CC BY
30
Bibliography
1. Alekseev, V.V. Osnovnihe principih lecheniya bolevihkh sindromov // RMZh. - 2003. - T. 11. - № 5 [Eh/r]. - R/d: http:// www.rmj.ru / rmj/ t11/ n5/ 250.htm.
2. Neblett, R. Theory and rationale for surface EMG-assisted stretching as an adjunct to chronic musculoskeletal pain rehabilitation / R. Neblett,
T.G. Mayer, R.J. Gatchel // Appl Psychophysiol Biofeedback. - 2003. - Jun;28(2):139-46.
3. Smith, V.N., Penny K. I., Purves A. M. et al. The chronic Pain Grade questionnaire: validation and reavilitity in posral research // Ibid. - 1997.
- Vol. 71.
4. Verhaak P.F. M., Kerssens J.J., Dekker J. et al. Prevalence of chronic benign pain disorder among adults: a revier of the literature // Ibid. -1998. - Vol. 77.
5. Epidemiology of Pain: A Report of the Task Force on Epidemiology of the International Association for the Study of Pain // Eds and members
of the Task Force on Epidemiology I. K. Crombie et al. - Seattle: IASP Press, 1999.
6. Gureje, O., Simon G. E., Van Korff M. A cross-national study of the course of persistent pain in primary care // Pain. - 2001. - Vol. 92.
7. Unruch, M. Gender variations in clinical pain experience // Pain. - 1996. - Vol.
8. Smulevich, A.B. Psikhosomaticheskie rasstroyjstva (klinika, terapiya, organizaciya medicinskoyj pomothi) [Eh/r]. - R/d: http://www.solvay-
pharma.ru/ataraks/article.asp?id=2193
9. Crombie, I.K. Epidemiology of persistent pain // Proceedings of the 8-th World Congress on Pain: Progress in Pain Research and Management. Vol. 8/Eds T. S. Jensen et al. - Seattle: IaSP Press, 1997.
10. van Wilgen CP, Keizer D. [The sensitization model: a method to explain chronic pain to a patient] Ned Tijdschr Geneeskd. 2004 Dec 18;148(51):2535-8.
11. Kassilj, G.N. Nauka o boli. - M., 1975.
12. Kukushkin, M.L. Mekhanizmih vozniknoveniya ostroyj boli i khronicheskikh bolevihkh sindromov / M.L. Kukushkin, V.K. Reshetnyak // Materia Medica. - 1997. - № 3(15).
13. Dubner, R. Neural basis of persistent pain: Sensory specialisation, sensory modulation, and neuronal plasticity // Proceedings of the 8-th
World Congress on Pain: Progress Pain Research and Management. Vol. 8/Eds T. S. Jensen et al. - Seattle: IASP Press, 1997.
14. Engel, GL. Psychogenic pain and pain-prone patient // Am J Med. 1959 Jun; 26(6):899-918.
15. Smulevich, A.B. K probleme algopaticheskikh sostoyaniyj / A.O. Filjc, M.O. Lebedeva // Ipokhondriya i somatoformnihe rasstroyjstva; pod red.
A.B. Smulevicha. - M., 1992.
16. Tuter, N.V. Psikhologicheskie osobennosti lichnosti boljnihkh s kompleksnihm regionarnihm bolevihm sindromom / N.V. Tuter, A.B.. Danilov [Eh/r]. - R/r: http://www.painstudy.ru/matls/pneuro/krbs.htm
17. Ryabus, M.V. Lechenie raznihkh form golovnoyj boli napryazheniya metodom biologicheskoyj obratnoyj svyazi / M.V. Ryabus, O.A. Kolosova // Zhurnal nevrologii i psikhiatrii im. S.S. Korsakova. - 1999. - № 12.
Статья поступила в редакцию 20.09.13
УДК 613.83:612.017
Markova E.V., Kozlov V.A. THE POSSIBILITY OF CELL THERAPY IN THE CASE OF OPIOID DEPENDENCE.
