 50 мг/л, образовывать пену — 15 мг/л.
Изучение влияния энрофлоксацина на об-
щий санитарный режим водоемов проводили по биохимическому потреблению кислорода в 6-су-точном эксперименте (БПК) в 6-ти концентрациях (от 0,25 до 0,0025 мг/л). Первые 5 концентраций вызывали торможение процессов БПК различной степени выраженности (40—20% по сравнению с контролем — разведенной прудовой водой), концентрация 0,01 мг/л была пороговой, а — 0,0025 мг/л не оказывала существенного влияния на процессы БПК.
Энрофлоксацин в концентрации 0,05 мг/л обладал бактерицидным действием на сапрофитную микрофлору к 9-м суткам, а в концентрации 0,01 мг/л бактерицидный эффект проявлялся к 30-м суткам.
Концентрация 0,0025 мг/л принята за подпо-роговую по влиянию на общий санитарный режим водоемов, лимитирующий признак вредности — влияние на сапрофитную микрофлору.
Для обоснованию МНД по санитарно-ток-сикологическому признаку вредности проведен 2-х месячный субхронический эксперимент, в котором исследовали влияние энрофлоксацина на микробиоценоз кишечника. Это обусловлено спицификой его биологического действия.
В опыте использованы белые крысы массой 190—200 г. Водные растворы энрофлоксаци-на в дозах 0,4, 0,04 и 0,004 мг/кг вводили в объеме 1 мл/100 г массы животных 5 дней в неделю. Контрольные животные ежедневно получали в том же объеме водопроводную воду, обследование животных осуществляли через 2 недели, 1 и 2 месяца введения.
В процессе эксперимента изучали количественное содержание в фекалиях кишечных палочек, других условно-патогенных грамотрица-тельных бактерий, энтеробактерий, стафилококков, стрептококков, лактобацилл, клостри-дий, общего количества аэробных и анаэробных бактерий.
Бактериологическое исследование испражнений крыс через 2 недели воздействия препарата выявило изменение в микробиоценозе толстой кишки крыс, получавших энрофлок-сацин в дозах 0,4 и 0,04 мг/кг (р < 0,05-0,01). Прежде всего обращает на себя внимание частичная элиминация из кишечного содержимого кишечных палочек и энтеробактерий, подчиняющаяся закономерности «доза-эффект» — большая доза вызывает более значительное снижение изученных показателей. Кроме того, достоверно снизилось общее количество аэробных бактерий. Через месяц после воздействия антибиотика выявлено достоверное изменение тех же показателей. Число кишечных палочек у животных, получавших максимальную дозу вещества, снизилось еще более существенно по сравнению с предыдущим сроком наблюдения и по сравнению с контролем, а у
животных, получавших среднюю дозу, — достоверное снижение этого показателя сохранилось. Количество других условно патогенных энтеробактерий также претерпело дальнейшее снижение. Сохранилось достоверное снижение аэробных бактерий. Ко второму месяцу эксперимента наблюдался некоторый рост кишечной флоры и восстановление количества изученных микроорганизмов кишечника животных. Так, количество кишечных палочек и энтеробактерий оставалось достоверно сниженным только у животных I группы, у животных, получавших антибиотик в дозе 0,04 мг/кг, количество этих бактерий восстанави-лось до нормальных величин. Общее количество аэробных бактерий, снижавшееся в предыдущие сроки обследования, ко второму месяцу эксперимента восстановилось.
Таким образом, в субхроническом эксперименте на лабораторных животных установлено антимикробное действие энрофлоксацина в дозах 0,4 и 0,04 мг/кг. Учитывая, что для определения антимикробного действия антибиотиков считается достаточным двухмесячный эксперимент, нет необходимости во введении дополнительного коэффициента запаса для прогноза параметров хронического действия. Максимальная недействующая доза составила 0,004 мг/кг, концентрация — 0,08 мг/л.
Сопоставление безвредных концентраций по органолептическому, общесанитарному и токсикологическому признаку вредности позволило рекомендовать ОДУ энрофлоксацина на уровне 0,0025 мг/л, 3 класс опасности, лимитирующий признак вредности — общесанитарный.
Список литературы
1. Evaluation of certain veterinary drug residues, in food //ortythird report of the Joint FAO/WHO Expert Committee on Food Additives. - Geneva, WHO, 1995.- 24p.
2. Голиков А.В., Скворцов В.Н. // Ветеринария, 1993. - № 8. - С. 32.
3. Голиков А.В., Скворцов В.Н., Семенова Н.В. //Там же, 1994. - № 4. - С. 29-30.
4. Enrofloxacin. Sicherheitsdatenblatt 056980/07(Гарантийный лист) BAYER Gesundheit, marz 1996, s.2.
5. Методические указания по установлению ОБУВ загрязняющих веществ в атмосферном воздухе населенных мест. - М.: МЗ СССР, 1982. - 20с.
6. Гигиеническое нормирование лекарственных средств в воздухе рабочей зоны, атмосферном воздухе населенных мест и воде водных объектов. МУ 1.1.726-98. - М.: МЗ РФ, 1999. - 70 с.
