CC BY
39
eSI/200-eem9:[t^SI.9:80-H7200-eem9 Xt/Л
Т. А. СМИРНОВА, Е. П. ПОНОМАРЕВА, Р. А. ХАНФЕРЯН, О. В. БОРОВИКОВ, В. А. АВАКИМЯН, А. В. АВАКИМЯН
влияние ронколейкина на морфологию слизистой оболочки желудка у больных язвенной болезнью, ассоциированной с н^уют
МУЗ городская больница № 2 КМЛДО, поликлиника СКАЛ; Кубанский государственный медицинский университет, г. Краснодар
Микроскопические изменения слизистой оболочки (СО) при язвенной болезни желудка (ЯБЖ) подробно описаны многими авторами [3, 23] и характеризуются некрозом с деструкцией, захватывающей не только эпителий СО, но и подслизистый и мышечный слои. В этом главное отличие язвы от эрозии, представляющей собой дефект только эпителия. Кроме того, доказано, что заживление язвы происходит путем рубцевания (поврежденный мышечный слой не регенерирует, а замещается соединительной тканью), а эрозия эпи-телизируется без рубцевания.
В слизистой оболочке желудка (СОЖ), окружающей язву, можно выделить две зоны. Вблизи края язвы преобладают повреждения поверхностного эпителия, который разрыхлен, вакуолизирован и обильно инфильтрирован полиморфно-ядерными эпителиоцитами. В собственной пластинке воспаление выражено значительно меньше. Это периульце-ральное воспаление связано с реакцией на наличие самой язвы, и бактерии Н.ру1оп (НР) здесь не выявляются. Несколько отступя от края язвы, морфологические изменения выражены в основном в покровно-ямочном эпителии, при этом в собственной пластинке определяется обильная гранулоцитарная инфильтрация, где в большинстве случаев и выявляются НР [2, 4].
Под воздействием НР развивается нейтрофильная инфильтрация СОЖ. Она стимулируется как непосредственно НР, которые выделяют водорастворимый белок, активирующий нейтрофилы [14], так и опосредованно, путем стимуляции секреции ^-8 эпителиоцитами желудка, а затем запуском всего воспалительного каскада с секрецией различных цитокинов. Степень выраженности инфильтрации зависит от степени обсе-мененности и «адгезии» НР [2, 17].
Помимо нейтрофилов в состав инфильтрата собственной пластинки СОЖ входят Т- и В-лимфо-циты, формирующие лимфоидные фолликулы, и макрофаги. Ранее считалось, что взаимодействие с лимфоцитами сводится к депрессии иммунного ответа, избирательной стимуляции Т1л2-клеток, тормозящих пролиферацию лимфоцитов и модулирующих коммитирование В-клеток главным образом в IgG-плазмоциты, а также нарушения полимеризации иммуноглобулинов [15]. В настоящее время появилось достаточно работ, в которых доказано, что при НР-ассоциированной ЯБЖ большинство клонов Т-клеток, выделенных из биоптатов СОЖ, секретируют гораздо больше IРЫу, нежели ^-4, что
является характерным признаком Th1 типа иммунного ответа [4, 12]. В опытах in vitro НР стимулирует продукцию лимфоцитами периферической крови IL-12, который способствует дифференцировке Т-лимфоцитов в Thl-клетки [16].
При нарушении клеточного обновления (дисрегене-рации) под воздействием НР происходит атрофия, сопровождающаяся уменьшением количества нормальных желез, обеспечивающих секреторную функцию, и кишечная метаплазия СОЖ [11]. При локализации язвы в теле желудка кишечная метаплазия определяется в антруме в 47,4%, в теле - в 6,2%, при локализации в пилорическом отделе - соответственно в 32% и 2%. Это позволило в последнее время кишечную метаплазию СОЖ отнести к признакам хеликобактерной инфекции [2, 13, 21]. Известно, что атрофия и кишечная метаплазия СОЖ являются предраковым состоянием желудка [7, 20, 10].