Changes in the parameters of the (CBA x C57BL/6)F1 mice behavior in the «open field» during the development of chronic morphine dependence are determined by initial behavior status of animals. Chronic morphine dependence were characterized by significant suppression of humoral immune response and changes of cytokine's genes expression in brain and spleen. Transplantation of immune cells from “healthy” singeing donors with the same immune status may correct both immune and behavior disorders in mice with chronic morphine dependence, so it could be considered as a possible biological method in the treatment of drug abuse.
Key words: chronic opiate addiction, exploratory behavior, immune response, cytokines, immune cell transplantation.
Е.В. Маркова, д-р мед. наук, зав. лаб. нейроиммунологии ФГБУ «НИИ клинической иммунологии» СО РАМН, г. Новосибирск, E-mail:evgeniya_markova@mail.ru; В.А. Козлов, д-р мед. наук, академик РАМН, директор ФГБУ «НИИ клинической иммунологии» СО РАМН, г. Новосибирск, E-mail: vakoz40@yandex.ru
ВОЗМОЖНОСТИ КЛЕТОЧНОЙ ТЕРАПИИ ПРИ ОПИАТНОЙ ЗАВИСИМОСТИ
В настоящем исследовании показано, что характер изменения параметров поведения в «открытом поле» экспериментальных животных в состоянии хронической опиатной зависимости определяется их исходным поведенческим статусом. Хроническая морфинова зависимость характеризовалась супрессией гуморального звена иммунного ответа и изменениями экспрессии генов цитокинов в головном мозге и селезенке животных. Трансплантация иммунокомпетентных клеток от «здоровых» сингенных доноров с соответствующим поведенческим статусом сопровождается нормализацией указанных иммунологических и поведенческих расстройств.
Ключевые слова: хроническая опиатная зависимость, исследовательское поведение, иммунный ответ, цитокины, трансплантация иммунокомпетентных клеток.
Новая интегративная наука, психонейроиммунология, появившаяся в последней трети XX века, с каждым годом все больше привлекает внимание исследователей. Это обусловлено тем, что понимание функционального единства нервной и иммунной систем, характера взаимодействия между ними открывает впечатляющие перспективы в самых различных областях экспериментальной и клинической медицины, позволяет пересмотреть лечебную тактику при борьбе со многими заболеваниями. Ярким примером патологии, характеризующейся нарушением ней-роиммунного взаимодействия, является хроническое потребление психоактивных веществ, в том числе алкоголя и наркотиков. Ведущими звеньями патогенетического механизма указанной иммунодизрегуляторной патологии являются нарушение центральной и периферической продукции цитокинов, усиленная
продукция аутоантител к нейромедиаторам, нейропептидам, эффекты которых опосредуются клеточными элементами иммунной системы [1-7]. Терапия аддиктивных расстройств применяемая в настоящее время, не обеспечивает полного излечения, очевидно, в связи с формированием стойкого «порочного круга», разорвать который возможно лишь путем нормализации регуляторной взаимосвязи ЦНС и иммунной системы. Методом выбора здесь может стать терапия аутологичными иммунокомпе-тентными клетками с определенными функциональными характеристиками. Выявленные в собственных исследованиях закономерности влияния активации иммунной системы на параметры функциональной активности ЦНС, установленная возможность направленного изменения поведения экспериментальных животных путем трансплантации иммунокомпетентных клеток [8-
13] могут служить основой для разработки новых методов и стратегии патогенетической терапии указанной патологии.
В связи с вышеизложенным, целью настоящей работы явилось изучение нейроиммунных расстройств, возникающих при синдроме хронической опиатной зависимости у животных с различным поведенческим статусом, и оценка возможности коррекции указанных расстройств трансплантацией иммунокомпетен-тных клеток.
Материалы и методы. Работа выполнена на 87 мышах-самцах (CBA x C57Bl/6)F1 в возрасте трех месяцев, в возрасте трех месяцев, средний вес животных составлял 18 - 20 грамм, Ориентировочно-исследовательское поведение мышей оценивали в тесте «открытое поле» [14].
