CC BY
47
ИЗВЕСТИЯ ВУЗОВ. ПРИКЛАДНАЯ ХИМИЯ И БИОТЕХНОЛОГИЯ Том 8 № 1 2018
КРАТКИЕ СООБЩЕНИЯ / BRIEF COMMUNICATION Оригинальная статья / Original article УДК 616-001.17- 085. 831
DOI: http://dx.doi.org/10.21285/2227-2925-2018-8-1 -153-158
1-ГЕРМАТРАНОЛ-ГИДРАТ - АКТИВАТОР ТРИПТОФАНИЛ-тРНК-СИНТЕТАЗЫ
© В.П. Барышок*, К.А. Абзаева**, М.М. Расулов***, Т.А. Подгорбунская*
*Иркутский национальный исследовательский технический университет, 665074, Российская Федерация, г. Иркутск, ул. Лермонтова, 83. **Иркутский институт химии им. А.Е.Фаворского СО РАН, 664033, Российская Федерация, г. Иркутск, ул.Фаворского, д.1.
***Государственный научный центр РФ «Государственный научно-исследовательский институт химии и технологии элементоорганических соединений», 105118, Российская Федерация, г. Москва, шоссе Энтузиастов, д. 38.
На культуре мононуклеарных клеток периферической крови (МНПК) человека изучено действие in vitro 1-герматранол-гидрата в сравнении с трекрезаном на белковый синтез и связанные с ним ведущие системы регуляции процессов развития, дифференцировки, регенерации и поддержания как клеточного, так и тканевого гомеостаза. Показано активирующее действие 1 -герматранол-гид-рата на суммарную активность триптофанил-тРНК-синтетазы - одного из ключевых ферментов внерибосомного этапа белкового синтеза триптофанил-тРНК синтетазы (ТРСазы). 1-гермат-ранол-гидрат в дозе 15 мкг/мл увеличивает экспрессию тРНК на 33-45% значительнее, чем тре-крезан в дозе 25 мкг/мл. Стимулируя биосинтез иммуноглобулинов, герматранол-гидрат обладает актопротекторным действием и является фактором ускорения образования обеих форм АРСаз. Активированная ТРСаза, подавляя патологические процессы аномальной агрессивной пролиферации сосудов, стимулирует восстанавливающее физиологическое развитие сосудов. Полученные данные дают основание полагать, что 1-герматранол-гидрат может быть использован в качестве лекарственного средства, обладающего иммуномодулирующим и адаптогенным действием. Ключевые слова: 1-герматранол-гидрат, триптофанил-тРНК-синтетаза, трекрезан, метилфе-ноксиацетат оксиэтиламмония, иммуномодуляторы, адаптогены.
Формат цитирования. Барышок В.П., Абзаева К.А., Расулов М.М., Подгорбунская Т.А. 1-Герматранол-гидрат - активатор триптофанил-тРНК-синтетазы // Известия вузов. Прикладная химия и биотехнология. 2018. Т. 8 , N. 1. С. 153-158. DOI: 10.21285/2227-2925-2018-8-1-153-158
1 -GERMATRANOL HYDRATE AS AN ACTIVATOR OF TRYPTOPHANYL-TRNA SYNTHETASE
© V.P. Baryshok*, K.A. Abzaeva**, M.M. Rasulov***, T.A. Podgorbunskaya*
*National Research Irkutsk State Technical University, 83, Lermontov St., Irkutsk, 665074, Russian Federation **A.E. Favorsky Irkutsk Institute of Chemistry SB RAS 1, Favorsky St., Irkutsk, 664033, Russian Federation
***State Scientific Research Institute of Chemistry and Technology of Organoelement Compounds, 38, Entuziastov Road, Moscow, 105118, Russian Federation
The effect of 1-germatranol hydrate, compared to trekrezan, on protein synthesis and the related systems regulating the development, differentiation, regeneration and maintenance of both cellular and tissue homeostasis was studied in vitro using the human peripheral blood mononuclear cells (PBMC) culture. The activating effect of 1-germatranol hydrate on the total activity of tryptophanyl-tRNA synthetase, one of the key enzymes in the extraribosomal stage of the tryptophanyl-tRNA synthetase protein synthesis, is shown. A 15 yg / ml dose of 1-germatranol hydrate increases the expression of tryptophanyl-tRNA synthetase by 33-45% more than a 15 yg / ml dose of trecrezan. By stimulating the biosynthesis of immunoglobulins, germatranol hydrate exhibits an actoprotective effect, thus accelerat-ing the formation of both forms of aminoacyl tRNA synthetase. Activated tryptophanyl-tRNA synthetase, suppressing pathological processes of abnormal aggressive proliferation of blood vessels, stimulates the restorative physiological development of blood vessels. The data obtained
suggest that 1-germatranol hydrate can be used as a pharmaceutical exhibiting immunomodulatory and adap-togenic action.