Сведения о дальнейших преобразованиях зон кишечной метаплазии немногочисленны и неоднозначны. Наряду с дисплазией ее участков имеются факты регрессии метаплазии с восстановлением структуры СОЖ [2, 22]. В настоящее время обратимость атрофии СОЖ не доказана, т. к. после эрадикации НР степень выраженности достоверно не уменьшается [18].
Оптимальным исходом любой репаративной регенерации является restitutio ad integrum, то есть полное восстановление структуры утраченной ткани. В желудке полное восстановление СОЖ наступает только при заживлении эрозий, острых язв и при артифициальных повреждениях: биопсии, эндоскопической полипэктомии [2, 8, 19]. При ЯБЖ заживление происходит с разрастанием соединительной ткани, проникающей в подслизистую и суб-серозную основу, между волокнами собственной мышечной оболочки, вызывая ее склероз и своеобразную фрагментацию [6, 2]. Строение СОЖ полностью при этом не восстанавливается: в участках рубцевания снижена оксигенация тканей, повышена проницаемость сосудов микроциркуляторного русла, и это может служить одной из важных причин рецидивирования язв [5, 24].
Таким образом, для ЯБЖ типичны атрофия СОЖ в краях язвы, разрастание соединительной ткани и метаплазия эпителия, при этом обнаружение ней-трофильной инфильтрации и лимфоидных фолликулов в гастробиоптатах рассматривается как признак хеликобактерной инфекции.
Рис. 1. Динамика морфологических изменений СОЖ в зависимости от метода терапии через 1 (А) и 3 (Б) мес.
%
Через 1 мес. Через 3 мес. Через 3 года
Рис. 2. Наличие инфицированности НР (А) и рецидивов ЯБЖ (Б) в зависимости от метода терапии
ш I группа ш II группа s I группа ш II группа
Целью настоящего исследования явилось определение клинико-морфологической и микробиологической эффективности лечения ЯБЖ, ассоциированной с Helicobacter pylori, препаратом рекомбинантного IL-2 - ронколейкином («Биотех», С.-Петербург) без применения антибактериальных препаратов.
Материалы и методы
Работа основана на результатах клинико-лабораторного и инструментального обследования больных язвенной болезнью желудка, ассоциированной с НР, получавших консервативное лече-
ние в гастроэнтерологическом центре поликлиники СКАЛ (ГЦ СКАЛ) МУЗ городской больницы № 2 «Краснодарское муниципальное лечебно-диагностическое объединение». Под наблюдением и на лечении находилось 108 больных ЯБЖ: 77 мужчин и 31 женщина в возрасте от 21 года до 55 лет (средний возраст 45,3±3,6 года). Все больные ЯБЖ методом случайной выборки были разделены на 2 группы: I - основная - 43 больных ЯБЖ (32 мужчины и 11 женщин, средний возраст 45,6±3,7 года), в лечении которых использован ронколейкин; II группа - сравнения - 65 больных ЯБЖ (45 мужчин и 20 женщин, средний возраст 45,5±2,8 года),
лечение которых проводилось по традиционной ан-тисекреторно-антибактериальной схеме. В качестве контроля (III группа) нами обследовано 30 здоровых добровольцев (22 мужчины и 8 женщин) в возрасте от 20 до 56 лет (средний возраст 43,4±3,5 года). Обследование больных проводилось до начала терапии, через 1, 3 месяца и 3 года после ее окончания.
Всем больным ЯБЖ и волонтерам проведено комплексное клинико-инструментальное обследование, в том числе фиброгастродуоденоскопия (ФГДС) с биопсией и морфологическим исследованием СОЖ, рН-метрия. Наличие обсеменения НР до лечения определяли при помощи быстрого уреазного теста, микробиологическим и гистологическим (окраска парафиновых срезов по Романов-скому-Гимза) методами в соответствии со стандартным протоколом, после лечения - уреазным и микробиологическим методами. Сравниваемые группы больных ЯБЖ по основным клиническим параметрам (возрасту, полу, длительности язвенного анамнеза, локализации язвенного дефекта, наличию сопутствующих заболеваний) сопоставимы. Все больные ЯБЖ, включенные в обследование, были инфицированы НР. Все это позволило провести сравнительную оценку эффективности примененных схем лечения.