Хроническая морфиновая зависимость у животных с активным и пассивным типами прведения в «открытом поле» формировалась методом принудительного спаивания в течение 25 дней. Морфин подавался в 3% растворе сахарозы, начиная с дозы 0,1 мг/мл, с последующим ее увеличением до 0,2 мг/мл, 0,3 мг/мл, 0,4 мг/мл через каждые 48 часов. Доза морфина в 0,4 мг/мл оставалась неизменной до конца эксперимента. В качестве контроля использовались группы животных, принимавшие в аналогичных условиях эксперимента раствор сахарозы.
Определение антителообразующих клеток проводилось по методу A.J. Cunningham [15].
Уровень мРНК ИЛ-1Ь в головном мозге и селезенке мышей определяли методом обратно-транскриптазной полимеразной цепной реакции, как это было описано ранее [10, 11]. Продукты ПЦР визуализировали в денситометре (Pharmacia-LKB); для полуколичественной оценки результатов использовали программу Image Master VDS Software (USA). Результаты выражались в относительных единицах оптической плотности (о.е.).
Иммунокомпетентные клетки для трансплантации выделяли из суспензии спленоцитов здоровых мышей - доноров с активным и пассивным типами ОИП адгезией на пластике. Среди выделенных клеток 87-92% составляли макрофаги. Жизнеспособность клеток оценивалась по включению трипанового синего и составляла 93 - 95%. Далее, клетки (8Ч106 в 0,2 мл среды RPMI-1640) доноров внутривенно вводили реципиентам с аналогичным исходным типом поведения. Для трансплантации применялась также и неразделенная суспензия спленоцитов в концентрации 15Ч106 на одно животное. На 5-е сутки после трансплантации у реципиентов тестировались параметры поведения, количество антителообразующих клеток селезенки, экспрессия генов цитокинов клетками головного мозга и селезенки.
Статистическую обработку результатов проводили с применением t-критерия Стьюдента и парного критерия Манна-Уитни (компьютерные программы «Jandel Sigma Plot», «Statistica»). Результаты представлены в виде М ± SD. Различия считали достоверными при p<0,05.
Результаты исследования. Хроническая опиатная зависимость была сформирована у двух групп мышей (CBA x C57Bl/6)
F1 с активным и пассивным типами ОИП. Установлено, что потребление морфина (мг) указанными группами животных, как среднесуточное (1,01 ± 0,2 и 1,2 ± 0,3 соответственно; p > 0,05), так и общее за курс (22,85 ± 5,3 и 26,16 ± 6,7 соответственно; p > 0,05) было примерно одинаковым. Тем не менее, наблюдались существенные различия в характере изменений параметров ориентировочно-исследовательского поведения мышей-морфинистов, зависящие от их исходного поведенческого статуса: у животных-морфинистов с исходно пассивным типом регистрировалась стимуляция показателей горизонтальной и вертикальной двигательной активности при снижении степени эмоционального напряжения. У животных с исходно активным типом поведения в «открытом поле» достоверных изменений указанных показателей не выявлено (таблица 1).
Как видно из приведенной таблицы, после трансплантации как неразделенной (вариант 1), так и прилипающей к пластику фракции спленоцитов (вариант 2), от здоровых сингенных доноров показатели данной поведенческой реакции у мышей-хрони-ческих морфинистов восстанавливаются и достоверно не отличаются от таковых у животных контрольной группы.
Повышение уровня ОИП при хронической морфиновой зависимости у мышей с исходно пассивным типом поведения сопровождается снижением уровня мРНК ИЛ-1 ß в клетках головного мозга (контроль - 30,9 ± 2,5 о.е.; морфинисты - 10,2 ± 1,4 о.е.; р < 0,05); причем экспрессия гена этого цитокина также нормализуется после трансплантации клеток системы мононукле-арных фагоцитов (уровень мРНК ИЛ-1 ß после трансплантации 28,6 ± 6,3 о.е.; р > 0,05 по сравнению с контрольной группой).