Keywords: 1-germatranol hydrate, tryptophanyl tRNA synthetase, trecrezan, immunomodulators, adaptogens
For citation. Baryshok V.P., Abzaeva K.A., Rasulov M.M., Podgorbunskaya T.A. 1-Germatranol hydrate as an activator of tryptophanyl-tRNA synthetase. Izvestiya Vuzov. Prikladnaya Khimiya i Biotekhnologiya [Proceedings of Universities. Applied Chemistry and Biotechnology]. 2018, vol. 8, no 1, pp. 153-158 (in Russian). DOI: 10.21285/2227-2925-2018-8-1-153-158
ВВЕДЕНИЕ
При воспалительных процессах изменяющих обмен липопротеидов в стенках сосудов, участвуют как системы неспецифического (макрофаги моноцитарного происхождения), так и Т-клетки специфического иммунитета [1]. При этом в регуляции цитокиновых функций важнейшую роль играют белковые и ферментные системы, состояние которых зависит от активности триптофанил-тРНК-синтетазы (ТРСазы) [2]. В свою очередь, ТРСазу активируют такие природные вещества как гемин, форболовые эфиры и эритропоэтин [3-5]. Синтетические соединения из класса протатранов - трекрезан (о-крезоксиацетат трис(2-оксиэтил)аммония), [0-СНзСбН4ОСН2СОО]-[1\1Н(СН2СН2ОН)з]+, и комплекс трис-(2-гидроксиэтил)амина с бис-(2-ме-тилфеноксиацетатом) цинка также повышают цитокинную активность суммарной ТРСазы [6,7].
1-Герматранол-гидрат H2OHOGe(OCH2 CH2)3N обладает широким спектром биологической активности. В частности, он повышает устойчивость растений к пониженным и повышенным температурам [8,9]. Это побудило нас исследовать действие 1 -герматранол-гидрата на суммарную активность триптофанил-тРНК-синтетазы (ТРСазы) в сравнении с эффектом иммуностимулятора трекрезана.
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
1-Герматранол-гидрат получен реакцией триэтаноламина с диоксидом германия в водной среде по методу [10]. Т. пл. 158-159оС.
Эффекты 1 -герматранол-гидрата и трекре-зана на белковый синтез и связанные с ним ведущие системы регуляции процессов развития, дифференцировки, регенерации и поддержания как клеточного, так и тканевого гомеостаза изучали in vitro на культуре мононуклеарных клеток периферической крови (МНПК) человека.
Схема опыта включала следующие этапы:
1. Получение МНПК. Периферическую кровь из локтевой вены в объеме 10 мл брали в стерильных условиях в пробирку, содержащую гепарин, в конечной концентрации 25 ед. в 1 мл крови. Затем кровь стерильно переносили в пластиковую пробирку объемом около 50 мл. Туда же добавляли 10 мл стерильного PBS буфера. Разбавленную кровь аккуратно наслаивали на 3-5 мл градиента фиколл-уротраст в
центрифужной пробирке. Соотношение объемов градиент - плазмы выдерживали в пределах 1:2-1:4. Пробирки центрифугировали в течение 40 мин в бакет-роторе с ускорением 200 g (1500-1800 об/мин) при температуре 20 °С. В процессе центрифугирования эритроциты и гранулоциты "проваливались" в градиент и оседали на дно пробирки. На верхней границе градиента при правильном разделении образуется рыхлое кольцо беловатого цвета, состоящее из мононуклеарных клеток. Суперна-тант представлен плазмой. Последовательность фракций крови в градиенте: плазма -тромбоциты - мононуклеарные клетки - фи-колл - эритроциты (на дне). Плазму и остаток фиколла с эритроцитами удаляли. Осторожно собирали клетки интерфазы (слой между плазмой - вверху и собственно фиколлом и осадком - внизу) пипеткой в пробирку с небольшим объемом среды и ресуспендировали. Заполняли пробирку PBS, центрифугировали при 800 или 1000 об./мин в течение 8-10 мин. Отсасывали и удаляли надосадок, ресуспендировали осадок в среде или PBS, заполняли пробирку PBS, повторно центрифугировали при 800 (1000) об./мин в течение 8-10 мин. Удаляли надосадок, осадок ресуспендировали в среде и подсчитывали клетки. После подсчета готовили рабочую концентрацию МК, содержащую 2*106 клеток/мл.