Методика введения рекомбинантного ИЛ-2 -ронколейкина была разработана А. В. Авакимя-ном в 2000 г. на кафедре клинической иммунологии и аллергологии Кубанского государственного медицинского университета и в Российском центре функциональной хирургической гастроэнтерологии в период работы над диссертацией на соискание ученой степени кандидата медицинских наук [1 ].
Введение раствора ронколейкина осуществлялось с интервалом 72 часа по 3 процедуры на курс. В трех случаях (при диаметре язвенных дефектов более 2 см и неполной эпителизации после трех инъекций) количество введений увеличивалось до 5.
Ронколейкин, растворенный в 0,9%-ном растворе хлорида натрия, вводился параульцерально в подсли-зистую в 4-6 точек, а также внутривенно (медленно, капельно, в течение 4-5 часов) с добавлением 5-8 мл 10%-ного раствора альбумина.
Полученные результаты обработаны методом вариационной статистики с помощью программы Microsoft Exel 7,0 (Windows 98). Для выявления достоверности различий использовали критерий Стью-дента.
При оценке клинической эффективности лечения использовались модифицированные критерии А. А. Фишера и О. С. Радбиль [9]: сроки заживления язвенного дефекта по данным ФГДС, динамика морфологических изменений СОЖ, наличие рецидивов, а также наличие инфицирован-ности НР.
Результаты и обсуждение
Заживление язвы в основной группе наступило в течение 10,79±0,46 дня, а в группе сравнения - 35,23±1,58 (р<0,001). К месячному сроку мониторинга заживление язвы наблюдалось у 93,1% (40 чел.) пациентов I группы и лишь у 72,3% (47 чел.) II группы.
До начала терапии в краях язвы больных обеих групп, по данным морфологического исследования, выявлялся атрофический гастрит; в воспалительном инфильтрате - выраженная нейтрофильная, плазмоцитарная и лимфоцитарная инфильтрация со скоплениями клеток по типу лимфоидных фолликулов, кишечная метаплазия покровно-ямочного и железистого эпителия. Выявленные изменения СОЖ, как известно, являются характерными морфологическими признаками хеликобактериальной инфекции. К месячному сроку мониторинга у 51,2% больных I группы отмечалось значительное уменьшение воспалительного инфильтрата и полное отсутствие лимфоидных фолликулов, а «опасная» в плане онкологической настороженности кишечная метаплазия покровно-ямочного и железистого эпителия отсутствовала у 60,46% пациентов. В гаст-робиоптатах пациентов II группы на этом сроке в 73,8% обнаруживалась инфильтрация со скоплениями лимфоидных фолликулов, и, хотя нейтро-фильная и плазмоцитарная реакции уменьшались, кишечная метаплазия покровно-ямочного и железистого эпителия сохранялась у 72,3% больных этой группы (рис. 1А).
На 3-м месяце мониторинга у 95,35% пациентов основной группы полностью отсутствовали воспалительные изменения СОЖ, у 81,4% не наблюдались кишечная метаплазия покровно-ямочного и железистого эпителия и явления фиброза. У пациентов II группы на этом сроке мониторинга нейтро-фильная и плазмоцитарная инфильтрация СОЖ уменьшалась, но скопления лимфоидных фолликулов сохранялись у 26,15% больных, а кишечная метаплазия покровно-ямочного и железистого эпителия - в 36,92% случаев (рис. 1Б). Данный факт свидетельствует о том, что ронколейкин нормализует морфологическую структуру СОЖ, что, вероятно, является следствием его многофакторного цитопротективного и стимулирующего нормальную регенерацию действия.