Со стороны иммунной системы у всех мышей в состоянии хронической морфиновой зависимости наблюдалось значительное (более чем на 40%) подавление гуморального иммунного ответа, выражающееся в уменьшении относительного количества антителообразующих клеток селезенки (1121,2 ± 172,8 и 675,8 ± 131,7 в контрольной и опытной группах животных соответственно; p < 0,01) Трансплантация спленоцитов макрофагаль-ной природы от здоровых доноров способна нивелировать эти изменения (1121,2 ± 172,8 и 1159,6 ± 238,2 в контрольной группе и у морфинистов после трансплантации соответственно). После трансплантации иммунокомпетентных клеток у всех реципиентов восстанавливался также сниженный при хронической мор-финовой зависимости уровень мРНК ИЛ-^св клетках селезенки. Тот факт, что трансплантация клеток системы мононуклеар-ных фагоцитов нивелирует вызванные хроническим воздействием морфина поведенческие и иммунологические расстройства, позволяет сделать вывод о существенной роли этих клеток в патогенезе данной зависимости.
Таким образом, представленные экспериментальные данные свидетельствуют о том, что характер изменений параметров ориентировочно - исследовательского поведения при синдроме хронической зависимости от морфина у животных определяется их исходным поведенческим статусом. Наблюдаемая при
Таблица 1
Параметры ориентировочно - исследовательского поведения мышей (CBA x C57Bl/6)F1 с различным исходным поведенческим статусом в состоянии хронической зависимости от морфина и после трансплантации иммунокомпетентных клеток (M ± SD)
Группы животных Суммарная горизонтальная двигательная активность Суммарная вертикальная двигательная активность Дефекация
Мыши с активным типом ОИП Мыши с пассивным типом ОИП Мыши с активным типом ОИП Мыши с пассивным типом ОИП Мыши с активным типом ОИП Мыши с пассивным типом ОИП
Контроль 270,9 ± 41,1 24,3 ± 7,2 21,1 ± 3,2 2,7 ± 2,1 1,1 ± 1,1 4,8 ± 0,9
Морфиновая зависимость 245,6 ± 28,1 138,3 ±37,4* 23,3 ± 4,6 8,8 ± 3,8* 1,3 ± 1,9 2,2 ±1,9*
Трансплантация 1 259,8 ± 47,3 41,2 ± 9,1 24,3 ± 1,2 2,9 ± 1,2 1,2 ± 0,3 4,3 ± 1,3
Трансплантация 2 247,2 ± 31,3 31,2 ± 8,5 24,3 ± 1,2 1,9 ± 1,2 0,9 ± 0,5 5,3 ± 1,7
Примечание: трансплантация 1 - трансплантация неразделенной суспензии спленоцитов; трансплантация 2 -
трансплантация прилипающей к пластику фракции спленоцитов; * - р < 0,05 по сравнению с контрольной группой животных
этом супрессия гуморального иммунного ответа, снижение экс- Выявленный позитивный эффект клеточной терапии в отноше-
прессии спленоцитами и клетками головного мозга гена ИЛ-1 р, нии нормализации нейроиммунных показателей у животных-мор-
равно как и поведенческие расстройства, могут быть устранены финистов позволяет рассматривать ее в качестве возможного
трансплантацией иммунокомпетентных клеток от здоровых до- биологического метода в комплексной терапии наркотической
норов с соответствующим психофизиологическим статусом. зависимости.
Библиографический список
1. Beagles, K. Systemic morphine administration suppresses genes involved in antigen presentation / K. Beagles, A. Wellstein, B. Bayer // Molecular pharmacology. - 2004. -V. 65. - №. 2.
2. Avila, A. Immune cell activity during the initial stages of withdrawal from chronic exposure to cocaine or morphine / A. Avila, N. Alonzo, B. Bayer // J. Neuroimmunology, 2004.