2. Культивирование МНПК в присутствии 1-герматранол-гидрата в различных концентрациях. Культивирование проводили в полной культуральной среде: RPMI-1640, 0,01 М HEPES, 10% фетальной бычьей сывороткой (Sigma) 200 мМ L-глутамина, 100 мг/мл гентами-цина. Раствор герматранол-гидрата фильтровали через фильтры с диаметром пор 0,22 мкМ и вносили культуру мононуклеаров в конечной концентрации 20 мкг/мл (оптимальную дозу определяли предварительно). Контрольные пробы инкубировали полной культуральной средой без 1 -герматранол-гидрата. Оптимальное время подбирали экспериментально, отбирая для анализа из отдельных лунок планшеты клеток через 1, 2, 3, 4, 6, 12 и 24 часа. Концентрации 1-герматранол-гидрата в культуральной среде и время инкубации подбирали в отдельной серии опытов.
3. Экспресс-выделение препаратов суммарной РНК осуществляли по методике [11].
4. Синтез на матрице РНК кДНК. Для син-
теза кДНК с использованием полученных препаратов суммарной РНК применяли реактивы фирмы Силекс М и прилагающиеся протоколы [12].
5. Количественное определение специфической тРНК триптофанил-тРНК-синте-тазы методом РТ-ПЦР. Количественный анализ специфической экспрессии гена ТРСазы проводили посредством оценки уровня специфической тРНК. При этом критерием оценки уровня тРНК служил количественный анализ суммарной кДНК, проводимый методом РТ-ПЦР. Реакцию РТ ПЦР осуществляли с использованием наборов реактивов фирмы «Синтол» (Комплект реагентов для проведения ПЦР-РВ в присутствии SYBR Green I Кат. номер R-402). Количественное определение уровня специфических кДНК для ТРСазы проводили на РТ-ПЦР приборе. Условия амплификации: денатурация при 95°C в течение 15 с, отжиг при 60 °C - 15 с, и полимеризация при 72 °C в течение 15с (сбор данных осуществляли на стадии полимеризации). Затравки сконструированы с использованием программы «Праймер Экспресс Версия 2.0», с применением дополнительной приставки к РТ-ПЦР прибору ABI Prism 7900HT.
Все реакции в сериях осуществляли в 3 повторениях. Анализ полученных данных проводили с тем же пакетом программ (SDS2.1), прилагающихся к прибору ABI Prism 7900HT. Уровень отклонений рассчитывали по программе с учетом оптимизации. Стандарты получали путем амплификации контрольных образцов в ПЦР реакции с теми же затравками, реактивами и условиями, оптимизированными для РТ-ПЦР. Измерения проводили относительно стандартных значений, при этом делали 4-кратные последовательные разбавления с целью получения стандартной кривой из 8 точек.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
1-Герматранол-гидрат и о-крезоксиацетат триэтаноламмония (препарат трекрезан) в дозе соответственно 15 и 25 мкг/мл культуры моно-нуклеарных клеток периферической крови (МНПК) человека, после 1, 3, 6, 12 и 24 часов культивирования повышают экспрессию тРНК -одного из ключевых ферментов внерибосом-ного этапа белкового синтеза триптофанил-тРНК синтетазы (ТРСазы) (таблица).
Как видно из таблицы, 1 -герматранол-гид-рат, будучи в меньшей дозе, проявляет более высокую активность, увеличивая экспрессию на 33-45% больше, чем трекрезан. Кроме этого, токсичность 1-герматранола значительно ниже, чем трекрезана (LD50 для белых мышей внутри-брюшинно соответственно 8400 [13] и 2000мг/кг [14]). Известны антиоксидантные свойства, нейротропная и противоопухолевая активность герматранола [15]. Сообщалось, что комбинация 1 -герматранола с рядом лекарственных средств усиливает их лечебный эффект и снижает побочное токсическое действие [16,17]. Стимулируя биосинтез иммуноглобулинов, гер-матранол-гидрат обладает актопротекторным действием, ускоряет восстановительные процессы в организме вследствие усиления дыхания митохондрий в клетках [18,19].