Следует отметить, что у пациентов основной группы язвы эпителизировались без образования рубца в 46,5% (20 чел.), тогда как в группе сравнения безрубцо-вое заживление имело место лишь у 10 чел. - 15,38% (рис. 2Б).
заключение
Таким образом, предлагаемый метод комплексного лечения ЯБЖ, ассоциированной с Helicobacter pylori, с использованием системной и локальной (параульцеральной) иммунотропной терапии рон-колейкином является клинически и патогенетически обоснованным, приводит к быстрой полноценной эрадикации Helicobacter pylori без применения антибактериальных препаратов, значительно уменьшает сроки заживления язвы, способствует быстрому восстановлению нормальной морфологической структуры СОЖ с исчезновением лимфоидной инфильтрации и кишечной метаплазии. Отсутствие побочных эффектов, простота методики введения, высокий терапевтический эффект позволяют использовать предлагаемый метод комплексного лечения ЯБЖ как в стационарных, так и в амбулаторных условиях.
Поступила 28.11.2007
ЛИТЕРАТУРА
1. Авакимян А. В. Эндоскопическое лечение язвенной болезни желудка: Автореф. дис. канд. мед. наук. Краснодар, 1999. 24 с.
2. Аруин Л. И., Капуллер Л. Л., Исаков В. А. Морфологическая диагностика болезней желудка и кишечника. М.: Триада-Х, 1998. 362 с.
3. Василенко В. Х., Гребенев А. Л., Шептулин А. А. Язвенная болезнь. М.: Медицина, 1987. 320 с.
4. Исаков В. А., Домарадский И. В. Хеликобактериоз. М.: Медпрактика-М., 2003. 411 с.
5. Маев И. В., Казюлин А. Н, Кучерявый Ю. А., Гаджиева М. Г. Микроциркуляторные нарушения при хронических эрозиях желудка // Клин. мед. 2003. № 6. С. 37-42.
6. Кононов А. В. Местный иммунитет и регенерация слизистых оболочек (биопсийное исследование). Омск, 1993. 319 с.
7. Пасечников В. Д., Котелевец С. М., Чуков С. З., Мостовов А. Н. Морфофункциональные проявления атрофии слизистой оболочки желудка при Helicobacter pylori - ассоциированном гастрите // Рос. журн. гастроэнтерол., гепатол., колопроктол. 2004. Т. 14, № 1. С. 26-32.
8. Потехин П. П., Пауков В. С. Проблема регенерации слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта при эрозивноязвенных поражениях // Арх. пат. 1995. № 2. С. 68-70.
9. Фишер А. А., Радбиль О. С. Критерии оценки эффективности лечения язвенной болезни. Обзор литературы // Новости медицины: Экспресс-информация. Вып. 11-12. М., 1985. 83 с.
10. Фокс Джеймс, Вонг Тимоти. Helicobacter pylori - все-таки нехороший микроб (Пер. с англ.) // Международный медицинский журнал. 2001. № 11. С. 537-539.
11. Шкитин В. А., Шпирна А. И., Старовойтов Г. Н. Роль Helicobacter pylori в патологии человека // Клиническая микробиология и антибактерильная терапия. 2002. № 3. С. 11-40.
12. Bamford K. B., Fan X., Crowe S. E., Leary J. F., Gourley W. K., Luthra G. K., Brooks E. G., Graham D. Y., Reyes V. E., Ernst P. B. Lymphocytes in the human gastric mucosa during Helicobacter pylori have a T helper cell 1 phenotype // Gastroenterology. 1998. ^l. 114, № 3. Р. 482-492.
13. Eidt S., Stolte M. Prevalence of intestinal metaplasia in Helicobacter pylori gastritis // Scand. J. Gastroenterol. 1994. Vоl. 29. P. 607-610.
14. Evans D. J., Evans D. G., Takemura T. et al. Characterization of Helicobacter pylori neutrophil-activating protein // Infect. Immun. 1995. tol. 63. P. 2213-2220.