3. Бохан, Н.А. Нейробиологические и психо-социальные закономерности формирования клинической гетерогенности аддиктивных расстройств (региональный, профилактический аспекты) / Н.А. Бохан, А.И. Мандель, И.А. Артемьев [и др.] // Сибирский вестник психиатрии и наркологии. - 2009. - № 5.
4. Cataldo Martucci, Silvia Franchi, Donatella Lattuada, Alberto E. Panerai, and Paola Sacerdote. Differential involvement of RelB in morphine-induced modulation of chemotaxis, NO, and cytokine production in murine macrophages and lymphocytes // Journal of Leukocyte Biology, 2007. - V. 81.
5. Shushpanova, T.V. Synaptogenesis and the formation of benzodiazepine receptors in the human brain in conditions of prenatal alcoholization / T.V. Shushpanova, A.V. Solonskii // Neuroscience and Behavioral Physiology. - 2013. - V. 43, № 4.
6. Saurer, T.B. et al. Neuroimmune mechanisms of opioid-mediated conditioned immunomodulation // Brain, Behavior, and Immunity, 2008 -V. 22(1).
7. Шушпанова, Т.В. Периферические бензодиазепиновые рецепторы тромбоцитов при алкоголизме / Т.В. Шушпанова, В.Я. Семке // Журнал неврологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. - 2006. - № 11 (106).
8. Маркова, Е.В. Модуляция ориентировочно-исследовательского поведения у мышей в процессе развития гуморального иммунного ответа // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины / Е.В. Маркова, А.Ф. Повещенко, Н.А. Короткова, Е.В. Якушенко,
В.В. Абрамов, В.А. Козлов. - 2002. - Т. 133. - № 5.
9. Markova, E.V. Activity of cell immune response and open field behavior in Wistar and OXYS rats / E.V. Markova, L.A. Obukhova,
N.G. Kolosova // Bulletin of Experimental Biology and Medicine. - 2003. - Т. 136. - № 4.
10. Маркова, Е.В. Регуляция ориентировочно-исследовательского поведения у животных путем трансплантации ммунокомпетентных клеток / Е.В. Маркова, В.В. Абрамов, В.А. Козлов // Успехи современной Биологии. - 2009. - Т. 129.- № 4.
11. Маркова, Е.В. Bлияние трансплантации лимфоидных клеток селезенки на функциональную активность иммунной и нервной систем у экспериментальных животных / Е.В. Маркова, В.В. Абрамов, Т.Г. Рябичева, В.А. Козлов // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2009. - № 4. - Т. 147.
12. Маркова, Е.В. Механизмы нейроиммунных взаимодействий в реализации поведенческих реакций. - Красноярск, 2012.
13. Маркова, Е.В. Клеточные механизмы нейроиммунных взаимодействий в регуляции ориентировочно-исследовательского поведения / Е.В. Маркова, М.А. Княжева, В.А. Козлов // Сибирский вестник психиатрии и наркологии. - 2013. - № 1(76).
14. Буреш, Я. Методики и основные эксперименты по изучению мозга и поведения / Я. Буреш, О. Бурешова, Д.П. Хьюстон. - М., 1991.
15. Cunningham, A.J. A method of increased sensitivity for detecting single antibody-forming cells // Nature. - 1965. - № 207.
Bibliography
1. Beagles, K. Systemic morphine administration suppresses genes involved in antigen presentation / K. Beagles, A. Wellstein, B. Bayer // Molecular pharmacology. - 2004. -V. 65. - №. 2.
2. Avila, A. Immune cell activity during the initial stages of withdrawal from chronic exposure to cocaine or morphine / A. Avila, N. Alonzo, B. Bayer // J. Neuroimmunology, 2004.
3. Bokhan, N.A. Neyjrobiologicheskie i psikho-socialjnihe zakonomernosti formirovaniya klinicheskoyj geterogennosti addiktivnihkh rasstroyjstv (regionaljnihyj, profilakticheskiyj aspektih) / N.A. Bokhan, A.I. Mandelj, I.A. Artemjev [i dr.] // Cibirskiyj vestnik psikhiatrii i narkologii. - 2009. -№ 5.