ТРСаза в клетках существует в двух формах: 1) основной полноразмерной; 2) частично усеченной (миниТРСаза), лишённой N- концевого фрагмента в процессе альтернативного сплайсинга (или эндогенного регулируемого протеолиза) при созревании пре-мРНК [20]. Образование обеих форм фермента может быть резко ускорено у всех млекопитающих при воздействии иммуномодулирующего белка - Y-интерферона. Это даёт основание полагать, что как 1-герматранол-гидрат, так и трекрезан явля-
Увеличение 1-герматранол-гидратом экспрессии тРНК по сравнению с контролем и препаратом трекрезан
The increase in 1-germatranol hydrate expression of tRNA as compared with control and drug trekrezan
Время Относительные единицы активности тРНК ТРСазы/тРНК бета-актина
культивирования, ч Контроль (чистая культуральная среда) Трекрезан в дозе 25 мкг/мл (% к контролю) 1-Герматранол-гидрат в дозе 15 мкг/мл (% к контролю)
1 0,4 ± 0,06 0,50 ± 0,10 (125) 0,72 ± 0,10 (180)*
3 0,41 ± 0,07 0,70 ± 0,10(170) 0,94 ± 0,10 (229)*
6 0,38 ± 0,06 1,00 ± 0,15 (263) 1,45 ± 0,14 (382)*
12 0,37 ± 0,05 1,20 ± 0,17 (324) 1,60 ± 0,15 (432)*
24 0,35 ± 0,05 0,99 ± 0,12 (283) 1,35 ± 0,14 (386)*
Примечание *достоверно при р<0,05 по отношению к прототипу (при n=12).
ются факторами ускорения образования обеих форм АРСаз. ТРСаза запускает каскад последующих регуляторных цитокинных функций, реализуемых в ходе «вызревания» фермента и включения его в контроль ангиогенеза. Сложнейшие процессы в клетке, обеспечивающие регуляции целого спектра дополнительных функций ТРСазы протекают в 2 стадии: а) посттранскрипционную, б) пострансляционную. В свою очередь, активированный фрагмент ТРСазы не только обладает активностью, подавляющей патологические процессы аномальной агрессивной пролиферации сосудов, но одновременно способен благотворно воздейство-
вать на состояние сосудистой системы, стимулируя восстанавливающее физиологическое развитие сосудов. Наряду с этим не исключено, что свойство 1-герматранол-гидрата интенсифицировать в итоге синтез белка может оказаться полезным при разработке средств, стимулирующих ранозаживление.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Таким образом, гидрат 1-гидроксигермат-рана достоверно активирует экспрессию тРНК ТРСазы и является перспективным в качестве лекарственного средства, обладающего адап-тогенной и иммуномодулирующей активностью.
Благодарность: Работа выполнена при финансовой поддержке Совета по грантам Президента Российской Федерации НШ-3649.2014.3.
1. Hansson G.K., Libby P. The immune response in atherosclerosis: a double-edged sword // Nat. Rev. Immunol. 2006. V. 6. P. 508-519.
2. Tzima E., Reader J.S., Irani-Tehrani M., Ewalt K.L., Schwartz M.A., Schimmel P. Biologically active fragment of a human tRNA synthetase inhibits fluid shear stress-activated responses of endothelial cells // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2003. V. 100, N 25. P. 14903-14907.
3. Забазарных М.Ю., Литвинов Д.Ю. Фор-боловые эфиры стимулируют экспрессию гена триптофанил-тРНК-синтетазы человека // Биохимия. 2003. Т. 68, N 4. С. 592-597.
4. Smith K.J., Bleyer A.J., Little W.C., Sane D.C. The cardiovascular effects of erythropoietin // Cardiovasc Res. 2003. V. 59, N 3. P. 538-548.
5. Gaube F., Wolf S., Pusch L., Kroll T.C. Gene expression profiling reveals effects of Cimici-fuga racemosa (L.) NUTT. (black cohosh) on the estrogen receptor positive human breast cancer cell line MCF-7 // BMC Pharmacology. 2007. V. 7. P. 1471-1478.
6. Расулов М.М., Нурбеков М.К., Бобкова С.Н., Беликова О.А., Воронков М.Г. Трекрезан как активатор мРНК аминоацил-тРНК-синте-тазы // Химико-фармацевтический журнал. 2011. Т. 45, N 7. С. 3-6.