7. Методические рекомендации «Постановка исследований для обоснования ПДК антибиотиков в воздухе рабочей зоны». - М., 1989.
8. Методические указания «Обоснование гигиенических нормативов в воде водных объектов хозяйственно-питьевого и культурно-бытового во-
допользования». МУ 2.1.5.720-98. - М.: МЗ РФ, 1999. - 55 с.
Материал поступил в редакцию 18.02.08.
УДК [615.322:582.784.6]014.2.099
А.А.Волкова, С.А.Кулешова, О.А.Андреева, М.Н.Ивашев
ГОУ ВПО «Пятигорская ГФА» Росздрава
Сухие экстракты одно- и двулетних побегов вишни обыкновенной — порошкообразные сыпучие вещества, полученные путем экстракции сырья 40 и 70% этиловым спиртом с последующим высушиванием.
Известно, что побеги вишни обыкновенной содержат флавоноиды, органические кислоты, дубильные вещества, соединения стероидной структуры, аминокислоты, сахара, макро- и микроэлементы.
Определение токсичности сухих экстрактов побегов вишни обыкновенной проводили по методу Кёрбера на белых половозрелых неин-бредных мышах массой 25—30 г, прошедших карантин в течение 14 суток. Содержание животных осуществляли согласно правилам, принятыми фармакологическим государственным комитетом («Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ» под ред. В.П.Фисенко, 2000).
Животные были разделены на группы по 6 мышей в каждой. Водные суспензии сухих экстрактов вишни обыкновенной вводили перо-рально однократно в дозе от 4500 до 5050 мг/кг. Общая продолжительность наблюдений за животными после введения исследуемых экстрак-
Гигиена труда: Учебник для вузов / Под ред. Н.Ф.Измерова, В.Ф.Кириллова. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008. - 584 с. 2000 экз.
Ноздрачев А.Д., Поляков Е.Л., Багаев В.А. Экспериментальная хирургия лабораторных животных: Учеб. пособие для вузов. — СПб.: Лань, 2007. — 255 с. 1000 экз.
Общая врачебная практика: Неотложная медицинская помощь: Учеб. пособие / Под ред. С.С.Вя-лова, С.А.Чорбинской. — М.: МЕДпресс-информ, 2007. — 112 с. 2000 экз.
Сидоров П.И., Совершаева С.Л., Скребцова Системный мониторинг ракетно-космической деятельности / Под общ. ред. П.И.Сидорова. — М.: МЕДпресс-информ, 2007. — 224 с. 1000 экз.
European Centre for Ecotoxicology and Toxicology
тов составила 14 дней. В первый день после введения мыши находились под непрерывным наблюдением. За весь период наблюдения гибели животных не зарегистрировано.
Оценку общего состояния животных при введении экстрактов побегов вишни проводили с учётом изменения поведенческих реакций, нервно-мышечной возбудимости и некоторых вегетативных функций. Токсические эффекты регистрировали в течение 3-х часов при введении больших доз экстрактов для представления общей картины передозировки.
При введении больших доз обоих экстрактов вишни у животных наблюдали повышенную активность в виде агрессивности, а также изменение аппетита, выявленного по увеличению потребления корма и питья, при умеренном увеличении мочеиспускания и дефекации. Двигательная активность значительно увеличилась, реакции на световые и звуковые, а также на тактильные и болевые раздражители были мало выражены. Общее состояние изменилось незначительно. Большие дозы экстрактов оказывали также умеренное негативное влияние и на дыхательную функцию животных, т. е. наблюдалась тенденция к уменьшению глубины и увеличению частоты дыхательных движений, в отличие от мышей контрольной группы.
Таким образом, анализ результатов изучения острой токсичности сухих экстрактов побегов вишни обыкновенной при однократном введении в желудок беспородным мышам в дозе 5050 мг/кг не выявил признаков выраженной интоксикации и гибели животных, что позволяет отнести оба экстракта к 4-му классу опасности — малоопасные вещества, согласно классификации ГОСТ 12.1.007-76.
Материал поступил в редакцию 08.10.07.
of Chemicals (ECETOC). Joint Assessment of Commodity Chemicals (JACC) Report № 53: Cyanides of Hydrogen, Sodium and Potassium, and Acetone Cy-anohydrin (CAS № 74-90-8, 143-33-9, 151-50-8 and 75-86-5), Volumes I and II. 2007. http://www. ecetoc.org.
European Centre for Ecotoxicology and Toxicology of Chemicals (ECETOC). Technical Report № 101: Guidance for setting occupational exposure limits: emphasis on data-poor substances. 2007. http:// www.ecetoc.org.
World Health Organization. WHO/IPCS Guidelines for the Public Health Management of Chemical Incidents (Draft). 2007. http://www.who.int/ipcs.
К.К.Сидоров, А.А.Виноградова
ОЦЕНКА ТОКСИЧНОСТИ СУХИХ ЭКСТРАКТОВ ОДНО- И ДВУЛЕТНИХ ПОБЕГОВ ВИШНИ ОБЫКНОВЕННОЙ
НОВЫЕ ПУБЛИКАЦИИ ПО ТОКСИКОЛОГИИ И СМЕЖНЫМ ДИСЦИПЛИНАМ