4. Cataldo Martucci, Silvia Franchi, Donatella Lattuada, Alberto E. Panerai, and Paola Sacerdote. Differential involvement of RelB in morphine-induced modulation of chemotaxis, NO, and cytokine production in murine macrophages and lymphocytes // Journal of Leukocyte Biology, 2007. - V. 81.
5. Shushpanova, T.V. Synaptogenesis and the formation of benzodiazepine receptors in the human brain in conditions of prenatal alcoholization / T.V. Shushpanova, A.V. Solonskii // Neuroscience and Behavioral Physiology. - 2013. - V. 43, № 4.
6. Saurer, T.B. et al. Neuroimmune mechanisms of opioid-mediated conditioned immunomodulation // Brain, Behavior, and Immunity, 2008 -V. 22(1).
7. Shushpanova, T.V. Perifericheskie benzodiazepinovihe receptorih trombocitov pri alkogolizme / T.V. Shushpanova, V.Ya. Semke // Zhurnal nevrologii i psikhiatrii im. S.S. Korsakova. - 2006. - № 11 (106).
8. Markova, E.V. Modulyaciya orientirovochno-issledovateljskogo povedeniya u mihsheyj v processe razvitiya gumoraljnogo immunnogo otveta // Byulletenj ehksperimentaljnoyj biologii i medicinih / E.V. Markova, A.F. Povethenko, N.A. Korotkova, E.V. Yakushenko, V.V. Abramov, V.A. Kozlov. - 2002. - T. 133. - № 5.
9. Markova, E.V. Activity of cell immune response and open field behavior in Wistar and OXYS rats / E.V. Markova, L.A. Obukhova, N.G. Kolosova // Bulletin of Experimental Biology and Medicine. - 2003. - T. 136. - № 4.
10. Markova, E.V. Pegulyaciya orientirovochno-issledovateljskogo povedeniya u zhivotnihkh putem transplantacii mmunokompetentnihkh kletok
/ E.V. Markova, V.V. Abramov, V.A. Kozlov // Uspekhi sovremennoyj Biologii. - 2009. - T. 129.- № 4.
11. Markova, E.V. Bliyanie transplantacii limfoidnihkh kletok selezenki na funkcionaljnuyu aktivnostj immunnoyj i nervnoyj sistem u ehksperimentaljnihkh zhivotnihkh / E.V. Markova, V.V. Abramov, T.G. Ryabicheva, V.A. Kozlov // Byulletenj ehksperimentaljnoyj biologii i medicinih. - 2009. - № 4. - T. 147.
12. Markova, E.V. Mekhanizmih neyjroimmunnihkh vzaimodeyjstviyj v realizacii povedencheskikh reakciyj. - Krasnoyarsk, 2012.
13. Markova, E.V. Kletochnihe mekhanizmih neyjroimmunnihkh vzaimodeyjstviyj v regulyacii orientirovochno-issledovateljskogo povedeniya / E.V. Markova, M.A. Knyazheva, V.A. Kozlov // Sibirskiyj vestnik psikhiatrii i narkologii. - 2013. - № 1(76).
14. Buresh, Ya. Metodiki i osnovnihe ehksperimentih po izucheniyu mozga i povedeniya / Ya. Buresh, O. Bureshova, D.P. Khjyuston. - M., 1991.
15. Cunningham, A.J. A method of increased sensitivity for detecting single antibody-forming cells // Nature. - 1965. - № 207.
Статья поступила в редакцию 20.09.13
УДК 616-06
Cheprasova M.I., Shpagina L.A. CLINICAL FEATURES OF THE DEPRESSIVE DISORDERS IN THE POLYNEUROPATHY. It is shown that in patients with vegeto-sensory polyneuropathy as a result of functional overload, asthenic component traced is closely associated with disorders of the locomotor area. The structure of mood disorders are identified mainly depression somatogenetic nature. Identified and described two options asthenic-depressive disorders. These states require medical correction.
Key words: mono-and polyneuropathy, functional overvoltage, depressive syndrome.