7. Пат. № 2457837, RU, A61P43, A61P37, A61K33/30 , A61K31/205. Комплекс трис-(2-гид-роксиэтил)амина с бис-(2-метилфеноксиацета-том) цинка, повышающий цитокинную активность суммарной триптофанил-тРНК-синтетазы / М.М. Расулов, М.В. Зверева, М.К. Нурбеков, С.Н. Адамович, А.Н. Мирскова, Р.Г. Мирсков, М.Г. Воронков Опубл. 10.08.2012, Бюлл. № 22.
8. Воронков М.Г. Левит Т.Х., Кириллов А.Ф., Барышок В.П., Козьмик Р.А. Действие гер-матранола на морозостойкость винограда // Докл. АН СССР. 1988. Т. 299. N 2. С. 509-512.
9. Shigarova A.M., Grabelnych O.I., Baryshok V.P., Borovskii G.B. Possible mecha-
Acknowledgement: The work was supported by the President Grant Sovet of the Russian Federation (Project № NSh 3649.2014.3.)
СКИЙ СПИСОК
nisms of the influence of germatranes on the resistance of wheat seedlings // Applied Biochemistry and Microbiology. 2016., V. 52. No. 4. P 410-415. http://dx.doi.org/10.1134/S0003683816040153 (in Russian)
10.Воронков М.Г., Овчинникова З.А., Барышок В.П. Синтез 1-герматранола и его С-заме-щенных // Известия. АН СССР. Серия химическая. 1987. Т. 4. C. 880.
11.Rasulov M.M., Nurbekov M.K., Bobkova S.N., Belikova O.A., Voronkov M.G. Trecrezan as an activator of aminoacyl-tRNA synthase mRNA // Pharm. Chem. J. 2011. V. 45. P. 381-384. https://doi.org/10.1007/s11094-011 -0639-2
12.Schumacher J.A., Jenson S.D., Elenitoba-Johnson K.S, Lim M.S. Utility of linearly amplied RNA for RT-PCR detection of chromosomal translocations: validation using the t(2;5)(p23;q35) NPM-ALK chromosomal translocation // J. Mol. Di-agn. 2004. V. 6, N 1. P. 16-21.
13.Казимировская В.Б., Дьяков В.М., Воронков М.Г., Ковальчук С.Ф. Трекрезан: токсикология, фармакология, результаты клинических испытаний. Иркутск, 1996. 224 с.
14.Lukevics E., Ignatovich L. / In The Chemistry of Organic Germanium, Tin and Lead Compounds. V. 2. Edited by Z. Rappoport. John Wiley & Sons, Ltd. 2002. P.1653-1678.
15.Биологическая активность соединений германия / Под ред. Э.Я. Лукевица. Рига: Зи-натне, 1990. 981 с
16.Пат. № 2233286, RU, C 07 F 7/30, А 61 К 31/28. Биохимические комплексы германия с высокой терапевтической активностью и широким спектром использования / Е.В. Соловьев, В.В. Щербинин, Е.А. Чернышев, М.В. Котрелев. 2001107254/15; Заявл. 17.08.1998; Опубл. 20.01.2003.
17.Пат. № 2236196, RU, А 61 С 15/04. Зубная нить / С.И. Шкуренко, В.А. Купленая, В.В.
Щербинин, А.Л. Крылов, А.В. Беляков, К.В. Га-личев, Н.Н. Слюсарь. 2003110014/15; Заявл. 09.04.2003; Опубл. 20.09.2004.
18.Пат. № 2108096, RU, A61K31/28. Средство, стимулирующее в эксперименте синтез иммуноглобулинов / В.Ф. Миронов, Е.А Чернышев, В.В. Малочкин, А.И. Мартынов, Г.А. Куликов. 95110653/14; Заявл. 26.06.1995; Опубл.10.04.1998.
19.Пат. № 2272624, RU, A61K31/28 (2006.01). Применение 1-гидроксигерматрана
моногидрата в качестве средства, стимулирующего в эксперименте синтез иммуноглобулинов / А.Д. Исаев, С.А. Башкирова, К.В. Павлов. 2005117990/15; Заявл. 10.06.2005; Опубл. 27.03.2006.