15. Fan X. J., Chua A., Shahi C. N. et al. Gastric T lymphocyte responses to Helicobacter pylori in patients with H.pylori colonization // Gut. 1994. Vil. 35. P. 1379-1384.
16. Haeberle H. A., Kubin M., Bamford K. B. et al. Differencial stimulation of interleukin-12 (IL-12) and IL-10 by live and killed Helicobacter pylori in vitro and assotiation of Il-12 production with gamma interferon-producing T-cells in the human gastric mucosa // Infection and Immunity. 1997. V!l. 65, № 10. P. 4229-4235.
17. Khulusi S., Mendall M. A., Patel P. Helicobacter pylori infection density and gastric inflammation in duodenal ulcer and non-ulcer subjects // Gut. 1995. to!. 37. P. 319-324.
18. Kuipers E. J. Helicobacter pylori and the risk and management of associated diseases: gastritis, ulcer disease, atrophic gastritis and gastric cancer // Aliment. Pharmacol. Ther. 1997. № 11. Suppl 1. P. 71 -88.
19. Lacy E. R., Morris G. P., Cohen M. M. Rapid repair of the surface epithelium in human gastric mucosa after acute superficial injury // J. Clin. Gastroenterol. 1993. Vol. 17. Suppl 1. P. 125-135.
20. Molloy R. M., Sonnenberg A. Relation between gastric cancer and previous peptic ulcer disease // Gut. 1997. Vol. 40. P. 247-252.
21. Morales T., Sampliner R., Bhattacharyya A. Intestinal metaplasia of the gastric cardia // Am. J.Gastroenterol. 1997. Vol. 92. P. 414-418.
22. Oohara T., Tohma H., Aono G. Intestinal metaplasia of regenerative epithelia in 549 gastric ulcers // Hum.pathol. 1983. Vol. 14. P. 1066-1067.
23. Szabo S., Kusstatscher S., Sandor Z., Sakoulas G. Molecular and cellular basis of ulcer healing // Scand. J. Gastroenterol. 1995. Vol. 21. Suppl 1. P. 93-97.
24. Tarnawski A., Tanoue K., Santos A. M., Sarteh I. J. Cellular and molecular mechanisms of Gastric ulcer healing. Is the quality of mucosal scar affected by treatment? // Scand. J. Gastroenterol. 1995. Suppl 210. P. 9-14.
t. a. smirnova, e. p. ponomarjova, r. a. khanferjan, v. a. avakimjan, a. v. avakimjan
RONCOLEUKIN EFFECT ON GASTRIC MUCOSA AT THE PATIENTS WITH HELKOBACTER PYLORI-ASSOCIATED
GASTRIC ULCER DISEASE
The microscopic picture of a stomach ulcer is characterized by an atrophy of a mucous membrane in edges of a ulcer, growth of a connecting fabric and metaplasia of epitelium. 108 patients suffering from HP-associated gastric ulcer disease were randomly divided into two groups. The I group of patients was cured with standard three or four component methods of therapy included of two antibiotics (usually Klaritromycin and Amoxicillin), proton pomp inhibitors and H2 receptor antagonists. Patients of the second group were treated with the same therapy, but instead of antibiotics they received 0,1 mg rIL-2 — Roncoleukin into four — six points submucously using gastroscope techniques and 0,4 mg was dissolved in 400 ml 0,9% NaCl with 4 ml 10% human albumin and infused intravenously. On 3 month of monitoring 95,35% patients of the basic group completely did not have inflammatory changes GMG against 73,85% in the II, and intestinal metaplasia of epitelium was kept only at 18,6% in the I group against 36,92% cases in the II. In the basic group ulcer epithelization period was 10,79±0,46 days against 35,23±1,58 days at the patients receiving traditional therapy.
Key words: gastric ulcer disease, Helicobacter pylori, Roncoleukin.