20.Liu J., Shue E., Ewalt K.L., Schimmel P. A new Y-interferon-inducible promoter and splice variants of an anti-angiogenic human tRNA synthe-tase // Nucleic Acids Res. 2004. V. 32, N 2. P. 719727. https://doi.org/10.1093/nar/gkh240
1. Hansson G.K., Libby P. The immune response in atherosclerosis: a double-edged sword. Nat. Rev. Immunol. 2006, vol. 6, pp. 508-519.
2. Tzima E., Reader J.S., Irani-Tehrani M., Ewalt K.L., Schwartz M.A., Schimmel P. Biologically active fragment of a human tRNA synthetase inhibits fluid shear stress-activated responses of endothelial cells. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2003, vol. 100, no. 25, pp. 14903-14907.
3. Zabazarnykh M.Yu., Litvinov D.Yu. Phor-bol esters stimulate the expression of human gene tryptophanyl-tRNA synthetase. Biokhimiya [Biochemistry]. 2003, vol. 68, no. 4, pp. 592-597. (in Russian)
4. Smith K.J., Bleyer A.J., Little W.C., Sane D.C. The cardiovascular effects of erythropoietin. Cardiovasc Res. 2003, vol. 59, no. 3, pp. 538-548.
5. Gaube F., Wolf S., Pusch L., Kroll T.C. Gene expression profiling reveals effects of Cimicifuga racemosa (L.) NUTT. (black cohosh) on the estrogen receptor positive human breast cancer cell line MCF-7. BMC Pharmacology. 2007, vol. 7, pp. 1471-1478.
6. Rasulov M. M., Nurbekov M. K., Bobkova S. N., Belikova O. A., Voronkov M. G. Trecrezan as an activator of aminoacyl-tRNA synthetase mRNA. Khimiko-Farmatsevticheskii Zhurnal [Pharmaceutical Chemistry Journal]. 2011, vol. 45, no. 7, pp. 36. (in Russian)
7. Rasulov М.М., Zvereva M.V., Nurbekov М.К., Adamovich S.N., Mirskova A.N., Mirskov R.G., Voronkov М^. Kompleks tris-(2-gidroksi-etil)amina s bis-(2-metilfenoksiatsetatom) tsinka, povyshayushchiii tsitokinnuyu aktivnost' summar-noi triptofanil-tRNK-sintetazy [Complex of tris(2-hy-droxyethyl)amine with zinc bis(2-methylphenoxy-acetate, increase cytokine activity total tryptopha-nyl-tRNA synthetase]. Patent RF, no. 2457837, 2012.
8. Voronkov М^. [et al.] Action of germatranol on the frost resistance of grapes. Doklady AN SSSR [Doklady AS USSR]. 1988, vol. 299, no. 2, pp. 509-512. (in Russian)
9. Shigarova A.M., Grabelnykh O.I., Baryshok V.P., Borovskii G.B. Possible mechanisms of the influence of germatranes on the resistance of wheat seedlings. Prikladnaya bio-khimiya i mikrobiologiya [Applied Biochemistry and
Microbiology]. 2016, vol. 52, no. 4, pp. 410-415 (in Russian). https://doi.org/10.1134/S00036838 16040153
10. Voronkov M.G., Ovchinnikova Z.A. Baryshok V.P. Synthesis of 1-germatranol and its Si-substituted. Izvestiya AN SSSR. Seriya khimich-eskaya [Proc. AS USSR. Series Chemistry]. 1987, vol. 4, pp. 880. (in Russian)
11.Rasulov M.M. [et al.] Trecrezan as an activator of aminoacyl-tRNA synthase mRNA. Pharm. Chem. J. 2011, vol. 45, pp. 381-384. https://doi.org/10.1007/s11094-011 -0639-2
12.Schumacher J.A., Jenson S.D., Elenitoba-Johnson K.S., Lim M.S. Utility of linearly amplied RNA for RT-PCR detection of chromosomal translocations: validation using the t(2;5)(p23;q35) NPM-ALK chromosomal translocation. J. Mol. Diagn. 2004, vol. 6, no. 1, pp. 16-21.
13.Kazimirovskaya V.B., D'yakov V.M., Voronkov M.G., Koval'chuk S.F. Trekrezan: toksikologiya, farmakologoya, rezul'taty klinicheskikh ispytanii [Trecrezan: toxicology, pharmacology, clinical trial results]. Irkutsk, 1996, 224 p.
14.Lukevics E., Ignatovich L. In: The Chemistry of Organic Germanium, Tin and Lead Compounds, vol. 2. Under the editorship of Z. Rap-poport. John Wiley & Sons, Ltd. Publ., 2002, pp. 1653-1678.
15.Lukevits E.Ya. [et al.] Biologicheskaya aktivnost' soedinenii germaniya [Biological activity of germanium compounds]. Riga: Zinatne Publ., 1990, 981 p.
16.Solov'ev E.V., Shcherbinin V.V., Cher-nyshev E.A., Kotrelev M.V. Biokhimicheskie kom-pleksy germaniya s vysokoi terapevticheskoi ak-tivnost'yu i shirokim spektrom ispol'zovaniya [Biochemical complexes of germanium with high therapeutic activity and wide range of use]. Patent RF, no. 2233286, 1998. Publ. 20.01.2003.
17.Shkurenko S.I., Bought V.A., Shcherbinin V.V., Krylov A.L., Belyakov A.V., Galichev K.V., Slyusar N.N. Zubnaya nit' [Dental floss]. Patent RF, no. 2236196, 2003, Publ. 20.09.2004.
18.Mironov V.F., Chernyshev E.A., Palochkin V.V., Martynov A.I., Kulikov G.A. Sredstvo, stimuli-ruyushchee v eksperimente sintez immunoglobuli-nov [Means of stimulating in the experiment, the
synthesis of immunoglobulins]. Patent RF, no. 2108096, 1995, Publ. 10.04.1998.
19.Isaev D.A., Bashkirova S.A., Pavlov K.V. Primenenie 1-gidroksigermatrana monogidrata v kachestve sredstva, stimuliruyushschego v ekaperimente sintez immunoglobulinov [Application of 1-hydroxygermatrane monohydrate as a
Критерии авторства
Барышок В.П., Абзаева К.А., Расулов М.М., Подгорбунская Т.А. выполнили экспериментальную работу, на основании полученных результатов провели обобщение и написали рукопись. Барышок В.П., Абзаева К.А., Расулов М.М., Подгорбунская Т.А. имеют на статью равные авторские права и несут равную ответственность за плагиат.
Конфликт интересов
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
СВЕДЕНИЯ ОБ АВТОРАХ Принадлежность к организации
Виктор П. Барышок
Иркутский национальный исследовательский технический университет, Д.х.н., профессор Ьа гум k@yandex.ru
Клавдия А. Абзаева
Иркутский институт химии им. А.Е.Фаворского СО РАН К.х.н., ст.н.с., abzaeva@irioch.irk.ru
Максуд М. Расулов
Государственный научный центр РФ «Государственный научно-исследовательский институт химии и технологии элементоорганических соединений» Д.м.н., профессор, начальник отдела maksud@bk.ru
Татьяна А. Подгорбунская
Иркутский национальный исследовательский технический университет К.х.н., доцент
Поступила 10.10.2017
means of stimulating experimental synthesis of immunoglobulins]. Patent RF, no. 2272624, 2005, Publ. 27.03.2006.
20.Liu J., Shue E., Ewalt K.L., Schimmel P. A new Y-interferon-inducible promoter and splice variants of an anti-angiogenic human tRNA synthetase. Nucleic Acids Res. 2004, vol. 32, no. 2, pp. 719-727. DOI: 10.1093/nar/gkh240
Contribution
Baryshok V.P., Abzaeva K.A., Rasulov M.M., Pod-gorbunskaya T.A. carried out the experimental work, on the basis of the results summarized the material and wrote the manuscript. Baryshok V.P., Abzaeva K.A., Rasulov M.M., Podgorbunskaya T.A. have equal author's rights and bear equal responsibility for plagiarism.
Conflict of interests
The authors declare no conflict of interests regarding the publication of this article.
AUTHORS' INDEX Affiliation
Victor P. Baryshok
National Research Irkutsk State Technical University,
Doctor of Chemistry, Professor ba ryvi k@yandex.ru
Clavdiya A. Abzaeva
A.E. Favorsky Irkutsk Institute of Chemistry SB RAS
Ph.D. (Chemistry), Senior Researcher abzaeva@irioch.irk.ru
Maksud M. Rasulov
State Scientific Center of the Russian Federation «State Scientific Research Institute of Chemistry and Technology of Organoelement Compounds» MD, Professor, Head of Department maksud@bk.ru
Tat'yana A. Podgorbunskaya
National Research Irkutsk State Technical University
Ph.D. (Chemistry), Associate Professor Received 10 October 2017
